专利名称：过氧化氢在制备微囊藻毒素抑制剂中的应用的制作方法
过氧化氢在制备微囊藻毒素抑制剂中的应用
(-)技术领域 本发明涉及过氧化氢在制备微囊藻毒素抑制剂中的新应用。
背景技术：
水域富营养化已成为全球性问题，淡水湖泊的富营养化导致藻类爆发性繁殖，形 成水华。目前，欧洲、非洲、北美洲和南美洲分别有53%、28%、48%、41 %的淡水湖泊存在不 同程度的富营养状态，亚太地区54%的湖泊处于富营养状态，以致世界各国的主要淡水湖 泊水华发生频率与严重程度均不断增长。我国的淡水湖泊75%以上富营养化，近年来也经 常暴发大范围的水华现象，如2003年8月和2006年6月的巢湖蓝藻暴发、2007年5月的太 湖和时有发生的滇池水华。水华藻通过释放次生代谢物质对其它生物产生毒害，其中最引人关注的是微囊藻 毒素(Microcystin，MC)。微囊藻毒素是一种细胞单环七肽类内毒素，主要作用于肝细胞和 肝巨噬细胞，强烈抑制肝细胞中蛋白磷酸酶的活性，并最终导致肝癌的发生。流行病学调查 结果也表明，原发性肝癌与饮用水源中微囊藻毒素含量密切相关。微囊藻毒素对动物也具 有一定毒性，家畜及野生动物饮用了含微囊藻毒素的水后，会出现腹泻、乏力、厌食、呕吐等 症状，甚至死亡。有学者根据危险度评价认为微囊藻毒素、肝炎病毒、黄曲霉毒素是我国南 方肝癌高发的3大环境危险因素。MC与人类健康的关系问题已成为生命科学界、医学界和 社会公众广泛关注的热点之一。近30年来，世界各地由微囊藻毒素引起人类及动物中毒事 件频繁发生。约有10000人由于饮用或直接接触微囊藻毒素污染的水而造成急性中毒，弓丨 起鸟类、鱼类、家畜中毒事件也时有发生，如我国内蒙古达赉湖每年因鱼腥藻、微囊藻水华 造成牛羊等动物死亡。因此，有效控制自来水水源中水华藻的生长、及其毒素分泌，成为迫 切需要解决的问题。目前广泛使用的除藻药物有硫酸铜和除草剂等，有一定除藻效果，但硫酸铜和化 学除草剂会对水生生态链的非靶标生物产生较大负面影响，产生二次污染，需谨慎施用。
发明内容
本发明提供了一种高效、简便、无污染的抑制微囊藻毒素合成和释放的制剂。本发明采用的技术方案是过氧化氢在制备微囊藻毒素(Microcystin)抑制剂中的应用。优选的，过氧化氢可作为抑制剂用于抑制水域中微囊藻毒素的合成和释放，尤其 是抑制铜绿微囊藻毒素的合成和释放。所述过氧化氢用于抑制微囊藻毒素合成和释放时，在水域中投放浓度为10 100 μ Mo过氧化氢能够刺激生物细胞代谢过程中产生的一种活性氧(ROS)，由于ROS对细 胞有氧化损伤作用，一直认为，过氧化氢是一种对细胞有毒害作用的试剂。由于过氧化氢可 以在自然光照催化下氧化分解成为氧气和水，因此不存在二次污染的可能，经实验证实合理的投放过氧化氢可以抑制藻毒素的合成和释放，因此可用于制备微囊藻毒素抑制剂，用 于治理藻类爆发性繁殖引起的自来水源污染。本发明通过实验证实过氧化氢能够抑制铜绿微囊藻细胞内毒素的合成及释放，阻 止微囊藻毒素流失进入水体系统，鉴于其优点和易降解性，过氧化氢将在控制水华上具有 良好应用前景。
图1为过氧化氢对铜绿微囊藻细胞内毒素浓度的影响；图2为过氧化氢对铜绿微囊藻释放毒素浓度的影响；图3为过氧化氢对铜绿微囊藻产生总毒素浓度。
具体实施例方式下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于 此实施例1 1铜绿微囊藻的培养1)铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)购自中国科学院武汉水生生物研究所 (编号905)，使用BG-Il培养基培养。2)培养条件24士0. 5°C，光暗比为14 10，光照强度4000Lux。3)加药藻液培养至OD = 0. 05，分别加过氧化氢0、25、50 μ Μ,培养至96h取样。2微囊藻毒素含量的测定1)取30ml藻液，离心去上清，沸水煮8min ；加入75%甲醇200 μ 1混勻，14000rpm 离心20min ；取上清液用于细胞内微囊藻毒素含量测定。2)取30ml藻液，离心取上清，蒸发浓缩至IOml ；HOOOrpm离心20min ；取上清液用
于细胞外微囊藻毒素含量测定。3)使用HPLC检测微囊藻毒素-LR标准样品，液相条件为流动相甲醇水(含0. 三氟乙酸)体积比=7 3色谱柱温度40°C ；流速lyl/min;
进样量20μ1;检测器紫外可见光检测器波长238nm并绘制标准曲线。4)同样液相条件检测细 胞内毒素和细胞外毒素含量，并用标准曲线所得公式计算毒素浓度，结果见图1 3。由图 可见，过氧化氢处理铜绿微囊藻96h后，胞内毒素含量减少，且培养环境中的毒素总量也显 著减少。
权利要求
1.过氧化氢在制备微囊藻毒素(Microcystin)抑制剂中的应用。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于过氧化氢作为抑制剂用于抑制水域中微囊藻 毒素的合成和释放。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于所述抑制剂在水域中投放浓度为10 100 μ Mo
全文摘要
本发明提供了过氧化氢在制备微囊藻毒素(Microcystin)抑制剂中的应用。本发明通过实验证实过氧化氢能够抑制铜绿微囊藻细胞内毒素的合成及释放，阻止微囊藻毒素流失进入水体系统，鉴于其优点和易降解性，过氧化氢将在控制水华上具有良好应用前景。
文档编号A01P1/00GK102077844SQ20111003248
公开日2011年6月1日 申请日期2011年1月30日 优先权日2011年1月30日
发明者余澍琼, 傅正伟, 钱海丰 申请人:浙江工业大学