专利名称：水产动物用抗病促生长剂及其制备方法
技术领域：
本发明属于饲料添加剂领域，涉及一种水产动物用抗病促生长剂及其制备方法。
背景技术：
近年来，随着人们的生活水平的提高，对水产品的需求也在日益扩大，这在很大程度上带动了水产养殖业的迅猛发展，集约式工业化养殖规模日益扩大。与此同时，水产动物的病害频繁发生，仅鱼类病害就已超过100种，其中危害严重的达10余种。如上世纪90年代初对虾病毒性爆发病，现在的扇贝、河蟹、甲鱼等的爆发病，给水产养殖业带来了巨大的损失。抗生素治疗是目前最主要的疾病防治方法，但由于生产中抗生素的普遍使用或使用不当，对抗生素的耐药菌株不断增加，干扰了养殖环境中有益微生物菌群的正常生长繁殖， 引起微生态平衡失调，产生二次污染和内源性感染。且抗生素只对细菌引起的病害具有疗效，但对病毒引起的病害无作用。科学研究发现，人类常见的癌症、畸形和其它一些慢性病的发生与食品中的抗生素、激素的使用和药物残留有关。人们越来越担心抗生素在水产品中的残留、富集所产生的不安全性，要求市场提供安全、无污染的“绿色食品”。近年来，药物残留也是影响出口贸易的重要原因之一。面对激烈竞争的国际市场，生产出无污染的绿色水产品势在必行。
发明内容
本发明的目的是提供一种效果稳定可靠、见效快的水产动物用抗病促生长剂，有效解决现有技术容易在水产动物体内残留并产生抗药性、给人类的食品安全带来隐患等缺陷。本发明的另一个目的是提供该水产动物用抗病促生长剂的制备方法。本发明还提供了一种包含该水产动物用抗病促生长剂的饲料。为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案如下本发明提供了一种水产动物用抗病促生长剂，其特征在于采用中药通过益生菌发酵的方法获得。所述的一种水产动物用抗病促生长剂，其特征在于所述的中药包括如下组分和质量份数蒲公英1 10份、甘草1 10份、苦参1 10份、三颗针1 10份。所述的一种水产动物用抗病促生长剂，其特征在于所述的益生菌包括酵母菌、乳酸菌和/或芽孢菌的一种或一种以上。所述的水产动物用抗病促生长剂，其特征在于所述的中药还包括质量份数为1 4份的黄芩、1 4份的青蒿、1 4份的野菊花、1 3份的川楝子和1 4份的大黄中的一种或一种以上。所述的一种水产动物用抗病促生长剂，其特征在于所述的酵母为产朊假丝酵母、 酿酒酵母和/或啤酒酵母。
所述的一种水产动物用抗病促生长剂，其特征在于所述的乳酸菌包括乳酸乳杆菌、嗜酸乳杆菌、嗜热乳杆菌、干酪乳杆菌、乳酸乳杆菌、植物乳杆菌和/或保加利亚乳杆菌。所述的一种水产动物用抗病促生长剂，其特征在于所述的芽孢菌包括枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和/或侧孢芽孢杆菌。所述的一种水产动物用抗病促生长剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤(1)中药材预处理选取中药材，分别于50 60°C下烘干2 3h ；经烘干后粉碎，过80 120目筛；(2)制备菌种发酵液将各菌种分别接种于各自的最适培养基中，在适当的条件下培养一级种子液，当各菌生长到对数生长期时分别转接到二级种子发酵罐中进行扩大培养，达到对数生长期时停止培养，备用；(3)中药发酵将粉碎过筛后的中药按一定配比混合均勻，装入发酵罐中，加入占中药质量0 5%的豆粕、0 10%玉米粉、5 20%麸皮，加水至含水量在50 70%之间，浸泡12 Mh 后，调节PH值6. 0 7. 5之间，在121°C下蒸汽灭菌15 20min，冷却后，加入占发酵物总质量的5% 15%的总菌种液，观 37°C发酵M 60小时，每隔他搅拌一次；发酵结束后，在35 50°C下烘干，即得水产动物用抗病促生长剂。所述的水产动物用抗病促生长剂的制备方法，其特征在于总菌种液是由各菌的二级种子液按等比例混合制成的混合种子液。所述的一种含水产动物用抗病促生长剂的饲料，其特征在于，包括以下质量比例的组成成分所述的水产动物用抗病促生长剂0. 02 0. 2%和辅料99. 98 99. 8%。本发明提供了一种水产动物用抗病促生长剂及其制备方法，具有以下优点1、本发明水产动物用抗病促生长剂具有提高免疫力、抗细菌、防治寄生虫、抗病毒、促进水产动物生长等功效；2、本发明的水产动物用抗病促生长剂适用于各个生长阶段的水产动物；3、本发明的水产动物用抗病促生长剂是益生菌和中药的有益结合，具有无毒副作用、无污染、无残留、不产生耐药性，见效快、效果稳定可靠，能够满足人们对水产品安全生产的要求；4、本发明水产动物用抗病促生长剂还可以通过提高其使用剂量，作为兽药应用。通过以下实施例将更具体的说明本发明，但是应理解所述实施例仅为了说明本发明，而不是以任何方式限制本发明的范围。
具体实施例方式实施例1中药蒲公英6份、甘草3份、苦参3份、三颗针4份制备方法(1)将枯草芽孢杆菌接种到普通营养肉汤培养基中，在37°C，ISOrpm摇床培养，生产一级种子液，当细菌含量达到107_8CFU/ml左右时，将一级种子液以接种量5%接种到装有营养肉汤的二级种子发酵罐中扩大培养，培养温度为32°C，转速为ISOrpm，当细菌含量达到109CFU/ml左右时，停止发酵，备用；(2)将产朊假丝酵母菌接种到麦芽汁培养基中J8°C，ISOrpm摇床培养，生产一级种子液，当细菌含量达到107_8CFU/ml左右时，将一级种子液以接种量5%接种到装有营养肉汤的二级种子发酵罐中扩大培养，培养温度为32°C，转速为ISOrpm，当酵母含量达到 109CFU/ml左右时，停止发酵，备用；(3)选取上述各中药材，分别于50 60°C下烘干2 3h，经烘干后粉碎，过80-120 目筛，备用；(4)按上述配方称取粉碎后的中药粉末，加入占中药质量5 %的豆粕、5 %的麸皮， 加水至含水量在55 60%，混合均勻，在室温下浸泡Mh，调节pH7. 0左右，在121°C下蒸汽灭菌15min，冷却后，分别加入占发酵物总质量的5%的枯草芽孢杆菌菌液和5%的产朊假丝酵母菌菌液，在32°C发酵Mh，每隔他搅拌一次；当活菌总数达到1.0X109CFU/ml时停止发酵，45°C下真空干燥，制得抗病促生长剂。实施例2中药蒲公英5份、甘草3份、苦参1份、三颗针2份、黄芩1份、青蒿1份制备方法(1)将地衣芽孢杆菌接种到普通营养肉汤培养基中，在37°C，ISOrpm摇床培养，生产一级种子液，当细菌含量达到107_8CFU/ml左右时，将一级种子液以接种量3%接种到的二级种子发酵罐中扩大培养，培养温度为37°C，转速为ISOrpm，当细菌含量达到109CFU/ml 左右时，停止发酵，备用；(2)将嗜酸乳杆菌接种到MRS培养基中，37°C，ISOrpm摇床培养，生产一级种子液， 当细菌含量达到107_8CFU/ml左右时，将一级种子液以接种量5%接种到装有营养肉汤的二级种子发酵罐中扩大培养，培养温度为37°C，转速为180rpm，当酵母含量达到109CFU/ml左右时，停止发酵，备用；(3)选取上述各中药材，分别于50 60°C下烘干2 3h，经烘干后粉碎，过80-120 目筛，备用；(4)按上述配方称取粉碎后的中药粉末，加入占中药质量5 %的豆粕、5 %的玉米粉、5 %的麸皮，加水至含水量在60 %，混合均勻，在室温下浸泡Mh，调节pH6. 5左右，在 121°C下蒸汽灭菌20min，冷却后，分别加入占发酵物总质量4%的地衣芽孢杆菌菌液和4% 的嗜酸乳杆菌菌液，在37°C发酵48h，每隔他搅拌一次；当活菌总数达到1. OX 109CFU/ml时停止发酵，40°C下真空干燥，制得抗病促生长剂。实施例3中药蒲公英3份、甘草3份、苦参1份、三颗针2份、黄芩1份、青蒿1份、野菊花 1份、川楝子2份、大黄1份制备方法(1)将地衣芽孢杆菌和侧孢芽孢杆菌分别接种到普通营养肉汤培养基中，在 370C，ISOrpm摇床培养，生产一级种子液，当细菌含量达到107_8CFU/ml左右时，将一级种子液以接种量3%接种到的二级种子发酵罐中扩大培养，培养温度为32°C，转速为ISOrpm，当芽孢菌含量达到109CFU/ml左右时，停止发酵，备用；
(2)将产朊假丝酵母接种到麦芽汁培养基中，28°C，ISOrpm摇床培养，生产一级种子液，当细菌含量达到107_8CFU/ml左右时，将一级种子液以接种量5%接种到的二级种子发酵罐中扩大培养，培养温度为32°C，转速为180rpm，当酵母含量达到109CFU/ml左右时， 停止发酵，备用；(3)将嗜热乳杆菌、干酪乳杆菌和保加利亚乳杆菌分别接种到MRS培养基中， 370C，ISOrpm摇床培养，生产一级种子液，当细菌含量达到107_8CFU/ml左右时，将一级种子液以接种量5%接种到装有营养肉汤的二级种子发酵罐中扩大培养，培养温度为32°C，转速为180rpm，当乳酸菌含量达到109CFU/ml左右时，停止发酵，备用；(4)选取上述各中药材，分别于50 60°C下烘干2 3h，经烘干后粉碎，过80-120 目筛，备用；(5)按上述配方称取粉碎后的中药粉末，加入占中药质量4%的豆粕、15%的玉米粉、5%的麸皮，加水至含水量在55%，混合均勻，在室温下浸泡Mh，调节pH6. 9左右， 在121°C下蒸汽灭菌18min，冷却后，分别加入占发酵物总质量2%的地衣芽孢杆菌菌液、 2%侧孢芽孢杆菌、2%的产朊假丝酵母菌菌液、2%的嗜热乳杆菌菌液、2%的干酪乳杆菌菌液和2%的保加利亚乳杆菌菌液，在32°C发酵36h，每隔他搅拌一次；当活菌总数达到 1. 0 X 109CFU/ml时停止发酵，50°C下真空干燥，制得抗病促生长剂。实施例4中药蒲公英4份、甘草3份、苦参1份、三颗针3份、青蒿2份、野菊花1份、川楝子1份制备方法(1)将产朊假丝酵母、啤酒酵母和酿酒酵母分别接种到麦芽汁培养基中，28 30°C，220rpm摇床培养，生产一级种子液，当细菌含量达到107_8CFU/ml左右时，将一级种子液以接种量5%接种到的二级种子发酵罐中扩大培养，培养温度为观 30°C，转速为 220rpm，当酵母含量达到109CFU/ml左右时，停止发酵，备用；(2)选取上述各中药材，分别于50 60°C下烘干2 3h，经烘干后粉碎，过80-120 目筛，备用；(3)按上述配方称取粉碎后的中药粉末，加入占中药质量2 %的豆粕、2 %的玉米粉、10 %的麸皮，加水至含水量在63 %，混合均勻，在室温下浸泡Mh，调节pH6. 9左右，在 121°C下蒸汽灭菌20min，冷却后，分别加入占中药材质量3%的产朊假丝酵母菌菌液、3% 的啤酒酵母菌菌液和3%的酿酒酵母菌菌液，在观 30°C发酵48h，每隔他搅拌一次；当活菌总数达到1.0X109CFU/ml时停止发酵，50°C下真空干燥，制得抗病促生长剂。实施例5一种含水产动物用抗病促生长剂的饲料(虹鳟鱼用)包括以下质量百分比的组成成分水产动物用抗病促生长剂0. 08%和辅料99. 92%。即1吨饲料中水产动物用抗病促生长剂的添加量为800g。饲料可以具体包括以下质量份数的组成成分按本发明实施例2 所制备的水产动物用抗病促生长剂0. 08份，进口鱼粉30份，大豆浓缩蛋白15份，膨化大豆 10份，棉籽蛋白10份，玉米蛋白粉4份，大豆磷脂2份，鱼油2份，豆油2份，次粉20. 02份， 4%的鱼用预混料4份。实施例6
一种含水产动物用抗病促生长剂的饲料(鲤鱼用)包括以下质量百分比的组成成分水产动物用抗病促生长剂0. 06%和辅料99. 94%。即1吨饲料中水产动物用抗病促生长剂的添加量为600g。饲料可以具体包括以下质量份数的组成成分按本发明实施例3所制备的水产动物用抗病促生长剂0. 6份，次粉200份，小麦麸180份，进口鱼粉60份，豆粕 230份，棉籽粕150份，菜籽粕142. 4份，鱼油10份，食盐2份，磷酸二氢钙13份，氯化胆碱 2份，预混料10份。本发明的水产动物用抗病促生长剂作为兽药的应用，在水产动物已经发生疾病的情况下，可以将上述的水产动物用抗病促生长剂的使用量提高到0. 1 1%，当作兽药使用，对水产动物疾病的治疗具有较好的疗效。以下通过具体试验例来说明本发明的水产动物用抗病促生长剂的有益效果。试验例1本试验例是用本发明实施例3制备的水产动物用抗病促生长剂在“虹鳟鱼”饲料中的应用，取得了良好的试验效果。1材料与方法1. 1试验动物的选择及分组本试验选用体重约3. 50g、出生时间相同的虹鳟鱼640尾，随机分为4个处理组 (记为对照组、试验组1、试验组2和试验组幻，每个处理组设4个重复组，每个重复组40尾试鱼。1.2试验时间试验开始前驯食一周后，进行正式试验，试验时间为42天。
1.3试验设计及试验日粮参考虹鳟鱼相关饲养资料，设计如下日粮(表1)，分别给饲相应处理的试鱼。每天饱食投喂4次，投喂时间分别为9:00、11:00、14:00和16:00，日检查水温1 2次，日更换新水0. 3 0. 5M3，氨氮低于0. lmg/L, pH值在7. 5 8. 5之间，DO > 8mg/L,水温控制在 17士 1°C。每天收集残饵并烘干称重。试验开始和结束前禁食M小时，准确称重，记尾数。表1日粮配方及营养水平
权利要求
1.一种水产动物用抗病促生长剂，其特征在于采用中药通过益生菌发酵的方法获得。
2.根据权利要求1所述的一种水产动物用抗病促生长剂，其特征在于所述的中药包括如下组分和质量份数蒲公英1 10份、甘草1 10份、苦参1 10份、三颗针1 10份。
3.根据权利要求1所述的一种水产动物用抗病促生长剂，其特征在于所述的益生菌包括酵母菌、乳酸菌和/或芽孢菌的一种或一种以上。
4.根据权利要求2所述的水产动物用抗病促生长剂，其特征在于所述的中药还包括质量份数为1 4份的黄芩或1 4份的青蒿、1 4份的野菊花、1 3份的川楝子和1 4份的大黄中的一种或一种以上。
5.根据权利要求3所述的一种水产动物用抗病促生长剂，其特征在于所述的酵母为产朊假丝酵母、酿酒酵母和/或啤酒酵母。
6.根据权利要求3所述的一种水产动物用抗病促生长剂，其特征在于所述的乳酸菌包括乳酸乳杆菌、嗜酸乳杆菌、嗜热乳杆菌、干酪乳杆菌、乳酸乳杆菌、植物乳杆菌和/或保加利亚乳杆菌。
7.根据权利要求3所述的一种水产动物用抗病促生长剂，其特征在于所述的芽孢菌包括枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和/或侧孢芽孢杆菌。
8.根据权利要求1 7任一项所述的一种水产动物用抗病促生长剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤(1)中药材预处理选取中药材，分别于50 60°C下烘干2 3h ；经烘干后粉碎，过80 120目筛；(2)制备菌种发酵液将各菌种分别接种于各自的最适培养基中，在适当的条件下培养一级种子液，当各菌生长到对数生长期时分别转接到二级种子发酵罐中进行扩大培养，达到对数生长期时停止培养，备用；(3)中药发酵将粉碎过筛后的中药按一定配比混合均勻，装入发酵罐中，加入占中药质量0 5 %的豆粕、0 10%玉米粉、5 20%麸皮，加水至含水量在50 70%之间，浸泡12 24h后， 调节pH值6. 0 7. 5之间，在121°C下蒸汽灭菌15 20min，冷却后，加入占发酵物总质量的5% 15%的总菌种液，28 37°C发酵M 60小时，每隔8h搅拌一次；发酵结束后，在 35 50°C下烘干，即得水产动物用抗病促生长剂。
9.根据权利要求8所述的水产动物用抗病促生长剂的制备方法，其特征在于总菌种液是由各菌的二级种子液按等比例混合制成的混合种子液。
10.一种包含权利要求1 7任一项所述的水产动物用抗病促生长的饲料，其特征在于，包括以下质量比例的组成成分所述的水产动物用抗病促生长剂0. 02 0. 2%和辅料 99. 98 99. 8%。
全文摘要
本发明公开了一种水产动物用抗病促生长剂及其制备方法。其特征是将传统中药与现代微生物转化技术相结合制备了一种新型的绿色饲料添加剂。它是将粉碎、过筛后的蒲公英、甘草、苦参、三颗针等混合后，加入麸皮、豆粕、玉米粉、水作为发酵培养基，调节pH，灭菌，冷却，加入菌种进行发酵，发酵结束后，烘干即得。本发明的水产动物用抗病促生长剂为中药与益生菌的有益结合，可替代抗生素，具有抗细菌、预防寄生虫病、抗病毒、提高免疫力和促进水产动物生长等功效；长期使用无毒副作用、无污染、无残留、不产生耐药性；效果稳定可靠，满足人们对水产品安全生产的要求。本发明的水产动物用抗病促生长剂还可通过提高其使用剂量，作为兽药应用。
文档编号A23K1/16GK102232474SQ20111009485
公开日2011年11月9日 申请日期2011年4月15日 优先权日2011年4月15日
发明者刘春辉, 肖传明, 黄远荣 申请人:北京康华远景科技有限公司