专利名称：一种多抗冬瓜的选育方法
技术领域：
本发明涉及一种冬瓜的选育方法，特别是涉及一种适于珠三角地区气候条件或相似气候条件下的抗枯萎病、疫病、病毒病的多抗冬瓜的选育方法。
背景技术：
冬瓜是我国主要蔬菜作物，年播种面积约300万亩，冬瓜产品对于调节我国蔬菜周年供应发挥着重要作用。由于冬瓜主要分布在我国、印度、越南、老挝等东南亚国家，遗传背景狭窄，抗性资源十分贫乏。枯萎病、疫病、病毒病等冬瓜病害的普遍流行，制约着冬瓜的生产，因而制定一套抗病冬瓜的高效、快捷的选育方法，对提高冬瓜育种水平和扩大生产有着重要的作用。目前关于适应珠三角地区气候条件或相似气候条件下的多抗冬瓜的选育方法尚未见报道。
发明内容
本发明目的在于提供一种适于珠三角地区气候条件或相似气候条件下的多抗冬瓜的选育方法。本发明所采取的技术方案是 一种多抗冬瓜的选育方法，包括如下步骤
(1)种子处理珠三角气候地区的4月中下旬至5月上旬，取冬瓜种子消毒，浸种，催
芽；
(2)人工接种病菌取步骤(1)处理后的种苗，人工接种枯萎病、疫病和病毒病， (3 ) 一次筛选取步骤(2 )接种病菌后的种苗，淘汰发病株，选留抗病株；
(4)二次筛选将步骤(3)获得的抗病株于珠三角气候地区的6月上旬定植大田，继续淘汰发病株，未发病单株自交留种；
(5)翌年将上年获得的多抗单株的种子重复步骤(1)-(4)的筛选工作，获得稳定的多抗单株。上述多抗冬瓜选育方法的一个优选方案，包括如下步骤
(1)种子处理珠三角气候地区的4月中下旬至5月上旬，取冬瓜种子用10%-15%质量比的Na3PO4溶液对种子消毒15-25min，再用50_55°C温水浸种8_12h，洗净后在条件下催芽；
(2)人工接种病菌取步骤(1)处理后的种苗，人工接种枯萎病、疫病和病毒病， 枯萎病接种方法取胚根长0. 5-1. 5cm的萌发种子，损伤胚根，在浓度为
5 X IO6-IO X IO6个孢子/ml的枯萎病病菌液中浸泡30_40min ；
疫病接种方法取第2-3真叶期的种苗，伤根法浇灌或叶面喷施疫病病菌孢子，接种浓度为1 X 102-2 X IO2个孢子/ml ；
病毒病接种方法取第2-3真叶期的种苗，用病毒液涂擦胚芽叶片；
(3)—次筛选取步骤(2)接种病菌后的种苗，1周后连续20天调查，淘汰发病株，选留抗病株；
(4)二次筛选将步骤(3)获得的抗病株于珠三角气候地区的6月上旬定植大田，继续淘汰发病株，未发病单株自交留种；
(5)翌年将上年获得的多抗单株的种子重复步骤(1)-(4)的筛选工作，获得稳定的多抗单株。本发明的优点在于
使用本发明的冬瓜选育方法，具有快捷、效果稳定、可操作性强等优点，可以快速得到对多种病害具有抗性的冬瓜，选育成功率高，对提高冬瓜产量、扩大生产有着重要的作用。
图1为不同播种期与枯萎病发生的关系图。图2为不同播种期与疫病发生的关系图。图3为不同播种期与病毒病发生的关系图。图4为不同播种期人工接种病毒发病情况图。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明作进一步的具体描述，但并不局限于此。实施例1
1、播种时期的筛选
1. 1实验材料取三水黑皮冬(B94)、台湾小冬瓜(B214)、东莞黑皮冬瓜(B218)、广利粉皮冬瓜(P33)的种子，分别编号为1号、2号、3号、4号。1. 2播种时期方案取上述各品种的冬瓜种子，于2月上旬、3月上旬、4月上旬、5 月上旬分别播种。设3次重复，每重复50株苗。实验地点广东省农科院白云基地。播种前，种子先经过下述1.3、1.4步骤的处理。1. 3种子处理用10%妝#04溶液对种子消毒lOmin，再用50_55°C温水浸种10h，洗净后在恒温条件下催芽。1. 4人工接种病菌取处理后的种苗，分别人工接种枯萎病、疫病和病毒病，
枯萎病接种方法取培根长0. 5-1. 5cm的种苗，损伤胚根，枯萎病接种方法取胚根长0. 5-2cm的萌发种子，损伤胚根，在浓度为5X IO6个孢子/ml的枯萎病病菌液中浸泡 30min ；
疫病接种方法取第2-3真叶期的种苗，伤根法浇灌或叶面喷施疫病病菌孢子，接种浓度为1 X IO2个孢子/ml ；
病毒病接种方法取第2-3真叶期的种苗，用病毒液涂擦胚芽叶片。1. 5实验结果不同播种时期对枯萎病抗性筛选的影响见图1。由图1可见，播种期在2-6月份期间，随着播种时间的延迟，人工接种枯萎病的发病株率逐渐下降，播种期为 5月份后枯萎病急剧下降，这与枯萎病的发生条件有关。不同播种时期对疫病抗性筛选的影响见图2。由图2可见，播种期从2月-5月份疫病发病呈上升趋势，而6月份播种的反而下降了。不同播种时期对病毒病抗性筛选的影响见图3。由图3可见，播种期由2月份-6月份病毒病发生率呈上升趋势。不同播种时期对多抗筛选的影响见图4。由图4可见，在不同的播种期先后人工接种枯萎病、疫病和病毒病，三种病害总发病率呈上升趋势，但播种期为4-5月份时，能比较客观、准确地表现各品种之间的抗性差异。2、多抗株系的筛选
2. 1种子处理广州地区4月中下旬至五月上旬，取三水黑皮冬(B94)、台湾小冬瓜 (B214)、东莞黑皮冬瓜(B218)、广利粉皮冬瓜(P33)种子用10%Na3P0溶液对种子消毒 lOmin，再用50-55°C温水浸种10h，洗净后在恒温条件下催芽。2. 2人工接种病菌取步骤(1)处理后的种苗，人工接种枯萎病、疫病和病毒病， 枯萎病接种方法取培根长0. 5-1. 5cm的种苗，损伤胚根，枯萎病接种方法取胚根
长0. 5-2cm的萌发种子，损伤胚根，在浓度为5X IO6个孢子/ml的枯萎病病菌液中浸泡 30min ；
疫病接种方法取第2-3真叶期的种苗，伤根法浇灌或叶面喷施疫病病菌孢子，接种浓度为1 X IO2个孢子/ml ；
病毒病接种方法取第2-3真叶期的种苗，用病毒液涂擦胚芽叶片。2. 3 一次筛选取步骤(2)接种病菌后的种苗，淘汰发病株，留选抗病株。2. 4 二次筛选将步骤(3)获得的抗病株，于广州地区6月上旬定植，淘汰发病株， 未发病抗病单株自交留种。2. 5翌年将上年获得的多抗单株的种子重复步骤(1)- (4)的筛选工作，获得稳定的多抗单株。3、所获多抗株系的抗病实验
取通过本发明方法所获得的冬瓜多抗株系进行抗病实验，以原始群体植株作为对照， 设3次重复，每重复100株苗，实验结果见表1。从表1中可以看出多抗株系比原始株系的三种发病率均显著下降，说明本发明的多抗冬瓜的选育方法是可行的，能获得多抗株系。 注经Duncan’ s多重比较测试，不同字母表示差异达5%水平。BD94_1_2、 BD218-5-1、BD214-2-6、PD33-6-4为经过本发明方法所获得的多抗株系；B94 (CK1)、B218 (CK2)、B214 (CK3)、P33 (CK4)为其原始株系。
4、所获多抗株系的性状稳定性实验
取通过本发明方法所获得的冬瓜多抗株系进行性状稳定性实验，以原始群体植株作为对照，设3次重复，每重复50株苗，实验结果见表2。从表2中可以看出多抗株系与原始株系在主要农艺性状方面没有产生显著差异。
权利要求
1.一种多抗冬瓜的选育方法，其特征在于，包括如下步骤(1)种子处理于珠三角气候地区的4月中下旬至5月上旬，取冬瓜种子消毒，浸种，催芽；(2)人工接种病菌取步骤(1)处理后的种苗，人工接种枯萎病、疫病和病毒病；(3)—次筛选取步骤(2)接种病菌后的种苗，淘汰发病株，选留抗病株；(4)二次筛选将步骤(3)获得的抗病单株于珠三角气候地区的6月上旬定植大田，继续淘汰发病株，未发病单株自交留种；(5)翌年将上年获得的抗病单株的种子重复步骤(1)-(4)的筛选工作，获得稳定的多抗单株。
2.根据权利要求1所述的一种多抗冬瓜选育方法，其特征在于，包括如下步骤(1)种子处理珠三角气候地区的4月中下旬至5月上旬，取冬瓜种子用10%-15%质量比的Na3PO4溶液对种子消毒15-25min，再用50_55°C温水浸种8_12h，洗净后在条件下催芽；(2)人工接种病菌取步骤(1)处理后的种苗，人工接种枯萎病、疫病和病毒病， 枯萎病接种方法取胚根长0. 5-1. 5cm的萌发种子，损伤胚根，在浓度为·5 X IO6-IO X IO6个孢子/ml的枯萎病病菌液中浸泡30_40min ；疫病接种方法取第2-3真叶期的种苗，伤根法浇灌或叶面喷施疫病病菌孢子，接种浓度为1 X 102-2 X IO2个孢子/ml ；病毒病接种方法取第2-3真叶期的种苗，用病毒液涂擦胚芽叶片；(3)—次筛选取步骤(2)接种病菌后的种苗，1周后连续20天调查，淘汰发病株，选留抗病单株；(4)二次筛选将步骤(3)获得的抗病株于珠三角气候地区的6月上旬定植大田，继续淘汰发病株，未发病单株自交留种；(5)翌年将上年获得的多抗单株的种子重复步骤(1)-(4)的筛选工作，获得稳定的多抗单株。
全文摘要
本发明公开了一种适于珠三角地区气候条件或相似气候条件下的多抗冬瓜的选育方法，包括种子处理、人工接种病菌，种苗筛选等步骤。本方法高效、快捷、稳定性高，可以快速得到对多种病害具有抗性的冬瓜，选育成功率高，对提高冬瓜抗性育种水平、扩大生产有着重要的作用。
文档编号A01H3/00GK102283107SQ20111018667
公开日2011年12月21日 申请日期2011年7月5日 优先权日2011年7月5日
发明者何晓明, 刘文睿, 姜丽, 彭庆务, 谢大森, 赵芹 申请人:广东省农业科学院蔬菜研究所