专利名称：鱼类良种选育方法
技术领域：
本发明涉及一种鱼类良种选育方法，属于动物繁殖技术领域。
背景技术：
大口黑鲈(Micropterus salmoides)俗称加州鲈，又名大嘴鲈，黑鲈，属于鲈形目， 太阳鱼科，是一种纯淡水的广温性肉食性鱼类。大口黑鲈原产于北美洲淡水水域，后引入英国、法国、西非、巴西、菲律宾等国及香港、台湾等地区养殖，其养殖水域几乎遍布全球。大口黑鲈从二十世纪80年代初引入我国内地后，已推广到全国许多省市，成为我国特种水产品之一。大口黑鲈肉质坚实细嫩、肉味鲜美、清香、营养丰富，价格较高，十分畅销。大口黑鲈易驯化、适应性强、病害少、易起捕，既可池塘单养、网箱单养，也可在亲鱼塘中混养，并能有效地控制鱼塘中的野杂鱼，是值得大力推广的优良品种。1983年从台湾引进大陆以来，大口黑鲈的养殖得到蓬勃发展，目前全国的产量超过16万吨，其中江苏地区养殖量占35-40%。从1983年引进至今，大口黑鲈的种质一直没有得到更新，选育工作也没有开展。 随着大口黑鲈养殖规模的不断扩大，很多苗种场在利益的驱动下，不注重苗种种质问题。受近亲繁殖等因素影响，大口黑鲈苗种质量明显下降，生长性状出现退化，已经给养殖户造成不小的经济损失，因此迫切需要开展大口黑鲈育种研究，选育出优良新品系，以适应大口黑鲈养殖业的发展需要。
发明内容
为了解决上述问题，本发明目的在于提供一种鱼类良种选育方法，从而选育出抗病、高产、稳产的适合我国淡水养殖环境的大口黑鲈品种。为了达到以上目的，本发明采用的技术方案是一种鱼类良种选育方法，包括以下步骤
a.亲鱼的选择在所有亲鱼中，选出活泼、遗传性好、体重大于平均体重15-20%的亲鱼，作为进行繁殖的亲本；
b.亲本配组对雌雄亲本进行配组，每组中雌雄亲本的比例为2:1；
c.亲本标记对每尾亲本进行个体标记，每尾亲本具有独立的标记号；
d.构建家系亲本性腺成熟后，对亲本进行人工注射激素溶液，雌雄亲本采用人工授精获得受精卵，进行孵化、培育，每一对亲本的后代分别饲养，建立家系，不同家系的饲养密度保持相同；自亲本子代的重量达到50g至养成的过程中，对不同家系中的每尾鱼进行标记， 每个个体具有独立的标记号，每个个体具有独立的标记号，然后混合养在同一池塘中，养殖期间不断淘汰，剩余家系作为下一代选育的基本家系；
e.良种选育在夏花阶段对各基本家系分别进行优选，在1龄鱼阶段对各基本家系在夏花阶段选出的亲鱼分别进行优选，在2龄鱼阶段对各基本家系在1龄鱼阶段选出的亲鱼分别进行优选，最后从各基本家系成鱼中挑选出活泼、遗传性好、体重大于平均体重15-20% 的亲鱼，作为进行下一代繁殖的亲本，重复步骤b至步骤d，继续进行选育。夏花指春季孵化的鱼苗，经过20 30天饲养后在夏季出池的鱼种；1龄鱼指将夏花经过3 5个月的饲养，称为1龄鱼；2龄鱼指将1龄鱼种再饲养一年即为2龄鱼。进一步地，步骤a和步骤e中，运用微卫星标记进行遗传检测确定遗传性能的优劣。微卫星标记又称为短串联重复序列或简单重复序列，是均勻分布于真核生物基因组中的简单重复序列，由2 6个核苷酸的串联重复片段构成。重复单位的重复次数在个体间呈高度变异性并且数量丰富，因此微卫星标记可以区别个体间差异。微卫星位点通常通过 PCR扩增，扩增产物通过电泳分析并根据大小分离等位基因进行检测。更进一步地，步骤b和步骤d中，采用PIT电子标记对每尾亲本进行个体标记。PIT 电子标记是一种封装在玻璃管内的射频芯片，每个芯片带有独立的序号信息，芯片通过注射器植入动植物体内，通过读卡器读出芯片序号信息来区分一个群体内的不同个体。进一步地，步骤d中的激素溶液为绒毛膜HCG、绒毛膜促性腺激素类似物LRH-A和地欧酮DOM的混合物。更进一步地，激素溶液的注射剂量为雌鱼亲本每千克体重注射绒毛膜 800 士 100UI、绒毛膜促性腺激素类似物10 士 2 μ g、地欧酮10 士 ang，雄鱼亲本每千克体重注射绒毛膜400 士 50UI、绒毛膜促性腺激素类似物5 士 1 μ g、地欧酮5 士 lmg。进一步地，步骤d中所述的人工授精包括以下步骤挤压雌鱼的腹部采集成熟卵， 保存在低温下；人工挤压雄鱼，挤出精液；立即混合成熟的精子和卵，进行搅拌。 优选地，步骤e中的在夏花阶段对各基本家系分别进行优选，其方法为在鱼苗长至3士0. 5cm时，将大个体筛选出来，保持鱼苗个体大小一致，测量鱼苗的全长、体长、体宽和体重，选择各项指标优秀的，根据需要决定数量。更优地，步骤e中的在1龄鱼和2龄鱼阶段对各基本家系分别进行优选，其方法为测量鱼苗的全长、体长、体宽和体重，选择各项指标优秀的，根据需要决定数量。优选地，步骤e中，最后每个家系成鱼所选用作为亲本的数量为1至3尾。本发明通过采用以上技术方案，通过对养殖大口黑鲈建立家系，开展大口黑鲈家系间的交配，选育出优质、高产、稳产的适合我国养殖环境的大口黑鲈新品种。
具体实施例方式下面对本发明的较佳实施例进行详细阐述，以使本发明的优点和特征能更易于被本领域技术人员理解，从而对本发明的保护范围做出更为清楚明确的界定。一种鱼类良种选育方法，包括以下步骤
a.亲鱼的选择收集200对大口黑鲈，采用本实验室开发的微卫星标记对这些大口黑鲈进行了遗传分析，分析结果显示，这些鱼具有较高的遗传多样性。然后从中优选出行动活泼、遗传性能好，体重大于平均体重15 20%的100对亲鱼作为备选亲本。b.亲本配组对雌雄亲本进行配组，每组中雌雄亲本的比例为2:1。c.亲本标记采用PIT电子标记对每尾亲本进行个体标记，每尾亲本具有独立的标记号。d.构建家系亲本性腺成熟后，对亲本进行人工注射激素溶液，雌雄亲本采用人工授精获得受精卵，自孵化至育苗、鱼种培育和1龄鱼培育，每一对亲本的后代分别饲养，建立家系，不同家系的饲养密度保持相同；自大口黑鲈子代重量达到50g至养成的过程中，对不同家系中的每尾亲本进行PIT电子标记，每个个体具有独立的标记号，然后混合养在同一池塘中，养殖期间不断淘汰，剩余60个家系作为下一代选育的基本家系。其中，用于催熟的激素溶液为绒毛膜HCG、绒毛膜促性腺激素类似物LRH-A和地欧酮DOM的混合物，其注射剂量为雌鱼亲本每千克体重注射绒毛膜800士 100UI、绒毛膜促性腺激素类似物10 士 2yg、地欧酮10 士 ang，雄鱼亲本每千克体重注射绒毛膜400 士 50UI、绒毛膜促性腺激素类似物5 士 1 μ g、地欧酮5 士 lmg。人工授精包括以下步骤挤压雌鱼的腹部采集成熟卵，保存在低温下；人工挤压雄鱼，挤出精液；立即混合成熟的精子和卵，进行搅拌。e.良种选育在大口黑鲈生长的夏花、1龄鱼、2龄鱼阶段是家系选育的关键时期， 进行优选
①夏花生长阶段的优选首先选择鱼苗活力强，游动正常，无畸形的家系作为选择家系，培育至夏花阶段，测量鱼苗的全长、体长、体宽和体重，从中筛选出个体较大、体色较好的10000尾左右进行继续培养；
②1龄鱼阶段的优选大口黑鲈在长至50g时进行一次选择，测量鱼苗的全长、体长、 体宽和体重，筛选出个体较大、体色较好的5000尾左右进行标记养殖；
③2龄鱼阶段的优选养殖至2龄对大口黑鲈家系运用同样的筛选方法，从60个家系中挑选个体较大、行动活泼400-500对大口黑鲈。采用微卫星标记进行遗传检测后，挑选 100-200对遗传性能好的作为备用亲鱼，其中每个家系所选用作为亲本的数量为1至3尾， 然后配组、育苗，继续进行选育，每次淘汰的大口黑鲈用于生产或销售。雌雄鱼的交配，按照1条雄鱼随机地与2条雌鱼交配的原则，这2条雌鱼的后代为同父异母的半同胞家系。在进行正常选育的过程中，要尽量避免半同胞或全同胞家系等亲缘关系近的大口黑鲈交配，从而防止近交衰退。本实施例中所述的方案适用于有较大规模的良种场或国家良种基地进行大口黑鲈的良种选育。以上实施方式只为说明本发明的技术构思及特点，其目的在于让熟悉此项技术的人了解本发明的内容并加以实施，并不能以此限制本发明的保护范围，凡根据本发明精神实质所做的等效变化或修饰，都应涵盖在本发明的保护范围内。
权利要求
1.一种鱼类良种选育方法，包括以下步骤a.亲鱼的选择在所有亲鱼中，选出活泼、遗传性好、体重大于平均体重15-20%的亲鱼，作为进行繁殖的亲本；b.亲本配组对雌雄亲本进行配组，每组中雌雄亲本的比例为2:1；c.亲本标记对每尾亲本进行个体标记，每尾亲本具有独立的标记号；d.构建家系亲本性腺成熟后，对亲本人工注射激素溶液，雌雄亲本采用人工授精获得受精卵，进行孵化、培育，每一对亲本的子代分别饲养，建立家系，不同家系的饲养密度保持相同；自亲本子代的重量达到50g至养成的过程中，对不同家系中的每尾鱼进行标记，每个个体具有独立的标记号，然后混合养在同一池塘中，养殖期间不断淘汰，剩余家系作为下一代选育的基本家系；e.良种选育在夏花阶段对各所述的基本家系分别进行优选，在1龄鱼阶段对各基本家系在夏花阶段选出的鱼种分别进行优选，在2龄鱼阶段对各基本家系在1龄鱼阶段选出的鱼种分别进行优选，最后从各基本家系成鱼中挑选出活泼、遗传性好、体重大于平均体重 15-20%的亲鱼，作为进行下一代繁殖的亲本，重复步骤b至步骤d，继续进行选育。
2.根据权利要求1所述的鱼类良种选育方法，其特征在于步骤a和步骤e中，运用微卫星标记进行遗传检测确定遗传性能的优劣。
3.根据权利要求1所述的鱼类良种选育方法，其特征在于步骤b和步骤d中，采用PIT 电子标记对每尾亲本进行个体标记。
4.根据权利要求1所述的鱼类良种选育方法，其特征在于步骤d中所述的激素溶液为绒毛膜HCG、绒毛膜促性腺激素类似物LRH-A和地欧酮DOM的混合物。
5.根据权利要求4所述的鱼类良种选育方法，其特征在于所述的激素溶液的注射剂量为雌鱼亲本每千克体重注射绒毛膜800士 100UI、绒毛膜促性腺激素类似物10士2yg、 地欧酮10士ang，雄鱼亲本每千克体重注射绒毛膜400士50UI、绒毛膜促性腺激素类似物 5士 lyg、地欧酮 5士 lmg。
6.根据权利要求1所述的鱼类良种选育方法，其特征在于步骤d中所述的人工授精包括以下步骤挤压雌鱼的腹部采集成熟卵，保存在低温下；人工挤压雄鱼，挤出精液；立即混合成熟的精子和卵，进行搅拌。
7.根据权利要求1所述的鱼类良种选育方法，其特征在于步骤e中所述的在夏花阶段对各基本家系分别进行优选，其方法为在鱼苗长至3士0. 5cm时，将大个体筛选出来，保持鱼苗个体大小一致，测量鱼苗的全长、体长、体宽和体重，选择各项指标优秀的，根据需要决定数量。
8.根据权利要求1所述的鱼类良种选育方法，其特征在于步骤e中所述的在1龄鱼和 2龄鱼阶段对各基本系分别进行优选，其方法为测量鱼苗的全长、体长、体宽和体重，选择各项指标优秀的，根据需要决定数量。
9.根据权利要求1所述的鱼类良种选育方法，其特征在于步骤e中，最后每个家系成鱼所选用作为亲本的数量为1至3尾。
全文摘要
本发明公开了一种鱼类良种选育方法，包括以下步骤a．亲鱼的选择；b．亲本配组；c．亲本标记；d．构建家系；e．良种选育。本发明通过采用以上技术方案，通过对养殖大口黑鲈建立家系，开展大口黑鲈家系间的交配，选育出优质、高产、稳产的适合我国养殖环境的大口黑鲈新品种。
文档编号A01K61/00GK102349462SQ20111025137
公开日2012年2月15日 申请日期2011年8月30日 优先权日2011年8月30日
发明者宣云峰, 徐海华, 王荣泉 申请人:吴江市水产养殖有限公司