专利名称：提高家蚕母蛾产卵量的饲料添加剂及其制作方法
技术领域：
本发明属于家蚕饲料添加剂技术领域，涉及ー种提高家蚕母蛾产卵量的饲料添加剂及其制备方法。
背景技术：
家蚕母蛾的产卵量是决定家蚕种繁育単位(蚕种场)经济效益的关键因素之一， 如何提高家蚕母蛾产卵量是当前蚕种繁育工作者研究的热点之一。家蚕产卵量由造卵数及产卵效率決定的。造卵数多的母蛾，一般产卵数亦多，故造卵数无疑是决定产卵数的最重要因素。理论上，一个家蚕母蛾最多可生产蚕卵800粒，但由于营养、饲养或保护条件、交配等的原因，目前大多数的家蚕品种的产卵量在500-600粒/蛾之间，还有比较大的提升空间。因此，如何促进家蚕母蛾造卵数及其产出卵率，对提高家蚕母蛾产卵量具有重要的意义。一些研究表明(1)蛹期进行合适的温湿度及其光线条件的保护，可以减少不产卵母蛾和少产卵母蛾，提高产卵数，减少不受精卵，増加良卵率；(2)幼虫期生活在富含负氧离子的环境中，可加快产卵速度，増加总产卵量，提高良卵率，减少不受精卵率；⑶改变桑叶叶质及通过添食氨基酸、蛋白质、微量元素以及激素等，均可一定程度提高家蚕母蛾的造卵数及产出卵率，但这些方法的效果都不是十分明显。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种提高家蚕母蛾产卵量的饲料添加剂及其制作方法。为了解决上述技术问题，本发明提供一种提高家蚕母蛾产卵量的饲料添加剤，由经破碎处理的抗福射菌(D. radiopugnance)与ZnSO4 · 7H20按照I : O. 95 I. 05的质量比混合而得；抗福射菌(D.radiopugnance)的保藏号为 ATCC 19172。作为本发明的提高家蚕母蛾产卵量的饲料添加剂的改进经破碎处理的抗辐射菌(D. radiopugnance)与 ZnSO4 · 7H20 的质量比为 1:1。本发明还同时提供了一种提高家蚕母蛾产卵量的饲料添加剂的制作方法，包括以下步骤I)、抗福射菌(D. radiopugnance)的破碎处理,依次进行以下步骤①、将抗福射菌(D. radiopugnance)的菌种接种至适合抗福射菌的固体培养基上，于28 32°C培养34 38h，然后挑取单菌落接种至适合抗辐射菌的液体培养基上，于28 32°C培养至对数生长期，得种子菌液；抗福射菌(D.radiopugnance)的保藏号为 ATCC 19172 ；②、将步骤①所得的种子菌液按体积比4. 5% 6. O %的接种量接种至适合抗辐射菌的发酵培养基上，于28 32°C条件下培养60 72h ;得发酵液；③、将步骤②所得的发酵液进行离心，得到抗辐射菌菌体；将抗辐射菌菌体平铺成O. Icm I. Oem厚度，在频率600 700MHz，电场强度8000 9000V/em的条件下处理40 60s ;再于5 30°C、风速I. 5 2. Om/s、相対湿度10 20%的条件下冷风干燥至含水量小于8% (质量比)，得到经破碎处理的抗辐射菌；2)、将经破碎处理的抗辐射菌与ZnSO4 ·7Η20按照I : O. 95 I. 05的质量比均匀搅拌混合，得提高家蚕母蛾产卵量的饲料添加剤。作为本发明的提高家蚕母蛾产卵量的饲料添加剂的制作方法的改进适合抗辐射菌的固体培养基为TGY固体培养基；适合抗辐射菌的液体培养基为TGY液体培养基；
适合抗辐射菌的发酵培养基为脱脂大豆培养基或者TGY液体培养基；每IOOOmL的脱脂大豆培养基由以下成分组成细度为60_80目的脱脂大豆粉20g，葡萄糖2g，硝酸钠2g，酵母膏lg，其余为蒸馏水。作为本发明的提高家蚕母蛾产卵量的饲料添加剂的制作方法的进ー步改进步骤③中的离心为4000 6000rpm离心4 6min。上述TGY固体培养基、TGY液体培养基均为本行业的常规培养基。本发明所用的保藏号为ATCC 19172的抗福射菌(D. radiopugnance)在专利号为200610154663.4的发明《具荧光素酶活性抗辐射菌的制备方法》(已授权)中有明确告知。本发明提供了抗福射菌(Deinococcusradiopugnance,D. radiopugnance)在制备提高家蚕产卵数的饲料添加剂中的应用。本发明的饲料添加剂经多次饲养试验表明产品性状稳定，具有安全高效特性，且操作简便；实际使用时，在桑叶添食时配制成浓度为O. 2 O. 5% (质量比)的喷洒溶液喷洒在桑叶上(用喷雾器均匀喷洒在桑叶叶面叶背两面，以喷湿而不滴为宜)，人工饲料中以O. 3 O. 6% (w/w)的添加量进行添食，可明显提高家蚕造卵数及产卵数。本发明的添加剂具有较显著的经济效益和社会效益，市场前景广阔。
具体实施例方式下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此。实施例I :一种提高家蚕母蛾产卵量的饲料添加剂的制作方法，依次进行以下步骤I)、抗福射菌(D. radiopugnance)的破碎处理，所用保藏号为ATCC NO. 19172的抗福射菌的菌株D. radiopugnance由美国菌种保藏中心提供。具体步骤为①、菌种的活化将抗福射菌(D. radiopugnance)划线接种于TGY固体培养基上,30°C培养36h,挑取单菌落接种于三角瓶内的TGY液体培养基中，于30°C培养至对数生长期；得活化后的种子菌液；TGY液体培养基的制备方法如下在蛋白胨6g、酵母膏3g和葡萄糖Ig中加蒸馏水至IOOOmL ;然后进行常规的高温灭菌(I. I个大气压，121°C下灭菌20min)。
TGY固体培养基的制备方法如下在蛋白胨6g、酵母膏3g、葡萄糖Ig和琼脂15g中加蒸懼水至IOOOmL ;然后进行常规的高温灭菌(11个大气压，121 °C下灭菌20min)。②、发酵培养将步骤①所得的活化后的种子菌液按体积比为5%的接种量接入以脱脂大豆配制成的培养基(即脱脂大豆培养基)中进行发酵培养，30°C培养60h ;得发酵液；上述脱脂大豆培养基的制备方法如下在细度为60-80目的脱脂大豆粉20g、葡萄糖2g、硝酸钠2g和酵母膏Ig中，加蒸馏水至IOOOmL ;然后进行常规的高温灭菌(I. I个大气压，121°C下灭菌20min)。③、破碎抗辐射菌的制备将步骤②所得的发酵液(即菌体发酵液)，于5000rpm离心5min，去掉上清液，将所得的抗辐射菌菌体(为湿菌体)均匀地铺成O. 5em的厚度，在频率600MHz，电场强度8000V/m的条件下处理40秒，使细胞破碎，将经破碎处理后的抗辐射菌置于物料盘中，放进冷风干燥机内进行冷风干燥，冷却温度控制在20-25 °C，风速I. 5-2. Om/s，相対湿度10-15%，干燥至含水量为6-8% (质量％ )，得到经破碎处理的抗辐射菌。2)、饲料添加剂组合将经破碎处理的抗辐射菌与ZnSO4 · 7H20这ニ种物质按质量比I : I的比例混合均匀，得提高家蚕母蛾产卵量的饲料添加剤。实验1-1、实施例I所得的饲料添加剂的应用效果如下空白对照组采用桑叶饲养，试验组在桑叶中喷洒O. 2%按本实施例I方法生产的饲料添加剂(即将饲料添加剂配制成质量浓度为O. 2%的喷洒溶液喷洒在桑叶上)，用喷雾器均匀喷洒在桑叶的叶面叶背两面，以喷湿而不滴为宜，稍作晾干后即可喂蚕；对照组I为将实施例I中的经破碎处理的抗辐射菌与ZnSO4 ·7Η20的质量比改成I O. 8，所得称为饲料添加剂Α，以饲料添加剂A替代试验组中的按实施例I方法生产的饲料添加剤，其余同试验组；对照组2为将实施例I中的经破碎处理的抗辐射菌与ZnSO4 ·7Η20的质量比改成I I. 2，所得称为饲料添加剂B，以饲料添加剂B替代试验组中的按实施例I方法生产的饲料添加剤，其余同试验组；添食时间从3龄起蚕开始直至上簇，试验蚕共300头，每组各25头(S卩，空白对照组、试验组、对照组I和对照组2各设置3个重复)，供试品种为丰1Χ54Α。每个组别的桑叶用量相同，应用效果的平均值见表I。表I、本发明饲料添加剂对家蚕产卵特性的影响
权利要求
1.提高家蚕母蛾产卵量的饲料添加剂，其特征是由经破碎处理的抗辐射菌(D. radiopugnance)与 ZnSO4 · 7H20 按照 I : O. 95 I. 05 的质量比混合而得； 所述抗福射菌(D. radiopugnance)的保藏号为ATCC 19172。
2.根据权利要求I所述的提高家蚕母蛾产卵量的饲料添加剂，其特征是所述经破碎处理的抗福射菌(D. radiopugnance)与ZnSO4 · 7H20的质量比为1:1。
3.一种提高家蚕母蛾产卵量的饲料添加剂的制作方法，其特征是包括以下步骤 .1)、抗福射菌(D.radiopugnance)的破碎处理,依次进行以下步骤 ①、将抗福射菌(D.radiopugnance)的菌种接种至适合抗福射菌的固体培养基上，于.28 32°C培养34 38h，然后挑取单菌落接种至适合抗辐射菌的液体培养基上，于28 .32°C培养至对数生长期，得活化后的种子菌液； 所述抗福射菌(D. radiopugnance)的保藏号为ATCC 19172 ； ②、将步骤①所得的活化后的种子菌液按体积比4.5% 6. 0%的接种量接种至适合抗辐射菌的发酵培养基上，于28 32°C条件下培养60 72h ;得发酵液； ③、将步骤②所得的发酵液进行离心，得到抗辐射菌菌体；将所述抗辐射菌菌体平铺成.0.Icm I. Ocm厚度，在频率600 700MHz，电场强度8000 9000V/cm的条件下处理40 .60s ;再于5 30°C、风速I. 5 2. 0m/s、相对湿度10 20%的条件下冷风干燥至含水量小于8% (质量比)，得到经破碎处理的抗辐射菌； .2)、将经破碎处理的抗辐射菌与ZnSO4·7Η20按照I : 0. 95 I. 05的质量比均匀搅拌混合，得提高家蚕母蛾产卵量的饲料添加剂。
4.根据权利要求3所述的提高家蚕母蛾产卵量的饲料添加剂的制作方法，其特征是 所述适合抗辐射菌的固体培养基为TGY固体培养基； 所述适合抗辐射菌的液体培养基为TGY液体培养基； 所述适合抗辐射菌的发酵培养基为脱脂大豆培养基或者TGY液体培养基； 所述每IOOOmL的脱脂大豆培养基由以下成分组成细度为60-80目的脱脂大豆粉.20g，葡萄糖2g，硝酸钠2g，酵母膏lg，其余为蒸馏水。
5.根据权利要求4所述的提高家蚕母蛾产卵量的饲料添加剂的制作方法，其特征是所述步骤③中的离心为4000 6000rpm离心4 6min。
全文摘要
本发明公开了一种提高家蚕母蛾产卵量的饲料添加剂，由经破碎处理的抗辐射菌(D.radiopugnance)与ZnSO4·7H2O按照1∶0.95～1.05的质量比混合而得。本发明还同时提供了上述饲料添加剂的制作方法，其中抗辐射菌(D.radiopugnance)的破碎处理包括以下步骤将活化后的保藏号为ATCC 19172的抗辐射菌(D.radiopugnance)的种子菌液接种至发酵培养基上培养，将所得的发酵液进行离心后在频率600～700MHz、电场强度8000～9000V/em的条件下处理40～60s；再干燥，得经破碎处理的抗辐射菌(D.radiopugnance)。
文档编号A23K1/18GK102626184SQ20121009612
公开日2012年8月8日 申请日期2012年4月3日 优先权日2012年4月3日
发明者屠振力 申请人:浙江大学