专利名称：一种秸秆饲料的制备方法
技术领域：
本发明涉及农作物秸杆应用技术领域，特别是涉及一种秸杆饲料的制备方法。
背景技术：
农作物秸杆是重要 的潜在生物资源，我国年产各类农作物秸杆7亿吨左右。现阶段国家正大力提倡秸杆资源综合利用，一方面是解决秸杆资源季节性过剩造成严重污染环境的问题，另一方面是解决目前秸杆综合利用效率低下的问题。我国目前秸杆资源大部分是焚烧还田和用作生活燃料，少部分用作反刍家畜饲料，数量还达不到秸杆资源总量的10%，综合利用率低。我国对秸杆饲料的开发利用仍处于起步阶段，饲料工业集约化生产水平较低。秸杆饲料的转化和加工利用技术主要有物理处理和化学处理。其中物理处理、化学处理方法最新的成果也只能做到改善秸杆的适口性，少部分能改善纤维素的品质，但均不能有效地提高秸杆饲料的营养价值。目前用于饲料加工的主要是玉米秸杆和水稻秸杆，利用率不及10%，少数养殖企业也引进了微贮处理技术。但微贮处理技术由于引进的秸杆分解菌种不适宜各地区的气候条件，分解效果不理想。
发明内容
本发明要解决的技术问题是克服现有秸杆饲料综合利用效率低下、物理处理和化学处理方法不能有效提高秸杆饲料的营养价值、微贮处理技术又不能满足不能气候条件的缺陷，针对各地区不同气候条件下秸杆微生物分解发酵的不同特点，对症下药，提供一种秸杆饲料的制备方法，为广大山区大力发展生态畜牧业提供有力保障，方法简单，营养丰富，易消化。为了解决上述技术问题，本发明采用如下的技术方案
本发明秸杆饲料的制备方法包括如下步骤
(O菌种采集采集堆放在田间自然腐烂的油菜秸杆；
(2)菌种分离将油菜秸杆浸泡后稀释，取稀释液涂布在马丁氏培养基上于25°C培养5 7d，继续用马丁氏培养基分离纯化菌种至无污染，筛选D/d值(菌落生长直径为d，菌落周围透明圈直径为D)大于2的菌落即为菌种；
(3)菌液培养取少量步骤(2)得到的菌种接种于马丁氏液体培养基上摇床培养制得菌液；
(4)稻杆发酵取菌液20 100ml、稻杆洛150 250g、鹿糖15 25g和蒸懼水100 150ml，混匀发酵，即得秸杆饲料。具体的，上述秸杆饲料的制备方法为
(O菌种采集采集堆放在田间300天以上并自然腐烂的油菜秸杆；
(2)菌种分离将油菜秸杆与水按1:8 12的质量比混合浸泡20 28h后稀释至10_4倍，取稀释液O. ImL涂布在8 12ml马丁氏培养基上，于25°C培养5 7d，继续用马丁氏培养基分离纯化菌种至无污染，筛选D/d值大于2的菌落即为菌种；
(3)菌液培养用O.3cm打孔器取步骤(2)得到的菌种接种于45 55ml马丁氏液态培养基中，于25°C、110 130r/min摇床培养70 74h，再取20%的培养产物接种于80 120ml马丁氏液态培养基中制得菌液；
(4)秸杆发酵取菌液20 100ml、秸杆渣200g、蔗糖20g和蒸馏水120ml，混匀，置于25 28°C条件下发酵15 20d即可。更进一步的，前述的制备方法中，所述菌种分离为将油菜秸杆与水按1:10的质量比混合浸泡24h后稀释至10_4倍，取稀释液O. ImL涂布在IOml马丁氏培养基上，于25°C培养5 7d，继续用马丁氏培养基分离纯化菌种至无污染，筛选D/d值大于2的菌落即为菌种。所述菌液培养为用O. 3cm打孔器取步骤(2)得到的菌种接种于50ml马丁氏液态培养 基中，于25°C、120r/min摇床培养72h，再取20%的培养产物接种于IOOml马丁氏液态培养基中制得菌液。优选的，前述制备方法中，在所述马丁氏培养基中按250ml马丁氏培养基加入15 25mg青霉素和25 35mg链霉素的比例加入青霉素和链霉素,青霉素和链霉素的优选加入量分别为20mg和30mg。在所述马丁氏液态培养基中按250ml马丁氏液态培养基加入15 25mg青霉素和25 35mg链霉素的比例加入青霉素和链霉素,青霉素和链霉素的优选加入量分别为20mg和30mg。在马丁氏培养基中加入青霉素和链霉素可以抑制黄曲霉等能引起稻杆霉变的有害细菌生长。与现有技术相比，本发明针对各地区不同气候条件下具有不同的秸杆微生物分解发酵特点，对症下药，利用当地微生物(采集于堆放在田间并自然腐烂的油菜秸杆)处理当地秸杆，将秸杆粗纤维转化为可消化的养分，且污染少、效益高，所得秸杆饲料是一种无异味、纤维素含量低，各项营养指标都较高、适口性好、易消化的绿色动物饲料，提高了秸杆资源饲料利用的效率，解决了我国大力发展生态畜牧业却缺乏冬季家畜饲料和秸杆饲用率低下的瓶颈问题。在制备时，还可以在马丁氏培养基和马丁氏液态培养基中加入青霉素和链霉素，能抑制黄曲霉等能引起秸杆霉变的有害菌生长，在5 30°C的条件下，秸杆饲料的保质期长达1-2个月。使用本发明提供的制作方法可以实现规模化、产业化生产，方法简单，取材方便，技术可行，为农作物秸杆加工与利用开辟了一条新路。
具体实施例方式实施例I :
发酵池构造长IOm,宽5m,高lm, 40cm厚的砖墙，C25轮灌衆,侧面粉刷。(I)秸杆预处理于每年3 5月份或8 11月份农作物成熟后收集秸杆，将农作物秸杆中的石块、土块等动物不能食用的杂物去除，采用粉碎机将农作物秸杆粉碎成2 5cm长度，以便发酵时微生物能充分接触；
(2)微生物菌种采集采集长期堆放在田间自然腐烂的油菜秸杆；
(3)菌种分离将秸杆与水按1:10的质量比混合，浸泡24h后稀释至10_4，取稀释液
O.ImL涂布在IOml马丁氏培养基上，于25°C培养5 7d，取D/d值大于2的菌落继续分离纯化培养(分离纯化培养的方法是将菌种接种于马丁氏培养基上于25°C培养5 7d)，至菌落无污染并且D/d值大于2，制得菌种；(4)菌液培养用3_打孔器采集步骤(2)所制得的菌种，接种于50ml马丁氏液态培养基中，于25°C、120r/min摇床培养72h，取20%的培养产物接种于IOOml马丁氏液态培养基中制得菌液；
(5)秸杆发酵取菌液20 100ml、秸杆渣200g、蔗糖20g和蒸馏水120ml，混匀，置于25 28°C条件下发酵15 20d即可，检验合格后，可直接给反刍动物食用。发酵前，秸杆渣的粗蛋白含量为I. 26%、粗纤维含量为47%、粗脂肪含量为O. 69%，发酵后，秸杆饲料中粗蛋白含量为3. 21%、粗纤维含量为9. 8%、粗脂肪含量为I. 25%。实施例2:
(O菌种采集将油菜秸杆堆放在田间300天以上使其自然腐烂后采集腐烂的油菜秸
杆；
(2)菌种分离将油菜秸杆与水按1:8的质量比浸泡20h后稀释至10_4，取稀释液O.ImL涂布在12ml马丁氏培养基上，于25°C培养5 7d，如菌种有污染则继续分离纯化，将菌种接种于马丁氏培养基上于25°C培养5 7d，直至菌种无污染，筛选D/d值大于2的菌落即为分离得到的菌种；
(3)菌液培养用3mm打孔器采集步骤(2)所制得的菌种，接种于55ml马丁氏液态培养基中，于25°C、110r/min摇床培养74h，取20%的培养产物接种于80ml马丁氏液态培养基中制得菌液；
(4)秸杆发酵取菌液20 100ml、秸杆渣150g、蔗糖15g和蒸馏水150ml，混匀，置于25 28°C条件下发酵15 20d即可。检验合格后，可直接给反刍动物食用。得到的秸杆饲料各成分为水分7. 23% 7. 57%、灰分3. 15% 3. 61%、P 58. I 64. 5mg/100g、Ca 863 962mg/100g、粗蛋白 3. 52% 4. 66%、粗纤维 9. 8% 10. 8%、粗脂肪
I.35% 4. 25%，纤维素含量降低，各项营养指标都提高，再经过检验合格后，可直接给反刍动物食用，适口性好，营养丰富。实施例3:
(O菌种采集将油菜秸杆堆放在田间300天以上使其自然腐烂后采集腐烂的油菜秸
杆；
(2)菌种分离将油菜秸杆与水按1:12的质量比浸泡28h后稀释至10_4，取稀释液
O.ImL涂布在8ml马丁氏培养基上，于25°C培养5 7d，如菌种有污染则继续分离纯化，将菌种接种于马丁氏培养基上于25°C培养5 7d，直至菌种无污染，筛选D/d值大于2的菌落即为分离得到的菌种；
(3)菌液培养用直径O.3cm打孔器采集步骤(2)所制得的菌种，接种于45ml马丁氏液态培养基中，于25°C、130r/min摇床培养70h，取20%的培养产物接种于120ml马丁氏液态培养基中制得菌液；
(4)秸杆发酵取菌液20 100ml、秸杆渣250g、蔗糖25g和蒸馏水100ml，混匀，置于25 28°C条件下发酵15 20d即可。检验合格后，可直接给反刍动物食用。
权利要求
1.一种秸杆饲料的制备方法，其特征在于包括如下步骤 (1)菌种采集采集堆放在田间自然腐烂的油菜秸杆； (2)菌种分离将油菜秸杆浸泡后稀释，取稀释液涂布在马丁氏培养基上于25°C培养5 7d，继续用马丁氏培养基分离纯化菌种至无污染，筛选D/d值大于2的菌落即为菌种； (3)菌液培养取少量步骤(2)得到的菌种接种于马丁氏液体培养基上摇床培养制得菌液； (4)稻杆发酵取菌液20 100ml、稻杆洛150 250g、鹿糖15 25g和蒸懼水100 150ml，混匀发酵，即得秸杆饲料。
2.按照权利要求I所述秸杆饲料的制备方法，其特征在于 (O菌种采集采集堆放在田间300天以上并自然腐烂的油菜秸杆； (2)菌种分离将油菜秸杆与水按1:8 12的质量比混合浸泡20 28h后稀释至10_4倍，取稀释液O. ImL涂布在8 12ml马丁氏培养基上，于25°C培养5 7d，继续用马丁氏培养基分离纯化菌种至无污染，筛选D/d值大于2的菌落即为菌种； (3)菌液培养用O.3cm打孔器取步骤(2)得到的菌种接种于45 55ml马丁氏液态培养基中，于25°C、110 130r/min摇床培养70 74h，再取20%的培养产物接种于80 120ml马丁氏液态培养基中制得菌液； (4)秸杆发酵取菌液20 100ml、秸杆渣200g、蔗糖20g和蒸馏水120ml，混匀，置于25 28°C条件下发酵15 20d即可。
3.按照权利要求2所述秸杆饲料的制备方法，其特征在于所述菌种分离为将油菜秸杆与水按1:10的质量比混合浸泡24h后稀释至ICT4倍，取稀释液O. ImL涂布在IOml马丁氏培养基上，于25°C培养5 7d，继续用马丁氏培养基分离纯化菌种至无污染，筛选D/d值大于2的菌落即为菌种。
4.按照权利要求2所述秸杆饲料的制备方法，其特征在于所述菌液培养为用O.3cm打孔器取步骤(2)得到的菌种接种于50ml马丁氏液态培养基中，于25°C、120r/min摇床培养72h，再取20%的培养产物接种于IOOml马丁氏液态培养基中制得菌液。
5.按照权利要求1、2或3所述秸杆饲料的制备方法，其特征在于在所述马丁氏培养基中按250ml马丁氏培养基加入15 25mg青霉素和25 35mg链霉素的比例加入青霉素和链霉素。
6.按照权利要求5所述秸杆饲料的制备方法，其特征在于所述青霉素和链霉素的加入量分别为20mg和30mg。
7.按照权利要求1、2或4所述秸杆饲料的制备方法，其特征在于在所述马丁氏液态培养基中按250ml马丁氏液态培养基加入15 25mg青霉素和25 35mg链霉素的比例加入青霉素和链霉素。
8.按照权利要求7所述秸杆饲料的制备方法，其特征在于所述青霉素和链霉素的加入量分别为20mg和30mg。
全文摘要
本发明公开了一种秸秆饲料的制备方法，采集堆放在田间并自然腐烂的油菜秸秆作为菌种原料，用马丁氏培养基分离培养制得菌种，将菌种用马丁氏液态培养基培养后制成菌液，将菌液接种于秸秆发酵生产秸秆饲料，针对各地区不同气候条件下具有不同的秸秆微生物分解发酵特点，对症下药，利用当地微生物(采集于堆放在田间并自然腐烂的油菜秸秆)处理当地秸秆，所得秸秆饲料是一种无异味、纤维素含量降低，各项营养指标都较高、适口性好、易消化的绿色动物饲料，使用本发明提供的制作方法可以实现规模化、产业化生产，方法简单，取材方便，技术可行，为农作物秸秆加工与利用开辟了一条新路。
文档编号A23K1/14GK102613392SQ201210095488
公开日2012年8月1日 申请日期2012年4月1日 优先权日2012年4月1日
发明者任春光, 向准, 孙超, 王莹, 贺红早 申请人:贵州省生物研究所