一种蝴蝶兰组织培养培养基的制作方法
【专利摘要】本发明提供一种蝴蝶兰组织培养培养基，由以下组分组成：KNO3：1900mg/L；硝酸铵：1650mg/L；磷酸二氢钾：170mg/L；七水硫酸镁：370mg/L；二水氯化钙：440mg/L；KI：0.60-0.62mg/L；硼酸：4.5-4.8mg/L；四水硫酸锰：25.0-25.3mg/L；七水硫酸锌：7.0-7.2mg/L；二水合钼酸钠：0.20-0.22mg/L；五水硫酸铜：0.025mg/L；六水氯化钴：0.025mg/L；Na2·EDTA：37.25mg/L；七水硫酸亚铁：27.85mg/L；肌醇：100mg/L；甘氨酸：2mg/L；盐酸硫胺素：0.1mg/L；盐酸吡哆醇：0.5mg/L；烟酸：0.5mg/L；蔗糖：20-22g/L；琼脂：5-5.2g/L；香蕉汁：30-35g/L；梨汁：3-5g/L；活性炭0.45-0.48g/L；溶剂为去离子水。应用本发明的培养基培养蝴蝶兰，成活率大于96%，染菌率为2.7-2.8%，培养基褐化程度较MS培养基低30-40%。
【专利说明】一种蝴蝶兰组织培养培养基
【技术领域】
[0001]本发明属于植物培养【技术领域】，具体涉及一种蝴蝶兰组织培养培养基。
【背景技术】
[0002]蝴蝶兰又名蝶兰(Phalaenopsisamabilis),兰科(Orchidaceae)蝶兰属(Phalaenopsis)多年生附生草本植物，有着“洋兰皇后”之称的蝴蝶兰，由于其花形如彩蝶飞舞，色彩艳丽，体态轻盈、飘逸，在国内外花卉市场上极受欢迎，一直都是消费者的宠儿。而且蝴蝶兰除了盆栽之外，还特别适宜用作切花，是艺术插花的高档花材。
[0003]目前蝴蝶兰工厂化生产常用的方法是用组织培养无性繁殖，即所谓克隆繁殖，具有繁殖快、数量大和小苗品种纯的优点。利用蝴蝶兰花梗侧芽、叶片、茎尖等外植体，经消毒处理后接种到培养基上，可诱导出营养牙或原球茎。再进一步于培养基中进行大量增殖、分化培养，这样就可以培养出大量的植株。通过克隆繁殖的蝴蝶兰苗生长、开花比较整齐一致，可完全保存母株的花色性状。
[0004]在原球茎的诱导过程中，目前使用的培养基为MS培养基，但是其在使用过程中褐化程度严重。
【发明内容】
[0005]本发明提供了一种蝴蝶兰组织培养培养基，应用其进行蝴蝶兰原球茎的诱导时，褐化程度小。`
[0006]本发明提供一种蝴蝶兰组织培养培养基，所述培养基由以下组分组成:
KNO3:1900mg/L ；
NH4NO3:1650mg/L ；
KH2PO4:170mg/L ；
MgSO4.7H20:370mg/L ；
CaCl2.2H20:440mg/L ；
KI:0.60-0.62mg/L ；
H3BO3:4.5-4.8mg/L ；
MnSO4.4H20:25.0-25.3mg/L ；
ZnSO4.7H20:7.0-7.2mg/L ；
Na2MoO4.2H20:0.20-0.22mg/L ；
CuSO4.5H20:0.025mg/L ；
CoCl2.6H20:0.025mg/L ；
Na2.EDTA:37.25mg/L ；
FeSO4.7H20:27.85mg/L ；
肌醇:100mg/L ；
甘氨酸:2mg/L ；盐酸硫胺素:0.lrng/L ；
盐酸批卩多醇:0.5mg/L ；
烟酸:0.5mg/L ；
蔗糖:20-22g/L ；
琼脂:5.0-5.2g/L ；
香蕉汁:30-35g/L ；
梨汁:3-5g/L ；
活性炭 0.45-0.48g/L ；
溶剂为去离子水。
[0007]优选地，所述培养基由以下组分组成:
KNO3:1900mg/L ；
NH4NO3:1650mg/L ；
KH2PO4:170mg/L ；
MgSO4.7H20:370mg/L ；
CaCl2.2H20:440mg/L ；
KI:0.61mg/L ；
H3BO3:4.6mg/L ；
MnSO4.4H20:25.2mg/L ；
ZnSO4.7H20:7.lmg/L ；
Na2MoO4.2H20:0.2 lmg/L ；
CuSO4.5H20:0.025mg/L ；
CoCl2.6H20:0.025mg/L ；
Na2.EDTA:37.25mg/L ；
FeSO4.7H20:27.85mg/L ；
肌醇:100mg/L ；
甘氨酸:2mg/L ；
盐酸硫胺素:0.lmg/L ；
盐酸批卩多醇:0.5mg/L ；
烟酸:0.5mg/L ；
鹿糖:21g/L ；
琼脂:5.lg/L ；
香蕉汁:32g/L ；
梨汁:4g/L ；
活性炭0.46g/L ；
溶剂为去离子水。
[0008]应用本发明的培养基培养蝴蝶兰，成活率大于96%，染菌率为2.7-2.8%，培养基褐
化程度较MS培养基低30-40%。
【具体实施方式】[0009]以下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
[0010]实施例1
本发明提供的一种蝴蝶兰组织培养培养基配方如下:
本发明的一种蝴蝶兰组织培养培养基是在MS培养基的基础上改良而成,具体配方如
下:
KNO3:1900mg/L ；
NH4NO3:1650mg/L ；
KH2PO4:170mg/L ；
MgSO4.7H20:370mg/L ；
CaCl2.2H20:440mg/L ；
KI:0.6lmg/L ；
H3BO3:4.6mg/L ；
MnSO4.4H20:25.2 mg/L ；
ZnSO4.7H20:7.lmg/L ；
Na2MoO4.2H20:0.2 lmg/L ；
CuSO4.5H20:0.025mg/L ；
CoCl2.6H20:0.025mg/L ；
Na2.EDTA:37.25mg/L ；
FeSO4.7H20:27.85mg/L ；
肌醇:100mg/L ；
甘氨酸:2mg/L ；
盐酸硫胺素:0.lmg/L ；
盐酸批卩多醇:0.5mg/L ；
烟酸:0.5mg/L ；
鹿糖:21g/L ；
琼脂:5.lg/L ；
香蕉汁:32g/L ；
梨汁:4g/L ；
活性炭0.46g/L ；
溶剂为去离子水。
[0011]实施例2
本发明提供的一种蝴蝶兰组织培养培养基配方如下:
本发明的一种蝴蝶兰组织培养培养基是在MS培养基的基础上改良而成,具体配方如
下:
KNO3:1900mg/L ；
NH4NO3:1650mg/L ；
KH2PO4:170mg/L ；
MgSO4.7H20:370mg/L ；CaCl2.2H20:440mg/L ；
KI:0.6lmg/L ；
H3BO3:4.6mg/L ；
MnSO4.4H20:25.0mg/L ；
ZnSO4.7H20:7.0mg/L ；
Na2MoO4.2H20:0.20mg/L ；
CuSO4.5H20:0.025mg/L ；
CoCl2.6H20:0.025mg/L ；
Na2.EDTA:37.25mg/L ；
FeSO4.7H20:27.85mg/L ；
肌醇:100mg/L ；
甘氨酸:2mg/L ；
盐酸硫胺素:0.lmg/L ；
盐酸批卩多醇:0.5mg/L ；
烟酸:0.5mg/L ；·
鹿糖:20g/L ；
琼脂:5.0g/L ；
香蕉汁:30g/L ；
梨汁:3g/L ；
活性炭0.45g/L ；
溶剂为去离子水。
[0012]实施例3
本发明提供的一种蝴蝶兰组织培养培养基配方如下:
本发明的一种蝴蝶兰组织培养培养基是在MS培养基的基础上改良而成,具体配方如
下:
KNO3:1900mg/L ；
NH4NO3:1650mg/L ；
KH2PO4:170mg/L ；
MgSO4.7H20:370mg/L ；
CaCl2.2H20:440mg/L ；
KI:0.6lmg/L ；
H3BO3:4.6mg/L ；
MnSO4.4H20:25.3mg/L ；
ZnSO4.7H20:7.2mg/L ；
Na2MoO4.2H20:0.22mg/L ；
CuSO4.5H20:0.025mg/L ；
CoCl2.6H20:0.025mg/L ；
Na2.EDTA:37.25mg/L ；
FeSO4.7H20:27.85mg/L ；肌醇:100mg/L ；
甘氨酸:2mg/L ；
盐酸硫胺素:0.lmg/L ；
盐酸批卩多醇:0.5mg/L ；
烟酸:0.5mg/L ；
庶糖:22g/L ；
琼脂:5.2g/L ；
香蕉汁:35g/L ；
梨汁:5g/L ；
活性炭0.48g/L ；
溶剂为去离子水。
[0013]应用上述培养基对蝴蝶兰进行组织培养:
(1)切下蝴蝶兰带芽茎段，长约2-3cm，用自来水清洗干净，在饱和漂白粉上清液中浸泡15min ；
(2)浸泡时不断搅动，浸泡后的茎段用流水冲洗干净，置于超净工作台上，先用75%的酒精消毒30s，无菌水清洗I次,再用0.1%的升汞浸泡IOmin ；
(3)经无菌水冲洗数次，将带芽茎段接种到培养基上，调pH为4.5，在每天光照12小时，光强1600Lux，温度25°C下培养；
(4)按照35天一个周期不断进行转接，每次转接都会有平均3倍的增殖，每天光照12小时，光强1600Lux，温度250C ；
(5)将苗分成单株，将其接种至壮苗生根培养基中培养，使其长高长大，同时长出发达的根系，最终培养成为一棵有根有叶的完整植株，每天光照12小时，光强1600LUX，温度25。。。
[0014]实验结果:应用本发明的培养基培养蝴蝶兰，成活率大于96%，染菌率为
2.7-2.8%，培养基褐化程度较MS培养基低30-40%。
[0015]最后应说明的是:以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【权利要求】
1.一种蝴蝶兰组织培养培养基，其特征在于:所述培养基由以下组分组成:KN03:1900mg/L ；NH4N03:1650mg/L ；KH2P04:170mg/L ；MgS04.7H20:370mg/L ；CaCl2.2H20:440mg/L ；KI:0.60-0.62mg/L ；H3BO3:4.5-4.8mg/L ；MnS04.4H20:25.0-25.3mg/L ；ZnS04.7H20:7.0-7.2mg/L ；Na2Mo04.2H20:0.2 0-0.22mg/L ；CuS04.5H20:0.025mg/L ；CoCl2.6H20:0.025mg/L ；Na2.EDTA:37.25mg/L ；FeS04.7H20:27.85mg/L ；肌醇:100mg/L ；甘氨酸:2mg/L ；盐酸硫胺素:0.lmg/L ；盐酸批卩多醇:0.5mg/L ；烟酸:0.5mg/L ；蔗糖:20-22g/L ；琼脂:5.0-5.2g/L ； 香蕉汁:30-35g/L ；梨汁:3-5g/L ；活性炭 0.45-0.48g/L ；溶剂为去离子水。
2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于:所述培养基由以下组分组成:KN03:1900mg/L ；NH4N03:1650mg/L ；KH2P04:170mg/L ；MgS04.7H20:370mg/L ；CaCl2.2H20:440mg/L ；KI:0.6lmg/L ；H3BO3:4.6mg/L ；MnS04.4H20:25.2mg/L ；ZnS04.7H20:7.lmg/L ；Na2Mo04.2H20:0.2 lmg/L ；CuS04.5H20:0.025mg/L ；CoCl2.6H20:0.025mg/L ；Na2.EDTA:37.25mg/L ；FeS04.7H20:27.85mg/L ；肌醇:100mg/L ；甘氨酸:2mg/L ；盐酸硫胺素:0.lmg/L ；盐酸批卩多醇:0.5mg/L ；烟酸:0.5mg/L ；鹿糖:21g/L ；琼脂:5.lg/L ；香蕉汁:32g/L ；梨汁:4g/L ；活性炭0.46g/L ；溶剂为去 离子水。
【文档编号】A01H4/00GK103704133SQ201310669090
【公开日】2014年4月9日 申请日期:2013年12月11日 优先权日:2013年12月11日
【发明者】李道强, 李培泰 申请人:柳州赛特生物科技研发中心