双孢菇高产生态栽培方法

双孢菇高产生态栽培方法
【专利摘要】本发明公开了一种双孢菇高产生态栽培方法，包括如下步骤：原料的准备；发酵；培养；前期管理；后期管理；出菇管理；采收。本发明的方法与国内同类先进技术的比较处于领先阶段，具有较强的竞争力。
【专利说明】双孢菇高产生态栽培方法
【技术领域】
[0001]本发明属于食用菌培养领域，具体而言，涉及一种双孢菇高产生态栽培方法。
【背景技术】
[0002]双孢菇是目前世界上人工栽培最广泛、产量最高、消费量最大的食用菌，约占世界食用菌总产量的37.89%。其中我国总产量占世界第二位。数据显示，2001~2011年，我国双孢菇产量占食用菌总产量的139%，年均增长率达到177%，其中2011年的总产量达到2600万吨；2001~2011年，双孢菇出口量占食用菌出口总量的40.68%，出口额占食用菌出口总额的24.46%，2011年出口创汇28.39亿美元以上。发展双孢菇产业，对于优化农村产业结构、增加农民收入和地方财政收入，改善城乡人民生活和增加出口创汇，都有重要现实意义，是广大农民致富奔小康的一条重要途径。
[0003]我国双孢菇产业在蓬勃发展的同时，也存在着一些困难因素，制约着双孢菇产业的发展。与双孢菇产业发达国家相比，我国的双孢菇优良品种较少、目前市场所使用的一些菌株表现出对温度敏感、对轮枝病侵染敏感，子实体丛生等现象，导致产、质量下降等退化表现。此外，在我国，占总产量90%以上的双孢燕由小规模农户生产,双孢燕一般生长在简易的塑料大棚或砖砌菇房内，生产绝大多数处于原始生产状态。而目前国外基本是采用全机械化模式进行。对比国外生产模式，我国双孢菇生产很大部分落后，单产不高、成本优势不明显。这在很大程度上制约了双孢菇产业竞争力的提升和农民收入的增加。
[0004]双孢菇作为典型的草腐类食用菌，其栽培离不开草类(稻草杆，麦秸、玉米杆等)栽培基质作为碳素的主要提供者，而畜禽粪便则作为其生长所需的氮素提供者。近年来，规模化、集约化、现代化的养殖场呈急剧上升势头，由于环境法规不健全和资金短缺，在建场之初往往未考虑粪便处理问题。据测定，一个饲养10万只鸡的工厂化养鸡场，每天产鸡粪可达10吨，年产鸡粪达3600多 吨。大多数畜禽养殖场对粪便没有进行处理，这样畜禽粪便的污染，对环境的危害，己经成为不可忽视的生态和环境保护的重要问题。然而，产生经济效益的同时，造成的环境污染也成为困扰养殖业持续发展的难题。
[0005]湖北省是我国农业大省，具有丰富的农作物秸杆资源，气候也适合双孢菇的生长。湖北省秸杆利用方式主要有粉碎还田、直接覆盖还田、堆怄还田、青贮饲料、生活燃料、生产沼气、就地焚烧、出售给企业等。其中秸杆还田是主要方式，而秸杆生产食用菌等秸杆的高效能利用所占的比例还比较低。目前随着人们对食品安全及生态环保意识的增强，客观上要求农业必须减少种养殖业对环境造成的污染，确保种养农产品质量安全，降低农业生产成本。这样就为发明双孢菇生态农业栽培技术提出了迫切的要求。目前，双孢菇在湖北省只有部分地区零散栽培，而且栽培的品种混乱、大部分是由外地盲目引进，由于引种前没有做引种适应性试验，所引进的菌株不一定适合湖北省栽培，给很多栽培户带来了一定的经济损失，造成栽培户栽培风险加大，经济效益下滑；此外，栽培方式多种多样，管理水平参差不齐，产品质量不标准，致使产量不稳定，如目前多采用固体菌种发菌，而固体菌种的菌丝生长较弱，制备时间长，接种后发菌慢和生产周期长，需投入大量的人力、物力和财力，栽培管理的难度大，生物学转化率低。

【发明内容】

[0006]本发明的目的是提供一种双孢菇高产生态栽培方法。为了实现本发明的目的，拟采用如下技术方案:
[0007]本发明一方面涉及1.双孢菇高产生态栽培方法，其特征在于包括如下步骤:
[0008]一、栽培季节
[0009]栽培季节是7月下旬至翌年4月；
[0010]二、栽培设施
[0011]单座塑料大棚为360~450平方米，长11~20米，宽6~8米，高4米；每床架宽1.5~1.6米，层距高0.6米，走道0.6~0.7米；大棚覆盖采用“两膜两苫”室内吊挂一层遮阳网，栽培设施要有良好的通风窗及拔气管；
[0012]三、原料的准备
[0013]取新鲜稻草、牛粪、鸡粪、晒干，贮存；
[0014]四、发酵
[0015]4.1 预湿
[0016]先把稻草或麦秸用水浇湿或大水浸泡捞出，预湿I~2天，干牛粪扎碎后同时浇水拌湿，预湿I~2天，预湿时把石灰加入料中，牛粪或鸡粪越细越好，建堆前把辅料全部拿出拌匀；
[0017]4.2 建堆
[0018]先将预湿的稻草或麦秸铺在底层20~25cm，加一层牛粪(鸡粪)，然后再铺20cm厚的稻草或麦秸，把拌匀的辅料均匀的撒上，再加一层牛粪(鸡粪)，再加稻草或麦秸加辅料，这样循环建堆，一直堆到高1.5m，宽2~3m，顶部成弓形，这样建好堆后，上面浇水直到底部有水渗出为止；
[0019]4.3 二次发酵
[0020]发酵成熟标志为颜色呈深咖啡色，腐熟均匀，无粪臭味，水分适中，富有弹性，手捏培养料能捏拢、松手后能自然伸展，PH值7.5左右，并且培养料内有较多有益微生物的白色小菌落，有浓厚的草香味，料疏松；
[0021]五、培养
[0022]将发酵好的培养料装筐，压实，每筐装料4.86kg ;将液体菌种均匀覆盖上培养料上方，接种量为2% ;待菌丝发满后覆土，在取土时，应取15~20cm以下的半活性半生的土.再用筛子筛上层白灰把土起拍碎，适至均匀地覆在料面上，厚度3cm，一般百平米用土量为3m3，土块不要过大，最大块不超过3cm也不用过筛，块面都有层薄均匀厚度在3cm，过薄则影响产量；
[0023]六、前期管理
[0024]覆土后开始喷水，3天之内使土层上下都要潮湿，原则是湿而不漏，没有白芯；喷水时要通风，诱导菌丝向土层内生长。部分菌丝开始在覆土层表面露出时，要补土压菌。喷水在早、晚进行，阴雨天不喷或少喷；
[0025]七、后期管理[0026]菌丝长到细土缝隙，线状菌丝开始变粗时，适时适量重喷“结菇水”。以土层吸足水分而又不漏料为准，连续喷2天，而后停喷水2-3天，同时增加通风，促使子实体形成。约7天后已有菇蕾长至黄豆大小，此时喷“出菇水”，少量多次，满足菇蕾生长的水分要求；
[0027]八、出菇管理
[0028]温度保持在20°C以下，应在中午气温高时通风换气，早晚及夜间关闭风口，注意保温。依天气和菇房保湿情况来决定喷水次数，使空气湿度保持85%~90%。早晚注意通风换气，保持温室内空气清新；
[0029]九、采收
[0030]菇盖直径3-5厘米左右，菇形圆整，色泽洁白，无空根白心，无虫蛀，无破损，无开伞等。采收前床面不能喷水。要轻采轻放，少翻动，确保鲜菇商品价值。
[0031]在本发明的一个优选实施方式中，建堆时米用的原料配方为:稻草47.6%,牛粪35.7%，鸡粪15.9%，饼肥1.2%，尿素0.2%,石膏1.2%，过磷酸钙1.2%，石灰1.0%。
[0032]在本发明的一个优选实施方式中，接种的菌种为液体菌种，液体种子的培养条件为温度27°C，初始pH6.5，接种量13%，装液量100mL。
[0033]本发明的方法与国内同类先进技术的比较处于领先阶段，具有较强的竞争力。
[0034]说明书附图
[0035]图1不同菌株 菌丝体生物量；
[0036]图2双孢菇不同菌株菌丝在培养料上吃料情况；
[0037]图3双孢菇不同菌株的子实体日增长量；
[0038]图4双孢菇不同菌株生育期比较；
[0039]图5双孢菇不同菌株前三潮菇的产量及生物学效率比较；
[0040]图6温度对菌丝体生物量的影响；
[0041 ] 图7初始pH值对菌丝体生物量的影响；
[0042]图8接种量对菌丝体生物量的影响；
[0043]图9装液量对菌丝体生物量的影响；
[0044]图10 二级液体种子培养条件正交试验因素指标分析；
[0045]图11不同配方培养料对菌丝生长的影响；
[0046]图12不同配方培养料对菌丝满袋时间的影响；
[0047]图13不同配方培养料对双孢菇产量的影响。
【具体实施方式】
[0048]实施例1:适于湖北省本地的双孢菇品种引进与选育
[0049]我国目前经全国食用菌品种认定委员会认定通过的主要双孢菇品种如下:
[0050](l)As4607菌种该菌种是由福建省蘑菇菌种发明推广站选育，1997年福建省蘑菇菌种审定委员会审定。该菌种播种后萌发力强，菌丝吃料速度和爬土速度中等偏快，纽结能力强，纽结发育成菇蕾或膨大为商品菇的时间较长。
[0051](2)As2796菌种该菌种是由福建省蘑菇菌种发明推广站选育，1993年通过福建省蘑燕菌种审定委员会审定。该菌种播种后萌发力强，菌丝吃料速度中等偏快。菌丝爬土速度中等偏快，纽结能力强，纽结发育成菇蕾或膨大为合格菇的时间较长，因此开采时间比一般菌株迟3天左右。
[0052](3)英秀一号该菌种是由浙江省农业科学院园艺发明所选育。该菌种发菌适温22°C~26°C，原基形成不需温差刺激，子实体生长发育温度范围4°C~23°C ;低温结实能力强。菇潮间隔期7天~10天。
[0053](4)棕秀一号该菌种是由浙江省农业科学院园艺发明所选育。该菌种子实体菌盖棕褐色、内部菌肉白色，肉质紧密，表面光洁。环境干燥时燕盖表面有鳞片产生。原基形成不需要温差刺激，菌丝生长温度范围为5°C~33°C，发菌期适宜温度为22~26°C ;子实体生长发育的温度范围为4°C~23°C，低温结实能力强。
[0054](5)蘑加I号该菌种是由华中农业大学菌种实验中心选育。该菌种子实体前期多丛生，后期多单生；菌丝半气生，菌盖洁白半球形，空气干燥时，易产生同心圆状的较规则的鳞片，菌肉白色，致密，菌柄白色近柱状，基部稍膨大，菌褶离生，少有菌环。子实体个体较大、圆整，菇形好，色白、肉质口感好；出菇期相对集中，菇潮较明显，适合工厂化栽培；抗病虫害能力较弱，易受菇蚊、蛞蝓等侵害，易发生真菌、细菌病害。
[0055](6)未经品种认定，但目前也广泛使用的双孢菇品种如下:
[0056]①浙农一号该菌种是浙江农业大学寿诚学教授从176菌株中选育出来的一个高产菌株。菌丝在斜面培养基上属于中间类型，菇型圆正，色泽洁白，菇顶圆凸，菇柄粗而短，菇型大。该菌株耐湿、喜肥、耐高温，出菇早，转潮快，适应性强，
[0057]②浙农2号该菌种系国内首次采用辐射育种手段选育成的适合罐藏的气生型蘑菇优良菌种，其母种菌丝体生长旺盛，气生趋势强，子实体外型圆整，洁白，致密，含水量低，不需开伞，菇盖厚，菇柄粗壮，播种后，菌丝吃料能力较强。
[0058]③176菌株该菌种是香港中文大学张树庭教授1979年应轻工部邀请来华技术讲座时赠送我国的，统一编号为“S`-176”。该菌种出菇早、耐高温，但质量较差，制罐后色泽灰淡，不宜做蘑菇罐头，所以只局限在盐水蘑菇生产地区推广。与其他菌株比较，有较强的抗病和抗杂菌感染能力。
[0059]④苏锡I号该菌种是无锡轻工业学院章克昌同志从英国引进，分离而得的一个蘑菇新菌株。苏锡一号与气生型蘑菇外型上无差别。菇盖圆正，色白，柄粗短，肉质奶白色，菌褶浅棕色。出菇早，转潮快，耐肥、耐湿，具高产性能。当水分不能满足要求时，菌盖会产生鱗片。
[0060]⑤111菌株该菌种是法国somyeel公司育成,高产菌株,单产与176菌株接近，由上农科院食用菌发明所自波兰引进，菇盖圆正，柄粗短，顶略平，菌褶浅棕色，菇体组织较疏松，适于盐溃工与鲜食。
[0061]⑥102-1菌株该菌种母种菌丝系气生型，出菇早、快，大小匀称。品质好，转潮快，产量高，抗病力强，鲜销制罐均可，系湖南省栽培的当家品种之一。
[0062]⑦101-1菌株该菌种是从102-1中选育出来的。菌株耐肥、耐湿，出菇时用水要足，否则将严重影响产量。耐高温和低温，耐高温的能力较其他菌株强，抗病能力强，无锈斑燕，品质较佳。
[0063]⑧川农蘑菇I号该菌种是四川农业大学以浙农I号和Ag56为亲株，利用不育同核体交选育而成。子实体洁白、圆整，光滑，紧实，菌柄中生，短且粗壮。四川各地只能满足该菌株生长发育条件的场所都可种植。[0064]⑨玉林I号、玉林2号该菌种为半气生型菌株，系广西玉林地区农业科学发明所选育。主要特点是菌丝吃料块，爬土能力强，单生菇多，前、中、后各期出菇均匀，抗逆性强，较耐高温，在21~22°C条件下子实体仍不易开伞。菌褶肉色，质量好，符合制罐标准，是广西玉林地区推广的优良菌株
[0065]引进筛选品种与湖北主栽品种生物学特性比较
[0066]本实施例通过对国内优良品种在引进地的调查，认为江苏17号、As2796、英秀一号、蘑加I号、浙农2号等5个品种可适应湖北省的栽培条件，并且目前湖北省内的主栽品种是As2796,所以选择江苏17号、英秀一号、蘑加I号、浙农2号为引进筛选品种,与As2796对比，开展不同菌株生物学特性比较实验，从中筛选出适宜于湖北省栽培条件的优良菌株。
[0067]1材料与方法
[0068]1.1材料与设备
[0069]1.1.1供试菌株
[0070]江苏17号引自江苏省农业科学院蔬菜发明所；
[0071]英秀一号引自浙江省农科院园艺发明所；
[0072]蘑加I号引自华中农业大学菌种实验中心；
[0073]浙农2号引自浙江农业大学食用菌发明所；；
[0074]As2796引自湖南农业大学食用菌发明所。
[0075]1.1.2 培养基
[0076](I)母种培养基配方PDA培养基:马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g、水1000mL,pH自然；
[0077](2)原种培养基配方麦粒98%,石骨1.5%,碳酸钙0.5%,含水量50~55%,pH(灭菌后)6.5~7.0 ;
[0078](3)培养料配方(％)稻草47.6，牛粪47.6，饼肥1.2，尿素0.2，石膏1.2，过磷酸钙1.2，石灰1.0 (需进行二次发酵)。
[0079]1.1.3主要设备
[0080]LRH-70生化培养箱(苏州江东精密仪器有限公司);
[0081]GT7C卧式灭菌锅(温州市盛田机械有限公司);
[0082]NRY-200培养摇床(福州精科仪器仪表有限公司)；
[0083]食用菌无菌接种箱(苏州奇乐电子科技有限公司)。
[0084]1.2试验方法
[0085]1.2.1不同菌株菌丝生长测定
[0086]将供试菌株接种于斜面培养基上，当斜面菌丝表现出良好的生长势时，每天观察菌丝密度、菌丝颜色、气生菌丝量、萌发时间、满管时间。每株菌株接15支试管，不同菌株的菌丝生长指标的观测均为15支试管中的平均值。
[0087]菌丝生长速度测定采用PDA培养基，为了提高准确性，利用打孔器在无菌操作下打孔，再将菌种接种在直径d=6cm的小培养皿中，置于24°C的恒温培养箱中培养，培养两天后开始测定。试验中每个样品设3次重复，每次测定重复3次，最终求平均值。
[0088]1.2.2不同菌株菌丝体生物量比较
[0089]每瓶接入约0.5cm2的斜面菌种2块于一级摇瓶(250mL三角瓶装液量IOOmL中，120r / min、26°C培养IOd后，分别定量取IOmL菌种转接于二级摇瓶(250mL三角瓶装液量90mL)中，120r / min、24°C培养7d。将发酵液离心(3000r / min) 20min，所得沉淀即菌丝体置于预先烘干并称重的滤纸上过滤，并用蒸馏水洗涤数次，然后置干燥箱中60°C烘干，称至恒重,计算菌丝体平均干重。每个处理重复3次。
[0090]1.2.3不同菌株生育期比较
[0091]将稻草预处理后按培养料配方配制，培养料经二次发酵处理后，倒入高20cm，长40cm,宽40cm的塑料筐中，每筐装量折合干料约4.86kg，每个菌株30筐，24°C恒温培养，待菌丝长至2 / 3时覆土，土层厚约4cm。覆土后，要经常喷水保持土面湿润，并保持空气相对湿度80~90%，温度控制在20°C左右，每天注意观察菌丝生长情况，并进行记录。待土缝中见到菌丝，土层中菌丝开始纽结成绒毛状、球状大小的白点时重喷结菇水，并加大通气。出现菇蕾后，温度控制在15~18°C，空气相对湿度90%左右，每天开窗通风约30min，见菇蕾长到黄豆大小时喷出菇水，总水量为5kg / m2左右，分2天喷水。观察各菌株在培养料上的长势，待菌丝封面即可覆土，并记录不同菌株由播种到菌丝封面覆土时间、原基形成期及子实体采收期所需时间，菌丝在培养料中的生长时间与相对吃料深度，及在整个采收期内子实体的累积产量，不同菌株的观测均为30个筐中的平均值。
[0092]1.2.4不同菌株子实体生物学性状观测
[0093]原基形成后计数原基数量；子实体七八分成熟时，观测不同菌株的生物学性状，包括菌盖颜色、菌盖直径、菌柄长度、菌柄直径、单个子实体重、子实体韧性及产量。不同菌株的观测均为30个筐中的平均值。
[0094]1.2.5不同菌株产量及生物学效率
[0095]生物学效率则按常规方法计算，记录30个筐的料重，产菇量，计算生物学效率的平均值。
[0096]生物学效率=子实体的鲜重/培养料的干重X 100%
[0097]1.2.6不同菌株子实体主要营养成分分析
[0098]分别测定粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、总糖、粗灰分。粗蛋白的测定采用微量凯氏定氮法；粗脂肪的测定采用索氏提取法；粗纤维的测定采用采用王玉万等食用木腐菌生理生化发明方法；总糖的测定采用3，5 —二硝基水杨酸法；粗灰分的测定采用干灰化法。
[0099]2结果与分析
[0100]2.1不同菌株菌丝生长情况
[0101]不同菌株在斜面培养基上菌丝的生长情况见表1。由表1可知，在同种斜面培养基上，不同菌株的菌丝生长速度和密度有一定差异。就菌丝颜色、菌丝密度方面来说，As2796与蘑加I号则表现较为优越；但浙农2号菌株从菌丝萌发时间、生长速度等方面来看则优于其它品种，菌丝呈白色。
[0102]表1不同菌株在培养基上菌丝的生长情况
[0103]
【权利要求】
1.双孢菇高产生态栽培方法，其特征在于包括如下步骤: 一、栽培季节 栽培季节是I月下旬至翌年4月； 二、栽培设施 单座塑料大棚为360~450平方米，长11~20米，宽6~8米，高4米；每床架宽1.5~·1.6米，层距高0.6米，走道0.6~0.7米；大棚覆盖采用“两膜两苫”室内吊挂一层遮阳网，栽培设施要有良好的通风窗及拔气管； 三、原料的准备 取新鲜稻草、牛粪、鸡粪、晒干，贮存； 四、发酵 ·4.1预湿 先把稻草或麦秸用水浇湿或大水浸泡捞出，预湿I~2天，干牛粪扎碎后同时浇水拌湿，预湿I~2天，预湿时把石灰加入料中，牛粪或鸡粪越细越好，建堆前把辅料全部拿出拌匀； ·4.2建堆 先将预湿的稻草或麦秸铺在底层20~25cm，加一层牛粪(鸡粪)，然后再铺20cm厚的稻草或麦秸，把拌匀的辅料均·匀的撒上，再加一层牛粪(鸡粪)，再加稻草或麦秸加辅料，这样循环建堆，一直堆到高1.5m，宽2~3m，顶部成弓形，这样建好堆后，上面浇水直到底部有水渗出为止； ·4.3 二次发酵 发酵成熟标志为颜色呈深咖啡色，腐熟均匀，无粪臭味，水分适中，富有弹性，手捏培养料能捏拢、松手后能自然伸展，PH值7.5左右，并且培养料内有较多有益微生物的白色小菌落，有浓厚的草香味，料疏松； 五、培养 将发酵好的培养料装筐，压实，每筐装料4.86kg ;将液体菌种均匀覆盖上培养料上方，接种量为2%;待菌丝发满后覆土，在取土时，应取15~20cm以下的半活性半生的土.再用筛子筛上层白灰把土起拍碎，适至均匀地覆在料面上，厚度3cm，一般百平米用土量为3m3，土块不要过大，最大块不超过3cm也不用过筛，块面都有层薄均匀厚度在3cm，过薄则影响产量； 六、前期管理 覆土后开始喷水，3天之内使土层上下都要潮湿，原则是湿而不漏，没有白芯；喷水时要通风，诱导菌丝向土层内生长；部分菌丝开始在覆土层表面露出时，要补土压菌；喷水在早、晚进行，阴雨天不喷或少喷； 七、后期管理 菌丝长到细土缝隙，线状菌丝开始变粗时，适时适量重喷“结菇水”；以土层吸足水分而又不漏料为准，连续喷2天，而后停喷水2-3天，同时增加通风，促使子实体形成；约7天后已有菇蕾长至黄豆大小，此时喷“出菇水”，少量多次，满足菇蕾生长的水分要求； 八、出燕管理 温度保持在20°C以下，应在中午气温高时通风换气，早晚及夜间关闭风口，注意保温；依天气和菇房保湿情况来决定喷水次数，使空气湿度保持85 %~90 早晚注意通风换气，保持温室内空气清新； 九、米收 菇盖直径3-5厘米左右，菇形圆整，色泽洁白，无空根白心，无虫蛀，无破损，无开伞；采收前床面不能喷水；要轻采轻放，少翻动，确保鲜菇商品价值。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于建堆时采用的原料配方为:稻草47.6%，牛粪35.7%，鸡粪15.9%，饼肥1.2%，尿素0.2%，石膏1.2%，过磷酸钙1.2%，石灰1.0%。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于接种的菌种为液体菌种，液体种子的培养条件为温度27°C，初始pH6.5，接种量13%，装液量100mL。
4.根据权利要求1所述的方法`，其特征在于所述的双孢菇的菌种为浙农2号。
【文档编号】A01G1/04GK103843585SQ201410095201
【公开日】2014年6月11日 申请日期:2014年3月17日 优先权日:2014年3月17日
【发明者】周桃英, 王梓林, 陈全胜, 杨辉德 申请人:周桃英