一种小菜蛾室内繁殖方法
【专利摘要】本发明涉及一种小菜蛾室内繁殖方法，该具体繁殖过程为：步骤a，育前准备：培育油菜苗；制作鲜寄主植物汁匀浆液；制作小菜蛾产卵卡；制作小菜蛾羽化产卵瓶；步骤b，饲育条件：在人工气候箱中饲养，温度25±1℃，相对湿度60％～70％，光照周期为光照∶黑暗＝14h∶10h；步骤c，小菜蛾规模化繁殖：小菜蛾卵孵化和幼虫的饲养；小菜蛾成虫羽化；小菜蛾卵收集。本方法直接在油菜苗上孵化、饲育，所繁殖的小菜蛾幼虫成活率高、生长健壮、发育整齐。
【专利说明】一种小菜蛾室内繁殖方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及生物培育领域，尤其涉及一种小菜蛾室内繁殖方法。
【背景技术】
[0002]小菜蛾又名菜蛾，俗名二头尖、吊丝虫等，属鳞翅目菜蛾科，是世界性十字花科蔬菜的重要害虫之一。据报道，全世界每年用于防治小菜蛾的费用高达10亿美元，仅美国每年就耗资I亿美元。
[0003]小菜蛾由于具有世代周期短，抗药性发展快，抗逆能力强且世代重叠等特点，给防治工作带来很大困难，目前农药防治仍然是小菜蛾防控的主要手段。为了筛选高效、低毒防治小菜蛾的新药剂或新剂型，需要有大量发育整齐、虫龄一致的虫源，因此小菜蛾人工饲养成为农药毒力测定的关键，同时也是小菜蛾生理学、病理学等研究的基础。
[0004]小菜蛾的室内人工饲养常规方法是让成虫在培植好的菜苗上或菜叶上产卵，虽然符合昆虫的产卵天性，但卵的收集和卵量计数困难，且不易消毒和冷藏，同时每天更换菜苗时成虫逃逸现象比较严重。
[0005]鉴于上述缺陷，本发明创作者经过长时间的研究和实践终于获得了本创作。
【发明内容】
[0006]本发明的目的在于提供一种小菜蛾室内繁殖方法，用以克服上述技术缺陷。
[0007]为实现上述目的，本发明提供一种小菜蛾室内繁殖方法，该具体繁殖过程为:
[0008]步骤a，育前准备:
[0009]步骤al，培育材料器械准备:
[0010]将所需器械清洁，消毒、灭菌，去除其它非目标昆虫；
[0011]步骤a2，培育油菜苗:
[0012]在白瓷盘中放入蛭石，蛭石厚度不超过瓷盘高度的2/3，干燥箱中140°C烘2h，冷却后，用喷壶淋水至饱和；同时油菜籽先用自来水浸泡3h，再用96.8%多菌灵1000液浸泡Ih,随后用清水冲洗,晾干后播种,每盘播种量约为8~IOg ;
[0013]步骤a3，制作鲜寄主植物汁匀浆液；
[0014]步骤a4，制作小菜蛾产卵卡:
[0015]产卵卡由吹塑纸制作完成，用油菜汁液浸泡；
[0016]步骤a5，制作羽化产卵瓶:
[0017]产卵瓶为玻璃罐头瓶，瓶内底部正中用双面胶带粘一青霉素小瓶，插入脱脂棉条，用来接纳蜂蜜水；
[0018]步骤b，饲育条件:
[0019]在人工气候箱中饲养，温度25±1°C，相对湿度60%~70%，光照周期为光照:黑Hf = 14h: IOh。
[0020]步骤C，小菜蛾规模化繁殖:[0021]步骤Cl，保持人工气候箱及产卵瓶洁净，无其他非目标昆虫；
[0022]步骤C2，小菜蛾卵孵化和幼虫的饲养:
[0023]根据繁殖或试验的数量要求，将一定量的卵卡消毒后(75%酒精)直接放在长势良好的油菜苗上，卵孵化后幼虫便在菜叶上取食，发育；幼虫孵化后发育至2~3龄，供试验用；用于繁殖的幼虫生长发育进入4龄时，将其从菜苗上抖落收集到玻璃缸中，用温室培育的无农药新鲜油菜叶片饲喂，待化蛹后，收集蛹，放入底部垫有湿润滤纸的培养皿中4~5 °C冰箱冷藏保存备用；
[0024]步骤c3，小菜蛾成虫羽化:
[0025]取发育良好的小菜蛾蛹，放入直径95mm、高IOOmm自制的羽化产卵瓶中羽化，每瓶约80~100头，待成虫羽化后，每天供给含蜂蜜重量百分比10%的蜂蜜水为成虫补充营养;
[0026]步骤c4，小菜蛾卵收集:
[0027]在上述条件下，小菜蛾4d后开始羽化、交尾、产卵，随后每天收集更换产卵卡，并滴加10%蜂蜜水。
[0028]进一步，在上述步骤a2中，播种后放入人工气候箱，出苗后视基质水分情况不定期喷淋植物营养液，待油菜苗生长至约60mm高，两片子叶完全展开时，可用于小菜蛾幼虫的饲育。
[0029] 进一步，在上述步骤a3中，选取无病、未喷过农药的油菜叶片60g，剪成小块放入搅拌机，加500ml水，搅拌后用纱布过滤，收集油菜叶汁液装入100mL三角瓶内，在120°C下高压灭菌30min，冷却后放入冰箱备用。
[0030]进一步，在上述步骤a4中，将绿色吹塑纸板裁成1.8 X 8cm的长条，用双面胶直立粘在0.8X2.2cm的小条中间，小条两边的双面胶带用纸粘上。使用小菜蛾产卵卡前将已灭菌的油菜汁液倒入烧杯中，卵卡放入其中浸泡Ih，取出晾干备用。
[0031]进一步，在上述步骤a5中，9cm滤纸中间剪一与青霉素小瓶直径相同的孔，穿过小瓶，垫在瓶底部，用来吸收成虫产生的粪便和多余的水分；将一定数量的蛹放进产卵瓶，随后用橡皮筋将一张直径为12cm滤纸固定在产卵瓶瓶口，滤纸正中有一个两边裁开、用时可翻起、边长为1.2cm的等边三角形孔，用以补加蜂蜜水用；距三角孔两侧1.5cm处各裁一个宽0.5cm、长2cm长方形的插卵卡孔；使用时在此有孔滤纸上再加盖一张同一型号滤纸，用橡皮筋扎紧瓶口。
[0032]进一步，在上述步骤c2中，收集到的蛹，可直接放到产卵瓶中羽化，也可放入底部垫有湿润滤纸的培养皿中4~5°C冰箱冷藏保存备用；在冷藏过程中，每隔5d往滤纸上滴加适量蒸馏水，保持冷藏环境湿润。
[0033]进一步，在上述步骤c4中，收集到的卵卡可直接放到油菜苗上孵化，也可放入底部垫有湿润滤纸的培养皿中，4~5°C冰箱冷藏保存备用；在冷藏过程中，每隔5d往滤纸上滴加适量蒸馏水，保持冷藏环境湿润。
[0034]与现有技术相比本发明的有益效果在于，
[0035](I)小油菜苗是小菜蛾室内大量繁殖的理想材料。它具有发芽快，出苗整齐，苗持续时间长的特点。本方法直接在油菜苗上孵化、饲育，小菜蛾各虫态发育良好，产卵量、孵化率和化蛹率高，雌雄性比接近自然种群，且繁育的幼虫虫体健壮，历期整齐，特别适宜于规模化和标准化室内扩繁小菜蛾。
[0036](2)本研究设计的羽化产卵瓶，在瓶口留有缝隙和小孔，并在瓶内固定有接纳蜂蜜水的棉条，便于每天更换卵卡和给成虫补充营养，同时也杜绝了成虫逃逸现象的发生，操作简单，实用性强。
[0037](3)产卵卡由吹塑纸制作完成，用油菜汁液浸泡后增加了其产卵诱集效果。更换下来的卵卡，按试验数量要求，可在体视镜下检查记录卵的数量后直接放到小油菜苗上孵化饲养，也可放在冰箱冷藏室中贮存备用。
[0038](4)本方法在幼虫进入4龄后，将其从菜苗上抖落到养虫缸中，用新鲜无毒油菜叶片饲养至化蛹，大大简化了收蛹操作难度。收集到的蛹可直接放到产卵瓶中羽化产卵，也可在冰箱冷减室中备待用。
[0039](5)本方法采用低温冷藏方式调控小菜蛾的发育进度。卵和蛹在低温4~5°C条件下可冷藏15d。在冷藏过程中，每隔5d往滤纸上滴加适量蒸馏水，保持冷藏环境湿润。
[0040](6)采用本发明的方法繁殖小菜蛾近5年，没有发现种群退化现象。
[0041]本发明能满足对小菜蛾时间和数量的要求，以及对小菜蛾发育整齐和健康等质量要求。
【具体实施方式】
[0042]以下，对 本发明上述的和另外的技术特征和优点作更详细的说明。
[0043]本发明小菜蛾室内繁殖方法的具体过程为:
[0044]步骤a，育前准备:
[0045]步骤al，培育材料器械准备:
[0046]本发明使用的材料器械包括蛭石、油菜种子、营养液、人工气候箱、果蔬粉碎机、毛笔、镊子、三角瓶、橡胶乳头滴管、白磁盘、羽化产卵瓶、卵卡；将上述器械清洁，消毒、灭菌，去除其它非目标昆虫。
[0047]步骤a2，培育油菜苗:
[0048]在白瓷盘中放入蛭石，蛭石厚度不超过瓷盘高度2/3，干燥箱中140°C烘2h，冷却后，用喷壶淋水至饱和；同时油菜籽先用自来水浸泡3h，再用96.8%多菌灵1000倍液浸泡Ih,随后用清水冲洗,晾干后播种,每盘播种量约为8~10g。
[0049]播种后放入人工气候箱，出苗后视基质干湿情况不定期喷淋植物营养液，待油菜苗生长至约60mm高，两片子叶完全展开时，可用于小菜蛾幼虫的饲育。
[0050]步骤a3，制作鲜寄主植物汁匀浆液:
[0051]选取无病、未喷过农药的油菜叶片60g，剪成小块放入搅拌机，加500ml水，搅拌后用纱布过滤，收集油菜叶汁液装入100mL三角瓶内，放入高压灭菌锅在120°C，加温30min，冷却后放入冰箱备用。
[0052]步骤a4，制作小菜蛾产卵卡:
[0053]将绿色吹塑纸板裁成1.8 X 8cm的长条，直立粘在0.8X2.2cm方形的双面胶小条中间，小条两边的双面胶带用纸粘上，以免与其他物品粘连；使用前将已灭菌的油菜汁液倒入烧杯中，卵卡放入其中浸泡lh，取出晾干备用。
[0054]步骤a5，制作羽化产卵瓶:[0055]产卵瓶为玻璃罐头瓶，瓶内底部正中用双面胶带粘一青霉素小瓶，瓶内插一脱脂棉条；9cm滤纸中间剪一与青霉素小瓶直径相同的孔，穿过小瓶，垫在瓶底部；将一定数量的蛹放进产卵瓶，随后用橡皮筋将一张直径为12cm滤纸固定在产卵瓶瓶口，滤纸正中有一个两边裁开、用时可翻起、边长为1.2cm的等边三角形孔，用以补加蜂蜜水用；距三角孔两侧1.5cm处各裁一个宽0.5 X长2cm长方形的插卵卡孔；使用时在此有孔滤纸上再加盖一张滤纸，用橡皮筋扎紧瓶口。
[0056]步骤b，饲育条件:
[0057]在人工气候箱中饲养，温度25±1°C，相对湿度60%~70%，光照周期为光照:黑Hf = 14h: IOh。
[0058]步骤C，小菜蛾规模化繁殖:
[0059]步骤Cl，保持人工气候箱及产卵瓶洁净、无其他非目标昆虫；
[0060]步骤c2，小菜蛾卵孵化和幼虫的饲养:
[0061]根据繁殖或试验的数量要求，将一定量的卵卡消毒后(75%酒精)直接放在长势良好的油菜苗上，卵孵化后幼虫便在菜叶上取食，发育；
[0062]幼虫孵化后发育至2~3龄，供试验用；用于繁殖的幼虫生长发育进入4龄时，将其从菜苗上抖落收集到玻璃缸中，加新鲜油菜叶饲养，待化蛹后，收集蛹，放入底部垫有湿润滤纸的培养皿中，4~5°C冰箱冷藏保存备用；蛹4~5°C冷藏保存15d对羽化、产卵无影响。在冷藏过程中，每隔5d往滤纸上滴加适量蒸馏水，保持冷藏环境湿润。
[0063]步骤c3，小菜蛾成虫羽化:
[0064]取发育良好的小菜蛾蛹，放入直径95mm、高IOOmm自制的羽化产卵瓶中羽化，每瓶约80~100头，并将其置于光照培养箱中培养。待成虫羽化后，每天供给含蜂蜜重量百分比10%的蜂蜜水为成虫补充营养。
[0065]步骤c4，小菜蛾卵收集:
[0066]在上述条件下，4d后小菜蛾开始羽化、交尾、产卵，随后每天收集更换产卵卡，并滴加10%蜂蜜水，便于成虫补充营养。
[0067]更换下来的卵卡可直接放到油菜苗上孵化，也可放入底部垫有湿润滤纸的培养皿中，4~5°C冰箱冷藏保存备用；卵4~5°C冷藏15d对孵化无影响。在冷藏过程中，每隔5d往滤纸上滴加 适量蒸馏水，保持冷藏环境湿润。
[0068]以上所述仅为本发明的较佳实施例，对发明而言仅仅是说明性的，而非限制性的。本专业技术人员理解，在发明权利要求所限定的精神和范围内可对其进行许多改变，修改，甚至等效，但都将落入本发明的保护范围内。
【权利要求】
1.一种小菜蛾室内繁殖方法，其特征在于，该具体繁殖过程为: 步骤a，育前准备: 步骤al，培育材料器械准备: 将所需器械清洁，消毒、灭菌，去除其它非目标昆虫； 步骤a2，培育油菜苗: 在白瓷盘中放入蛭石，蛭石厚度不超过瓷盘高度的2/3，干燥箱中140°C烘2h，冷却后，用喷壶淋水至饱和；同时油菜籽先用自来水浸泡3h，再用96.8%多菌灵1000倍液浸泡lh，随后用清水冲洗,晾干后播种,每盘播种量约为8~IOg ; 步骤a3，制作鲜寄主植物汁匀浆液； 步骤a4，制作小菜蛾产卵卡: 产卵卡由吹塑纸制作完成，用油菜汁液浸泡备用； 步骤a5，制作羽化产卵瓶: 产卵瓶为玻璃罐头瓶，瓶内底部正中用双面胶带粘一青霉素小瓶，插入脱脂棉条，用来接纳蜂蜜水； 步骤b，饲育条件: 在人工气候箱中饲养，温度25±1°C，相对湿度60%~70%，光照周期为光照:黑暗=.14h: 10h ； 步骤c，小菜蛾规模化繁殖: 步骤Cl，保持人工气候箱及产卵瓶洁净，无其他非目标昆虫； 步骤c2，小菜蛾卵孵化和幼虫的饲养: 根据繁殖或试验的数量要求，将一定量的卵卡消毒后直接放在长势良好的油菜苗上，卵孵化后幼虫便在菜叶上取食，发育；幼虫孵化后发育至2~3龄，供试验用；用于繁殖的幼虫生长发育进入4龄时，将其从菜苗上抖落收集到玻璃缸中，用温室培育的无农药新鲜油菜叶片饲喂，待化蛹后，收集蛹，放入底部垫有湿润滤纸的培养皿中，4~5°C冰箱冷藏保存备用； 步骤c3，小菜蛾成虫羽化: 取发育良好的小菜蛾蛹，放入直径95mm、高IOOmm自制的羽化产卵瓶中羽化，每瓶约.80~100头，待成虫羽化后，每天供给含蜂蜜重量百分比10%的蜂蜜水为成虫补充营养；步骤c4，小菜蛾卵收集: 在上述条件下，小菜蛾约4d后开始羽化、交尾、产卵，随后每天收集更换产卵卡，并滴加10%蜂蜜水。
2.根据权利要求1所述的小菜蛾室内繁殖方法，其特征在于，在上述步骤a2中，播种后放入人工气候箱，出苗后视基质水分情况不定期喷淋植物营养液，待油菜苗生长至约60mm高，两片子叶完全展开时，可用于小菜蛾幼虫的饲育。
3.根据权利要求2所述的小菜蛾室内繁殖方法，其特征在于，在上述步骤a3中，选取无病、未喷过农药的油菜叶片60g，剪成小块放入搅拌机，加500ml水，搅拌后用纱布过滤，收集油菜叶汁液装入100mL三角瓶内，在120°C下高压灭菌30min，冷却后放入冰箱备用。
4.根据权利要求1或2所述的小菜蛾室内繁殖方法，其特征在于，在上述步骤a4中，产卵卡由吹塑纸做成，将绿色吹塑纸板裁成1.8X8cm的长条，用双面胶直立粘在0.8X2.2cm的小条中间，小条两边的双面胶带用纸粘上；使用小菜蛾产卵卡前将已灭菌的油菜汁液倒入烧杯中，卵卡放入其中浸泡lh，取出晾干备用。
5.根据权利要求1或2所述的小菜蛾室内繁殖方法，其特征在于，在上述步骤a5中，9cm滤纸中间剪一与青霉素小瓶直径相同的孔，穿过小瓶，垫在瓶底部，用来吸收成虫产生的粪便和多余的水分；将一定数量的蛹放进产卵瓶，随后用橡皮筋将一张直径为12cm滤纸固定在产卵瓶瓶口，滤纸正中有一个两边裁开、用时可翻起、边长为1.2cm的等边三角形孔，用以补加蜂蜜水用；距三角孔两侧1.5cm处各裁一个宽0.5cm、长2cm长方形的插卵卡孔；使用时在此有孔滤纸上再加盖一张同一型号滤纸，用橡皮筋扎紧瓶口。
6.根据权利要求1或 2所述的小菜蛾室内繁殖方法，其特征在于，在上述步骤c2中，收集到的蛹，可直接放到产卵瓶中羽化，也可放入底部垫有湿润滤纸的培养皿中4~5°C冰箱冷藏保存备用；在冷藏过程中，每隔5d往滤纸上滴加适量蒸馏水，保持冷藏环境湿润。
7.根据权利要求1或2所述的小菜蛾室内繁殖方法，其特征在于，在上述步骤c4中，收集到的卵卡可直接放到油菜苗上孵化，也可放入底部垫有湿润滤纸的培养皿中4~5°C冰箱冷藏保存备用；在冷藏过程中，每隔5d往滤纸上滴加适量蒸馏水，保持冷藏环境湿润。
【文档编号】A01K67/033GK103960201SQ201410195491
【公开日】2014年8月6日 申请日期:2014年5月12日 优先权日:2014年5月12日
【发明者】朱九生, 王静 申请人:山西省农业科学院农产品质量安全与检测研究所