本发明属于农药应用技术领域，涉及一种农药组合物，具体的说是一种含异噻菌胺和精呋霜灵的组合物，应用于防治植物病虫害。
背景技术：
在农业生产过程中，植物病虫害发生严重，危害植物根、茎、叶等部位，以及果实、种子、块茎等繁殖器官，使作物产量锐减，品质下降严重。病虫害发生严重时，导致作物绝收。因此，植物病虫害在生产实际上具有重要的防治意义，杀菌剂或杀虫剂是防治植物病虫害最为经济、快捷而有效的方法。
并且，在实际生产中，植物病虫害往往同时发生，如种传、土传病害和地下害虫，叶面病害和叶部害虫等常常同时发生，单一使用杀菌剂或杀虫剂，并不能很好地解决生产实际中的植物病虫害危害问题。将杀菌剂和杀虫剂混配，可弥补这种不足，两者优势互补，可扩大防治谱，综合有效控制病虫害危害，在生产实践中成为深受欢迎的应用形式。尤其是具有协同作用的杀菌剂和杀虫剂，各有效组分间相互作用，使组合效果优于单独使用效果的理论总和，因而在实际使用时可起到事半功倍的效果，更受使用者青睐。
异噻菌胺(isotianil)属诱导植物抗病性药剂，通过诱导植物产生抗病性反应，抵御病原菌侵染。主要用于防治水稻稻瘟病和水稻白叶枯病，也可防治小麦白粉病、黄瓜炭疽病、黄瓜细菌性角斑病等病害。结构式如下：
精呋霜灵(furalaxyl-m)是呋霜灵(furalaxyl)的高效异构体，对多种作物上由腐霉、疫霉、霜霉病菌引起的卵菌病害表现出良好防效。cas登录号为57764–08–6。
精甲霜灵(metalaxyl-m)、咯菌腈(fludioxonil)、咪鲜胺(prochloraz)、噁霉灵(hymexazol)、硅噻菌胺(silthiofam)、种菌唑(ipconazole)、灭菌唑(triticonazole)、三唑醇(triadimenol)、烯唑醇(diniconazole)、高效烯唑醇(diniconazole-m)、氟菌唑(triflumizole)、叶菌唑(metconazole)、腈菌唑(myclobutanil)、硅氟唑(simeconazole)、四氟醚唑(tetraconazole)、苯醚甲环唑(difenoconazole)、丙硫菌唑(prothioconazole)、稻瘟酯(pefurazoate)、咪唑菌酮(fenamidone)、异菌脲(iprodione)、氟嘧菌酯(fluoxastrobin)、吡唑醚菌酯(pyraclostrobin)、嘧菌酯(azoxystrobin)、肟菌酯(trifloxystrobin)是多种广谱性杀菌剂，呋虫胺(dinotefuran)、吡虫啉(imidacloprid)、啶虫脒(acetamiprid)、噻虫嗪(thiamethoxam)、烯啶虫胺(nitenpyram)、噻虫胺(clothianidin)、螺虫乙酯(spirotetramat)、毒死蜱(chlorpyrifos)、丁硫克百威(carbosulfan)、乙虫腈(ethiprole)、三氟苯嘧啶(triflumezopyrim)是多种广谱性杀虫剂。上述药剂对多种病害或虫害表现出优良防效。
本发明经过大量的配方筛选试验研究发现，当异噻菌胺和精呋霜灵的组合物与精甲霜灵、咯菌腈、咪鲜胺、噁霉灵、硅噻菌胺、种菌唑、灭菌唑、三唑醇、烯唑醇、高效烯唑醇、氟菌唑、叶菌唑、腈菌唑、硅氟唑、四氟醚唑、苯醚甲环唑、丙硫菌唑、稻瘟酯、咪唑菌酮、异菌脲、氟嘧菌酯、吡唑醚菌酯、嘧菌酯、肟菌酯、呋虫胺、吡虫啉、啶虫脒、噻虫嗪、烯啶虫胺、噻虫胺、螺虫乙酯、毒死蜱、丁硫克百威、乙虫腈、三氟苯嘧啶中的一种或一种以上药剂任意组合时，显示出令人惊讶的杀虫杀菌效果，即表现出良好的协同作用，实际效果明显优于单独使用的理论总和，在生产上具有非常广泛的应用前景。
技术实现要素：
本发明涉及协同组合物，包括活性成分a和b，所述的活性成分a为异噻菌胺(isotianil)和精呋霜灵(furalaxyl-m)，所述的活性成分b为精甲霜灵、咯菌腈、咪鲜胺、噁霉灵、硅噻菌胺、种菌唑、灭菌唑、三唑醇、烯唑醇、高效烯唑醇、氟菌唑、叶菌唑、腈菌唑、硅氟唑、四氟醚唑、苯醚甲环唑、丙硫菌唑、稻瘟酯、咪唑菌酮、异菌脲、氟嘧菌酯、吡唑醚菌酯、嘧菌酯、肟菌酯、呋虫胺、吡虫啉、啶虫脒、噻虫嗪、烯啶虫胺、噻虫胺、螺虫乙酯、毒死蜱、丁硫克百威、乙虫腈、三氟苯嘧啶中的一种或一种以上组合。此外，还包括农药制剂加工中可以使用的助剂。
所述组合物可以特别良好的效果用于防治各种有用作物中的植物病虫害，所述有用作物包括但不限于常规育种作物、转基因作物、无性繁殖作物及无性繁殖材料、驯化栽培的野生植物等，特别适用于防治水稻、小麦、草莓、白菜、马铃薯、玉米、大麦、棉花、花生、蔬菜、果树等作物上的多种病虫害，如种传、土传病害、地下害虫、叶部病害及害虫等。
可提及的具体实例为一些可用本发明的组合物防治的代表性植物病虫害，所述实例并不限于特定属种。需要说明的是本发明并不局限于以下具体实例，还可以以相同方式延伸到其它植物病虫害，括号注明其病原拉丁文学名：
水稻稻瘟病(magnaporthegrisea)、水稻白叶枯病(xanthomonasoryzae)、水稻胡麻叶斑病(bipolarisoryzae)、水稻细菌性谷枯病(burkholderigluma)、水稻细菌性立枯病(pseudomonasplantarii)、小麦白粉病(blumeriagraminis)、黄瓜炭疽病(colletotrichumorbiculare)、黄瓜细菌性角斑病(pseudomonassyringaepv.lachlymans)、葫芦科蔬菜(黄瓜、西葫芦、南瓜)白粉病(sphaerothecafuliginea)、草莓白粉病(sphaerothecaaphanis)、苹果白粉病(podosphaeraleucotricha)、葡萄白粉病(erysiphenecator)、草莓炭疽病(glomerellacingulata)、辣椒炭疽病(colletotrichumgloeosporioides)、柑橘炭疽病(colletotrichumglecosporioides)、葡萄炭疽病(glomerellacingulata)、香蕉炭疽病(colletotrichummusae)、白菜黑斑病(alternariabrassicae)、番茄、辣椒和马铃薯早疫病(alternariasolani)、苹果斑点落叶病(alternariamali)、葡萄霜霉病(plasmoparaviticola)、观赏植物霜霉病(peronosporasparsa)、黄瓜霜霉病(pseudoperonosporacubensis)、莴苣及白菜霜霉病(peronosporaparasitica)，洋葱霜霉病(peronosporadestructor)，大豆霜霉病(peronosporamanschurica)，烟草霜霉病(peronosporatabacina)、马铃薯及番茄晚疫病(phytophthorainfestans)、辣椒疫病(phytophthoracapsici)、西瓜疫病(phytophthoramelonis)、烟草黑胫病(phytophthoraparasiticavar.nicotianae)、甘蓝猝倒病和草坪腐霉枯萎病(pythiumaphanidermatum)、观赏植物根腐病(pythiumsplendens)、马铃薯银腐病(helminthosporiumsolani)、水稻纹枯病和马铃薯黑痣病(rhizoctoniasolani)、小麦纹枯病(rhizoctoniacerealis)、棉花、大豆、小麦、玉米、油菜、高粱、甜菜、黄瓜、番茄猝倒病及立枯病(rhizoctoniasolani)、小麦赤霉病和玉米茎基腐病(fusariumgraminearum)、大豆根腐病和西瓜枯萎病(fusariumoxysporum)、水稻恶苗病(fusariummoniliforme)、水稻稻曲病(ustilaginoideaoryzae)、果树、蔬菜等作物灰霉病(botrytiscinerea)、油菜及大豆菌核病(sclerotiniasclerotiorum)、花生白绢病(sclerotiumrolfsii)、桃褐腐病(moniliniafructicola)、甜樱桃褐腐病(monilinialaxa)、小麦散黑穗病(ustilagotritici)、小麦腥黑穗病(tilletiacaries)、小麦杆黑粉病(urocystisocculta)、小麦雪霉叶枯病(monographellanivalis)、小麦叶锈病(pucciniarecondita)、小麦条锈病(p.striiformis)、小麦杆锈病(p.graminis)、小麦壳针孢叶枯病(septoriatritici)、大豆锈病(phakopsorapachyrhizi)、大麦黑穗病(ustilagohordei)、大麦条纹病(pyrenophoragraminea)、燕麦散黑穗病(ustilagoavenae)、洋葱黑粉病(urocystiscolchici)、玉米丝黑穗病(sphacelothecareiliana)、苹果黑星病(venturiainaequalis)、梨黑星病(venturianashicola)、小麦全蚀病(gaeumannomycesgraminis)、葫芦科蔬菜壳针孢叶斑病(septoriacucurbitacearum)、苹果树腐烂病(valsamali)、玉米大斑病(exserohilumturcicum)、香蕉叶斑病(mycosphaerellafijiensis)、葡萄黑痘病(sphacelomaampelinum)、葡萄白腐病(coniothyriumdiptodictta)、苹果轮纹病(physalosporapiricola)、柑橘疮痂病(sphacelomafawcettii)、花生叶斑病(cercosporaarachidicola)、小麦根腐病(bipolarissorokiniana)、西瓜蔓枯病(mycosphaerellamelonis)、观赏花卉黑斑病(septoriafhrysanth)、食用菌病害(如褐腐病mycogoneperniciosa、褐斑病verticilliumfungicola、绿霉trichodermaviride、链孢霉neurosporacrassa等)、小麦蚜虫(sitobionavenae)、小麦吸浆虫(sitodiplosismosellana)、水稻稻飞虱(nilaparvatalugens)、水稻蓟马(stenchaetothripsbiformis)、水稻三化螟(tryporyzaincertulas)、水稻二化螟(chilosuppressalis)、稻纵卷叶螟(cnaphalocrocismedinalis)、稻象甲(lissorhoptrusoryzophilus)、柑橘潜叶蛾(phyllocnistiscitrellastainton)、玉米和小麦蛴螬(anomalacorpulenta)、玉米地老虎(agrotisypsilon)、玉米金针虫(agriotesfuscicollis)、花生和马铃薯蛴螬(holotrichiaparallela)、甘蔗二点螟(chilotracainluscatellus)、甘蔗黄螟(aryroploceschistaceana)、番茄、辣椒、茄子和黄瓜烟粉虱(bemisiatabaci)、黄瓜白粉虱(trialeurodesvapotariorum)、芸苔属蔬菜(如甘蓝)蚜虫(brevicorynebrassicae)、小菜蛾(plutellaxylostella)、斜纹夜蛾(prodenialitura)、甜菜夜蛾(laphygmaexigua)、番茄和马铃薯木虱(bactericeracockerelli)、柑橘蚜虫(toxopteracitricidus)、木虱(diaphorinacitri)、介壳虫(如矢尖蚧unaspisyanonensis、红蜡蚧ceroplastesrubens等)、螨类(如全爪螨panonychuscitri)、苹果小食心虫(grapholithainopinata)、小卷蛾(adoxophyesorana)、卷叶蛾(pandemisheparana)、绵蚜(eriosomalanigerum)、全爪螨(panonychusulmi)、山楂叶螨(tetranychusviennensis)、二斑叶螨(tetranychusurticae)、韭菜迟眼蕈蚊(bradysiaodoriphaga)、食用菌菌蛆(lycoriellapleuroti)、甘蓝黄条跳甲(phyllotratastriolata)、节瓜蓟马(thripsflavus)、茶树茶小绿叶蝉(empoascaflavescens)、橘小实蝇(bactroceradorsalis)、橘大实蝇(bactroceraminax)、地中海实蝇(ceratitiscapitata)、樱桃实蝇(rhagoletisindifferens)、番茄、茄子、黄瓜、芹菜、烟草根结线虫病(meloidogyneincognita)，辣椒根结线虫病(meloidogynehapla)，花生根结线虫病(meloidogynearenaria)、菌核病(sclerotiumrolfsii)，大豆胞囊线虫(heteroderaglycines)、爪哇根结线虫(meloidogynejavanica)等。
为了解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案予以实现：
本发明组合物组分a和b可以任意比例混配，通常一种活性成分含量高于其余活性成分，优选混合比是100：1至1：100或50：1至1：50。
本发明组合物可通过将活性成分与农药制剂加工中可以使用的助剂混合，用已知方法制备为常规的制剂，如乳油、可湿性粉剂、种子处理悬浮剂、水分散粒剂、悬浮剂、水乳剂、微乳剂、悬浮种衣剂、种子处理干粉剂、种子处理可分散粉剂、颗粒剂、微囊悬浮剂、悬乳剂等。制剂中一般含有0.1～95％重量的活性成分，优选0.5～90％重量的活性成分。
农药制剂加工中可以使用的助剂包括但不限于：水、溶剂、填料、各种表面活性剂(乳化剂、分散剂、润湿剂等)、黏结剂、成膜剂、着色剂、防冻剂、增稠剂、助悬剂、崩解剂、消泡剂、渗透剂、警戒色、增效剂、稳定剂、壁囊材料、ph调节剂、防腐剂等。并且，适当地，为了提高对特定作物耐受力，可适当添加安全剂；或者有时为了促进作物生长发育，可在混配组合物中添加常规农业肥料，制成药肥混剂。这些助剂都是农药制剂中常用或允许使用的成分，并无特别限定，可选择一种或一种以上助剂构成，具体成分和用量根据配方要求通过简单的试验确定。
所述组合物各种应用剂型的生产工艺均属现有已知技术，在此不再赘述。
本发明组合物可以多种方法使用，如兑水以常规方式喷雾使用，或直接撒施或沟施，或拌毒土撒施，或种子处理等，于植物播种时、出苗前、出苗后营养生长期和生殖生长期均可使用。用药量可在较宽范围内变化，并且取决于土壤的状况、使用方法、作物、待防治的植物病虫害种类及苗龄大小、当时的气候条件及其他因素。本发明组合物通常以0.001～1.0kg活性成分混合物/100kg种子的用量施用，或者以0.001～1.0kg活性成分混合物/公顷的用量施用；更为优选地，以0.001～0.5kg活性成分混合物/100kg种子的用量施用，或者以0.01～0.5kg活性成分混合物/公顷的用量施用。
本发明与现有技术相比，具有如下技术效果：
1、混配组合物具有良好的协同作用，应用效果明显优于单剂理论效果总和，即具有超叠加作用，可更好地控制植物病虫害发生危害；
2、混配组合物活性成分之间在植物病虫害防治谱上具有良好的互补性，可很好扩大防治谱，综合有效控制各种植物病虫害发生危害；
3、混配组合物具有良好的协同作用，可减少药剂使用量，降低使用成本和环境污染，提高对作物的安全性。
具体实施方式
以下给出本发明的具体实施例，需要说明的是本发明并不局限于以下具体实施例，凡在本申请技术方案基础上做的等同变换均落入本发明的保护范围。
实施例1：38％乳油
配方组成为：活性成分a为28％，活性成分b为10％，乳化剂蓖麻油聚氧乙烯醚4％，乳化剂十二烷基硫酸钙6％，溶剂二甲苯补足至100％。
制备方法为：将所有物料投入配料釜中，搅拌溶解至完全透明，化验合格后，转移至储罐灌装。
实施例2：12％种子处理悬浮剂
配方组成为：活性成分a为6％，活性成分b为6％，润湿剂脂肪醇聚氧乙烯醚4％，分散剂马来酸-丙烯酸共聚物钠盐5％，防冻剂乙二醇4％，增稠剂硅酸镁铝0.2％，警戒色玫瑰精0.8％，水补足至100％。
制备方法为：将活性成分和润湿剂、分散剂、防冻剂、警戒色和水投入搅拌釜中，充分搅拌后，将物料抽入砂磨机中进行充分研磨，研磨完成后，抽入高速剪切机中，加入增稠剂后，进行高速剪切，剪切完成后即制得种子处理悬浮剂。
实施例3：75％水分散粒剂
配方组成为：活性成分a为20％，活性成分b为55％，润湿剂拉开粉5％，分散剂脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠6％，崩解剂硫酸铵5％，黏结剂羧甲基纤维素0.2％，填料凹凸棒土补足至100％。
制备方法为：将所有物料混合均匀后，经气流粉碎机粉碎，再次混合均匀，然后，加入一定量的水将此混合物捏合，挤压造粒，经干燥筛分，即得到水分散粒剂。
实施例4：15％水乳剂
配方组成为：活性成分a为9％，活性成分b为6％，溶剂二甲苯10％，乳化剂苯乙烯基苯酚甲醛树脂聚氧乙烯聚氧丙烯醚3％，乳化剂磺化琥珀酸二辛酯钠盐5％，防冻剂丙二醇5％，水补足至100％。
制备方法为：将活性成分a和b用溶剂充分溶解后，投入乳化剂充分搅拌后形成油相；将防冻剂加入水中溶解，形成水相；将水相缓慢加入油相中，使用高速剪切机剪切，即可得水乳剂。
实施例5：21％微乳剂
配方组成为：活性成分a为7％，活性成分b为14％，溶剂二甲苯10％，溶剂环己酮4％，乳化剂烷基酚聚氧乙烯醚甲醛缩合物9％，乳化剂顺丁烯二酸二仲辛酯磺酸钠6％，防冻剂乙二醇5％，水补足至100％。
制备方法为：将活性成分a和b用溶剂充分溶解后，投入乳化剂和防冻剂混合均匀，最后加入去离子水，进行高速剪切，即可得微乳剂。
实施例6：46％可湿性粉剂
配方组成为：活性成分a为32％，活性成分b为14％，润湿剂十二烷基苯磺酸钙5％，分散剂木质素磺酸钠4％，填料高岭土补足至100％。
制备方法为：将活性成分和各助剂混合均匀，投入机械粉粹机中进行初粉粹，之后经气流粉碎机粉碎，再混合均匀，即制得可湿性粉剂。
实施例7：5％颗粒剂
配方组成为：活性成分a为3％，活性成分b为2％，润湿剂苯乙基酚聚氧乙烯醚0.6％，分散剂聚羧酸盐1.0％，着色剂炭黑0.2％，填料膨润土补足至100％。
制备方法为：将所有物料混合均匀后，加入一定量的水将此混合物捏合，挤压造粒，经干燥筛分，即得到颗粒剂。
实施例8：30％悬浮种衣剂
配方组成为：活性成分a为24％，活性成分b为6％，润湿剂十二烷基硫酸钠4％，分散剂烷基酚聚氧乙烯醚甲醛缩合物磺酸盐4％，成膜剂聚乙烯醇-醋酸聚乙烯共聚物0.5％，防冻剂乙二醇5％，增稠剂黄原胶0.2％，警戒色酸性大红1.0％，水补足至100％。
制备方法为：将活性成分和润湿剂、分散剂、防冻剂、警戒色、成膜剂和水投入搅拌釜中，充分搅拌后，抽入高速剪切机中，进行高速剪切，再泵至砂磨机中进行充分砂磨，砂磨合格后加入增稠剂，搅拌均匀即得悬浮种衣剂。
应用效果实例：
1、试验方法
(1)对西瓜蔓枯病菌的生物活性
以西瓜蔓枯病菌(mycosphaerellamelonis)为供试病原菌，田间采集病蔓，实验室分离纯化，接种在pda培养基上培养，培养至菌落直径达6cm左右备用。
以西瓜感病品种“新兰”为供试作物，可控日光温室内培养至3叶～5叶期备用。
将配制好的药液均匀喷施于“新兰”叶面至全部润湿。施药72h后接种病原菌。用内径为8mm的打孔器在新鲜黄瓜果实表面打一小口(轻微打去表皮即可，文献报道黄瓜果实便于诱导蔓枯病菌孢子产生)，用直径为5mm的打孔器从pda菌落边缘同一圆周上切取菌饼，接种于黄瓜果实切口上，然后置于25℃的光照培养箱中培养，每天光照12h，至产生大量孢子时，用无菌水洗下分生孢子，用双层纱布过滤，制成浓度为1×105个孢子/ml的孢子悬浮液，将其喷雾接种于已施药的西瓜叶片上。接种后移至保湿箱中(相对湿度95％～100％)黑暗培养24h。然后在20℃～25℃、12h光暗交替、相对湿度为90％以上的条件下培养。每处理设置4次重复，每重复5盆，每盆2株，并设不含药剂的处理作空白对照。待空白对照发病率达到80％以上时，分级调查各处理发病情况。分级标准参照“西瓜蔓枯病有效药剂筛选及药效评价(李雨、王少秋等，农药：2016年，第55卷第6期:460-462页)”分为9级。计算各处理的病情指数和防治效果。
病情指数按式(1)计算，防治效果按式(2)计算，计算结果保留小数点后两位。
式中：
x—病情指数；
ni—各级病叶数；
i—相对级数值；
n—调查总叶数；
9—最高级数值。
式中：
p—防治效果，单位为百分数(％)；
ck—空白对照病情指数；
pt—药剂处理病情指数。
(2)对烟草黑胫病菌的生物活性
以烟草黑胫病菌(phytophthoraparasiticavar.nicotianae)为供试病原菌。从田间采集病叶，实验室分离纯化，接种在燕麦培养基上培养，培养至菌落直径达6cm左右备用。燕麦培养基配制如下：燕麦50g，琼脂粉18g，去离子水1000ml，高压蒸汽灭菌(121℃)30min。后述的产孢培养液皮氏培养液配制如下：ca(no3)20.4g，kh2po40.15g，mg(no3)20.15g，cacl20.06g，去离子水1000ml，高压蒸汽灭菌(121℃)30min。
以烟草感病品种“许金7号”为供试作物，可控日光温室内培养至3叶～5叶期备用。
将配制好的药液均匀喷施于“许金7号”叶面至全部润湿。施药72h后接种病原菌。用打孔器从培养好的菌落边缘1/3处打取8块直径为5mm的菌饼，置于直径为9cm的培养皿中，加入20ml皮氏培养液，使液面刚好没过菌饼。置于28℃恒温培养箱中黑暗培养3天，产生大量孢子囊后，倾去培养皿中的皮氏液，加入适量灭菌蒸馏水，置于4℃冰箱中，30min后取出，室温(25±1℃)下放置1h，待游动孢子释放后，用双层纱布过滤，制得浓度为1×105游动孢子/ml的游动孢子悬浮液，将其喷雾接种于已施药的烟草叶片上。接种后移至保湿箱中(相对湿度95％～100％)黑暗培养24h。然后在(25～27)℃、12h光暗交替条件下，相对湿度为90％以上的条件下培养。每处理设置4次重复，每重复5盆，每盆2株，并设不含药剂的处理作空白对照。待空白对照发病率达到80％以上时，分级调查各处理发病情况。分级标准参照《gb/t17980.90-2004农药田间药效试验准则(二)第90部分杀菌剂防治烟草黑胫病》进行。计算各处理的病情指数和防治效果。
病情指数按式(1)计算，防治效果按式(2)计算，计算结果保留小数点后两位。
(3)对草坪腐霉枯萎病菌的生物活性
以草坪腐霉枯萎病菌(pythiumaphanidermatum)为供试病原菌，从田间采集病根，实验室分离纯化，接种在pda培养基上培养，培养至菌落直径达6cm左右备用。pda培养基为实验室常规培养基，此处略去其配制方法。
以草坪感病品种“高羊茅”为供试作物，可控日光温室内培养至3叶～5叶期备用。
将配制好的药液均匀喷施于“高羊茅”叶面至全部润湿。施药72h后接种病原菌。用打孔器从pda菌落边缘1/3处打取8块直径为5mm的菌饼，置于培养皿中经煮沸10min且自然冷却的玉米叶片上，加入20ml皮氏培养液，使液面刚好没过菌饼。置于28℃恒温培养箱中黑暗培养3天，产生大量孢子囊后，倾去培养皿中的皮氏液，加入适量灭菌蒸馏水，置于4℃冰箱中，30min后取出，室温(25±1℃)下放置1h，待游动孢子释放后，用双层纱布过滤，制得浓度为1×105游动孢子/ml的游动孢子悬浮液，将其喷雾接种于已施药的高羊茅叶片上。接种后移至保湿箱中(相对湿度95％～100％)黑暗培养24h。然后在28℃～30℃、12h光暗交替、相对湿度为90％以上的条件下培养。每处理设置4次重复，每重复5盆，每盆2株，并设不含药剂的处理作空白对照。待空白对照发病率达到80％以上时，分级调查各处理发病情况。分级标准参照“嘧菌酯·咪鲜胺(45％悬浮剂)防治草坪草腐霉枯萎病药效试验(郭志刚、王宾，试验研究：2014年9月，115-116页)”分为7级。计算各处理的病情指数和防治效果。
病情指数按式(3)计算，防治效果按式(2)计算，计算结果保留小数点后两位。
式中：
x—病情指数；
ni—各级病叶数；
i—相对级数值；
n—调查总叶数；
7—最高级数值。
(4)对黄瓜霜霉病菌的生物活性
参照《ny/t1156.7-2006农药室内生物测定试验准则杀菌剂第7部分：防治黄瓜霜霉病试验盆裁法》进行。
以黄瓜霜霉病菌(pseudoperonosporacubensis)为供试病菌，实验室接种在黄瓜幼苗上扩繁备用。
以黄瓜感病品种“长春密刺”为供试作物，实验室盆栽，幼苗长至4片～6片真叶期备用。
将配制好的药液均匀喷施于“长春密刺”叶面至全部润湿。施药72h后接种病原菌。选取扩繁用发病叶片，用4℃蒸馏水洗下叶片背面霜霉病菌孢子囊，洗脱液用双层纱布过滤，制成浓度为1×105个孢子囊/ml的孢子囊悬浮液，将其喷雾接种于已施药的黄瓜苗叶片背面(霜霉病菌易侵染叶片背面)。接种后移至保湿箱中(相对湿度95％～100％)黑暗培养24h。然后在17～22℃、12h光暗交替条件下，相对湿度为90％以上的条件下培养。每处理设置4次重复，每重复5盆，每盆2株，并设不含药剂的处理作空白对照。当空白对照发病率达到50％以上时，分级调查处理发病情况。计算各处理的病情指数和防治效果。
病情指数按式(1)计算，防治效果按式(2)计算，计算结果保留小数点后两位。
(5)对马铃薯晚疫病菌的生物活性
参照《ny/t1156.12-2008农药室内生物测定试验准则杀菌剂第12部分：防治晚疫病试验盆栽法》进行。
以马铃薯晚疫病菌(phytophthorainfestans)为供试病原菌，从田间采集病叶，实验室分离纯化，接种在燕麦培养基上培养，培养至菌落直径达6cm左右备用。燕麦培养基配制如下：燕麦50g，琼脂粉18g，去离子水1000ml。高压蒸汽灭菌(121℃)30min。后述的产孢培养液皮氏培养液配制如下：ca(no3)20.4g，kh2po40.15g，mg(no3)20.15g，cacl20.06g，去离子水1000ml，高压蒸汽灭菌(121℃)30min。
以马铃薯感病品种“大西洋”为供试作物，实验室盆栽，幼苗长至2片～4片真叶期备用。
将配制好的药液均匀喷施于“大西洋”叶面至全部润湿。施药72h后接种病原菌。用打孔器从燕麦培养基菌落边缘1/3处打取8块直径为5mm的菌饼，置于直径为9cm的培养皿中，加入20ml皮氏培养液，使液面刚好没过菌饼。置于18℃恒温培养箱中黑暗培养3天，产生大量孢子囊后，倾去培养皿中的皮氏液，加入适量灭菌蒸馏水，置于4℃冰箱中，30min后取出，18℃恒温培养箱中放置1h，待游动孢子释放后，用双层纱布过滤，制得浓度为1×105游动孢子/ml的游动孢子悬浮液，将其喷雾接种于已施药的马铃薯叶片上。接种后移至保湿箱中(相对湿度95％～100％)黑暗培养24h。然后在18℃～20℃、12h光暗交替、相对湿度为90％～100％的人工气候箱内培养。每处理设置4次重复，每重复5盆，每盆2株，并设不含药剂的处理作空白对照。当空白对照发病率达到50％以上时，分级调查各处理发病情况。计算各处理的病情指数和防治效果。
病情指数按式(1)计算，防治效果按式(2)计算，计算结果保留小数点后两位。
(6)对水稻蓟马的生物活性
参照《ny/t1154.14-2008农药室内生物测定试验准则杀虫剂第14部分：浸叶法》进行。
以水稻蓟马(stenchaetothripsbiformis)为供试对象，选取室内饲养，生理状态一致的2龄若虫进行试验。
将新鲜的水稻叶片浸于待测药剂溶液中，10s后取出晾干后置于含有1％保湿滤纸的培养皿中，接入试虫，置于(25±1)℃、湿度60％～80％、光周期l:d＝16:8h的人工气候箱中饲养。每处理4次重复，每重复30头，并设不含药剂的处理作为空白对照。处理后48h调查结果(死亡标准：用毛笔轻触虫体，虫体不能活动)，分别记录总虫数和死亡数。
死亡率按式(4)计算，单位为百分率(％)，计算结果保留小数点后两位：
式中：
p1—死亡率，单位为百分数(％)；
k—表示死亡虫数，单位为头；
n—表示处理总虫数，单位为头。
(7)对马铃薯蛴螬的生物活性
参照《nyt1154.15-2009农药室内生物测定试验准则杀虫剂第15部分：地下害虫浸虫法》进行。
以马铃薯蛴螬(holotrichiaparallela)为供试对象，选取室内饲养，生理状态一致的2龄幼虫进行试验。
将幼虫浸入药液中10s取出，用滤纸吸去多余药液，将试虫转移至装有新鲜马铃薯块的玻璃试管中，管口以潮湿的黑布遮盖，置于25℃±1℃，相对湿度60％～80％的恒温养虫室内饲养。每处理4次重复，每重复30头，并设不含药剂的处理作为空白对照。处理后48h调查结果(死亡标准：用毛笔轻触虫体，虫体不能活动)，分别记录总虫数和死亡数。
死亡率按式(4)计算，单位为百分率(％)，计算结果保留小数点后两位：
(8)组合物预期活性判定
组合物预期活性借鉴拜耳、先正达、陶氏等跨国农药企业制剂专利中判定组合物预期活性的方法(colby法)：colby，s.r.：“calculatingsynergisticandantagonisticresponsesofherbicidecombinations”，weeds15，p.20～22，1967进行。
组合物预期活性按(5)式计算：
式中：
x—药剂1用量为p时的防效或死亡率；
y—药剂2用量为q时的防效或死亡率；
z—药剂3用量为r时的防效或死亡率；
e0—药剂1用量为p+药剂2用量为q+药剂3用量为r时的理论防效或死亡率，即组合物的预期活性；
e—药剂1、2和3按不同配比混配时的实际防效或死亡率，即组合物的实际活性；
当e＞e0时，即如果混配药剂的实际活性超过所计算的预期活性，则该组合物就具有超叠加作用，即协同作用。
2、试验结果
试验结果详见表1～7，可见，活性成分a(异噻菌胺和精呋霜灵)与选自活性成分b(吡唑醚菌酯、噁霉灵、咯菌腈、四氟醚唑、呋虫胺、毒死蜱等)的药剂混配后，实际活性均大于预期活性，说明活性成分a与活性成分b中的药剂混配具有协同作用。
表1异噻菌胺、精呋霜灵与吡唑醚菌酯混配对西瓜蔓枯病菌的联合作用效应
表2异噻菌胺、精呋霜灵与噁霉灵混配对烟草黑胫病菌的联合作用效应
表3异噻菌胺、精呋霜灵与咯菌腈混配对草坪腐霉病菌的联合作用效应
表4异噻菌胺、精呋霜灵与四氟醚唑混配对黄瓜霜霉病菌的联合作用效应
表5异噻菌胺、精呋霜灵与苯醚甲环唑混配对马铃薯晚疫病菌的联合作用效应
表6异噻菌胺、精呋霜灵与呋虫胺混配对水稻蓟马的联合作用效应
表7异噻菌胺、精呋霜灵与毒死蜱混配对马铃薯蛴螬的联合作用效应