本发明涉及水产品养殖技术领域，具体涉及一种防止刺参产生应激反应的方法。
背景技术：
自古以来，刺参就以其无可比拟的独特营养保健功效备受人们青睐，尤其自2003年“非典”事件爆发以来，刺参养殖产业迅猛拓展，现已成为中国海水养殖的支柱产业之一。在刺参的生产过程中，倒池、清底、更换附着基、刺参亲体和苗种运输等人工操作均是必不可少的重要环节，但是上述人工操作均会对刺参造成影响，刺参因不同程度的脱离原来生活栖息环境而产生应激反应。刺参的应激反应容易导致刺参应激死亡、吐肠以及后期生长缓慢的问题。因此，如何保证刺参在各种人为刺激后的成活率、避免对后续生长造成影响，一直是本领域中亟需解决的瓶颈问题。
目前，已公开的刺参活体保存、运输及应激后恢复的专利和文献等技术资料中，均为通过控制水温、充氧、用药以及缩短刺激时间等因素来实现，具体效果还需取决于刺参的自身体质，不论何种方法，其原理主要是利用外部人工手段保证刺参基本存活条件、降低人工操作强度、缩短操作时间以达到防止应激反应的目的。这些方法受到溶氧量、水温、运输时间、刺参体质等外部因素影响较大，工艺繁琐、效果不佳且保证存活时间较短，无法完全消除人工操作对刺参产生的应激反应，人工操作后也极易造成刺参抵抗力下降、发病、死亡、吐肠以及生长缓慢等不良后果，影响刺参养殖的生产效益。
技术实现要素：
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种防止刺参产生应激反应的方法，使刺参的生长发育不受应激刺激的影响。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种防止刺参产生应激反应的方法，将休眠剂薄荷醇拌饵料投入刺参养殖水体，每立方米刺参养殖水体投入的薄荷醇质量为2.5～100g，待1/2以上的刺参呈身体放松舒展状态或1/2以上的刺参从附着基脱离后，进行人工操作；
当每立方养殖水体中含有的刺参规格小于5000头/斤时，所述薄荷醇的投入量为2.5～5g/m3；
当每立方养殖水体中含有的刺参规格为1000～5000头/斤时，所述薄荷醇的投入量为5.5～10g/m3；
当每立方养殖水体中含有的刺参规格为100～999头/斤时，所述薄荷醇的的投入量为10.5～25g/m3；
当每立方养殖水体中含有的刺参规格为20～99头/斤时，所述薄荷醇的投入量为25.5～50g/m3；
当每立方养殖水体中含有的刺参规格大于20头/斤时，所述薄荷醇的投入量为50.5～100g/m3。
优选的，所述人工操作包括更换附着基、倒池、筛苗或运输。
优选的，在人工操作前1.5～3h将所述休眠剂薄荷醇拌饵料投入水体。
优选的，所述休眠剂薄荷醇投入水体至1/2以上的刺参呈身体放松舒展状态或1/2以上的刺参从附着基脱离后的时间为15～40min。
优选的，所述薄荷醇与饵料的质量比为1～2:3～16。
优选的，每立方米养殖水体中的刺参总质量与所述饵料的质量比为(80～120):(2～10)。
优选的，所述人工操作时间最长不超过16h。
优选的，所述人工操作后，还包括复苏刺参的步骤；所述复苏刺参的方法包括：将休眠的刺参在红糖水溶液中浸泡45～60min，即可复苏刺参。
优选的，所述红糖水溶液的浓度为100～200mg/l。
优选的，所述刺参复苏后10～14h内不投喂，首次投喂按照刺参体重的0.5～2％投喂饵料，复苏后24～36h后再恢复正常投喂量。
本发明与现有技术相比，本发明具有以下优点：
本发明提供的方法是将休眠剂薄荷醇投入刺参养殖水体，每立方米刺参养殖水体投入的薄荷醇质量为2.5～100g，待1/2以上的刺参呈身体放松舒展状态或1/2以上的刺参从附着基脱离后，进行人工操作；根据刺参的重量规格不同提供了对应的休眠剂施用量。本发明在可能会导致刺参应激反应的人工操作前，采用薄荷醇对刺参进行休眠，休眠状态不会导致刺参产生应激反应，同时在休眠状态下进行人工操作也不会使刺参产生应激反应，即避免了刺参出现应激反应的可能性。本发明提供的方法打破了现有技术以降低人工操作强度、简化操作步骤、控制刺激时间来避免刺参发生应激反应的传统思路。采用本发明提供的方法处理的刺参成活率可达到100％，并且彻底解决了刺参即使经过常规的降低应激反应处理依旧会出现生长缓慢、吐肠等应激反应的问题。
本发明以薄荷醇为休眠剂，对刺参安全无害、刺激小、持续时间长，休眠状态可持续8～12h，为刺参活体运输、倒池、更换附着基等人工操作提供了充裕的时间。特别是为刺参活体运输提供了更长的可运输时间，现有的刺参活体运输手段的活体可运输时间为3～4h，采用本发明所述防止刺参产生应激反应的方法能够使活体可运输时间延长一倍以上。
本发明创造性的采用每立方米养殖水体中投入2.5～100g的薄荷醇作为刺参的休眠剂，无需使刺参达到深度麻醉状态，保持休眠状态即可。本发明创造性的发现长时间使刺参进入休眠状态时外界人工操作不会导致刺参出现应激反应，成本低，操作简便。
具体实施方式
本发明提供了一种防止刺参产生应激反应的方法，将休眠剂薄荷醇拌饵料投入刺参养殖水体，每立方米刺参养殖水体投入的薄荷醇质量为2.5～100g，待1/2以上的刺参呈身体放松舒展状态或1/2以上的刺参从附着基脱离后，进行人工操作，进行人工操作；
当每立方养殖水体中含有的刺参规格小于5000头/斤时，所述薄荷醇的投入量为2.5～5g/m3；
当每立方养殖水体中含有的刺参规格为1000～5000头/斤时，所述薄荷醇的投入量为5.5～10g/m3；
当每立方养殖水体中含有的刺参规格为100～999头/斤时，所述薄荷醇的的投入量为10.5～25g/m3；
当每立方养殖水体中含有的刺参规格为20～99头/斤时，所述薄荷醇的投入量为25.5～50g/m3；
当每立方养殖水体中含有的刺参规格大于20头/斤时，所述薄荷醇的投入量为50.5～100g/m3。
在本发明中，所述薄荷醇为刺参的休眠剂，能够使刺参进入浅层休眠状态，减弱了刺参的感觉和运动知觉，但并不需要进入深层麻醉即可实现避免刺参产生应激反应的作用。
在本发明中，所述人工操作包括更换附着基、倒池、筛苗或运输。
本发明优选的在人工操作前1.5～3h将休眠剂拌饵料投入刺参养殖水体，更优选为人工操作前2h。
本发明按照刺参大小规格的不同，将休眠剂薄荷醇拌饵料投入刺参养殖水体，每立方米刺参养殖水体投入的薄荷醇质量为2.5～100g；待1/2以上的刺参呈身体放松舒展状态或1/2以上的刺参从附着基脱离后，进行人工操作。当刺参出现1/2以上的刺参呈身体放松舒展状态或1/2以上的刺参从附着基脱离的现象时，表明刺参已经进入休眠状态。此种状态下进行人工操作不会被刺参感知，进而不会使刺参产生因外界刺激导致的应激反应，从根本上彻底的防止了刺参的应激反应出现，打破了常规降低人工操作强度、简化操作步骤、控制刺激时间来避免刺参发生应激反应的传统思路。
在本发明中，刺参越大则每斤中的刺参头数越小，所述的刺参规格通过每斤中含有的刺参个数表示刺参的个体大小，根据刺参大小的不同，能够使其进入休眠状态并且不产生刺激的薄荷醇浓度相应的进行调整，即随着刺参质量的增加薄荷醇的用量也相应的增加，但是薄荷醇与刺参质量并不呈正比，因而本发明创造性的对一定范围内的刺参质量确定了相应的休眠剂薄荷醇的用量。
在本发明中，所述休眠剂薄荷醇投入水体至待1/2以上的刺参呈身体放松舒展状态或1/2以上的刺参从附着基脱离的时间为15～40min，此时表示刺参进入休眠状态；依据不同规格和薄荷醇的用量，刺参进入休眠状态的时间各不相同，在本发明所述的方法中：
当每立方养殖水体中含有的刺参规格小于5000头/斤时，所述薄荷醇的投入量为2.5～5g/m3，进入休眠的时间为5～10min，休眠持续时间为8～10h；
当每立方养殖水体中含有的刺参规格为1000～5000头/斤时，所述薄荷醇的投入量为5.5～10g/m3，进入休眠的时间为10～20min，休眠持续时间为8～10h；
当每立方养殖水体中含有的刺参规格为100～999头/斤时，所述薄荷醇的的投入量为10.5～25g/m3，进入休眠的时间为15～20min，休眠持续时间为8～10h；
当每立方养殖水体中含有的刺参规格为20～99头/斤时，所述薄荷醇的投入量为25.5～50g/m3，进入休眠的时间为20～30min，休眠持续时间为10～16h；
当每立方养殖水体中含有的刺参规格大于20头/斤时，所述薄荷醇的投入量为50.5～100g/m3，进入休眠的时间为30～40min，休眠持续时间为10～16h.
在本发明中，所述休眠剂薄荷醇与饵料的质量比优选为1～2:3～16，更优选为1:6～16。在本发明中，所述每立方米刺参养殖水体中，刺参总质量与所述饵料的质量比优选为(80～120):(2～10)，更优选为100:3～5。本发明采用休眠剂拌饵投入的方式，一部分薄荷醇能够通过刺参进食饵料进入体内发挥作用，能够有效的缩短刺参进入休眠的时间，提高效率。
具体的，本发明所述薄荷醇拌饵料的方法为：采用乙醇将薄荷醇晶体溶解为溶液，与饵料混合即可。本发明所述的饵料优选为刺参的配合饲料。本发明对所述薄荷醇和饵料的来源无特殊限定，采用市售商品即可。在本发明中，乙醇溶解薄荷醇晶体时，起到的是助溶作用，即乙醇的用量能够将薄荷醇晶体溶解即可。
在本发明中，所述人工操作的时间最长不超过16h，采用本发明所述方法使刺参休眠后为人工操作提供了充足的时间。尤其是当人工操作为运输刺参时，本发明提供的方法能够提供8～16h的刺参活体运输时间，是现有技术运输活体刺参时间的2倍，刺参成活率高，并且刺参在解除休眠后不会出现吐肠、生长迟缓等应激反应。
在本发明所述防止刺参出现应激反应的方法中，水体温度为10～25℃。
在本发明中，所述防止刺参产生应激反应的方法在人工操作后还包括如下复苏刺参的步骤：将休眠的刺参在糖水溶液中浸泡45～60min，使休眠的刺参复苏。优选的，浸泡时间为30min。
当观察到刺参的身体及棘刺自然伸展、逐渐上爬至附着基或池壁时，即为成功复苏。本发明采用红糖水浸泡刺参复苏，有助于刺参迅速恢复体力，同时提高刺参的机体免疫力，避免或防止由于较长时间的人工操作导致的不良应激反应出现。
在本发明中，所述红糖水溶液的质量体积浓度优选为100～200mg/l，更优选为120～180mg/l。优选的，本发明所述红糖水溶液以砂滤海水为溶剂。本发明所述红糖水溶液优选为红糖水溶液。
所述经过糖水溶液浸泡后的刺参从休眠中复苏，本发明在刺参复苏后的10～14h内不进行投喂，首次投喂时按照刺参重量的0.5～2％投喂饵料，直到复苏后24～36h后再恢复正常投喂量。
在本发明中，优选的在刺参复苏后的12～13h内不进行投喂。经过不投喂后，本发明优选的在首次投喂时按照刺参重量的1％投喂饵料。本发明所述回复正常投喂量的时间优选为刺参复苏后的30h。
下面结合本发明的实施例，对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1防止长途运输对刺参的影响
10立方米的水体中，每立方米水体含有2斤刺参，刺参的规格为2000头/斤。在准备进行运输前2h，按照刺参体重的3％称取配合饲料300g，按照配合饲料与薄荷醇质量比3:1的比例称取薄荷醇晶体100g，用少量乙醇将薄荷醇晶体溶解后与配合饲料混合，将混合物投入水体中。待1/2以上的刺参呈身体放松舒展状态或1/2以上的刺参从附着基脱离时即为进入了休眠状态，此时可对休眠后的刺参进行活体运输。
运输结束后，将刺参置于干净的砂滤海水中，加入100～200mg/l的红糖，浸泡20～45min，1/2以上刺参恢复正常状态(身体及棘刺自然伸展，逐渐上爬至附着基或池壁)，刺参成功复苏，此时测定刺参的存活率。
刺参复苏后的12h内不投喂任何饵料，刺参复苏后的第12h首次投喂时，按照刺参重量的1％投喂配合饲料，逐渐加大投喂量，直至复苏后24h再恢复正常的投喂量。复苏的第7d测定刺参的存活率；复苏的第30d时测定刺参特定生长率(sgr)。
其中，配合饲料购买于青岛朗格生物技术有限公司，主要营养组成为：粗蛋白16％、粗脂肪5％、粗纤维8％、总磷6％、粗灰分25％、赖氨酸0.8％、水分10％。
对比例1常规降低刺参应激反应的方法
10立方米的水体中，每立方米水体含有2斤刺参，刺参的规格为2000头/斤。
(1)空腹暂养：将准备进行运输的刺参停饵2天，使其排空肠道内残留物。
(2)充氧：使用充氧泵对暂养刺参的容器进行充氧。
(3)降温：在暂养刺参的水中缓慢加入海水冰块或密封冰瓶降温，控制水温在8～15℃之间。
(4)打包：将暂养的刺参装入泡沫保温箱中进行干运或水运，保温箱密封前需再在箱内放入适量密封冰瓶以保持低温(8～15℃)。
(5)运输：制定好路线计划，保证车辆、人员等到位，尽量缩短时间。
(6)恢复：人工操作完成或运输到达目的地后，施用抗应激类药物(如乙酰甲喹等)以防止对刺参的影响，1/2以上刺参恢复正常状态(身体及棘刺自然伸展，逐渐上爬至附着基或池壁)时测定刺参成活率。
实施例2
本次试验对所述防止刺参产生应激反应的方法提高刺参人工操作后成活率进行验证。
按照实施例1或对比例1的方法对刺参进行活体运输，活体运输时间依次为2h、4h、6h、8h、10h、12h、16h；分别检测刺参恢复正常后的成活率，结果如表1所示：
表1不同方法的刺参活体运输时间和成活率
由表1的数据可以看出，与对比例1相比，实施例1方法运输的刺参成活率显著提高，并且实施例1的方法运输刺参在2～10h时均达到了100％，而对比例1所述方法运输刺参的成活率最高仅为99％。表明本发明提供的防止刺参产生应激反应的方法能够显著提高人工操作后的刺参成活率；常规的刺参活体运输时间在2～8h，本发明提供的刺参活体运输时间可以达到16h，即活体运输时间延长了1倍。
实施例3防止倒池对刺参的影响
10立方米的水体中，每立方米水体含有2斤刺参，刺参的规格为2000头/斤。在准备进行运输前2h，按照刺参体重的3％称取配合饲料300g，按照配合饲料与薄荷醇质量比3:1的比例称取薄荷醇晶体100g，用少量乙醇将薄荷醇晶体溶解后与配合饲料混合，将混合物投入水体中。待待1/2以上的刺参呈身体放松舒展状态或1/2以上的刺参从附着基脱离状态时即为进入了休眠状态，此时可对休眠后的刺参进行倒池。
倒池后，将刺参置于干净的砂滤海水中，加入100～200mg/l的红糖，浸泡20～45min，1/2以上刺参恢复正常状态(身体及棘刺自然伸展，逐渐上爬至附着基或池壁)，刺参成功复苏，此时测定刺参的存活率。
刺参复苏后的12h内不投喂任何饵料，刺参复苏后的第12h首次投喂时，按照刺参重量的1％投喂配合饲料，逐渐加大投喂量，直至复苏后第24h再恢复正常的投喂量。复苏的第7d测定刺参的存活率；复苏的第30d时测定刺参特定生长率(sgr)。
其中，配合饲料购买于青岛朗格生物技术有限公司，主要营养组成为：粗蛋白16％、粗脂肪5％、粗纤维8％、总磷6％、粗灰分25％、赖氨酸0.8％、水分10％。
实施例4
除按照配合饲料与薄荷醇质量比6:1的比例称取薄荷醇晶体50g外，其他步骤与实施例3相同。
实施例5
除按照配合饲料与薄荷醇质量比3:2的比例称取薄荷醇晶体200g外，其他步骤与实施例3相同。
对比例2
除不添加薄荷醇外，其他步骤与实施例3相同。
实施例6
10立方米的水体中，每立方米水体含有6斤刺参，刺参的规格为200头/斤。在准备进行运输前1.5h，按照刺参体重的5％称取配合饲料1500g，按照配合饲料与薄荷醇质量比12:1的比例称取薄荷醇晶体125g，用少量乙醇将薄荷醇晶体溶解后与配合饲料混合，将混合物投入水体中。待1/2以上的刺参呈身体放松舒展状态或1/2以上的刺参从附着基脱离时即为进入了休眠状态，此时可对休眠后的刺参进行倒池。
倒池后，将刺参置于干净的砂滤海水中，加入100～200mg/l的红糖，浸泡20～45min，1/2以上刺参恢复正常状态(身体及棘刺自然伸展，逐渐上爬至附着基或池壁)，刺参成功复苏，此时测定刺参的存活率。
刺参复苏后的10h内不投喂任何饵料，刺参复苏后的第11h首次投喂时，按照刺参重量的0.5％投喂配合饲料，逐渐加大投喂量，直至复苏后第24h再恢复正常的投喂量。复苏的第7d测定刺参的存活率；复苏的第30d时测定刺参特定生长率(sgr)。
其中，配合饲料购买于青岛朗格生物技术有限公司，主要营养组成为：粗蛋白16％、粗脂肪5％、粗纤维8％、总磷6％、粗灰分25％、赖氨酸0.8％、水分10％。
实施例7
除按照配合饲料与薄荷醇质量比8:1的比例称取薄荷醇晶体187.5g外，其余步骤均与实施例6相同。
实施例8
除按照配合饲料与薄荷醇质量比6:1的比例称取薄荷醇晶体250g外，其余步骤均与实施例6相同。
对比例3
除不添加薄荷醇外，其余步骤均与实施例6相同。
实施例9
10立方米的水体中，每立方米水体含有10斤刺参，刺参的规格为10头/斤。在准备进行运输前1.5h，按照刺参体重的5％称取配合饲料5000g，按照配合饲料与薄荷醇质量比8:1的比例称取薄荷醇晶体625g，用少量乙醇将薄荷醇晶体溶解后与配合饲料混合，将混合物投入水体中。待刺参出现身体蜷缩、1/2以上棘刺收缩、附着力下降(1/2以上脱落)等状态时即为进入了休眠状态，此时可对休眠后的刺参进行活体运输。
运输结束后，将刺参置于干净的砂滤海水中，加入100～200mg/l的红糖，浸泡20～45min，1/2以上刺参恢复正常状态(身体及棘刺自然伸展，逐渐上爬至附着基或池壁)，刺参成功复苏，此时测定刺参的存活率。
刺参复苏后的14h内不投喂任何饵料，刺参复苏后的第15h首次投喂时，按照刺参重量的0.5％投喂配合饲料，逐渐加大投喂量，直至复苏后第30天再恢复正常的投喂量。复苏的第7d测定刺参的存活率；复苏的第30d时测定刺参特定生长率(sgr)。
其中，配合饲料购买于青岛朗格生物技术有限公司，主要营养组成为：粗蛋白16％、粗脂肪5％、粗纤维8％、总磷6％、粗灰分25％、赖氨酸0.8％、水分10％。
实施例10
除按照配合饲料与薄荷醇质量比6.25:1的比例称取薄荷醇晶体800g外，其余步骤均与实施例9。
实施例11
除按照配合饲料与薄荷醇质量比5:1的比例称取薄荷醇晶体1000g外，其余步骤均与实施例9。
对比例4
除不添加薄荷醇外，其余步骤均与实施例9相同。
实施例12
统计实施例3～11、对比例2～4检测的复苏后刺参成活率、刺参特定生长率sgr，具体数据见表2。
表2不同规格的刺参经过处理后的复苏时间、成活率和特定生长率
根据表2的数据可以看出，与对比例相比，本发明实施例提供的方法能够有效的提高刺参复苏后的成活率，复苏时间短，复苏后的特定生长率也相对提高，这表明本发明提供的方法能够有效提高刺参的成活率，并对刺参的后期生长速率无影响。
还可以看出，在同一刺参规格下，随着薄荷醇浓度的升高刺参的成活率和特定生长率随之下降，这表明浓度较高的薄荷醇还是对刺参特定生长率和成活率有所影响，本发明提供的方法通过较低的薄荷醇浓度使得刺参进入休眠状态即可，既可以避免人工操作对刺参产生的应激刺激，也可以防止薄荷醇作为麻醉剂时对刺参后期生长速率的影响。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。