一种金银花的品种改良方法与流程

本发明公开了一种金银花的品种改良方法，具体为金银花改良技术领域。

背景技术：

金银花自古以来就以它的药用价值广泛而著名。其功效主要是清热解毒，主治温病发热、热毒血痢、痈疽疔毒等。现代研究证明，金银花含有绿原酸、木犀草素苷等药理活性成分，对溶血性链球菌、金黄葡萄球菌等多种致病菌及上呼吸道感染致病病毒等有较强的抑制力，另外还可增强免疫力、抗早孕、护肝、抗肿瘤、消炎、解热、止血(凝血)、抑制肠道吸收胆固醇等，其临床用途非常广泛，可与其它药物配伍用于治疗呼吸道感染、菌痢、急性泌尿系统感染、高血压等40余种病症。

金银花茶有独特的减肥功能，还能抑制与杀灭咽喉部的病原菌，对老人和儿童有抗感染功效。经常服用金银花浸泡或煎剂有利于风火目赤、咽喉肿痛、肥胖症、肝热症和肝热型高血压的治疗与康复。金银花药用价值和保健用途广泛，社会需求量大。金银花的成色不同，药用效果也不同。传统的金银花由于受到其种植产地的气候、温度等条件的限制，其药用价值区别很大，远远不及道地药材的药理特性。为此，我们提出了一种金银花的品种改良方法投入使用，以解决上述问题。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种金银花的品种改良方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种金银花的品种改良方法，该改良方法的具体步骤如下：

s1：采用山东四季金银花与本地具有一种开花周期、凋谢时间长的金银花品种进行品种杂交；

s2：将杂交后的金银花种子在4月份播种，在播种前将种子在35～40℃温水中浸泡24h，取出拦2～3倍湿沙催芽，等裂口达30％左右时播种；

s3：在播种时，在畦上按行距21～22cm开沟播种，覆土1cm，每2天喷水1次，10余日即可出苗，秋后或第2年春季移栽，每1h㎡用种子15kg左右；

s4：最后以种植所繁殖的实生苗进行扦插育苗。

优选的，所述步骤s1中，杂交的流程如下：

s11：以本地金银花作为母本，山东金银花作为父本，在开花前1～2d，除去本地金银花的雄蕊，用塑封袋套袋后，挂上标签；

s12：在当日傍晚17时左右采集山东金银花花粉，并贮藏于4℃的冰箱中低温保存；

s13：翌日早上8时，对前天去雄的本地金银花授粉，至第三日早上8时再授粉一次，每次授粉后都要套袋；

s14：到11月份作用，收集成熟的金银花浆果，用清水将其表面灰尘清除，在无菌操作台上从浆果中取出种子；

s15：将杂交后的金银花种子用75％乙醇溶液浸泡60s后，再用次氯酸钠溶液表面消毒20min，无菌水漂洗三次后，接种在ms+ga35.0mg/l萌发培养基上，置于25℃温室中培养，每天光照24h；

s16：通过金银花种子的萌发获得无菌苗，在无菌苗株系扩大繁殖后，用过氧化物pod同工酶分析鉴定其杂种性。

优选的，所述步骤s16中，杂种性鉴定的方法为：

s161：对金银花无菌苗株系精确称取0.5g试管苗的嫩叶，置于预冷的研钵中，再加入0.3ml预冷的提取缓冲液，在冰上研磨至匀浆后，用冷冻离心12000r/min条件下离心20min，吸取上清液到ep管中，提取蛋白质；

s162：提取蛋白质提取液20μl，加入同体积的缓冲液，混匀后，ongoing微量进样针上样30μl，先在10ma条件下电泳，当溴酚蓝带跑至浓缩胶底部时，调节电压到20ma，整个电泳过程在4℃的低温下进行，电泳完成后，取出胶带，染色30min，当出现清晰的蓝色条带时，用9％的醋酸溶液固定并拍照。

优选的，所述的缓冲液由0.05mol/ltris-hcl缓冲液和20％的甘油混合而成。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明中的金银花经过改良后花蕾期超长，节间短，花蕾外露，采摘方便工效高，道地正品，有效成分含量高，花蕾大，集中，产量高，抗逆性强，直立性好，适应性广。

附图说明

图1为本发明改良流程图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

请参阅图1，本发明提供一种技术方案：一种金银花的品种改良方法，该改良方法的具体步骤如下：

s1：采用山东四季金银花与本地具有一种开花周期、凋谢时间长的金银花品种进行品种杂交，杂交的流程如下：

s11：以本地金银花作为母本，山东金银花作为父本，在开花前1～2d，除去本地金银花的雄蕊，用塑封袋套袋后，挂上标签；

s12：在当日傍晚17时左右采集山东金银花花粉，并贮藏于4℃的冰箱中低温保存；

s13：翌日早上8时，对前天去雄的本地金银花授粉，至第三日早上8时再授粉一次，每次授粉后都要套袋；

s14：到11月份作用，收集成熟的金银花浆果，用清水将其表面灰尘清除，在无菌操作台上从浆果中取出种子；

s15：将杂交后的金银花种子用75％乙醇溶液浸泡60s后，再用次氯酸钠溶液表面消毒20min，无菌水漂洗三次后，接种在ms+ga35.0mg/l萌发培养基上，置于25℃温室中培养，每天光照24h；

s16：通过金银花种子的萌发获得无菌苗，在无菌苗株系扩大繁殖后，用过氧化物pod同工酶分析鉴定其杂种性，杂种性鉴定的方法为：

s161：对金银花无菌苗株系精确称取0.5g试管苗的嫩叶，置于预冷的研钵中，再加入0.3ml预冷的提取缓冲液，在冰上研磨至匀浆后，用冷冻离心12000r/min条件下离心20min，吸取上清液到ep管中，提取蛋白质，缓冲液由0.05mol/ltris-hcl缓冲液和20％的甘油混合而成；

s162：提取蛋白质提取液20μl，加入同体积的缓冲液，混匀后，ongoing微量进样针上样30μl，先在10ma条件下电泳，当溴酚蓝带跑至浓缩胶底部时，调节电压到20ma，整个电泳过程在4℃的低温下进行，电泳完成后，取出胶带，染色30min，当出现清晰的蓝色条带时，用9％的醋酸溶液固定并拍照；

s2：将杂交后的金银花种子在4月份播种，在播种前将种子在35～40℃温水中浸泡24h，取出拦2～3倍湿沙催芽，等裂口达30％左右时播种；

s3：在播种时，在畦上按行距21～22cm开沟播种，覆土1cm，每2天喷水1次，10余日即可出苗，秋后或第2年春季移栽，每1h㎡用种子15kg左右；

s4：最后以种植所繁殖的实生苗进行扦插育苗。

金银花扦插繁殖：

一般在雨季进行。在夏秋阴雨天气，选健壮无病虫害的1～2年生枝条截成30～35cm，摘去下部叶子作插条，随剪随用。在选好的土地上，按行距1.6m、株距1.5m挖穴，穴深16～18cm，每穴5～6根插条，分散形斜立着埋土内，地上露出7～10cm，左右，填土压实(透气透水性好的沙质土为佳)。

扦插的枝条开根之前应注意遮阴，避免阳光直晒造成枝条干枯。也可采用扦插育苗；在7～8月间，按行距23～26cm，开沟，深16cm左右，株距2cm，把插条斜立着放到沟里，填土压实，以透气透水性好的沙质土为育苗土，开根最快，并且不易被病菌侵害而造成枝条腐烂。栽后喷一遍水，以后干旱时，每隔2天要浇水1遍，半月左右即能生根，第2年春季或秋季移栽。

金银花整形修剪：

剪枝是在秋季落叶后到春季发芽前进行，一般是旺枝轻剪，弱枝强剪，枝枝都剪，剪枝时要注意新枝长出后要有利通风透光。对细弱枝、枯老枝、基生枝等全部剪掉，对肥水条件差的地块剪枝要重些，株龄老化的剪去老枝，促发新枝。幼龄植株以培养株型为主，要轻剪，山岭地块栽植的一般留4～5个主干枝，平原地块要留1～2个主干枝，主干要剪去顶稍，使其增粗直立；

整形是结合剪枝进行的，原则上是以肥水管理为基础，整体促进，充分利用空间，增加枝叶量，使株型更加合理，并且能明显地增花高产。剪枝后的开花时间相对集中，便于采收加工，一般剪后能使枝条直立，去掉细弱枝与基生枝有利于新花的形成。摘花后再剪，剪后追施一次速效氮肥，浇一次水，促使下茬花早发，这样一年可收4次花，平均每667平方米可产干花150～200kg。

金银花田间管理：

追肥：栽植后的头1～2年内，是金银花植株发育定型期，多施一些人畜粪、草木灰、尿素、硫酸钾等肥料。栽植2～3年后，每年春初，应多施畜杂肥、厩肥、饼肥、过磷酸钙等肥料。第一茬花采收后即应追适量氮、磷、钾复合肥料，为下茬花提供充足的养分。每年早春萌芽后和第一批花收完时，开环沟浇施人粪尿、化肥等。每种肥料施用250g，施肥处理对金银花营养生长的促进作用大小顺序为：尿素+磷酸二氢铵，硫酸钾复合肥，尿素，碳酸氢铵，其中尿素+磷酸二氢铵、硫酸钾复合肥、尿素能够显著提高金银花产量，结合营养生长和生殖生长状况以及施肥成本，追肥以追施尿素+磷酸二氢铵(150g+100g)或250g硫酸钾复合肥为好。

金银花病虫防治：

褐斑病：叶部常见病害，造成植株长势衰弱。多在生长后期发病，8～9月份为发病盛期，在多雨潮湿的条件下发病重。发病初期在叶上形成褐色小点，后扩大成褐色圆病斑或不规则病斑。病斑背面生有灰黑色霉状物，发病重时，能使叶片脱落。防治方法：剪除病叶，然后用1:1.5:200比例的波尔多液喷洒，每7～10天1次，连续2～3次：或用65％代森锌500倍稀释液或托布津1000～1500倍稀释液，每隔7天喷1次，连续2～3次。

白粉病：在温暖干燥或植株荫蔽的条件下发病重；施氮过多，植株茂密，发病也重。发病初期，叶片上产生白色小点，后逐渐扩大成白色粉斑，继续扩展布满全叶，造成叶片发黄，皱缩变形，最后引起落花、落叶、枝条干枯。防治方法；清园处理病残株；发生期用50％托布津1000倍液或bo-10生物制喷雾。

蚜虫：危害叶片、嫩枝，引起叶片和花蕾卷曲，生长停止，产量锐减。4～6月虫情较重，“立夏”前后，特别是阴雨天，蔓延更快。防治方法：用40％乐果1000～1500倍稀释液或灭蚜松(灭蚜灵)1000～1500倍稀释液喷杀，连续多次，直至杀灭。

尺蠖：茬花后幼虫蚕食叶片，引起减产。防治方法：入春后，在植株周围1米内挖土灭蛹。幼虫发生初期，喷2.5％鱼藤精乳油400～600倍液；或用敌敌畏、敌百虫等喷杀，但花期要停止喷药。

炭疽病：叶片病斑近圆形，潮湿时叶片上着生橙红色点状黏状物。防治方法：清除残株病叶，集中烧毁；移栽前用1：1：150～200波尔多液浸种5～10分钟；发病期喷施65％代森锌500倍液或50％退菌特800～1000倍液。

天牛：植株受害后，逐渐衰老枯萎乃至死亡。防治方法：成虫出土时，用80％敌百虫1000倍液灌注花墩。在产卵盛期，7～10天喷1次90％敌百虫晶体800。1000倍液；发现虫枝，剪下烧毁；如有虫孔，塞入80％敌敌畏原液浸过的药棉，用泥土封住，毒杀幼虫。

金银花收获加工：

金银花采收最佳时间是清晨和上午，此时采收花蕾不易开放，养分足、气味浓、颜色好。下午采收应在太阳落山以前结束，因为金银花的开放受光照制约，太阳落后成熟花蕾就要开放，影响质量。不带幼蕾，不带叶子，采后放入条编或竹编的篮子内，集中的时候不可堆成大堆，应摊开放置，放置时间最长不要超过4小时。

金银花商品以花蕾为佳，混入开放的花或梗叶杂质者质量较逊。花蕾以肥大、色青白、握之干净者为佳。5、6月间采收，择晴天早晨露水刚干时摘取花蕾，置于芦席、石棚或场上雄开晾晒或通风阴干，以1～2天内晒干为好。晒花时切勿翻动，否则花色变黑而降低质量，至九成干，拣去枝叶杂质即可。忌在烈日下曝晒。阴天可微火烘干，但花色较暗，不如晒干或阴干为佳。

金银花改良后的特点：

1、花蕾期超长，节间短，花蕾外露，采摘方便工效高。大白期长，极大的延长了最佳采摘期，再也不用担心采摘稍晚就要开花凋谢，在采摘时间上更具有灵活性，一般每茬花集中采摘两次即可，另外该品种金银花节间短，叶片下垂、肥厚，花蕾集中外露，可以大把采收，每人每天可以采收鲜花60～100市斤，而传统金银花只能采收20～30市斤，采摘工效提高3～4倍，大大节省了人工成本，提高了金银花的经济效益。

2、道地正品，有效成分含量高。经过指纹图谱检测，该品种金银花和传统道地金银花完全一致，通过dna条形码分子鉴定，完全属于《中国药典》规定的正品金银花，经过国家法定食品药品检验所检测该品种金银花绿原酸含量3.20％，木犀草苷含量0.096％，分别比国家药典规定的高出110％和90％，比传统品种大毛花高出7％和78％。

3、花蕾大，集中，产量高。该品种金银花徒长枝很少，两年以上的花墩都是结花母枝，而且花蕾硕大，花针长，头茬花千蕾鲜花重300克左右，是普通金银花的2.5倍，而且花蕾期长，不易开花凋谢，减少了花落对产量的影响，从而提高了亩产量，亩产量可达100～150公斤，比传统金银花增产25％以上。

4、抗逆性强，直立性好，适应性广。该品种金银花既保留了传统品种的抗旱，耐寒，耐瘠薄，耐盐碱等优点，可在山区旱地，沟边地堰，边疆荒漠地区栽植，又具备主干直立性好，易培育成树型金银花的优点，方便了田间管理和鲜花采摘，提高了通风透光性和金银花的产量，也适宜平原地区，密植丰产园发展，并是生态绿化，美化城镇，旅游观光的优良植物。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。