]虹吸原理:就是连通器的原理，加在密闭容器里液体上的压强，处处都相等。而虹吸管里灌满水，没有气，来水端水位高，出水口用手掌或其他物体封闭住。此时管内压强处处相等。一切安置好后，打开出水口，虽然两边的大气压相等，但是来水端的水位高，压强大，推动来水不断流出出水口。管内最高点液体在重力作用下往低位管口处移动，形成真空，在真空作用下，高位管口的液体被吸进最高点，形成虹吸现象。
[0039]参考图1-图2，本发明中网格承载体I在纵截面上具有弧度，而所述卵子或胚胎玻璃化冷冻载体的网格承载体的弧度最底面贴合培养皿底部，另外，参考图3-图5，初始的时候胚胎11周围包裹有冷冻液12，培养皿16底部也添加有冷冻液15，通过拖杆拉动，在拖动过程中，流体的静摩擦力使网格承载体14上最底部的冷冻液的粘稠液体受到静摩擦力的阻力而转移到干净无液体的培养皿底部16，所述拖动过程类似于虹吸原理中对虹吸管需要初始施加一个真空吸力，进一步在网格承载体14和培养皿底部16通过网孔13形成液体桥梁后，即网格承载体的网孔与培养皿底部是一个液体桥梁，类似于虹吸原理中的虹吸管中的真空通道(具体请参考图3)，而通过虹吸原理可将势能高、压强大的网格承载体上的冷冻液继续压入培养皿底部，因此，网格承载体14的网孔13上的冷冻液通过液体桥梁不断往下转移；而基于液体表面张力将使所有的液体都有集中的趋势，即会产生所有液体都有均匀分布的趋势而使网格承载体14上胚胎周围的冷冻液体都往最底部的部分集中，进而转移到培养皿底部16，即最终将胚胎周围包裹的冷冻液转移为培养皿底部的多余冷冻液17。
[0040]下面基于上述的原理说明本发明实现的一种卵子或胚胎玻璃化冷冻保存方法，具体包括:卵子或胚胎平衡操作步骤、玻璃化冷冻液清洗步骤、胚胎装入载体步骤，其中，上述卵子或胚胎平衡操作步骤、玻璃化冷冻液清洗步骤均与现有技术类似，其中，卵子或胚胎平衡操作步骤具体主要是将胚胎置于7.5%乙二醇+7.5% 二甲基亚砜的培养液中放置10分钟左右；期间胚胎先经历皱缩的脱水；再经历从皱缩状态恢复到原大小的水分子被冷冻保护剂置换的过程。而玻璃化冷冻液清洗步骤具体主要是将胚胎置于15%乙二醇+15% 二甲基亚砜的玻璃化冷冻液中，清洗5-10遍直至卵子或胚胎平衡操作步骤中包裹在胚胎周围的低浓度平衡液清洗干净，这里不再赘述。
[0041]而对于所述胚胎装入载体步骤，本发明中主要包括以下具体步骤:
[0042]步骤11:将卵子或胚胎玻璃化冷冻载体的网格承载体置于15%乙二醇+15% 二甲基亚砜的玻璃化冷冻液中进行浸润；
[0043]步骤12:将完全侵润的卵子或胚胎玻璃化冷冻载体的网格承载体放置在培养皿内，具体实现时，最好将卵子或胚胎玻璃化冷冻载体的网格承载体放置在培养皿内是以网格承载体的弧度最底面贴合培养皿底部；
[0044]步骤13:将玻璃化冷冻操作步骤中的清洗后的胚胎吸入玻璃吸管，再转移至卵子或胚胎玻璃化冷冻载体的网格承载体上，并将玻璃吸管内所有剩余液体全部吹打到网格承载体表面；
[0045]步骤14:拖动卵子或胚胎玻璃化冷冻载体的拖杆，将该卵子或胚胎玻璃化冷冻载体的网格承载体在培养皿底部移动，使网格承载体上胚胎周围的冷冻液沿拖动方向转移到培养皿底部；
[0046]步骤15:拖动完成后，将卵子或胚胎玻璃化冷冻载体的网格承载体置于液氮中，完成冷冻操作。
[0047]虽然本发明的较佳实施例已揭露如上，本发明并不受限于上述实施例，任何本技术领域内的技术人员，在不脱离本发明所揭露的范围内，当可作些许的改动与调整。
【主权项】
1.一种实现胚胎装入冷冻载体的系统，其特征在于，包括:培养皿和卵子或胚胎玻璃化冷冻载体，其中该卵子或胚胎玻璃化冷冻载体包括: 载体本体，与所述载体本体一体相连、拖拉所述载体本体的拖杆，其中所述载体本体为网格承载体，所述网格承载体在纵截面上具有弧度； 所述卵子或胚胎玻璃化冷冻载体的网格承载体的弧度最底面贴合培养皿底部，借助卵子或胚胎玻璃化冷冻载体的拖杆，该卵子或胚胎玻璃化冷冻载体的网格承载体随拖杆在培养皿底部移动使网格承载体中承载的卵子或胚胎周围的冷冻液沿拖动方向转移到培养皿底部。
2.根据权利要求1所述的系统，其特征在于，所述弧度为半圆弧。
3.根据权利要求1所述的系统，其特征在于，网格承载体的网格孔径为80-100um。
4.一种卵子或胚胎玻璃化冷冻载体，其特征在于，包括: 载体本体，与所述载体本体一体相连、拖拉所述载体本体的拖杆，其中所述载体本体为网格承载体，所述网格承载体在纵截面上具有弧度。
5.根据权利要求4所述的卵子或胚胎玻璃化冷冻载体，其特征在于，所述弧度为半圆弧。
6.根据权利要求4所述的卵子或胚胎玻璃化冷冻载体，其特征在于，网格承载体的网格孔径为80-100um。
7.—种卵子或胚胎玻璃化冷冻保存方法，包括:卵子或胚胎平衡操作步骤、玻璃化冷冻液清洗步骤、胚胎装入载体步骤，其特征在于，所述胚胎装入载体步骤包括有: 步骤11:将卵子或胚胎玻璃化冷冻载体的网格承载体置于15%乙二醇+15% 二甲基亚砜的玻璃化冷冻液中进行浸润； 步骤12:将完全侵润的卵子或胚胎玻璃化冷冻载体的网格承载体放置在培养皿内；步骤13:将玻璃化冷冻操作步骤中的清洗后的胚胎吸入玻璃吸管，再转移至卵子或胚胎玻璃化冷冻载体的网格承载体上，并将玻璃吸管内所有剩余液体全部吹打到网格承载体表面； 步骤14:拖动卵子或胚胎玻璃化冷冻载体的拖杆，将该卵子或胚胎玻璃化冷冻载体的网格承载体在培养皿底部移动，使网格承载体上胚胎周围的冷冻液沿拖动方向转移到培养皿底部； 步骤15:拖动完成后，将卵子或胚胎玻璃化冷冻载体的网格承载体置于液氮中，完成冷冻操作。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，步骤12中将卵子或胚胎玻璃化冷冻载体的网格承载体放置在培养皿内是以网格承载体的弧度最底面贴合培养皿底部。
9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，卵子或胚胎平衡操作步骤具体为: 将胚胎置于7.5%乙二醇+7.5% 二甲基亚砜的培养液中放置10分钟左右；期间胚胎先经历皱缩的脱水；再经历从皱缩状态恢复到原大小的水分子被冷冻保护剂置换的过程。
10.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，玻璃化冷冻液清洗步骤具体为:将胚胎置于15%乙二醇+15% 二甲基亚砜的玻璃化冷冻液中，清洗5-10遍直至卵子或胚胎平衡操作步骤中包裹在胚胎周围的低浓度平衡液清洗干净。
【专利摘要】本发明公开一种实现胚胎装入冷冻载体的系统、冷冻载体及冷冻保存方法，其中卵子或胚胎玻璃化冷冻载体包括：载体本体，与所述载体本体一体相连、拖拉所述载体本体的拖杆，其中所述载体本体为网格承载体，所述网格承载体在纵截面上具有弧度；由于卵子或胚胎玻璃化冷冻载体的所述网格承载体在纵截面上具有弧度，在网格承载体和培养皿底部形成液体桥梁后，通过虹吸原理可将势能高、压强大的网格承载体上的液体继续压入培养皿底部，从而可以在胚胎装入玻璃化冷冻载体时减少包裹卵子/胚胎周围冷冻保护剂体积。
【IPC分类】A01N1-02
【公开号】CN104855371
【申请号】CN201410062556
【发明人】张孝东, 黄国宁
【申请人】张孝东
【公开日】2015年8月26日
【申请日】2014年2月24日