oxin activity. Microbiol Mol Biol. Rev. 71, 255-281.
[0127] Rausell, C. , Garcia-Roblesj I. , Sanchez, J. , Munoz-Garayj C. , Martinez-Ramir ez, A. C. , Real, M. D. , and BravojA. (2004). Role of toxin activation on binding and pore formation activity of the Bacillus thuringiensis Cry3 toxins in membranes of Leptinotarsa decemlineata(Say). Biochim. Biophys Acta 1660,99-105.
[0128] Roush RT. Two-toxin strategies for management of insecticidal transgenic crops:can pyramiding succeed where pesticide mixtures have not ? Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci.1998 Oct 29 ；353 (1376):1777 - 1786.
[0129] Van，R. J.，Jansens，S.，Hofte，H.，Degheele，D.，and Van，M. H. (1990a). Receptors on the brush border membrane of the insect midgut as determinants of the specificity of Bacillus thuringiensis delta-endotoxins.Appl Environ Microbiol 56, 1378-1385.
[0130] Heckel, D. G. , Gahan, L. J. , Baxter, S. W. , Zhao, J. Z. , Shelton, A. M. , Gould, F. , and Tabashnik, B. E. (2007). The diversity of Bt resistance genes in species of Lepidoptera. J Invertebr Pathol 95, 192-197.
[0131] Luo, K. , Banks, D. , and Adang, M. J. (1999). Toxicity, binding, and permeability analyses of four bacillus thuringiensis cry I delta-endotoxins using brush border membrane vesicles of spodoptera exigua and spodoptera frugiperda. Appl. Environ. Microbiol. 65, 457-464.
[0132] Palmer，M.，Buchkremer，M，Valeva，A，and Bhakdi, S. Cysteine-specific radioiodination of proteins with fluorescein maleimide.Analytical Biochemistry253, 175-179. 1997.
[0133] Ref Type: Journal (Full)
[0134] Sambrook, J. and RusselljD. W. (2001). Molecular Cloning: A Laboratory Manual. Cold Spring Harbor Laboratory).
[0135] Schlenz, M. L. , Babcock, J. M. , and Storer, N. P. Response of CrylF-resistant and Susceptible European Corn Borer and Fall Armyworm Colonies to Cry1A.105 and Cryl2Ab2. DAI 0830, 2008. Indianapolis,Dow AgroSciences. Derbi Report.
[0136] Sheets, J. J. and Storer, N. P. Analysis of CrylAc Binding to Proteins in Brush Border Membrane Vesicles of Corn Earworm Larvae (Heleothis zea). Interactions with CrylF Proteins and Its Implication for Resistance in the Field. DAI-0417, 1-26. 2001. Indianapolis, Dow AgroSciences.
[0137] Tabashnik，B. E.，Liu，Y. B.，Finson，N.，Masson，L.，and Heckel，D. G. (1997) ? One gene in diamondback moth confers resistance to four Bacillus thuringiensis toxins. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A 94, 1640-1644.
[0138] Tabashnik, B. E. , Malvar, T. , Liu, Y. B. , Finson, N. , Borthakur, D. , Shin, B. S. , Park, S. H. , Masson, L. , de Maagd, R. A. , and BoschjD. (1996). Cross-resistance of the diamondback moth indicates altered interactions with domain II of Bacillus thuringiensis toxins.Appl. Environ. Microbiol. 62, 2839-2844.
[0139] Tabashnik，B. E.，Roush，R. T.，Earle，E. D.，and Shelton，A. M. (2000) ? Resistance to Bt toxins.Science 287,42.
[0140] Wolfersberger, M. G. (1993). Preparation and partial characterization of amino acid transporting brush border membrane vesicles from the larval midgut of the gypsy moth(Lymantria dispar). Arch. Insect Biochem. Physiol 24, 139-147.
[0141] Xu, X. , Yu, L. , and Wuj Y. (2005). Disruption of a cadherin gene associated with resistance to CrylAc {delta}-endotoxin of Bacillus thuringiensis in Helicoverpa armigera. Appl Environ Microbiol 71，948-954.
【主权项】
1. 一种转基因植物，其包含编码CrylEa杀虫蛋白的多核苷酸，和编码第二杀虫蛋白的 第二多核苷酸，所述第二杀虫蛋白选自下组：CryIAb,CrylBe,CrylCa,CrylDa,和Vip3Ab。2. 权利要求1的转基因植物，所述植物进一步包含编码第三杀虫蛋白的DNA。3. 根据权利要求1的植物的种子，其中所述种子包含所述异源多核苷酸。4. 根据权利要求3的植物的种子，其中所述种子包含所述异源多核苷酸。5. 植物田地，包含非Bt避难所植物和多个根据权利要求1的植物，其中所述避难所植 物占所述田地中全部作物植物的少于40%。6. 权利要求5的植物田地，其中所述避难所植物占所述田地中全部作物植物的少于 30%〇7. 权利要求5的植物田地，其中所述避难所植物占所述田地中全部作物植物的少于 20%〇8. 权利要求5的植物田地，其中所述避难所植物占所述田地中全部作物植物的少于 10%〇9. 权利要求5的植物田地，其中所述避难所植物占所述田地中全部作物植物的少于10. 权利要求5的植物田地，其中所述避难所植物形成地块或条垄。11. 一种组合物，包括来自非Bt避难所植物的避难所种子和多个权利要求3的种子，其 中所述避难所种子占该组合物中全部种子的少于40%。12. 权利要求11的组合物，其中所述避难所种子占该组合物中全部种子的少于30%。13. 权利要求11的组合物，其中所述避难所种子占该组合物中全部种子的少于20%。14. 权利要求11的组合物，其中所述避难所种子占该组合物中全部种子的少于10%。15. 权利要求11的组合物，其中所述避难所种子占该组合物中全部种子的少于5%。16. -种管理昆虫对Cry蛋白产生抗性的方法，所述方法包括种植种子以产生权利要 求5的植物田地。17. 权利要求5-10中任一项的田地，其中所述植物占地超过10英亩。18. 权利要求1的植物，其中所述植物选自下组：玉米、大豆、棉花、芥花和向日葵。19. 权利要求1的植物的植物细胞，其中所述植物细胞包含所述编码所述CrylEa杀虫 蛋白的多核苷酸，其中所述CrylEa杀虫蛋白与SEQIDNO:7至少95%相同。20. 权利要求1的植物，其中所述CrylEa杀虫蛋白包含SEQIDNO: 7。21. -种产生权利要求19的植物细胞的多核苷酸的方法，所述方法包括在多个所述细 胞内复制所述多核苷酸。22. -种控制秋粘虫昆虫的方法，所述方法包括向所述昆虫提供供经口摄取的CrylEa 杀虫蛋白和第二杀虫蛋白，所述第二杀虫蛋白选自下组：CryIAb,CrylBe,CrylCa,CrylDa, 和Vip3Ab。23. 权利要求1的植物的植物细胞，其中所述第二核苷酸编码CrylAb杀虫蛋白，并且其 中所述CryIAb杀虫蛋白与SEQIDNO:8至少95%相同。24. 权利要求1的植物，其中所述CrylAb杀虫蛋白包含SEQIDN0:8。25. 权利要求1的植物的植物细胞，其中所述植物细胞包含所述编码CrylBe杀虫蛋白 的所述分离多核苷酸，其中所述CrylBe杀虫蛋白与SEQIDN0:9至少95%相同。26. 权利要求1的植物，其中所述CrylBe杀虫蛋白包含SEQIDN0:9。27. 权利要求1的植物的植物细胞，其中所述植物细胞包含编码所述CrylCa杀虫蛋白 的所述多核苷酸，其中所述CrylCa杀虫蛋白与SEQIDNO: 10至少95%相同。28. 权利要求1的植物，其中所述CrylCa杀虫蛋白包含SEQIDNO: 10。29. 权利要求1的植物的植物细胞，其中所述植物细胞包含编码所述CrylDa杀虫蛋白 的所述多核苷酸，其中所述CrylDa杀虫蛋白与SEQIDNO: 11至少95%相同。30. 权利要求1的植物，其中所述CrylDa杀虫蛋白包含SEQIDNO: 11。31. 权利要求1的植物的植物细胞，其中所述植物细胞包含编码所述Vip3Ab杀虫蛋白 的所述多核苷酸，其中所述Vip3Ab杀虫蛋白与SEQIDN0:6至少95%相同。32. 权利要求1的植物，其中所述Vip3Ab杀虫蛋白包含SEQIDN0:6。33. 权利要求22的方法，所述方法包括向所述昆虫提供第三杀虫蛋白。34. 权利要求1的植物的植物细胞。35. 权利要求2的植物的植物细胞。36. 权利要求18的植物的植物细胞。
【专利摘要】本发明包括用于控制秋粘虫(fall army worm)鳞翅目昆虫的方法和植物，所述植物含有Cry1Ea杀虫蛋白和选自下组的第二杀虫蛋白：Cry1Ab,Cry1Be,Cry1Ca,Cry1Da,和Vip3Ab，以延迟或防止昆虫产生抗性。
【IPC分类】A01P7/00, A01H1/00, A01H5/00
【公开号】CN104902744
【申请号】CN201380063218
【发明人】J·J·希茨, K·E·纳瓦, S·伯顿, E·A·考德威尔
【申请人】美国陶氏益农公司
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2013年10月4日
【公告号】CA2886787A1, EP2903413A1, US20140109263, WO2014055881A1