一种百合培养方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于植物栽培领域，尤其涉及一种百合培养方法。
【背景技术】
[0002] 随着人们对百合日益增长的消费需求，国内对百合种植的研宄也越来越深入与广 泛。通过对百合种球的处理及设施栽培，使得原本只能秋植的百合一年四季皆可种植与开 花。传统的百合栽培，以地栽为主，由于封粘重易板结，容易滋生各种土传病，不利于百合生 长，进而严重影响了百合的品质，尽管每年都要对封进行消毒与改良，但效果不明显。百合 忌连作，种植过百合的土壤，通常要间隔四年左右再种植，才能保证百合的相对品质，对于 专业业种植百合者来说，土地利用率太低。因此，开发选择一种百合快速繁育种球，不受土 地资源限制的栽培方法及其应用方法，对于满足人们日益增长的百合消费需求，提高百合 种球繁育，缓解土地资源压力和种球需求，具有重大意义。
[0003] 传统的百合繁殖方法主要采用常规分球、分珠芽鳞片扦插、鳞片包埋等。但采用这 些方法繁殖，繁殖系数较小不能满足大面积生产对种苗的需求，特别是经多代分殖以后，常 造成种性退化，甚至病毒积累，影响百合的产量和质量。利用组织培养技术，能够迅速去除 病毒和更新品种，加快了百合的快速繁殖速度，缩短了百合的生育周期。在百合杂交育种 中也存在着基因库贫乏、种间杂交不亲和等局限性，而组织培养技术则可克服这些弊端。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于提供一种百合培养方法，旨在解决传统的百合栽培方法土地利 用率低，容易造成种性退化和病毒积累的问题。
[0005] 本发明是这样实现的，一种百合培养方法包括百合胚无菌培养方法、百合快速组 培方法、百合黑暗变温立体育种方法；
[0006] 所述百合胚无菌培养方法以百合幼胚为外植体在无菌条件下进行胚的离体培养， 观察不同百合胚的萌发和生长情况，并选出适合百合胚在无菌条件下萌发\增殖和生根的 培养基；
[0007] 所述百合快速组培方法采用鳞片作为外植体进行诱导后再进行初代培养，将生长 最好的愈伤组织切割成适当大小，移栽到最适培养基中，继代培养后移栽组培苗；
[0008] 所述百合黑暗变温立体育种方法将从鳞茎上剥取的鳞片放到培养箱里，洗净除菌 处理后，置于暗光中，在变温条件下培养。
[0009] 进一步，所述百合胚无菌培养方法将不同品种的百合和在不同剂量的培养基中无 菌培养，具体包括：
[0010] 步骤一、胚培养：取授粉后的蒴果，在无菌条件下用75%酒精棉球擦拭表面，再用 〇. 1 %的升汞溶液浸泡15min，然后再用无菌水冲洗；在无菌接种箱里将蒴果切开，选取有 胚种子剥取种胚，接种到培养基MS+6-BA0. lmg/L+NAAO. 2mg/L上，放置到培养室培养；
[0011] 步骤二、增殖培养：在无菌条件下，将胚培养所得幼苗的鳞片剥离，移 植到MS+NAAO. Olmg/L+6-BAO~1.0 mg/L的增殖培养基上，6~BA浓度分别为 0\0. 25\0. 5\0. 75\1. Omg/L.
[0012] 步骤三、生根培养：将所得种苗接种在MS+6-BA1. Omg/L+2. 4-DO. 5mg/L+NAA0~ I. 〇mg/L的生根培养基上，NAA的浓度分别为0\0. 2\0. 5\0. 75\1. Omg/L，分为加质量比 0.1 %的活性炭与不加活性炭两种情况。
[0013] 进一步，所述百合快速组培方法中的继代培养包括：
[0014] 步骤一、丛生芽的诱导：将继代培养后的愈伤组织接种到不同配比初代培养基上 进行培养；
[0015] 步骤二、增殖继代培养：取培养出来的初生代丛生芽，将茎切成数段，接种到继代 培养基上，待腋芽萌发，并于切口处膨大形成愈伤组织，培养若干天；
[0016] 步骤三、生根培养：将丛生芽切割下来，转入生根培养基中，接种在MS+NAAO. 5mg/ L或ΙΒΑ0. 5mg/L的培养基中。
[0017] 进一步，百合快速组培方法中，培养基是以MS为基本培养基，附加不同激素构成 的；诱导和分化培养基，附加白糖30g/L，生根培养基附加白糖20g/L，优选0. lmg/1 NAA和 1. 0mg/l的BA单独或混合使用。
[0018] 进一步，百合快速组培方法中，根据MS培养基中元素分类，分为以下四种母液：
[0019] 母液 I :NH4N03、KN03、CaCl2 · 2H20、MgSO4 · 7H20、KH2PO4;
[0020] 母液 II :KI、H3BO3' MnSO4 · 4H20、ZnSO4 · 7H20、Na2MoO4 · 2H20、CuSO4 · 5H20、 CoCl2 · 6H20 ;
[0021] 母液III :FeS04 · 7H20、Na2-EDTA · 2H20 ;
[0022] 母液IV :肌醇、烟酸、盐酸吡哆醇、盐酸硫胺素、甘氨酸。
[0023] 进一步，母液I、母液II及母液IV的配制方法是：每种母液中的几种成分称量完毕 后，分别用少量的蒸馏水彻底溶解，然后再将它们混溶，最后定容；
[0024] 母液III的配制方法是：将称好的FeSO4 · 7H20和Na2-EDTA · 2H20分别放到蒸馏水 中，边加热边不断搅拌使它们溶解，然后将两种溶液混合，并将pH调至5. 5,最后定容。
[0025] 使用百合黑暗变温立体育种方法能够减短种球的形成时间，利用组织培养技术， 能够迅速去除病毒和更新品种，加快了百合的快速繁殖速度，缩短了百合的生育周期，通 过对胚的无菌培养，能有效的缩短百合种籽的培育周期。
【附图说明】
[0026] 图1是本发明实施例提供的百合胚无菌培养方法流程图；
[0027] 图2是本发明实施例提供的百合快速组培方法流程图。
【具体实施方式】
[0028] 为能进一步了解本发明的
【发明内容】
、特点及功效，兹例举以下实施例，并配合附图 详细说明如下。
[0029] 本发明是这样实现的，一种百合培养方法包括百合胚无菌培养方法、百合快速组 培方法、百合黑暗变温立体育种方法；
[0030] 所述百合胚无菌培养方法以百合幼胚为外植体在无菌条件下进行胚的离体培养， 观察不同百合胚的萌发和生长情况，并选出适合百合胚在无菌条件下萌发\增殖和生根的 培养基；
[0031] 实施例1
[0032] 食用百合（松花岭1号）的胚选择及培养基：
[0033] 步骤a:采集松花岭1号授粉后30~60d的蒴果，在无菌条件下用75%酒精棉球 擦拭表面3次，再用0. 1 %的升汞溶液浸泡15min，然后再用无菌水冲洗3次.在无菌接 种箱里将蒴果切开，选取有胚种子剥取种胚，接种到培养基MS+6-BA0. lmg/L+NAAO. 2mg/L 上，放置到培养室培养，温度为24°C~27°C，光照3000Lx，光照时数12h/d ;
[0034] 步骤b:在无菌条件下，将胚培养所得幼苗的鳞片剥离，移植到MS+NAAO. Olmg/ L+6-BA0~1.0 mg/L的增殖培养基上培养.6~BA浓度分别为0\0. 25\0. 5\0. 75\1. Omg/L ;
[0035] 步骤 c:将所得种苗接种在 MS+6-BA1. Omg/L+2. 4-DO. 5mg/L+NAA0 ~1.0 mg/L 的生 根培养基上，NAA的浓度分别为0\0. 2\0. 5\0. 75\1. Omg/L，分为加活性炭（0. 1 % )与不加 活性炭两种情况；
[0036] 步骤d:观察每种培养基，记录生长情况。
[0037] 实施例2
[0038] 药用百合（铁炮百合）的胚选择及培养基：
[0039] 步骤a:采集铁炮百合授粉后30~60d的蒴果，在无菌条件下用75%酒精棉球擦 拭表面3次，再用0. 1 %的升汞溶液浸泡15min，然后再用无菌水冲洗3次.在无菌接种箱 里将蒴果切开，选取有胚种子剥取种胚，接种到培养基MS+6-BA0. lmg/L+NAA0. 2mg/L上， 放置到培养室培养，温度为24°C~27°C，光照3000Lx，光照时数12h/d ;
[0040] 步骤b:在无菌条件下，将胚培养所得幼苗的鳞片剥离，移植到MS+NAAO. Olmg/ L+6-BA0~I. 0mg/L的增殖培养基上培养.6~BA浓度分别为0\0. 25\0. 5\0. 75\1. 0mg/L ;
[0041] 步骤 c:将所得种苗接种在 MS+6-BA1. Omg/L+2. 4-DO. 5mg/L+NAA0 ~1.0 mg/L 的生 根培养基上，NAA的浓度分别为0\0. 2\0. 5\0. 75\1. 0mg/L，分为加活性炭（0.1 % )与不加 活性炭两种情况；
[0042] 步骤d:观察每种培养基，记录生长情况。
[0043] 实施例3
[0044] 观赏百合（西伯利亚））的胚选择及培养基：