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[0225] 来自ARISA分析的结果表明，当应用20/50时，在一些组中，洋葱根际土壤具有显 著不同的微生物种群。γ变形菌随着更多的产品应用而增加（古生菌和双核亚界也是如 此），而放线菌下降。
[0226] 表9:收获结果
[0229] 在播种后立即采用20/50处理床，并在4周后再次进行处理促进了收获重量中的 显著增加，和球茎之间的可变性降低。在未处理的对照中，25%的收成是滞销的，原因是小 尺寸的球茎或变形的球茎，而在处理过的组中的损失率远低于3%。总体而言，当按IOL/ 公顷应用时，20/50发酵剂产生了可市售洋葱的67%的增长，当以20L/公顷应用时，产生了 94%的增长。
[0230] 这些增加都与根部双核亚界和γ变形菌的显著增加以及根部放线菌的减少相 关。
[0231] 实施例5 :原生植物的再生长和恢复
[0232] 被指定用于原生植物再生长的区域分别位于Perth北方的Lake Gnangara(2012 年11月使用）周围按每株植物5ml的比率对该区域施用溶解在2L水中的20/50发酵剂
[0233] 在使用实施例2所述的技术应用20/50发酵剂后的4个月时，对来自从天然植物 再生长区域取样的不同植物的叶片组织的组成进行分析。结果提供于表10至表12中
[0234] 表10 :叶片组织结果-山龙眼
[0235]
[0241] 对从三种原生植物的根部采集的土壤样品中的微生物多样性进行了测试，还按照 上述实施例3中的技术对所述原生植物的叶片组织进行了测试。
[0242] 表13 :ARISA测定的结果
[0245] 一·相1比于未处理的植物，20/50发酵剂的应用增加了所测试的原生植物的叶片组织 中的测量的养分的水平，并对每个物种具有不同的影响。最恒定的增加是微量元素的摄取 的增加。
[0246] 20/50发酵剂还改变了根际的微生物分布。
[0247] 此外，应用发酵剂极大地促进了植物生长，如图11A/B至图14A/B所示。
[0248] 实施例6 :蔗糖的发酵：
[0249] 设置三个反应容器，其中的每一个容器含有814g鹿糖（cane sugar)(糖 (sucrose) )、80g尿素、40g硫酸镁、20g磷酸二氢钾和5g "Thrive"牌可溶性全肥料。向容 器1加入I. 45L水，向容器2加入0. 95L水并且向容器3加入0. 84L水。然后向所有容器 加入Ig酵母，将混合物搅拌，直到所有内容物都溶解。将每个容器密封，并且在接下来的70 天中将每个容器每天打开并将内容物剧烈搅拌，以释放出二氧化碳并在将容器再次密封之 前补充氧气。
[0250] 在70天的温育时间中周期性地重新获得样品以测量比重，pH值和电导率。
[0251] 在完成70天之后，加入柠檬酸和尿素至每一个为5 % (w/v)并溶解在发酵剂中。
[0252] 实施例7-发酵的蔗糖对作物生长的影响
[0253] 在2013年在Forrestdale采用如实施例2中所述的同样的方法，使用由蔗糖生产 的发酵剂产品。
[0254] 使用先前未被耕种的新的土壤区域。在试验的持续时间，不添加肥料。土壤分析 示出6. 9mg/kg的Colwell可提取磷酸盐，有机碳为0. 41 %且pH为6. 5。这被认为是低肥 沃力的土壤。
[0255] 在播种时按每公顷2L应用蔗糖发酵剂，和/或在两叶阶段（播种后3周）和/或 在分蘖（播种后5周）按每公顷4L应用蔗糖发酵剂。总共应用了七个不同的处理，并且与 未处理进行了比较，其中对于每个处理有4个重复。每个处理床为lm 2。
[0256] 于2013年6月14日播种Mace品种的小麦。于11月12日对每床进行收获，对粮 食进行了清理并且确定粮食重量。
[0257] 表14 :将20/50发酵剂应用于小麦生长的结果
[0259] 结果显示，在非常低肥沃力的土壤中，蔗糖发酵剂产生最小13 %、最大43 %的产 量提尚。
[0260] 实施例8 -不同发酵产品的组成的分析
[0261] 对不同的发酵土壤添加剂的组成进行了测定。通过获得二氯甲烷萃取物并将该提 取物进行LC/MS/MS分析来进行对有机物含量的分析。结果呈现于表16至表21和图15至 图21中。
[0262] 表15 :测试的发酵土壤添加剂产品
[0263]
[0268]
[0269] 样品3，过期的TM Ag产品，不含有可检测的有机化合物峰。
[0270] 表 18-样品 4 :Mycorrcin 的组成
[0271]
[0274]
[0275] 表20-样品6 :Bioprime 20/50发酵剂的组成
[0276]
[0287] 样品1至3中的总的有机碳是相当低的，低至3. 6%和I. 7%。似乎样品1至3是 由通常用于生产乙醇的浓度下但在足够的需氧条件下的糖基质发酵而成，从而形成酸但保 留很少的醇，因此基本不存在酯。样品2和样品3比样品1酿造得更慢，所以所产生的酸往 往具有更高的分子量。样品2和样品3是不稳定的，从而随着时间的推移活性有机分子完 全消失。在样品2和样品3中的大部分有机物（约80% )是丁酸。样品1至3都不含有除 了有机酸以外的信号传导分子，并且它们绝对不含有呋喃酮、烷基-2-酮、乙酮、植物激素、 酯和本发明的糖发酵剂的复杂酚。
[0288] 样品4和样品5具有31 %和34%的尚得多的总的有机碳。然而，这种碳的绝大部 分（约>97%)是钾黄腐的原因。样品4和样品5具有相当高的NPK含量，其未被披露于容 器上。如果处理时的植物生长，它很可能是因为养分受限被克服。看来，样品4和样品5包含 一些发酵产品，但该产品用山梨酸（非天然生成的）和苯甲酸（天然的，但不以这些比例） 补充以稳定该发酵剂产品。苯甲酸和山梨酸这两者都是杀真菌剂。尽管样品4(Myc 〇rrcin) 在产品标签上声称它含有信号传导分子，但我们的研宄表明，样品4或样品5两者都不含 有除了有机酸以外的信号传导分子，并且它们绝对不包含呋喃酮、烷基2-酮、乙酮、植物激 素、酯和本发明的糖发酵剂的复杂酚。
[0289] 样品6和样品7是标准的Bioprime (20/50发酵剂）混合料，显示高水平的复杂有 机分子。
[0290] 实施例9 -使用糖发酵剂以增加土壤润湿
[0291] 测试对生长有小麦和燕麦的非润湿土壤的增加土壤的湿润的能力。测试的围场至 少在过去的六年中都是无生产力的。在播种后的3周（作物生长的两叶阶段）时，按3L/ 公顷加入Bioprime (20/50发酵剂）。生产从近零产量提高到了 4吨/公顷作物。
[0292] 使用在实施例3中讨论的技术进行的土壤的ARISA分析表明了微生物区系已经发 生了明显的变化。这种变化消除了土壤的非润湿性质。据信，这是Bioprime应用持续地增 加放线菌的多样性的结果，已知放线菌代谢由变形菌产生的蜡。这类蜡作为干燥胁迫响应 产生，但通过包覆土壤颗粒使它们为非润湿的。对非润湿农场土壤的现有处理是使用粘土。 Bioprime 20/50发酵剂的应用产生了比任何所报道的用粘土处理实验更好的对非润湿性 的逆转。
[0293] 实施例10-对葡萄作物利用土壤添加剂
[0294] 将20/50发酵剂施用至三个品种的鲜食葡萄的藤：Red Globe、红Crimson Seedless 和 Flame Seedless，它们生长在西澳洲的 Swan Valley。
[0295] 施用两周后，对叶片进行取样并利用实施例1描述的技术分析。结果列于表28中。
[0296] 使用实施例3描述的ARISA技术测定土壤微生物种群的多样性。结果列于表22 中，并整理于表23和图22中。
[0297] 土壤DNA结果示出了在应用20/50发酵剂后整体土壤生物多样性的由平均678的 OTU (未处理区域）上升至平均763的明显增加。
[0298] 表22-三个葡萄品种的微生物分布分析
[0299]
[0300] 表23 :微生物分布分析的综合结果
[0301]
[0304] 相比于未处理的植物，发现20/50发酵剂的应用增加了测试的葡萄品种中的叶片 组织中的测量的养分的水平，并对每种类型的葡萄具有不同的影响。最恒定的增长是微量 元素的摄取的增加。
[0305] 20/50发酵剂还改变了根际微生物分布，其中相对降低了属于β变形菌的细菌的 多样性和优势，并增加了属于双核亚界的占优势分类群的数量。
[0306] 基于与公开的本发明相关的上述教义，实施本发明的各个实施方案的上述模式的 修改对于那些本领域的技术人员是显而易见的。本发明的上述实施方案仅仅是示例性的， 并且不应以任何方式解释成限制性的。
【主权项】
1. 一种包含糖发酵剂的土壤添加剂，其中所述发酵剂含有信号传导分子，所述信号传 导分子包含存在于所述发酵剂中的约1-50 %的有机物质。2. 根据权利要求1所述的土壤添加剂，其中所述信号传导分子选自下列组中的一者或 多者：微生物群体感应剂和淬灭剂、灭微生物剂和/或植物激活剂。3. 根据权利要求1所述的土壤添加剂，其中所述信号传导分子选自以下的一者或多 者：酚类化合物和/或有机酸。4. 根据权利要求1所述的土壤添加剂，其中所述糖发酵剂含有信号传导分子，所述 信号传导分子包含存在于所述发酵剂中的约1-50 %、5-50 %、10-45 %、15-40 %、20-40 %、 20-30 %或20-25 %的有机物质。5. -种包含糖蜜发酵剂的土壤添加剂，其中所发酵剂含有信号传导分子，所述信号传 导分子包含存在于所述发酵剂中的约20-25 %的有机物质。6. -种用于生产土壤添加剂的方法，所述方法包括以下步骤： a)在高代谢胁迫的条件下用微生物发酵糖 其中所述高代谢胁迫的条件导致通过所述微生物产生高水平的信号传导分子。7. 根据权利要求6所述的方法，其中产生的糖发酵剂含有信号传导分子，所述信号传 导分子包含存在于所述发酵剂中的约1-50 %的有机物质。8. 根据权利要求6或7所述的方法，其中所述高代谢胁迫通过一个或多个选自包括以 下的列表的条件提供：高离子强度、高渗透压和/或厌氧或氧化胁迫。9. 根据权利要求8所述的方法，其中所述高代谢胁迫通过高离子强度和高渗透压和氧 化胁迫的组合提供。10. 根据权利要求5所述的方法，其中所述高离子强度和高渗透压通过将所述发酵混 合物中的水量减少至所述发酵混合物中的固体体积的〇. 5倍和至4. 0倍（v/v)之间来产 生。11. 根据权利要求5所述的方法，其中所述氧化胁迫通过将氧水平降至约0. 1和 8. 5ppm之间的溶解02来产生。12. -种用于调节土壤的试剂盒，所述试剂盒包含： a) 包含糖发酵剂的土壤添加剂，其中所述发酵剂含有信号传导分子，所述信号传导分 子包含存在于所述发酵剂中的约1-50% (w/w)的有机物质；和 b) 用于施用所述土壤添加剂的说明书。13. -种用于调节土壤的方法，所述方法包括以下步骤： a)向所述土壤加入一定量的包含糖发酵剂的土壤添加剂，其中所述发酵剂含有信号传 导分子，所述信号传导分子包含存在于所述发酵剂中的约1-50% (w/w)的有机物质。14. 一种用于促进植物生长和/或增加作物产量的方法，所述方法包括以下步骤： a)向所述土壤加入一定量的包含糖发酵剂的土壤添加剂，其中所述发酵剂含有信号传 导分子，所述信号传导分子包含存在于所述发酵剂中的约1-50% (w/w)的有机物质。15. -种用于改变根际微生物区系的种群组成的方法，所述方法包括以下步骤： a)向所述土壤加入一定量的包含糖发酵剂的土壤添加剂，其中所述发酵剂含有信号传 导分子，所述信号传导分子包含存在于所述发酵剂中的约1-50% (w/w)的有机物质。16. -种用于增加土壤的润湿的方法，所述方法包括以下步骤：
【专利摘要】一种包含糖发酵剂的土壤添加剂，其中所述发酵剂含有信号传导分子，所述信号传导分子包含存在于所述发酵剂中的约1-50％的有机物质。
【IPC分类】A01N63/02, C05F11/10, C09K17/14, C05F5/00
【公开号】CN104936453
【申请号】CN201380070633
【发明人】P·J·基廷
【申请人】液体化肥系统有限公司
【公开日】2015年9月23日
【申请日】2013年11月29日
【公告号】CA2892962A1, EP2925139A1, WO2014082130A1