]S102:将SlOl的原料配制成溶液，搅拌均匀，调节PH值至7.30?7.50，过滤除菌；
[0030]S103:把新鲜同种异体骨软骨移植物经无菌生理盐水清洗3-5次，放入已配制好骨软骨移植物保存液中浸泡；
[0031]S104:将S103骨软骨移植物保存液放入4°C保存。
[0032]本发明的具体实施例:
[0033]如图2所示:
[0034]实施例1:每100ml骨软骨移植物保存液含葡萄糖80mmol、氨基酸2.0mmol、抗氧化剂0.5mmol，碱性成纤维细胞生长因子(bFGF) 60nmol、无机盐lmmol、维生素6mmol、丙酮酸钠2mmol、青霉素70U。余为去离子水，该骨软骨保存液的pH值为7.30?7.50。4°C保存。在保存第21天、35天时，对骨软骨组织的软骨细胞存活率进行检测。在保存第21天时，其细胞存活率为85%。
[0035]实施例2:每100ml骨软骨移植物保存液含葡萄糖lOOmmol、氨基酸0.lmmol、抗氧化剂0.2mmol，碱性成纤维细胞生长因子(bFGF) 25nmol、无机盐20mmol、维生素9mmol、丙酮酸钠lmmol、青霉素60U。余为去离子水，该骨软骨保存液的pH值为7.30?7.50。4°C保存。在保存第21天、35天时，对骨软骨组织的软骨细胞存活率进行检测。在保存第21天时，其细胞存活率为86%。
[0036]实施例3:每1000ml骨软骨移植物保存液含葡萄糖llOmmol、氨基酸0.5mmol、抗氧化剂1.3mmol，碱性成纤维细胞生长因子(bFGF) 5nmol、无机盐80mmol、维生素4mmol、丙酮酸钠1.5mmol、青霉素50U、余为去离子水，该骨软骨保存液的pH值为7.30?7.50。4°C保存。在保存第21天、35天时，对骨软骨组织的软骨细胞存活率进行检测。在保存第21天时，其细胞存活率为84%。
[0037]实施例4:每1000ml骨软骨移植物保存液含葡萄糖125mmol、氨基酸1.0mmol、抗氧化剂2.0mmol，碱性成纤维细胞生长因子(bFGF) 50nmol、无机盐120mmol、维生素lmmol、丙酮酸钠lmmol、青霉素55U、余为去离子水，该骨软骨保存液的pH值为7.30?7.50。4°C保存。在保存第21天时，其细胞存活率为85%。
[0038]本发明中无机盐能有效保持保存液酸碱平衡及细胞渗透压；葡萄糖、氨基酸能有效为细胞提供能量及营养物质来源；抗氧化剂能有效抵抗细胞衰老；碱性成纤维细胞生长因子能有效促进软骨细胞再生。调PH值为7.30?7.50适于组织细胞的体外生长，4°C保存有利于降低组织细胞代谢率，减轻组织再损伤，延长保存时间。
[0039]以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1.一种骨软骨移植物保存液，其特征在于，每100ml的骨软骨移植物保存液包括:葡萄糖80?125mmol、氨基酸0.1?2.0mmol、抗氧化剂0.2?2.0mmol、碱性成纤维细胞生长因子5?60nmol、无机盐I?120mmol、维生素I?9mmol、丙酮酸钠I?2mmol、青霉素50?70U、余为去离子水。2.如权利要求1所述的骨软骨移植物保存液，其特征在于，该骨软骨保存液的PH值为7.30 ?7.50 ;4°C保存。3.如权利要求1所述的骨软骨移植物保存液，其特征在于，每100ml骨软骨移植物保存液含葡萄糖lOOmmol、氨基酸0.lmmol、抗氧化剂0.2mmol，碱性成纤维细胞生长因子25nmol、无机盐20mmol、维生素9mmol、丙酮酸钠lmmol、青霉素60U，余为去离子水。4.如权利要求1所述的骨软骨移植物保存液，其特征在于，每1000ml骨软骨移植物保存液含葡萄糖llOmmol、氨基酸0.5mmol、抗氧化剂1.3mmol，碱性成纤维细胞生长因子5nmol、无机盐80mmol、维生素4mmol、丙酮酸钠1.5mmol、青霉素50U、余为去离子水。5.如权利要求1所述的骨软骨移植物保存液，其特征在于，每1000ml骨软骨移植物保存液含葡萄糖125mmol、氨基酸1.0mmol、抗氧化剂2.0mmol，碱性成纤维细胞生长因子50nmol、无机盐120mmol、维生素lmmol、丙酮酸钠lmmol、青霉素55U、余为去离子水。6.一种如权利要求1所述的骨软骨移植物保存液，其特征在于，该骨软骨移植物保存液的制备方法包括如下步骤: 步骤一，取葡萄糖、氨基酸、抗氧化剂、碱性成纤维细胞生长因子、无机盐、维生素、丙酮酸钠、青霉素和去离子水； 步骤二，将步骤一的原料配制成溶液，搅拌均匀，调节PH值至7.30?7.50，过滤除菌； 步骤三，把新鲜同种异体骨软骨移植物经无菌生理盐水清洗3-5次，放入已配制好骨软骨移植物保存液中浸泡； 步骤四，将步骤三骨软骨移植物保存液放入4°C保存。7.一种如权利要求1所述的骨软骨移植物保存液在骨软骨组织库的应用。8.一种如权利要求1所述的骨软骨移植物保存液在临床同种异体骨软骨移植术治疗关节软骨损伤的应用。
【专利摘要】本发明公开了一种骨软骨移植物保存液及其制备方法，包括：葡萄糖80～125mmol、氨基酸0.1～2.0mmol、抗氧化剂0.2～2.0mmol、碱性成纤维细胞生长因子5～60nmol、无机盐1～120mmol、维生素1～9mmol、丙酮酸钠1～2mmol、青霉素50～70U、余为去离子水；配制成溶液，调节PH值至7.30～7.50，过滤除菌；把新鲜同种异体骨软骨移植物经无菌生理盐水清洗3-5次，放入已配制好骨软骨移植物保存液中浸泡；4℃保存。本发明抵抗保存中软骨细胞衰老、抑制软骨细胞凋亡、保持软骨组织的良好生物学活性、维持软骨细胞存活率、延长保存时间、提高骨软骨移植物保存效果的功效。
【IPC分类】A01N1/02
【公开号】CN104938476
【申请号】CN201510093497
【发明人】亓建洪, 刘召庆, 宋洪强, 陈彬, 张延明, 谢地
【申请人】泰山医学院
【公开日】2015年9月30日
【申请日】2015年3月2日