br>[0037] 在配置诱导丛生芽的培养基和诱导生根培养基时：
[0038] (a)配制1/2MS基础母液。
[0039] (b)按照表1所述的生根培养基配方，称取适量琼脂、白砂糖和活性炭，将琼脂倒 入煮沸自来水中溶解，再倒入白砂糖和活性炭直至溶解后保温备用。
[0040] (C)将洗净去皮的香蕉和土豆切成小块，然后放入榨汁机中粉碎，得到的匀浆即为 香蕉汁和土豆汁。
[0041] (d)将母液、花宝二号、琼脂、白砂糖、活性炭、香蕉汁和土豆汁按一定比例定容后， 分装到培养瓶，高温灭菌。
[0042] (e)于超净工作台中，将硝酸钐和硝酸铕分别溶于无菌水，经孔径为0. 22 μπι的过 滤灭菌器过滤灭菌，再用移液枪分装到（d)中所述每一瓶灭完菌的培养基中，趁热摇匀。 [0043] 在配制生根培养基时，除各种营养元素母液采用蒸馏水配制外，其他组分均可采 用自来水进行配制，可以间接简化程序和降低成本。
[0044] (3)组培苗接种及培养
[0045] 于超净工作台中进行接种，用经过高温消毒的镊子小心将1~2厘米铁皮石斛组 培苗从培养瓶中取出，放置在预先消毒的大培养皿上，挑选出其中长势均一的幼苗，一根根 插入到实施例1~8的诱导丛生芽的诱导培养基中，每瓶接种15株，培养的条件为：温度 22~26°C，光照强度2000~30001x，光暗交替16h/8h。经7周左右的诱导生长，幼苗长到 3~4厘米。选取其中长势整齐的组培苗，用经过高温消毒的镊子从组培瓶中取出，放在灭 过菌的大培养皿上，用预先灭菌的剪刀将缠绕在一起的根剪短，保留2厘米左右，再一根根 插入到诱导生根培养基中，培养的条件为：温度22~26°C，光照强度2000~25001x，光暗 交替 12h/12h。
[0046] 实施例1~8接种到诱导丛生芽的培养基后，3周左右即可观察到有丛生芽长出， 7周左右幼苗数量明显增多。将实施例1~8接种到诱导丛生芽的培养基中生长7周，对各 瓶中的组培苗数量进行统计，实验数据见表3,生长情况见图1。
[0047] 表3实施例1~8诱导丛生芽的诱导7周后实验数据
[0048]
[0049]
[0050] 由表3可以看出，实施例1号、2号、3号、4号、5号、6号的组培苗丛生芽的诱导效 果优于实施例7号和8号的对照组，说明稀土元素硝酸钐有助于诱导丛生芽，增加组培苗数 目。其中实施例2号和3号的效果最佳，说明硝酸钐的浓度在10mg/L时，诱导数目最多。
[0051] 实施例1~8接种到诱导生根培养基后，2周左右截断根部开始再生，同时有不定 根生成，4周左右根系粗壮且发达，即可达到炼苗出瓶。于4周左右，对每一瓶组培苗的根的 数量及粗壮程度进行统计，实验数据见表4,生长情况见图2、图3。
[0052] 表4实施例1~8诱导生根4周后实验数据
[0053]
[0054] 由表4可以看出，实施例1号、2号、3号、4号、5号、6号的组培苗生根效果优于实 施例7号和8号，根系发达，生长健壮，说明稀土元素硝酸铕有助于根的再生，同时增粗作用 明显。其中实施例2号和3号的效果最佳，说明浓度为10mg/L的硝酸铕诱导作用最明显。
[0055] 以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，凡未脱离本发明申请专利范围所做的 任何简单修改、均等变化与修饰，仍属于本发明的涵盖范围。
【主权项】
1. 一种利用稀土元素促进铁皮石斛丛生芽的诱导与生根培养基，其特征在于，所述丛 生芽的诱导培养基，是以1/2MS培养基为基础，其中加入花宝二号1~3g/L、香蕉汁30~ 60g/L、土豆汁50~80g/L、硝酸钐4~15mg/L、白砂糖15~30g/L、活性炭1~3g/L、琼脂 6~8g/L ;所述生根培养基，是以1/2MS培养基为基础，其中加入花宝二号0. 5~3g/L、香 蕉汁30~60g/L、土豆汁50~80g/L、硝酸铕4~15mg/L、白砂糖15~30g/L、活性炭1~ 3g/L、琼脂 6 ~8g/L。2. 根据权利要求1所述的利用稀土元素促进铁皮石斛丛生芽的诱导与生根培养基，其 特征在于，如下组分在丛生芽的诱导培养基中的浓度分别为：花宝二号1~2g/L、香蕉汁 40~60g/L、土豆汁60~80g/L、硝酸钐4~12mg/L、白砂糖30g/L、活性炭L 5g/L、琼脂 7. 2g/L ;如下组分在生根培养基中的浓度分别为：花宝二号1~2g/L、、香蕉汁40~60g/L、 土豆汁60~80g/L、硝酸铕4~12mg/L、白砂糖30g/L、活性炭I. 5g/L、琼脂7. 2g/L。3. 根据权利要求2所述的利用稀土元素促进铁皮石斛丛生芽的诱导与生根培养基，其 特征在于，如下组分在丛生芽的诱导培养基中的浓度分别为：花宝二号lg/L、香蕉汁60g/ L、土豆汁80g/L、硝酸钐10mg/L、白砂糖30g/L、活性炭I. 5g/L、琼脂7. 2g/L ;如下组分在生 根培养基中的浓度分别为：花宝二号lg/L、、香蕉汁60g/L、土豆汁80g/L、硝酸铕10mg/L、白 砂糖30g/L、活性炭I. 5g/L、琼脂7. 2g/L。4. 根据权利要求1~3之一所述的利用稀土元素促进铁皮石斛丛生芽的诱导与生根 培养基，其特征在于，硝酸钐和硝酸铕按下列方法添加到培养基：现将未添加硝酸钐和硝酸 铕的培养基高温灭菌，在培养基未冷却前，于超净工作台中，硝酸钐和硝酸铕分别溶于无菌 水，经孔径为0. 22 ym的过滤灭菌器过滤灭菌，再用移液枪分装到每一瓶培养基中，趁热摇 匀。5. -种利用稀土元素促进铁皮石斛丛生芽的诱导与生根培养方法，其特征在于：包括 以下步骤： (1) 诱导丛生芽 铁皮石斛原球茎经过分化，长成具有根茎叶的幼苗，选择其中1~2厘米长势良好的幼 苗作为材料，接种于丛生芽的诱导培养基中，每瓶接种15株进行丛生芽的诱导；所述丛生 芽的诱导培养基，是以1/2MS培养基为基础，其中加入花宝二号1~3g/L、香蕉汁30~60g/ L、土豆汁50~80g/L、硝酸钐4~15mg/L、白砂糖15~30g/L、活性炭1~3g/L、琼脂6~ 8g/L ； (2) 诱导生根 选取经过丛生芽的诱导诱导长至3~4厘米的小苗，用剪刀将其缠绕结团的根部剪短， 保留2厘米左右，将小苗一根根分离，接种到生根培养基中进行生根诱导；所述生根培养 基，是以向1/2MS培养基为基础，其中加入花宝二号0. 5~3g/L、香蕉汁30~60g/L、土豆 汁50~80g/L、硝酸铕4~15mg/L、白砂糖15~30g/L、活性炭1~3g/L、琼脂6~8g/L ; (3) 炼苗与移栽 将组培瓶里的成苗放置在自然光下炼苗一周；再将瓶苗取出并洗净根部培养基后，移 栽至泥炭土和苔藓体积比为1:1的混合基质中进行培养。6. 根据权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤（2)中培养的条件为：温度22~ 26°C，光照强度2000~30001x，光暗交替16h/8h。7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，上述方法步骤（3)中，培养的条件为：温 度22~26°C，光照强度2000~25001x，光暗交替12h/12h。
【专利摘要】本发明提供了一种利用稀土元素促进铁皮石斛丛生芽的诱导和生根的培养基和培养方法。诱导培养基为向1/2MS培养基中加入一定量的花宝二号、硝酸钐、香蕉汁、土豆汁、活性炭、琼脂、白砂糖；生根培养基为向1/2MS培养基中加入一定量的花宝二号、硝酸铕、香蕉汁、土豆汁、活性炭、琼脂、白砂糖。该发明向培养基中增加适量的稀土元素，适量的稀土元素能够增加植物体内源激素的含量，使各种酶的活性增强，呼吸作用提高，有效清除组织内的H2O2，从而促进组培苗的生物量增加，获得更多且根系粗壮的组培苗。该方法具有简单易行，获得更多植株，生根时间短，根系发达，经济实用的优点，可大大提高组培苗移栽成活率，满足集约化生产的要求。
【IPC分类】A01H4/00
【公开号】CN105010140
【申请号】CN201510395987
【发明人】丁小余, 吴睿, 牛志韬
【申请人】南京师范大学
【公开日】2015年11月4日
【申请日】2015年7月7日