制备抗原标准菌株，毒杀鳞翅目昆虫。（5)Bacillusthuringienis subsp.merrisoniACCC-10031 -武汉微生物农药厂；原始编号：012 ;毒杀鳞翅目昆虫。（6) Bacillusthuringiensissubsp.galleriae苏云金杆菌錯螺亚种ACCC-10027 -中国科 学院微生物所；毒杀菜青虫。（7)Bacillusthuringiensissubsp.Israelensis苏云金杆 菌以色列亚种ACCC-10038 -成都华宏实业公司一山东泰安生物研究所一世界卫生组织 (WHO);杀灭蚊子幼虫?子效果较好。（8)Bacillusthuringienissubsp.thuringienis ACCC-10035 -中国农业科学院土壤肥料研究所；原始编号：D25 ;抗噬菌体毒杀玉米螟；分 离源：从HD-187 菌株中自然选育而得。（9)Bacillusthuringiensissuhsp.berliner苏 云金杆菌柏氏变种ACCC-10022 -中国农业科学院土壤肥料研究所；原始编号：D26 ;防治 鱗翅目昆虫；分离源：菌粉。（lO)Bacillusthuringiensissubsp.Dendrolimus苏云金杆 菌松蜀亚种ACCC-10062 -苏联；毒杀松毛虫。（ll)Bacillusthuringienissubsp.sotto ACCC-10033 -武汉微生物农药厂一英国；原始编号：016 ;制备抗原标准菌株，毒杀鳞翅目 昆虫。
[0118] 制备方法同实施例1，不同在于第二步：菌液的扩大培养：首先将菌种同类纯液分 别按1 : 1的比例进行混合，即真菌、细菌类分别制得混合液；再按这三大类型混合液真菌 50、细菌30的重量份比例进行混合。
[0119] 实施例7
[0120] 本发明将制备的实施例1成品喷在害虫体表皮上，菌孢吸水膨胀，约经8-12小时 即可萌发长出1-2条发芽，分泌几丁质溶解酶，以萌发芽管侵入，以后伸长为菌丝，直接吸 收混虫体液养分而至弥漫于虫体血液，妨碍血液循环。菌丝的代谢产物草酸盐类在血液中 大量积累，碱度下降，失去原有透明性而滞浑浊，引起理化性质的改变，使代谢机能紊乱而 死。
[0121] 实施例8
[0122] 将本发明成品实施例2制剂，喷洒在植物上，经虫口进入肠道，48小时肠道中孢子 萌发率为37%。60-72小时内菌丝侵入肠道壁，并使消化液进入血腔，84小时消化液PH值 由7. 0降至5. 0,菌丝从虫体节间膜、气门、感觉器官孔道伸出，死亡率达95%。
[0123] 实施例9
[0124] 将本发明成品实施例3制剂，洒在虫体上，真菌对昆虫有毒，但并不直接杀死昆 虫，而破坏了虫体表皮，有利于杀虫细菌侵入，导致综合病征，未待初发真菌病的缓慢发生 过程，而被细菌制病而迅速死亡。就证明本发明利用多类菌混合杀虫的创新理念正确及制 剂杀虫效果显著。
[0125] 实施例10
[0126] 本发明微生物组合实施例6杀虫剂与市场单一菌种杀虫剂对小白菜田菜青虫毒 杀试验。喷施本发明杀虫剂五天后，试验区组三十二条菜青虫有二十五条出现病变或死 亡；对照区组三十一条菜青虫有十二条发生病变或死亡。证明本杀虫剂比对照杀虫效果高 51%。
【主权项】
1. 一种微生物组合杀虫剂，是由选自真菌、放线菌和/或细菌的2类或3类菌种制备成 的浓缩菌团制剂；所述重量份组分比例是：真菌40-60、放线菌15-25、和/或细菌20-40。2. 根据权利要求1的微生物组合杀虫剂，所述重量份组分比例是：真菌50、放线菌20、 和/或细菌30。3. 根据权利要求1或2的微生物组合杀虫剂，所述真菌，选自以下之2种或2种以上菌 种： (1) metarhizium anisopliae(metschn)sorok 金龟子缘僵菌 ACCC-30101 -中国农业 科学院土肥所一中国科学院微生物研究所AS3. 3675 -陕西楡林地区治沙所； (2) Paecilomyces farinosus (Dicks.) Brown 粉拟青霉 ACCC-30190 -中国农业科学院 土肥所一北京林业大学武觐文赠送，原始编号：8601 ; (3) Paecilomyces Iilacinus(Thom)Samson 淡紫色拟青霉 ACCC-30677 -云南省烟草 科学研究院祝明亮赠；原始编号：ZML086 ; 所述放线菌，选自以下之2种或2种以上菌种： (1) Streptomyces anuiatus (Beijing rinckl912)wadksmanl953 园环圈链霉菌 ACCC-41456 -湖北省生物农药工程研究中心；原始编号：HBERC00797 ; (2) "Streptomyces culicidicuslan et al?灭蚊链霉菌 ACCC-41132-广东省广州 微生物研究所一上海植生所；原始编号：G頂4. 12MIK4. 1 ; (3) Streptomyces griseolus subsp hangzhouensis ACCC-40075 -浙江农业科学院； 原始编号：S26 ; (4) Streptomyces caiVus Backus et al.，1957秀裸链霉菌ACCC-41451-湖北省生物 农药工程研究中心；原始编号：HBERC00743 ; 所述细菌，选自以下之2种或2种以上菌种： (1) Bacillus subtilis (Enrenbergl835) cohnl872 枯草芽抱杆菌 ACCC-11088 -中国 科学院微生物研究所；ASL 0933 ; (2) Bacillus Sphaericus meyerand Neidel904球形芽抱杆菌ACCC-11096-中国科学 院微生物研究所一美国；=ASL 1672 ;原始编号：2115 ; (3) Bacillus laterosporus Laubach 侧抱芽抱杆菌 ACCC-11079 -中国农科院土肥所 -中国科学院微生物所ASL 0864 ; (4) Bacillus thuringienis subsp. Aisawai ACCC-10016-武汉微生物农药厂；原始 编号：096 ; (5) Bacillus thuringienis subsp.merrisoni ACCC-10031 -武汉微生物农药厂；原 始编号：012 ; (6) Bacillus thuringiensis susp. galleriae 苏云金杆菌錯螺亚种 ACCC-10027 -中 国科学院微生物所； (7) Bacillus thuringiensis susp. israelensis 苏云金杆菌以色列亚种 ACCC- 10038 -成都华宏实业公司一山东泰安生物研究所一世界卫生组织（WHO); (8) Bacillus thuringienis subsp.thuringienis ACCC-10035 -中国农业科学院土 壤肥料研究所；原始编号：D25 ; (9) Bacillus thuringiensis suhsp.berliner 苏云金杆菌柏氏变种 ACCC-10022 -中 国农业科学院土壤肥料研究所；原始编号？； (10) Bacillus thuringiensis subsp. Dendrolimus 苏云金杆菌松蜀亚种 ACCC- 10062 -苏联； (11) Bacillus thuringienis subsp. sotto ACCC-10033 -武汉微生物农药厂-英国； 原始编号：〇16 ; 所选取的每类菌种的每个菌种培养纯液之间按照（0.5-1. 5) : (0.5-1. 5)比例混合。4. 根据权利要求3所述的微生物组合杀虫剂，所选取的每类菌种的每个菌种培养纯液 之间按照I : 1比例混合。5. 根据权利要求3或4所述的微生物组合杀虫剂，所述制剂为液体或固体制剂。6. 权利要求1-5之一的微生物组合杀虫剂的制备方法，包括以下步骤： (1) 将各种菌种分别常规培养为菌种培养纯液： (2) 菌液的扩大培养：将每类真菌、放线菌和/或细菌的每个菌种培养纯液之间按照 所述比例进行混合制成每类混合菌液；再将所述每类混合菌按所述重量份组分比例进行混 合；培养液培养，发酵得到成品制剂。7. 根据权利要求6的微生物组合杀虫剂的制备方法，所述步骤（2)是将混合菌液与培 养液按1 : (8-10)的比例培养，所述培养液配料组分重量份比例为：黄豆粉1-1. 5,糊精 0. 3-0. 9,蛋白胨0. 2-0. 4,磷酸氢二钾0. 1-0. 3,碳酸钙0. 3-0. 7,硫酸镁0. 2-0. 6,硫酸铵 0? 03-0. 07,豆油 0? 1-0. 3 ;PH 值为 7. 2。8. 根据权利要求6或7的微生物组合杀虫剂的制备方法，所述混合菌液与培养液按 1 : 9的比例培养，所述培养液配料组分重量份比例为：黄豆粉1. 2,糊精0. 6,蛋白胨0. 3， 磷酸氢二钾〇. 2,碳酸钙0. 5,硫酸镁0. 4,硫酸铵0. 05，豆油0. 2。9. 根据权利要求7的微生物组合杀虫剂的制备方法，所述混合菌液加入经过净化后的 培养基液内；放入种子罐内，在温度30°C ±1°C下，每小时搅拌200次，培养36-48小时；镜 检每克含菌量达到20亿/克时，停止培养，检查无杂菌即为合格种子菌液。将合格的菌液 按5%的比例，加入发酵罐内培养基液，培养30-45小时，经检查无杂菌，菌液明显成芽孢和 晶体，含量达20亿/克，即可为成品发酵物。10. 根据权利要求6或7的微生物组合杀虫剂的制备方法，还包括步骤（3)固体菌剂的 制备：在成品菌液中加入8-10%的碳酸钙，搅拌30分钟；板框过滤；，搅拌30分钟，调成浆 状；喷雾干燥；粉碎混合均匀，即得。
【专利摘要】本发明公开了一种微生物组合杀虫剂及其制备方法，是由选自真菌、放线菌和/或细菌的2类或3类菌种制备成的浓缩菌团制剂；所述重量份组分比例是：真菌40-60、放线菌15-25、和/或细菌20-40；包括将各种菌种分别常规培养为菌种培养纯液；菌液的扩大培养：将每类的每个菌种培养纯液之间按比例混合制成每类混合菌液；再将每类混合菌按所述重量份组分比例进行混合；培养液培养，发酵得到每20亿/毫升高浓度产品和固体产品。本发明具有能毒杀不同的昆虫和昆虫种类的特性，对金龟子、蚊虫、线虫、鳞翅目，鞘翅目和膜翅目等几百种害虫具有毒杀作用强，速度快、范围广和毒杀彻底的优点，在比单一菌种生产的杀虫剂提高杀虫效率达51％以上。
【IPC分类】A01N63/00, A01N63/04, A01P7/04
【公开号】CN105076216
【申请号】CN201410210981
【发明人】段一皋, 王羲元
【申请人】段一皋, 王羲元
【公开日】2015年11月25日
【申请日】2014年5月20日