循环的制剂温度）， 和/或对13000g乳液体系的离心（例如，约30分钟）。在后处理之后，再次研究乳胶粒尺寸以 发现潜在的相分离和不稳定性。
[0078] 表2:实施例制剂
[0081] *n/a是指乳胶粒尺寸过大无法利用动态光散射测量或未形成乳液。
[0082] 林165nm在25°C贮存3个月后具有0 · 27的PDI。
[0083]表3:示例性实施方案的后热处理
[0085] *n/d表示无数据。
[0086]表4:示例性实施方案的后冷冻
[0088] *n/d表示无数据D
[0089] 表5:示例性实施方案的后离心(例如，持续约30分钟）
[0092I *n/d表示无数据。
[0093]除了加速贮存稳定性处理外，在良好实验室规范(GLP)的条件下，利用时间灭菌试 验，对于多种真菌、细菌和/或病毒测试一些实施方案的抗微生物活性。表6示出了使用具有 如表1所示的实施例1组合物的制剂所测试的病原体的非详尽列表。测试程序包括美国测试 和材料协会(ASTM)方法E1052(ASTM E1052)悬浮液试验。
[0094]表6:杀伤力1的抗微生物实验
[0097] 实验数据表明制备出在经过加速稳定性测试时动力学稳定的多种细乳液实施方 案。此外，一些实施例进行了测试抗微生物活性，并显示出在约1分钟内和约10分钟时间内 的基本完全杀灭生物。这些结果表明在几乎无表面活性剂的制剂中，天然酚类化合物的抗 微生物特性可以出乎意料的稳定方式得到保存。
[0098] 编号3的乳液含有比例为10:1的百里香酚和聚山梨醇酯，将其分别用负染色透射 电子显微镜进行评估(图1)，发现平均乳胶粒尺寸为135nm，如通过动态光散射所证实的。使 用透射电子显微镜对主要活性组分百里香酚对致病性大肠杆菌的效果进行可视化（图2)。 参考图2,暴露于0.10%浓度的纯百里香酚乳液中的致病性大肠杆菌表现出立即溶菌和膜 损伤的迹象。这些结果清楚地表明百里香酚的膜扰动作用。
[0099] 除描述对浮游微生物（自由漂浮）的抗微生物活性试验，还进行了这些乳液对生物 膜的作用的实验评估。这些测试针对接种了几种食物传播细菌的生菜和蓝莓进行，以模拟 农业应用。简而言之，这些实验首先涉及接种大肠杆菌0157 :H7、沙门氏菌和李斯特菌的生 菜和蓝莓。然后将样品室温孵育1.5小时以允许生物膜形成。在孵育后，将生菜或蓝莓的样 品暴露于乳液消毒剂的几种变化例中1分钟。经过乳液处理，将蔬菜/水果样品中和、均质化 并连续施涂选择性培养基进行病原体鉴定和计数。这些生物膜抗微生物测试在25°C和4°C 下进行。实验数据如下所示。列出的所有乳液均以0.10%活性百里香酚浓度使用：
[0103] 结果表明，洗涤1分钟后，乳液对于食源性生物膜具有1-3级对数去除率（或go-99.9%)。这种处理明显优于用水洗涤，用水洗涤通常提供小于 1 级对数去除率。这些数据对 于蓝莓和生菜都是一致的。这些功效值相当于使用10-50ppm的氯基消毒剂。此外，添加 0.2%柠檬酸也对乳液的抗微生物效力略有改善。这表明在酸性环境中活性得到增强。所述 乳液的性能在室温下略优于4°C下。总的来说，数据表明这些乳液可以用作农业消毒剂和生 物膜修复。
[0104] 虽然本公开已经在上文中提供了某些实施方案和实施例，本领域技术人员应当理 解的是，本公开超出了具体公开的实施方案，延伸到其它替代实施方案和/或实施方案的用 途以及明显的修改方案和等同方案。此外，虽然已经示出并具体描述了几个实施方案，本领 域技术人员基于该公开很容易认识到其他修改方案在本公开范围内。还可以设想，可以进 行实施方案的特定特征和方面的各种组合或子组合，并且仍然在本公开的范围之内。应该 理解的是，所公开的实施方案的各种特征和方面可以结合或彼此替换以形成公开的实施方 案的变化模式。因此，本文的公开内容不应受到上述特定实施方案的限制。相反，意图在于 将所有的修改方案、等同方案和替代方案均涵盖落在如所附权利要求书限定的本公开的范 围之内。
【主权项】
1. 一种抗微生物制剂，包括： 有效量的活性组分，选自单萜和多酚； 非离子或阴离子表面活性剂； 有机助溶剂;和 水， 其中所述制剂是平均乳滴尺寸为约25nm至约3000nm的乳液。2. 如权利要求1所述的抗微生物制剂，其中所述抗微生物制剂有效对抗微生物，所述微 生物选自大肠杆菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌MRSA菌株、粪肠球菌VRE菌株、白色念珠菌、 单纯疱疹1、万古霉素耐药性金黄色葡萄球菌、诺沃克病毒、人免疫缺陷病毒、鼻病毒、艰难 梭菌、肺炎克雷伯菌、结核分枝杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、李斯特菌、霍乱弧菌、痤疮丙酸杆菌 和须发癣菌。3. 如权利要求2所述的抗微生物制剂，其中所述制剂在约10分钟内灭活所述微生物的 对数去除率为大于或等于3级对数去除率。4. 如权利要求1-3中任一项所述的抗微生物制剂，其中所述活性组分选自百里香酚、香 芹酚、薄荷醇、丁香酚、甲基异丙基苯、对甲基异丙基苯、柠檬烯、香叶醇、松油醇、桉油醇、柠 檬醛。5. 如权利要求1-4中任一项所述的抗微生物制剂，其中所述表面活性剂选自聚氧乙烯 二醇、聚氧丙烯二醇、葡糖苷、聚氧乙烯二醇辛基酚醚、聚氧乙二醇烷基苯酚醚、甘油烷基 酯、聚山梨醇酯、失水山梨醇脂肪酸酯类、椰油酰胺、泊洛沙姆、聚乙氧基化牛油胺、十二烷 基硫酸钠和月桂基聚醚硫酸钠。6. 如权利要求1-5中任一项所述的抗微生物制剂，其中所述有机助溶剂选自乙醇、甲 醇、乙酸、丙酮、甲乙酮、丁醇、氯仿、DMSO、醚、柠檬酸和羧酸。7. 如权利要求1-6中任一项所述的抗微生物制剂，其中所述活性组分存在的浓度为约 0 · 005wt% 至约40wt%。8. 如权利要求7所述的抗微生物制剂，其中所述活性组分存在的浓度为约lwt%至约 40wt% 〇9. 如权利要求7所述的抗微生物制剂，其中所述活性组分存在的浓度为约0.02wt%至 约 lwt% 〇10. 如权利要求7所述的抗微生物制剂，其中所述活性组分存在的浓度为约0.05wt%至 约0 · 10wt%。11. 如权利要求1-10中任一项所述的抗微生物制剂，其中所述活性组分与所述表面活 性剂之间的重量比为约1:5至约30:1。12. 如权利要求11所述的抗微生物制剂，其中所述活性组分与所述表面活性剂之间的 重量比为约10:1。13. 如权利要求1-10中任一项所述的抗微生物制剂，其中所述表面活性剂存在的浓度 为约0 · 0015wt% 至约0 · lwt%。14. 如权利要求1-10中任一项所述的抗微生物制剂，其中所述表面活性剂存在的浓度 为约0 · 005wt% 至约0 · Olwt%。15. 如权利要求14所述的抗微生物制剂，其中所述有机助溶剂存在的浓度为约0.2wt % 至约75wt%。16. 如权利要求15所述的抗微生物制剂，其中所述有机助溶剂存在的浓度为约5wt %至 约75wt%。17. 如权利要求15所述的抗微生物制剂，其中所述有机助溶剂存在的浓度为约0.2wt % 至约5wt%。18. 如权利要求1 5所述的抗微生物制剂，其中所述有机助溶剂存在的浓度为约 0 · 25wt % 至约 lwt %。19. 如权利要求1-19中任一项所述的抗微生物制剂，其中所述抗微生物制剂以乳液形 式递送。20. 如权利要求19所述的抗微生物制剂，其中所述抗微生物制剂包括基本自组装的乳 液。21. 如权利要求20所述的抗微生物制剂，其中所述抗微生物制剂具有约25nm至约600nm 的平均乳滴尺寸。22. 如权利要求21所述的抗微生物制剂，其中所述乳液的平均乳滴尺寸为约25nm至约 500nm〇23. 如权利要求21所述的抗微生物制剂，其中所述乳液的平均乳滴尺寸为约25nm至约 900nm〇24. 如权利要求21所述的抗微生物制剂，其中所述乳液的平均乳滴尺寸为约100nm至约 600nm〇25. 如权利要求21所述的抗微生物制剂，其中所述乳液的平均乳滴尺寸为约600nm至约 3000nm。26. 如权利要求1-25中任一项所述的括微生物制剂，还包含香味剂。27. 如权利要求26所述的括微生物制剂，其中所述香味剂包括精油和香料中的至少其 〇28. 如权利要求1-27中任一项所述的抗微生物制剂，还包括螯合剂。29. 如权利要求28所述的抗微生物制剂，其中所述螯合剂包括EDTA和柠檬酸中的至少 其一。30. 如权利要求1-29中任一项所述的抗微生物制剂，还包括孢子萌发剂。31. 如权利要求1-30中任一项所述的抗微生物制剂，其中所述抗微生物制剂用于表面 消毒剂、创口杀菌制剂和农业消毒剂中的至少其一。32. 如权利要求1-31中任一项所述的抗微生物制剂，其中所述抗微生物制剂以液体形 式实施。33. 如权利要求1-31中任一项所述的抗微生物制剂，其中所述抗微生物制剂引入到水 胶体悬浮液中。34. -种包含如权利要求1-33中任一项所述的抗微生物制剂的产品，选自洗涤液、消毒 剂、灭菌剂、防腐剂、创口护理制剂、农业喷雾剂或冲洗剂、家用水果或蔬菜喷雾剂、湿巾和 个人护理产品。35. -种减少物体上的活微生物的方法，包括使所述物体与有效量的如权利要求1-32 中任一项所述的抗微生物制剂接触。
【专利摘要】本发明公开了抗微生物乳液、包含该乳液的产品以及使用方法。
【IPC分类】A01N31/16, A01P1/00, A01N31/08, A01N25/04, A01P3/00
【公开号】CN105705014
【申请号】CN201480015890
【发明人】李健明, 肖恩·丹尼斯·康奈尔
【申请人】普渡研究基金会
【公开日】2016年6月22日
【申请日】2014年3月13日
【公告号】US20160007594, WO2014151449A1