一种农用杀虫组合物及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及农药领域，尤其是一种农用杀虫组合物及其应用。
【背景技术】
[0002] 农业是国民经济的基础，是人类的衣食之源、生存之本，农业的发展状况直接影响 着国民经济全局的发展。在农业生产中，害虫会严重影响农作物的生长，影响农业收获，给 农民带来严重的经济损失，因此，对农作物害虫进行有效防治，对于保证农户的经济利益及 粮食安全，具有重要意义。
[0003] 目前危害农作物的害虫种类很多，其中主要是昆虫，鳞翅目害虫和鞘翅目害虫，如 小菜蛾、棉铃虫、玉米螟、金龟子以及地下害虫蛴螬、蝼蛄等。现有技术中的农用杀虫剂可分 为化学杀虫剂和生物杀虫剂，但是化学杀虫剂具有难降解、容易破坏生态系统的平衡的缺 点。生物杀虫剂又包括细菌杀虫剂和真菌杀虫剂，真菌杀虫剂是一类寄生谱较广的昆虫病 原真菌，是一种触杀性微生物杀虫剂。目前，研究利用的主要真菌杀虫剂所用的菌种有：白 僵菌、绿僵菌、拟青霉、座壳孢菌和轮枝菌，尤其是白僵菌(beauveria bassiana)是一种广 谱性的昆虫病原真菌，对700多种有害昆虫都能寄生，致病性强、适应性强，持效期长，但因 为白僵菌的杀虫有效物质是活孢子，因此它对施药环境的要求较高，温度较高则自然死亡 失效。单一使用白僵菌杀虫存在对施药环境要求高，一旦环境发生改变则会严重失效的缺 点。
【发明内容】
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[0004] 本发明的目的是提供一种广谱高效的农用杀虫组合物，用来解决现有技术中真菌 杀虫剂杀虫效率对施药环境依赖性强的缺陷。
[0005] 本发明提供了一种农用杀虫组合物，包括以下重量份的组分：
[0006] 药物活性组分25~85份，所述药物活性组分包括重量比为1:1~6的苏云金杆菌和 白僵菌；
[0007] 药物载体15~85份；
[0008] 辅助剂0.1~25份。
[0009] 优选的，所述的白僵菌选自生物保藏编号为CGMCC N0.7997或者CGMCC N0.7998限 定的菌种中的一种或两种。
[0010]优选的，所述的白僵菌的制备方法包括以下步骤：
[0011] 1)白僵菌菌种的活化；
[0012] 2)将所述活化后的白僵菌接种于白僵菌液体培养基中进行液体发酵，当活菌总数 达50~100亿/ml停止发酵，得到白僵菌发酵液；
[0013] 3)将所述步骤2)得到的白僵菌发酵液接种于白僵菌固体培养基中，铺盘，进行浅 盘发酵，得到固体发酵白僵菌。
[0014] 优选的，所述固体培养基1包括以下重量份的组分:麦麸40~80份，谷壳5~10份， 玉米粉5~10份。
[0015] 优选的，所述的苏云金杆菌的制备方法包括以下步骤:a)苏云金杆菌菌种的液体 活化;b)将所述活化后的苏云金杆菌接种于苏云金杆菌液体培养基中进行液体发酵，当活 菌总数达2~9亿/ml停止发酵，得到苏云金杆菌发酵液;c)将所述步骤b)得到的苏云金杆菌 发酵液接种于苏云金杆菌固体培养基中，进行苏云金杆菌的固体发酵，得到固体发酵苏云 金杆菌，所述固体发酵的接种量为5~15wt%。
[0016] 优选的，所述的苏云金杆菌的制备方法在固体发酵结束后还包括干燥步骤，所述 的干燥步骤为30~40°C干燥35~45h或者45~50°C干燥20~28h。
[0017]优选的，所述的苏云金固体培养基包括以下质量含量的组成:麸皮65 %~75%，_& 柏 20% ~30%，玉米粉 2% ~4%，KH2P〇4 0.1% ~0.3%，MgS〇4 0.04% ~0.06%，Ca ⑶ 3 1.5% ~2.0%〇
[0018] 优选的，所述药物载体为惰性粉或有机溶剂;所述的惰性粉选自轻质碳酸钙、硅藻 土、滑石粉、白炭黑、膨润土、硫酸钠、陶土和高岭土中的一种或几种;所述的有机溶剂选自 甲苯、二甲苯、二甲基甲酰胺、石油芳烃和植物油中的一种或几种。
[0019] 优选的，所述辅助剂包括农乳700,拉开粉和木质素磺酸钠中的一种。
[0020] 本发明还提供一种苏云金杆菌和白僵菌复配农用杀虫组合物在农作物防虫害方 面的应用。
[0021] 本发明的有益效果:本发明提供的苏云金杆菌和白僵菌复配的农用杀虫组合物高 效、低毒，对人畜和作物安全，既可以保护作物，又不伤害天敌，对生态环境影响小。实验结 果表明，苏云金杆菌和白僵菌复配的农用杀虫组合物，防效最高可达90.4%，杀虫率和防效 都远远高于单独使用白僵菌或苏云金杆菌。
[0022]生物保藏说明
[0023] 球孢白僵菌(Beauveria bassiana)，本发明所述的球孢白僵菌菌种保藏在中国微 生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国 科学院微生物研究所，生物保藏编号为CGMCC N0.7997或CGMCC N0.7998，保藏时间为2013 年8月13日。
【具体实施方式】：
[0024]本发明提供了一种农用杀虫组合物，包括以下重量份的组分:药物活性组分25~ 85份，所述药物活性组分包括重量比为1:1~6的苏云金杆菌和白僵菌;药物载体15~85份； 辅助剂0.1~25份。
[0025]本发明提供的农用杀虫组合物包括25~85份药物活性组分，优选为35~75份，更 优选的为45~65份。在本发明中，所述的药物活性组分包括重量比为1~1~6的苏云金杆菌 和白僵菌，所述药物活性组分中，苏云金杆菌和白僵菌的重量比优选的为1:2~4,更优选的 为 1:3〇
[0026] 在本发明中，所述的白僵菌为选自生物保藏编号为CGMCC N0.7997或者CGMCC NO.7998限定的菌种中的一种或两种，在实施例中，可具体采用经过发酵后烘干粉碎得到的 固体粉状白僵菌。
[0027]在本发明中，所述的白僵菌发酵优选包括以下步骤：
[0028] 1)白僵菌菌种的活化；
[0029] 2)白僵菌的液体发酵，将活化后的白僵菌接种于白僵菌液体培养基中进行液体发 酵，当活菌总数达50~100亿/ml停止发酵得到白僵菌发酵液；
[0030] 3)白僵菌的固体发酵，将步骤2)得到的白僵菌发酵液接种于白僵菌固体培养基 中，铺盘，进行浅盘发酵得到固体发酵白僵菌。
[0031] 本发明中白僵菌菌种的活化是将保藏的白僵菌菌种接种于装有营养琼脂培养基 的茄型瓶中，25-28 °C培养8~12h进行活化培养。
[0032]本发明在白僵菌活化培养后优选的对其进行液体培养，所述白僵菌液体发酵所接 种的液体培养基1的组成是本领域常规使用的白僵菌液体培养基，所述的液体培养基优选 经120~130°C灭菌30-45min后使用。本发明对所述发酵的设备没有特殊的限制，采用本技 术领域常规的发酵罐即可。
[0033]在本发明中，所述液体发酵的温度优选为25~28°C，更优选的为26~27°C;所述 液体发酵的pH值优选为6.8-7.0，更优选的为6.9;罐内压力优选为0.05~0.1 MPa，更优选的 为0.07~0.08MpPa;所述液体发酵的通气量优选为0.8~1.2V/V · min，更优选的为1V/V · min;所述液体发酵的时间优选为28-32小时，更优选的为30小时。
[0034]本发明优选在发酵30~32小时后每隔3~4小时检测发酵活菌总数，优选的，当活 菌总数达50~100亿/ml停止发酵，更优选的，当活菌总数达80~99亿/ml停止发酵，得到白 僵菌发酵液。本发明所述的发酵活菌总数检测采用本领域常规采用的计数方法即可，例如 显微计数、平板菌落计数、测定细胞重量等。
[0035]完成所述液体发酵后，本发明将得到的白僵菌发酵液接种于固体培养基中，进行 浅盘发酵，得到固体发酵白僵菌。在本发明中，所述的固体培养基优选包括以下重量份的组 分:麦麸40~80份，谷壳5~10份，玉米粉5~10份。本发明优选在所述固体培养基中加水，使 固体培养基含水量为45 % -55 %，然后铺盘，进行浅盘发酵。
[0036]在本发明中