一种农用杀虫组合物及其应用_2

文档序号:9933120阅读:来源:国知局
,所述的固体发酵的温度优选为24~28°C,更优选的为25~27°C;所述 固体发酵的湿度优选为40%_95%,更优选为55%~75%;所述固体发酵的时间优选为48~ 96小时。
[0037]完成所述固体发酵后,本发明优选将得到固体发酵培养基烘干、粉碎和过筛,得到 固体粉状白僵菌。在本发明中,所述烘干的温度优选为60~80°C,更优选的在65~75°C ;本 发明优选将固体发酵培养基烘干至水分含量在25~35%之间。本发明对所述粉碎没有特殊 的限制,采用本领域技术人员熟知的粉碎的技术方案即可。在本发明中,所述过筛优选采用 80~100目筛。
[0038]在本发明中所述的苏云金杆菌的制备方法优选包括以下步骤:
[0039] a)苏云金杆菌菌种的液体活化;
[0040] b)将所述活化后的苏云金杆菌接种于苏云金杆菌液体培养基中进行液体发酵,当 活菌总数达2~9亿/ml停止发酵,得到苏云金杆菌发酵液;
[0041] C)将所述步骤b)得到的苏云金杆菌发酵液接种于苏云金杆菌固体培养基2中,进 行苏云金杆菌的固体发酵,得到固体发酵苏云金杆菌。
[0042]本发明中苏云金杆菌菌种的活化是将保藏的苏云金杆菌菌种接种于装有营养琼 脂培养基的茄型瓶中,28~32 °C培养8~12h进行活化培养。
[0043]本发明在将所述的苏云金杆菌活化培养后,优选的进行液体发酵培养,所述液体 发酵培养优选的采用摇瓶培养的方式。在本发明中,所述的液体发酵培养基2为本领域常用 的苏云金杆菌液体培养基,无其他特殊要求,所述的液体培养基优选经120~130 °C灭菌30-45min后使用;所述液体发酵培养的温度优选的为28~32°C,更优选的为30°C;所述液体发 酵培养的转速优选的为180~220r/min,更优选的为200r/min;所述液体发酵培养的湿度优 选的为40 %~70%,更优选的为55 %。
[0044]本发明优选在发酵30~32小时后每隔3~4小时检测发酵活菌总数,优选的,当活 菌总数达2~9亿/ml停止发酵,更优选的,当活菌总数达5~6亿/ml停止发酵,得到苏云金杆 菌发酵液。本发明所述的发酵活菌总数检测采用本领域常规采用的计数方法即可,例如显 微计数、平板菌落计数、测定细胞重量等。
[0045]本发明在苏云金杆菌液体发酵完成后,优选的对苏云金杆菌进行固体发酵,所述 的苏云金杆菌的固体发酵的固体培养基2优选的包括以下质量含量的组分:麸皮65%~ 75%,豆柏20%~30%,玉米粉2%~4%,1〇12?040.1%~0.3%,]\^5040.04%~0.06%, CaC03l .5%~2.0%,更优选的包括以下质量含量的组分:麸皮70%,豆柏25%,玉米粉3%, KH2P〇4〇.2% ,MgS040.05% ,CaC031.75% ;
[0046] 在本发明中,所述苏云金固体发酵的接种量优选的为5~15wt%,更优选的为 10wt%,所述苏云金杆菌的固体发酵优选的在固体发酵室完成,所述的苏云金杆菌的固体 发酵优选的包括两个阶段,分别为第一阶段固体发酵和第二阶段固体发酵;第一阶段固体 发酵的时间优选为〇~24h,更优选的为0~20h,第一阶段固体发酵发酵温度优选的为18~ 24 °C,更优选的为20~22°C;第二阶段固体发酵的时间优选的为24~72h,更优选的为20~ 64h,第二阶段固体发酵的发酵温度优选的为24~31°C,更优选的为27~28°C。本发明优选 的在苏云金杆菌完成两个阶段的固体发酵之后得到的固体发酵苏云金杆菌进行干燥,所述 干燥的温度优选的为温度为30~40°C或者45~50°C,当干燥温度为30~40°C,所述干燥的 时间为35~45h;当所述干燥温度为45~50°C是,所述干燥时间优选的为20~28h。
[0047] 本发明在苏云金杆菌固体发酵培养干燥完成后,优选的对其进行粉碎和过筛,得 到固体粉状苏云金杆菌。本发明对所述粉碎没有特殊的限制,采用本领域技术人员熟知的 粉碎的技术方案即可。在本发明中,所述过筛优选采用80~100目筛。
[0048]本发明提供的农用杀虫组合物包括15~85份药物载体,优选为30~70份,更优选 为45~55份,最优选为50份。在本发明中,所述的药物载体优选为惰性粉或有机溶剂。具体 的,所述惰性粉优选选自轻质碳酸钙、硅藻土、滑石粉、白炭黑、膨润土、硫酸钠、陶土和高岭 土中的一种或几种,惰性粉具体的可为上述物质中的任意一种或者由上述物质中的两种、 三种、四种、五种、六种、七种或八种以任意比例混合组成;所述有机溶剂优选选自甲苯、二 甲苯、二甲基甲酰胺、石油芳烃和植物油中的一种或几种,具体的可为上述物质中的任意一 种或者由上述物质中的两种、三种或四种以任意比例混合组成。本发明所述的药物载体使 药物性状稳定,便于运输,亦可提高药物的药效。
[0049]本发明提供的农用杀虫组合物包括0.1~25份辅助剂,优选为5~20份,更优选为 10~15份,最优选为13份。在本发明中,所述的辅助剂为一般市售辅助剂,无其他特殊要求, 具体的可为农乳700,拉开粉,木质素磺酸钠中的一种,本发明中辅助剂的作用是稳定药物 性状,提尚药效。
[0050]本发明对农用杀虫组合物的制备方法没有特殊的限定,采用本领域技术人员熟知 的组合物制备的技术方案即可;具体的,本发明将上述技术方案药物活性组分、药物载体和 辅助剂混合后制备得到。
[0051] 本发明所述的农用杀虫组合物可应用于农作物防虫害方面,提供了一种上述技术 方案所述农用杀虫组合物在防治农作物虫害方面的应用,具体的可应用的农作物种类包括 蔬菜、谷类作物、果树、水稻、茶树、甘蔗等,本发明所述的农用杀虫组合物可防治各类害虫 和害螨,包括菜青虫、小菜蛾、棉铃虫、玉米螟、金龟子、红蜘蛛以及地下害虫蛴螬、蝼蛄等。
[0052] 本发明所述的农用杀虫组合物的施药方法为本领域所熟知的施药方法,无其他特 殊要求,具体的包括以下步骤:将本发明所述的农用杀虫组合物用水稀释得到1〇〇〇~3000 倍稀释液后,进行叶面喷洒。
[0053]下面将结合本发明中的实施例,对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述。显 然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实 施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属 于本发明保护的范围。
[0054] 实施例1
[0055] 固体粉状白僵菌的制备:将保藏的白僵菌菌种接种于装有营养琼脂培养基的茄型 瓶中,28 °C培养1 Oh进行活化培养;活化培养后的白僵菌接种于121°C灭菌35min后的液体 培养基中,在发酵罐中进行液体发酵,具体的发酵条件:温度为27°C ;pH值为6.9;罐内压力 为0.08MPa,发酵通气量为1V/V · min;发酵时间优选为32小时;在发酵30小时后检测发酵活 菌总数,当活菌总数达到95亿/ml停止发酵,得到白僵菌发酵液;将得到的白僵菌发酵液接 种于固体培养基中,具体的所述的固体培养基包括以下重量份的组分:麦麸55份,谷壳8份, 玉米粉7份,在所述的固体培养基中加入蒸馏水,使固体培养基含水量为50%,然后铺盘,进 行浅盘发酵,具体的发酵条件为:发酵温度为26°C,发酵湿度为65 %,发酵时间为72小时;固 体发酵结束后将得到的固体发酵的白僵菌75°C的条件下,烘干至固体发酵白僵菌的水分含 量为30 %,粉碎过90目筛,得到固体粉状白僵菌。
[0056] 实施例2
[0057]固体粉状苏云金杆菌的制备:将保藏的苏云金杆菌菌种接种于装有营养琼脂培养 基的茄型瓶中,30°C培养10h进行活化培养;活化培养后的苏云金杆菌接种于121°C灭菌 35min后的液体培养基中,进行液体发酵,具体的发酵条件:温度为30°C;发酵时间为32小 时;在发酵24小时后检测发酵活菌总数,当活菌总数达到2亿/ml停止发酵,得到苏云金杆菌 发酵液;将得到的苏云金杆菌发酵液接种于固体培养基中,具体的所述的固体培养基包括 以下重量的组分:麸皮70%,豆柏25%,玉米粉3%,KH 2P〇4〇.2%,MgS〇4〇.05%, CaC03l.
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