专利名称：促进皮肤、毛发生长的营养剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种促进皮肤、毛发生长的营养剂，尤其涉及一种通过蛋白水解方法从乳蛋白中制备的乳蛋白多肽，并应用于促进人体皮肤、毛发生长的方法。
发明技术背景多年来，牛奶及牛奶中成份被广泛应用于各类护肤类产品和化妆品中，日本专利[No.57(1982)-209210]公开的技术中公布了应用牛奶蛋白多肽及氨基酸增加锌的溶解，减少头皮屑。日本专利(No.58-500664)公布的技术介绍了应用乳蛋白多肽防治龋齿的应用。日本专利[No.60(1987)-185100]公布的技术中，介绍了采用分子量为500～5,000的乳蛋白多肽增加蛋白水解物溶解度，应用于化妆品中。
通过进一步研究证实，乳蛋白水解物中分子量小于1,000D的多肽，具有刺激皮肤、毛发生长，促进营养物质吸收的作用，具有表面良好吸水性，成膜性的特征。而通过多种蛋白酶的复合水解蛋白过程，可以分解乳蛋白中多肽分子量小于1,000D，游离氨基酸超过氨基酸问题的90％以上，从而使该蛋白水解物具有促进皮肤和毛发生长的作用。
本发明所要解决的技术问题是，通过复合蛋白酶水解乳蛋白，制备蛋白水解液，采用层析方法，分离分子量小于1,000D的多肽，应用于化妆品中，促进皮肤和毛发生长。
发明内容
本发明解决上述技术问题所采用的技术方案，其特征是，以各类乳蛋白为原料，通过复合蛋白水解酶的多种蛋白分解作用，水解乳蛋白变成小分子多肽和游离氨基酸，应用层析方法分离分子量小于1,000D的多肽，应用于多种美容或化妆品中，促进人体皮肤和毛发的生长。
本发明的技术特征是，乳蛋白原料可以是任何形式的牛奶蛋白，包括牛奶、奶粉、酪蛋白或其分离物(α-酪蛋白、β-酪蛋白、Gamma-酪蛋白、Kappa-酪蛋白)、乳清蛋白及其分离物(α-乳球蛋白，β-乳球蛋白)、乳清蛋白粉、浓缩乳清蛋白粉、高纯度乳清蛋白粉等，也可以采用上述混合形式的乳蛋白，在调配乳蛋白溶液时，浓度在5％～20％范围。
本发明的技术特征是，可以采用各种类型的蛋白分解酶进行乳蛋白水解，包括，胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、枯草蛋白酶、木瓜蛋白酶、热分解蛋白酶、弹性蛋白酶、脯氨酸-特异性蛋白酶、产生于链球菌的蛋白分解酶、产生于乳酸杆菌的蛋白分解酶或乳酸杆菌抽提物等，最好是同时联合应用两个以上的蛋白酶，例如，胃蛋白酶和胰酶的共同使用，蛋白分解酶的使用量为每克蛋白质3,000～5,000单位，酶解时温度为40～55℃，PH值按照使用蛋白分解酶不同而异，但应选择最适合使用蛋白酶的PH值，酶解时间2～8小时，蛋白水解结束后加热90～95℃，持续5～15分钟，灭活蛋白酶。
本发明的技术特征是，将已完成酶解过程的蛋白水解液进行进一步分离，采用层析分离的方法，例如凝胶层析或亲水层析，吸附分子量小于1,000D的多肽，层析柱内凝胶具有吸收芳香族氨基酸和有亲水侧链-羟基的特征，例如，交联葡聚糖G-10，G-15和G-25(Sephadex G-10，G-15 and G-25 by pharmacia)、交联琼脂糖S-100(Sephacryl S-100 byPharmasia)等，然后，用1％～15％的乙醇溶液洗脱，以增加芳香族氨基酸吸附特性，分离物吸收峰在280nm，洗脱液经真空干燥或冷冻干燥成为粉剂，内含丰富的促进皮肤和毛发生长营养剂。
本发明的技术特征是，本发明方法被复合蛋白酶分解的乳蛋白多肽中，多肽分子量小于1,000D，其中游离氨基酸占氨基酸总量的90％以上，具有显著的促进人体皮肤及毛发生长作用，并已去除牛奶蛋白质的致敏性。
本发明的技术特征是，本发明方法制备的促进皮肤、毛发生长的营养剂可以作为添加剂，加入各类美容产品中和化妆品中，这种营养剂可以很方便的溶解在水中，制备浓度为20％的水溶液，经稀释后可以加到护肤霜、冷霜、日霜、晚霜、沐浴剂、洗发香波、护发素、洗面奶、洗面膏等化妆品、护肤品和美容品中。
本发明的有益效果是，通过采用天然营养剂，在促进皮肤和毛发生长的同时无任何毒副作用，而且原料来源丰富，加工过程简便，适合推广应用。
具体实施例方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明实施例1制备乳蛋白水解液取400公斤乳清蛋白粉，加双蒸馏水升温至45℃，持续搅拌直至乳清蛋白粉完全溶解，加1N HCL稀释并调节PH至4.6，加温至90℃维持60秒进行巴氏消毒，应用交错切面流体超滤装置，采用分子量为60,000D的超滤膜分离乳糖等小分子物质，收集超滤浓缩物，用1N HCL调PH至2.5，加入38.8升牛胃蛋白酶抽提物(BOVIPEP，bovine pepsin extract.Pepsin Centent of 1.7克/L，from Lab.Presure-Granday)，水解过程持续1小时，加含12公斤NaOH和18.65公斤KOH的混合溶液150升，21％的铵溶液43升，调PH至8.0±0.1，加入647克已混合的蛋白分解酶，含有高纯度的胰蛋白酶/胰凝乳蛋白酶(采用PEM 2500S，胰蛋白酶/胰凝乳蛋白酶混合物，胰蛋白酶活性大于1800USP单位/mg，胰凝乳蛋白酶活性大于350USP单位/mg，from NOVB INDUSTRIE ENZYMES S.A.Paris.)，同时加入277克的II型弹性蛋白酶(酶活性大于30I.U./mg)，维持温度在45℃±2℃，持续3小时，蛋白水解过程结束，升温至98℃持续60秒以灭活胰酶，将蛋白水解酶泵入超滤装置，采用分子量为10,000D的SFEC超滤膜，超滤膜表面积为170m.sup.2，输入压为2bar.，温度为50℃，收集超滤上清液，进一步纯化分离。
实施例2乳蛋白多肽用层析柱分离取实施例1制备的蛋白水解液，用交联葡聚糖G-10(Sephadex G-10，10.times.12cm)过层析柱，以10ml/分流速用去离子水洗脱，洗脱液被分离在280nm吸收峰，收集的洗脱液冷冻干燥成为粉剂。
权利要求
1.本发明涉及一种促进皮肤、毛发生长的营养剂，尤其涉及一种通过蛋白水解方法从乳蛋白中制备的乳蛋白多肽，并应用于促进人体皮肤、毛发生长的方法，其特征是，以各类乳蛋白为原料，通过复合蛋白水解酶的多种蛋白分解作用，水解乳蛋白变成小分子多肽和游离氨基酸，应用层析方法分离分子量小于1,000D的多肽，应用于多种美容或化妆品中，促进人体皮肤和毛发的生长。
2.按照权利要求1所述的方法，本发明的技术特征是，乳蛋白原料可以是任何形式的牛奶蛋白，包括牛奶、奶粉、酪蛋白或其分离物(α-酪蛋白、β-酪蛋白、Gamma-酪蛋白、Kappa-酪蛋白)、乳清蛋白及其分离物(α-乳球蛋白，β-乳球蛋白)、乳清蛋白粉、浓缩乳清蛋白粉、高纯度乳清蛋白粉等，也可以采用上述混合形式的乳蛋白，在调配乳蛋白溶液时，浓度在5％～20％范围。
3.按照权利要求1所述的方法，本发明的技术特征是，可以采用各种类型的蛋白分解酶进行乳蛋白水解，包括，胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、枯草蛋白酶、木瓜蛋白酶、热分解蛋白酶、弹性蛋白酶、脯氨酸-特异性蛋白酶、产生于链球菌的蛋白分解酶、产生于乳酸杆菌的蛋白分解酶或乳酸杆菌抽提物等，最好是同时联合应用两个以上的蛋白酶，例如，胃蛋白酶和胰酶的共同使用，蛋白分解酶的使用量为每克蛋白质3,000～5,000单位，酶解时温度为40～55℃，PH值按照使用蛋白分解酶不同而异，但应选择最适合使用蛋白酶的PH值，酶解时间2～8小时，蛋白水解结束后加热90～95℃，持续5～15分钟，灭活蛋白酶。
4.按照权利要求1所述的方法，本发明的技术特征是，将已完成酶解过程的蛋白水解液进行进一步分离，采用层析分离的方法，例如凝胶层析或亲水层析，吸附分子量小于1,000D的多肽，层析柱内凝胶具有吸收芳香族氨基酸和有亲水侧链-羟基的特征，例如，交联葡聚糖G-10，G-15和G-25(Sephadex G-10，G-15 and G-25 by pharmacia)、交联琼脂糖S-100(Sephacryl S-100 by Pharmasia)等，然后，用1％～15％的乙醇溶液洗脱，以增加芳香族氨基酸吸附特性，分离物吸收峰在280nm，洗脱液经真空干燥或冷冻干燥成为粉剂，内含丰富的促进皮肤和毛发生长营养剂。
5.按照权利要求1所述的方法，本发明的技术特征是，本发明方法被复合蛋白酶分解的乳蛋白多肽中，多肽分子量小于1,000D，其中游离氨基酸占氨基酸总量的90％以上，具有显著的促进人体皮肤及毛发生长作用，并已去除牛奶蛋白质的致敏性。
6.按照权利要求1所述的方法，本发明的技术特征是，本发明方法制备的促进皮肤、毛发生长的营养剂可以作为添加剂，加入各类美容产品中和化妆品中，这种营养剂可以很方便的溶解在水中，制备浓度为20％的水溶液，经稀释后可以加到护肤霜、冷霜、日霜、晚霜、沐浴剂、洗发香波、护发素、洗面奶、洗面膏等化妆品、护肤品和美容品中。
全文摘要
本发明涉及一种促进皮肤、毛发生长的营养剂，尤其涉及一种通过蛋白水解方法从乳蛋白中制备的乳蛋白多肽，并应用于促进人体皮肤、毛发生长的方法，其特征是，以各类乳蛋白为原料，通过复合蛋白水解酶的多种蛋白分解作用，水解乳蛋白变成小分子多肽和游离氨基酸，应用层析方法分离分子量小于1,000D的多肽，应用于多种美容或化妆品中，促进人体皮肤和毛发的生长。
文档编号C12P21/00GK1557278SQ200410016109
公开日2004年12月29日 申请日期2004年2月4日 优先权日2004年2月4日
发明者高春平 申请人:高春平