专利名称：一种对虾养殖池藻相的构建方法
技术领域：
本发明涉及养殖池藻相的构建方法，特别是一种对虾养殖池藻相的构建方法。
背景技术：
由于对虾养殖业的快速发展，对虾养殖池集约化、半集约化程度的提高，管理者技 术的局限性等原因造成了养殖水体富营养化、养殖生态环境失衡、对虾病害频发和产品 质量下降等问题。利用微藻技术来调控对虾养殖的生态环境已经是目前研究的热点。
微藻是养殖池中的初级生产者，在对虾养殖池中占有重要位置，它通过光合作用提 高养殖水体中的溶氧含量，能吸收水体中的氨氮及亚硝酸氮等有毒物质，对维持养殖池 生态系统的正常功能，稳定养殖池环境是不可缺少的，同时还可作为虾苗的天然饵料。 但是由于不同的微藻其生理、生态特性有所区别，有的在虾池浮游植物群落中生物量优 势种明显，而有些种类虽然个体数量的优势度突出，但其个体小，生物量少，对微型浮 游生物群落和养殖环境稳定性的维持作用并不大，还有些种类个体数量并不占优势，但 个体大，生物量高，光合作用强，对维持微型浮游生物群落及养殖环境稳定性起重要作 用。其中有些藻类优势种可以同时出现，有些优势种则表现相互抑制。其种群组成、数 量分布直接或间接地影响养殖池的生态环境质量，进而影响到养殖池的生产力。
目前对虾养殖池微藻调控或对于浮游微藻的人工定向培养，多针对单种或两种优良 微藻开展，在复杂的养殖环境中，容易导致某一阶段个别微藻种类过度繁殖，水体中的 微藻群落多样性指数相对偏低，不利于水环境中微藻群落的稳定，从而造成养殖过程中 前期藻相难培育、中期易突变、后期过旺盛的情况。
发明内容
本发明的目的在于提供一种对虾养殖池优良藻相的构建方法，该方法通过筛选优良 薇藻构建藻相，从而优化对虾养殖池水体环境质量，为对虾健康生长提供稳定的优良环境。
本发明的目的是通过以下技术方案来实现的 一种对虾养殖池藻相的构建方法，选
择养殖池水体中优势度大于0. 15的微藻，将微藻置于氮源浓度为261 338Wnol/L，磷 源浓度为25 32Wnol/L的培养液中，在以下培养条件下进行扩大培养繁殖至对虾养殖
要求的微藻总体生物量，再将藻液引入对虾海水养殖池用于对虾养殖
温度24 27°C;盐度21 26， pH为7. 5 8. 5，光照强度为5500 7000Lx，光 暗比为12 : 12 14 : 10。
所述的微藻扩大培养采用三级扩大培养，其中一级培养用于藻种放大性培养，二级 培养为100L 300L的小水体藻类扩培，三级为10MS 30MS的水泥池扩培。其中在一、 二和三级培养均采用相同的上述培养条件，在一、二级扩大培养时所加入的藻种细胞密 度大于106ind/L;三级扩大培养时所加入的藻种细胞密度大于107ind/L。
所述的培养液中还含有硅酸钠为35 50Mfflol/L，柠檬酸铁为0. 2 0. 5Mmol/L，硅
酸钠和柠檬酸铁主要为微藻的培养提供硅和铁等营养元素。
所述的氮源为硝酸铵、氯化铵、硫酸铵、硝酸钠、硝酸钾、尿素等中的一种或两种 或两种以上的混合。
所述的磷源为磷酸二氢钾、磷酸二氢纳、过磷酸钙等中的一种或两种或两种以上的混合。
所述的微藻为啮蚀隐藻(Cryptomonas erosa Ehr.)、新月菱形藻(Niztzschia closterium)、 微绿球藻(Nannichloropsis oculata)禾口蛋白核小球藻(Chlorella pyr画dosa Chick)的混合。上述的各微藻的投放比例为(0. 7 1. 2) : (0. 7 1. 2): (0. 7 1. 2) : (0. 7 1. 2)，各种藻的细胞初始密度为大于107ind/L。
所述的养殖池水体的水色为鲜绿色、豆绿色或绿褐色，其水体浮游微藻生物多样性 指数大于1.60。
所述的微藻总体生物量为108 109ind/L。
本发明在扩大培养过程还可添加有益菌，营造良好水环境满足微藻的生长需求。所 述的有益菌为芽孢杆菌、光合细菌、乳酸杆菌中的一种或两种或三种的混合。
本发明与现有技术相比，具有如下优点
1) 在虾池筛选土著优良微藻构建藻相，确保藻相在虾池环境的适应性；
2) 通过三级扩大培养使微藻总体生物量达到一定的密度后，再将藻液引入经彻底 消毒的对虾海水养殖高位池，具备实际操作性；
3) 通过构建藻相使各种微藻均衡繁殖，从而优化了对虾养殖池的微藻生态环境，
有利于避免养殖过程中因个别微藻过度繁殖或群体消亡造成的奸池生物多样性单一，水 环境变化剧烈和养殖水体环境质量恶化等情况。
具体实施例方式
实施例一
实验对虾养殖试验场进行，对养殖场附近海边的水源及养殖池水体中浮游微藻藻类
结构进行采样分析，发现养殖池水体春季的微藻平均多样性指数为0.92，秋季为2.14。 通过综合对比分析选择养殖池水体的水色为鲜绿色或豆绿色或绿褐色、养殖水体浮游微 生物多样性指数大于l. 60、生产性能优良对虾的对虾海水养殖池中筛选优势度大于0. 15 以上的啮蚀隐藻(Cr"t翻"as er鎖Ehr.)、新月菱开》藻(〃izteA，c力i3 cJ。"erY"/T7)、 微绿球藻(yVa/MicyWoro/ 67's ocd/J^t3)禾口蛋白核小球藻(CvWore77s pj^re"oit/a a Chick) 构建藻相。选用硝酸铵作为氮源，磷酸二氢钾为磷源，使培养液中氮含量范围为261 338Wnol/L，磷含量范围为25 32Wnol/L，培养液与培养容器的体积比例为3:5,藻相 中各微藻添加比例为1:1:1:1,各种藻的细胞初始密度为1. 30X 107ind/L，培养温度为 24 27°C，盐度为21 26;并加入硅酸钠和柠檬酸铁，培养液中硅酸钠浓度为46陶ol/L 和柠檬酸铁浓度为0. 4Wnol/L的浓度分别，调节pH为7. 8，光照强度为5500Lx，光暗 比12:12。
藻相培养过程中采用三级扩大培养方式， 一级培养用于藻种放大性培养，二级培养 为100L 300L的小水体藻类扩大培养，三级为1C^ 3(^的水泥池扩大培养。其中在一、 二和三级扩大培养时都采用上述所列的培养条件，在一、二级扩大培养时所加入的藻种 细胞密度应大于106ind/L，三级扩大培养时所加入的藻种细胞密度应大于107ind/L。三 级扩培因为是在室外水泥池进行，需选择在天气良好的时候进行，在天气良好的情况下 通过8 15天的扩大培养使微藻总体生物量达到45X 107 100X 107ind/L，再将之引入 到1 2亩的经彻底消毒的对奸养殖池。藻液入池前后不定期添加培养液和芽孢杆菌， 其添加量均分别为lkg/亩，M。养殖过程中定期每10天使用芽孢杆菌，并视水质状况使 用光合细菌、乳酸菌营造良好水环境。
结果表明，晴好天气下藻液入池后5天左右，养殖水体水色良好，前30-45天水色 为豆绿色，养殖中期至后期为绿褐色，水质稳定，养殖对虾健康。通过全程分析，啮蚀 隐藻、微绿球藻和蛋白核小球藻均成为了对虾养殖池的优势种，而养殖水体的微藻细胞 平均密度大于30X 107ind/L，微藻生物多样性指数大于1. 80。平均养殖100 120天，
对虾单茬亩产量达1000kg/亩以上，经济和社会效益显著。 实施例二
实验在对虾养殖试验场进行。对养殖池水体中浮游微藻藻类进行采样分析，春季其 微藻细胞密度为14 . 96X 107ind/L。确定选择啮蚀隐藻(Cryptomonas erosa Ehr.)、新 月菱形藻(Niztzschia closterium)、 微绿球藻(Na皿ichloropsis oculata)禾口蛋白 核小球藻(Chlorella pyrenoidosa Chick)构建藻相。选用尿素作为氮源，过磷酸钙 为磷源，使培养液中氮含量为261 338mol/L，磷含量为25 32Wtio1/L，培养液与培 养容器的体积比例为3:5，藻相中各微藻添加比例为0.7:0.8:1:1，各种藻的细胞初始 密度为大于107ind/L，培养温度为24 27°C，盐度为21 26;并加入硅酸钠和柠檬酸 铁，在培养液中硅酸钠浓度为50陶ol/L和柠檬酸铁浓度为0. 5Wnol/L，调节pH为8. 2， 光照强度为6000Lx，光暗比14:10。
藻相培养过程中采用三级扩大培养方式， 一级培养用于藻种放大性培养，二级培养 为100L 300L的小水体藻类扩大培养，三级为10Nf 30M'^的水泥池扩大培养。一、二 和三级扩大培养时采用上述培养条件，在一、二级扩大培养时所加入的藻种细胞密度大 于106ind/L，三级扩大培养时所加入的藻种细胞密度大于107ind/L。三级扩培因为是在 室外水泥池进行，需选择在天气良好的时候进行，在天气良好的情况下通过8 15天的 扩大培养使微藻总体生物量达到60X 107 100X10'ind/L，再将之引入到1 2亩的经彻 底消毒的对虾养殖池。藻液入池前后不定期添加培养液和芽孢杆菌，其添加量均分别为 lkg/亩.M。养殖过程中定期每10天使用芽孢杆菌，并视水质状况使用光合细菌、乳酸 菌营造良好水环境。
结果表明，晴好天气下藻液入池后5 8天左右，养殖水体水色良好，前20-35天 水色为豆绿色，养殖中期至后期为绿色或绿褐色，水质稳定，养殖对虾健康。通过全程 分析，啮蚀隐藻、微绿球藻和蛋白核小球藻均成为了对虾养殖池的优势种，而养殖水体 的微藻细胞平均密度大于25X 107ind/L，微藻生物多样性指数大于1. 50。平均养殖100 120天，对虾单茬亩产量达1000kg/亩以上，经济和社会效益显著。
本发明不局限于上述特定的实施方案范围内，上述实施方案仅仅是为了能够对本发 明的使用过程进行详细地说明，而且有相等功能的生产方法和技术细节也属于本发明内 容的一部分。事实上，本领域技术人员根据本发明的描述，就能够根据需要找到不同的 调整方案，这些调整都应在本发明的保护范围内。
权利要求
l、一种对虾养殖池藻相的构建方法，其特征是选择养殖池水体中优势度大于0.15的微藻，将微藻置于氮源浓度为261～338μmol/L，磷源浓度为25～32μmol/L的培养液中，在以下培养条件下进行扩大培养繁殖至对虾养殖要求的微藻总体生物量，再将藻液引入对虾养殖池用于对虾养殖温度24～27℃；盐度21～26， pH为7.5～8.5，光照强度为5500～7000Lx，光暗比为12:12～14:10。
2、 根据权利要求1所述的对虾养殖池藻相的构建方法，其特征是所述的微藻扩 大培养采用三级扩大培养，其中一级培养用于藻种放大性培养，二级培养为100L 300L 的小水体藻类扩培，三级为10MS 30MS的水泥池扩培；其中一、二和三级培养均采用 相同的上述培养条件；在--、二级扩大培养时所加入的藻种细胞密度大于106ind/L;三 级扩大培养时所加入的藻种细胞密度大于107ind/L。
3、 根据权利要求1所述的对虾养殖池藻相的构建方法，其特征是所述的培养液 中还含有硅酸钠为35 50Wiiol/L,柠檬酸铁为0. 2 0. 5Riiol/L。
4、 根据权利要求1所述的对虾养殖池藻相的构建方法，其特征是所述的氮源为 硝酸铵、氯化铵、硫酸铵、硝酸钠、硝酸钾、尿素中的一种或两种或两种以上的混合。
5、 根据权利要求1所述的对虾养殖池藻相的构建方法，其特征是所述的磷源为 磷酸二氢钾、磷酸二氢纳、过磷酸钙中的一种或两种或两种以上的混合。
6、 根据权利要求1所述的对虾养殖池藻相的构建方法，其特征是所述的微藻为啮蚀隐藻、新月菱形藻、微绿球藻和蛋白核小球藻的混合。
7、 根据权利要求6所述的对虾养殖池藻相的构建方法，其特征是所述的各微藻的投放比例为0. 7 1. 2:0. 7 1. 2: 0. 7 1. 2:0. 7 1. 2;各种藻的细胞初始密度为大于丄(Vind/L。
8、 根据权利要求1所述的对虾养殖池藻相的构建方法，其特征是所述的养殖池水体的水色为鲜绿色、豆绿色或绿褐色，其水体浮游微藻生物多样性指数大于1.60。
9、 根据权利要求1所述的对虾养殖池藻相的构建方法，其特征是所述的微藻总体生物量为10s 109ind/L。
10、 根据权利要求l所述的对虾养殖池藻相的构建方法，其特征是在扩大培养过 程中还添加lkg/亩'M的有益菌；所述的有益菌为芽孢杆菌、光合细菌、乳酸杆菌中的 一种或两种或三种的混合。
全文摘要
本发明公开了一种对虾养殖池藻相的构建方法，选择养殖水体中优势度大于0.15的微藻，将微藻置于氮源浓度为261～338μmol/L，磷源浓度为25～32μmol/L的培养液中，在以下培养条件下进行扩大培养繁殖至对虾养殖要求的微藻总体生物量，再将藻液引入对虾养殖池用于对虾养殖温度24～27℃；盐度21～26，pH为7.5～8.5，光照强度为5500～7000Lx，光暗比为12∶12～14∶10。通过构建藻相使各种微藻均衡繁殖，从而优化了对虾养殖池的微藻生态环境，有利于避免养殖过程中因个别微藻过度繁殖或群体消亡造成的虾池生物多样性单一，水环境变化剧烈和养殖水体环境质量恶化等情况。
文档编号C12N1/12GK101363004SQ200810198309
公开日2009年2月11日 申请日期2008年9月4日 优先权日2008年9月4日
发明者文国樑, 曹煜成, 李卓佳, 杨莺莺, 梁伟峰, 陈素文 申请人:中国水产科学研究院南海水产研究所