一种对虾养殖中致病性哈维氏弧菌DNA模板的制备方法与流程

文档序号:11145210阅读:403来源:国知局

本发明涉及的是哈维氏弧菌技术领域,具体的说是一种对虾养殖中致病性哈维氏弧菌DNA模板的制备方法。



背景技术:

目前对虾(中国明对虾、日本囊对虾、凡纳滨对虾)养殖的主要病害是白斑病综合症(WSSV),124批次的对虾样品抽样检测中,WSSV阳性率在80%以上;其次是弧菌感染的红腿病,而哈维氏弧菌是其中最主要的致病因子,209批次的对虾样品抽样检测中,哈维氏弧菌的阳性率为70%以上。

哈维氏弧菌不但直接能导致养殖的对虾致病,出现对虾附肢变红,游泳足最早变红,步足及尾肢也呈鲜红色,头胸甲的鳃区呈黄色,厌食,动力减弱,个体消瘦现象,还会迅速引起同一养殖水体中的对虾传染而爆发大规模的红腿病,导致对虾快速并且大量的死亡现象,危害非常巨大。



技术实现要素:

本发明的目的在于针对现有技术的缺陷和不足,提供了一种对虾养殖中致病性哈维氏弧菌DNA模板的制备方法。

为实现上述目的,本发明采用的技术方案是:

一种对虾养殖中致病性哈维氏弧菌DNA模板的制备方法,其步骤如下:

1、将三根带有液体培养基的试管在28℃下摇床培养过夜;

2、第二天取出三根试管,一根对照组,两根实验组,打开洁净工作台,首先进行紫外消毒20min后一同放入其中;

3、选取浓度比较大的一根带菌试管,用移液枪吸取1ml细菌培养液于事先准备好的PCR管中,并且再在另一个PCR管中加等量清水以便于离心时对称;

4、将上述两个PCR管置于高速离心机中,离心5min,转速为1200r/min,弃上清液(用量程较小的移液枪慢慢吸取);

5、再加入100ul无菌水,置于100℃水浴锅中水浴加热10min;

6、紧接着冰浴2min;

7、再次将其置于高速离心机中,转速为12000r/min,5min,取上清液备用;

8、置于一20℃冰箱内保存备用。

本发明的有益效果为:制备方法简单,制备效果好,可以有效的检测养殖水域及养殖对虾组织中的弧菌感染,提前做好水质调控,及早的预防对虾弧菌病,防治规模性爆发疾病,从而有效提高对虾的健康养殖。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白,以下结合具体实施方式,对本发明进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施方式仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。

一种对虾养殖中致病性哈维氏弧菌DNA模板的制备方法,其步骤如下:

1、将三根带有液体培养基的试管在28℃下摇床培养过夜;

2、第二天取出三根试管,一根对照组,两根实验组,打开洁净工作台,首先进行紫外消毒20min后一同放入其中;

3、选取浓度比较大的一根带菌试管,用移液枪吸取1ml细菌培养液于事先准备好的PCR管中,并且再在另一个PCR管中加等量清水以便于离心时对称;

4、将上述两个PCR管置于高速离心机中,离心5min,转速为1200r/min,弃上清液(用量程较小的移液枪慢慢吸取);

5、再加入100ul无菌水,置于100℃水浴锅中水浴加热10min;

6、紧接着冰浴2min;

7、再次将其置于高速离心机中,转速为12000r/min,5min,取上清液备用;

8、置于一20℃冰箱内保存备用。

本具体实施方式的优点:制备方法简单,制备效果好,可以有效的检测养殖水域及养殖对虾组织中的弧菌感染,提前做好水质调控,及早的预防对虾弧菌病,防治规模性爆发疾病,从而有效提高对虾的健康养殖。

对于本领域技术人员而言,显然本发明不限于上述示范性实施例的细节,而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下,能够以其他的具体形式实现本发明。因此,无论从哪一点来看,均应将实施例看作是示范性的,而且是非限制性的,本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定,因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。

此外,应当理解,虽然本说明书按照实施方式加以描述,但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案,说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见,本领域技术人员应当将说明书作为一个整体,各实施例中的技术方案也可以经适当组合,形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。

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