专利名称：：一种杨梅核仁油的提取方法
技术领域：
：本发明涉及一种提取杨梅核仁油的方法。
背景技术：
：杨梅(MyricarubraSieb.etZucc.)，属杨梅科杨梅属乔木，是我国南方的特产果树，主要分布在长江以南的浙江、江苏、福建等省。杨梅核是杨梅果汁和杨梅果酒生产的副产品，占原料的10%左右，目前尚未得到有效的开发利用，造成资源严重浪费及环境污染。杨梅核仁是杨梅的种子，据报道，其含油量高达67%，远超花生、葵花籽、油菜籽等传统油料种子；油酸和亚油酸是其主要的不饱和脂肪酸，占脂肪酸总量的80%以上，营养价值较高，具有进一步开发成新型食用植物油的潜力。传统的植物油提取方法多采用压榨和溶剂浸出，虽然具有较高得油率，但工艺步骤较多，设备复杂，且油料提油后蛋白严重变性而利用困难，造成很大的资源浪费，同时溶剂浸出后需要脱溶过程，设备多、投资大、污染重。水酶法是一种新兴的提油方法，以机械粉碎和水相酶解为主要手段降解植物细胞壁，使油脂充分释放。与传统工艺相比，水酶法设备简单、操作安全、处理条件温和，提取效率提高的同时，可使油脂的活性成分得以保留，提高营养价值。目前对杨梅核仁油的提取有少量报道，有些采用有机溶剂浸提与超声波技术相结合，有些采用二氧化碳超临界提取。采用水酶法提取花生油、玉米胚芽油等传统植物油已有相关报道，而水酶法提取杨梅核仁油尚未见报道；且杨梅核仁的特性不同于花生和玉米胚芽。
发明内容本发明要解决的技术问题是提供一种工艺简便、成本低、效率高的杨梅核仁油的提取方法。为了解决上述技术问题，本发明提供一种杨梅核仁油的提取方法，依次包括以下步骤1)、将杨梅核仁粉碎后加入pH7.0-8.0的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液，在150250W频率下超声波处理1525min，杨梅核仁与磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液的重量/体积比为lg/4-6mL;然后再加入中性蛋白酶，置于水浴中于45-55t:酶解3-5小时，得酶解液，中性蛋白酶为杨梅核仁重量的3%5%;2)、将步骤l)所得酶解液经离心后，分别收集上层游离清油和乳油；该上层游离清油为一级游离清油；3)、将步骤2)所得乳油经离心破乳后，收集上层游离清油，该上层游离清油为二级游离清油；将上述二级游离清油与一级游离清油合并，得杨梅核仁油。作为本发明的杨梅核仁油的提取方法的改进步骤1)中的中性蛋白酶的酶活力为^100000U/g，该中性蛋白酶为中性食品级蛋白酶。3作为本发明的杨梅核仁油的提取方法的进一步改进步骤2)中于25003500rpm离心2535min，步骤3)中于55006500rpm离心2535min。本发明的杨梅核仁油的提取方法，中性蛋白酶例如可选用湖州礼来生物技术有限公司生产的食品级中性蛋白酶。发明人经过大量的实验才获得了杨梅核仁与磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液的重量比；因为加液(磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液)少则浆料黏度大，不利于油脂的释放；加液过多则是底物浓度与酶浓度较低，降低酶反应速度，影响最终的得油率。同样，发明人经过大量的实验才获得了中性蛋白酶与杨梅核仁的重量比；因为酶量直接影响酶解速度，中性蛋白酶的用量太少酶解速度过慢，而用量过多会使生产成本增高，且造成浪费。在本发明的步骤2)中，酶解液经离心后，从上至下分为四层，分别为一级游离清油、乳油、水解液和残渣；弃去水解液和残渣，分别收集一级游离清油和乳油，乳油用于步骤3)的离心破乳。在本发明的步骤3)中，乳油经离心破乳后，分别为上层游离清油(即二级游离清油)和残渣，弃去残渣，收集上层游离清油。本发明提取的杨梅核仁油经GC分析检测出9种脂肪酸(表1)，不饱和脂肪酸总量达84.21%，其中亚油酸含量达40.54%以上，远高于橄榄油、茶油等常用植物食用油。亚油酸具有多种重要生理作用，尤其对防止心脑血管疾病等起着积极的作用，是人体的必需氨基酸之一。因此，利用本发明提取的杨梅核仁油具有较高的营养价值。表1杨梅核仁油主要脂肪酸组成及其含量<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>本发明的杨梅核仁油的提取方法，采用了将机械粉碎、超声波辅助技术与中性蛋白酶解相结合的方法，充分利用超声波技术使含油细胞更容易破裂和中性蛋白酶对蛋白质的水解作用，对细胞中脂蛋白及磷脂与蛋白质结合形成的、包络于油滴外的蛋白膜进行破坏，使油脂充分释放，易于分离，从而达到简便、快速提取杨梅核仁油的目的。本发明与传统的提油工艺相比有如下优点1)、采用了生产量大、价格低廉的中性蛋白酶用于油的提取，大幅度縮减了生产成本；2)、提取条件温和，操作环节少，提高了设备利用率，縮短了提油时间，不仅能源消耗显著降低，且油料不经高温处理，所提油脂的品质明显提高；3)、不使用有机溶剂浸提，省去了浸提后复杂的脱溶过程，生产更安全，操作更简便。综上所述，本发明较以往的提取方法更易于工业化生产，具有良好的推广应用前景。具体实施例方式实施例l、一种提取杨梅核仁油的方法，依次进行以下步骤1)、称取去壳的杨梅核仁3g，粉碎后加入18mLpH8.0的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液，在150-250W频率下超声波处理20min，加入0.09g中性食蛋白酶(酶活力为100000U/g)，于45。C水浴4小时；2)、将步骤1)所得酶解液经3500rpm离心25min后，分别收集一级游离清油和乳油，弃去水解液和残渣；3)、将步骤2)所得乳油经5500rpm离心35min后，收集上层二级游离清油，合并一级和二级游离清油得杨梅核仁油。经上述步骤的杨梅核仁油提取率为55.16%。实施例2、一种提取杨梅核仁油的方法，依次进行以下步骤1)、称取去壳核仁5g，粉碎后加入20mLpH7.0的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液，在200W频率下超声波处理25min，加入0.25g中性食蛋白酶(酶活力为100000U/g)，于55"C水浴3小时；2)、将步骤1)所得酶解液经2500rpm离心35min后，分别收集一级游离清油和乳油，弃去水解液和残渣；3)、将步骤2)所得乳油经6500rpm离心25min后，收集上层二级游离清油，合并一级和二级游离清油得杨梅核仁油。经上述步骤的杨梅核仁油提取率为52.34%。实施例3、一种提取杨梅核仁油的方法，依次进行以下步骤1)、称取去壳核仁3g，粉碎后加入15mLpH7.5的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液，在150-250W频率下超声波处理15min，加入0.12g中性食蛋白酶(酶活力为100000U/g)，于5(TC水浴5小时；2)、将步骤1)所得酶解液经3000rpm离心30min后，分别收集一级游离清油和乳油，弃去水解液和残渣；3)、将步骤2)所得乳油经6000rpm离心30min后，收集上层二级游离清油，合并一级和二级游离清油得杨梅核仁油。经上述步骤的杨梅核仁油提取率为59.89%。最后，还需要注意的是，以上列举的仅是本发明的若干个具体实施例。显然，本发明不限于以上实施例，还可以有许多变形。本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容直接导出或联想到的所有变形，均应认为是本发明的保护范围。权利要求一种杨梅核仁油的提取方法，其特征是依次包括以下步骤1)、将杨梅核仁粉碎后加入pH7.0-8.0的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液，在150～250W频率下超声波处理15～25min，所述杨梅核仁与磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液的重量/体积比为1g/4-6mL；然后再加入中性蛋白酶，置于水浴中于45-55℃酶解3-5小时，得酶解液，所述中性蛋白酶为杨梅核仁重量的3％～5％；2)、将步骤1)所得酶解液经离心后，分别收集上层游离清油和乳油；该上层游离清油为一级游离清油；3)、将步骤2)所得乳油经离心破乳后，收集上层游离清油，该上层游离清油为二级游离清油；将上述二级游离清油与一级游离清油合并，得杨梅核仁油。2.根据权利要求1所述的杨梅核仁油的提取方法，其特征是所述步骤l)中的中性蛋白酶的酶活力为2100000U/g。3.根据权利要求1或2所述的杨梅核仁油的提取方法，其特征是所述步骤l)中的中性蛋白酶为中性食品级蛋白酶。4.根据权利3所述的杨梅核仁油的提取方法，其特征是所述步骤2)中于25003500rpm离心2535min。5.根据权利4所述的杨梅核仁油的提取方法，其特征是所述步骤3)中于55006500rpm离心2535min。全文摘要本发明公开了一种杨梅核仁油的提取方法，包括以下步骤1)、将杨梅核仁粉碎后加入pH7.0-8.0的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液，在150～250W频率下超声波处理；然后再加入中性蛋白酶，置于水浴中于45-55℃酶解3-5小时，得酶解液；2)、将酶解液经离心后，分别收集上层游离清油和乳油；该上层游离清油为一级游离清油；3)、将乳油经离心破乳后，收集上层游离清油，该上层游离清油为二级游离清油；将上述二级游离清油与一级游离清油合并，得杨梅核仁油。采用本发明的提取方法能获得高品质的杨梅核仁油。文档编号A23D9/02GK101690525SQ20091015443公开日2010年4月7日申请日期2009年10月27日优先权日2009年10月27日发明者严人,于海宁,林秋生,沈生荣申请人:浙江大学