专利名称：提取栝楼籽油的方法
技术领域：
本发明涉及一种提取栝楼籽油的方法，属于植物油领域。
背景技术：
栝楼(Trichasanthes kirilowii Maxim)，葫戸科栝楼属，是一种多年生攀援藤本 植物，又名瓜蒌、吊瓜等。分布于东亚及澳大利亚北部，我国主要分布于山东、河南、河北、北 京、浙江、安徽等省。栝楼作为中草药在我国种植历史悠久，其果实、种子和根均可入药。《本 草纲目》记载栝楼有健胃、润肺、化痰、散结、滑肠作用，主治痰热咳嗽、肺痰咳血、胸闷、便
秘等症。现代科学研究表明栝楼籽具有消炎、抗癌功能，对肺癌、胃癌、胰腺癌、乳腺癌等具
有一定的疗效。 除药用价值外，栝楼籽还有较高的食用价值。栝楼产籽量多，籽粒饱满，风味独特， 含有丰富的脂肪酸、蛋白质、多种必需氨基酸及矿质元素，是一种绿色的保健食品。近年来， 以栝楼籽为原料炒制而成的"吊瓜子"以其独特的风味和营养成为高档炒制品，价格居高不 下，激发了农民种植的积极性，籽用栝楼的栽培面积逐年扩大，产量迅速增长。目前，虽然栝 楼籽加工厂家较多，但仍停留在简单的炒制食品阶段，对栝楼籽的综合利用和深度开发还 未开展。据报道，栝楼籽含油量可达35%以上，且还有大量的不饱和脂肪酸，占脂肪酸总量 的89%以上。研究表明，栝楼籽中的不饱和脂肪酸具有降血脂、抗血栓、调节免疫系统等重 要生理功能，具有进一步开发成保健食用植物油的潜力。 现有的植物油脂提取方法多采用压榨法、溶剂浸出法和超临界C02萃取法。传统 的压榨法需对油料进行高温处理，不仅能耗大且影响油品质量，同时压榨后饼粕中蛋白变 性程度较大，利用程度有限，造成资源浪费，如果采用低热处理则提油率下降；溶剂浸出法 虽提取率较高，但脱溶过程复杂，投资大，设备多，溶剂残留问题难以控制，其存在安全生产 和环境污染方面的隐患；而超临界提取法由于处理成本高，设备生产能力较低，工业化程度 较为困难。 酶法提油具有高效、能耗低、无污染、工艺简便、生产成本低等优点，且油料蛋白质 的性能得到较好的保持，可以达到同时利用油脂和蛋白质的目的。目前，采用酶法提取栝楼 籽油尚未有报道。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种简易、快速、提油率高、生产成本低的栝楼籽 油的提取方法。 为了解决上述技术问题，本发明提供一种提取栝楼籽油的方法，依次包括以下步 骤 1)、将栝楼籽粉碎后，加入pH6. 0 7. 0的磷酸氢二钠_磷酸二氢钠缓冲液，栝楼 籽与磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液的重量/体积比为lg : 3 5mL;然后加入中性蛋白 酶和纤维素酶，中性蛋白酶为栝楼籽重量的2 4%，纤维素酶为栝楼籽重量的1 3%;置于水浴中于45 55t:酶解3 5小时，得酶解液； 2)、将步骤1)所得酶解液经离心后，分别收集上层游离清油和乳油，弃去水解液 和残渣；该上层游离清油为一级游离清油； 3)、将步骤2)所得乳油经离心破乳后，收集上层游离清油，弃去下层残渣；该上层 游离清油为二级游离清油；将上述一级游离清油与二级游离清油合并，得栝楼籽油。
作为本发明的提取栝楼籽油的方法的改进步骤1)中的中性蛋白酶的酶活力为 > 100000U/g，纤维素酶的酶活力为^ 160000U/g。该中性蛋白酶和纤维素酶均为食品级 酶。 作为本发明的提取栝楼籽油的方法的进一步改进步骤2)中于2500 3500rpm 离心20 30min，步骤3)中于5500 6500rpm离心15 25min。 作为本发明的提取栝楼籽油的方法的优选方案步骤1)中加入pH7.0的磷酸氢 二钠_磷酸二氢钠缓冲液，栝楼籽与磷酸氢二钠_磷酸二氢钠缓冲液的重量/体积比为 lg : 5mL;中性蛋白酶为栝楼籽重量的3X，纤维素酶为栝楼籽重量的1%，置于水浴中于 45t:酶解5小时，得酶解液。 在本发明中，中性蛋白酶例如可选用湖州礼来生物技术有限公司生产的食品级中 性蛋白酶，其酶活力为^ 100000U/g，纤维素酶例如可选用湖州礼来生物技术有限公司生产 的食品级纤维素酶，其酶活力为^ 160000U/g。 本发明的步骤2)，经离心后，从上至下分成4层，分别是上层游离清油、乳油、水解 液和残渣；本发明的步骤3)，经离心后，从上至下分成2层，分别是上层游离清油和下层残 渣。 本发明采用中性蛋白酶与纤维素酶共同酶解栝楼籽，与单用中性蛋白酶或纤维素
酶相比，提油率有很大的提高。在机械破碎的基础上，纤维素酶水解脂多糖等复合体，进一
步破坏细胞壁，使中性蛋白酶充分渗透到油料细胞中水解脂蛋白等复合体，两种酶协同作
用，更有利于油脂的充分释放，从而提高出油率；采用本发明方法出油率能高达68. 40%。
栝楼籽油得率=[提取脂肪质量/(栝楼籽脂肪含量X栝楼籽质量)]X100X。 本发明提取的栝楼籽油经GC分析表明，不饱和脂肪酸总量达82.72X，其中油酸
29. 10%，亚油酸28. 59%，栝楼酸25. 03%。大量的研究表明不饱和脂肪酸是许多生理活性
脂质的前提，在体内具有广泛的生理功能油酸能够降低胆固醇，促进脂质代谢，而亚油酸
是人体重要的必需脂肪酸，在防治心血管疾病、抑制肿瘤生长等方面具有一定的功效。栝楼
酸是葫芦科植物的特征酸，是亚麻酸的同分异构体，含有三个不饱和键。研究表明，多不饱
和脂肪酸的营养价值随着不饱和键的增加而升高。因此，本发明提取的栝楼籽油具有较高
的营养价值和潜在保健功能。 表1栝楼籽油主要脂肪酸组成及其含量
不饱和脂肪酸饱和脂肪酸名称油酸亚油酸 栝楼酸棕榈酸(软脂酸)硬脂酸
含量29.10% 28.59% 25.03%8.81%3.28% 本发明较传统提油工艺具有以下优点 1)、油料无需经过高温处理，油脂在温和的条件下得以释放，不仅大大节省了能 耗，且具有较好的品质；
2)、采用水相酶解提取油脂，取代了传统的有机溶剂浸出，消除了有机溶剂残留、 污染环境及易燃、易爆等安全隐患； 3)、使用产量大、价格低的酶类，大幅度縮减了生产成本，效率显著提高； 4)、工艺简便，操作环节少，縮短了提油时间，提高了生产设备的利用率。 综上所述，本发明较以往的提取方法更适用于工业化生产，适于在生产上大规模
推广，能产生良好的社会效益和经济效益。
具体实施例方式
实施例1、一种栝楼籽油的提取方法，依次进行以下步骤 1)、称取栝楼籽5g，将其粉碎后，加入15mL p朋.0的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓 冲液；然后再加入0. lg中性蛋白酶(酶活力为100000U/g)和0. 15g纤维素酶(酶活力为 160000U/g)，置于5(TC水浴中酶解3小时后，得酶解液； 2)、将步骤1)所得酶解液经3500rpm离心20min后，分别收集位于上层的一级游 离清油和乳油，弃去水解液和残渣； 3)、将步骤2)所得乳油经5500rpm离心25min破乳后，收集位于上层的二级游离
清油，弃去下层残渣；将上述二级游离清油与一级游离清油合并，得栝楼籽油。 经上述步骤的栝楼籽油提取率为60. 77% 。 实施例2、一种栝楼籽油的提取方法，依次进行以下步骤 1)、称取栝楼籽10g，将其粉碎后，加入40mLpH6. 5的磷酸氢二钠_磷酸二氢钠缓 冲液；然后再加入0. 4g中性蛋白酶(酶活力为100000U/g)和0. 2g纤维素酶(酶活力为 160000U/g)，置于55t:水浴中酶解4小时后，得酶解液； 2)、将步骤1)所得酶解液经2500rpm离心25min后，分别收集位于上层的一级游 离清油和乳油，弃去水解液和残渣； 3)、将步骤2)所得乳油经6500rpm离心15min破乳后，收集位于上层的二级游离
清油，弃去下层残渣；将上述二级游离清油与一级游离清油合并，得栝楼籽油。 经上述步骤的栝楼籽油提取率为55. 86% 。 实施例3、一种栝楼籽油的提取方法，依次进行以下步骤 1)、称取栝楼籽20g，将其粉碎后，加入100mL pH7. 0的磷酸氢二钠_磷酸二氢钠 缓冲液；然后再加入0. 6g中性蛋白酶(酶活力为100000U/g)和0. 2g纤维素酶(酶活力为 160000U/g)，置于45t:水浴中酶解5小时后，得酶解液； 2)、将步骤1)所得酶解液经3000rpm离心30min后，分别收集位于上层的一级游 离清油和乳油，弃去水解液和残渣； 3)、将步骤2)所得乳油经6000rpm离心20min破乳后，收集位于上层的二级游离 清油，弃去下层残渣；将上述二级游离清油与一级游离清油合并，得栝楼籽油。
经上述步骤的栝楼籽油提取率为68. 40% 。 对比试验1、在实施例3的步骤1)中取消纤维素酶的使用，其余内容同实施例3 ; 所得栝楼籽油的提取率为40. 17%。 对比试验2、在实施例3的步骤l)中取消中性蛋白酶的使用，其余内容同实施例 3 ;所得栝楼籽油的提取率为30. 45%。
最后，还需要注意的是，以上列举的仅是本发明的若干个具体实施例。显然，本发 明还可以有许多变形。通过改变料水比、酶解时间、温度、pH、酶的种类及用量、离心速度与 时间等，均可获得栝楼籽油。本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容直接导出或联 想到的所有变形，均应认为是本发明的保护范围。
权利要求
一种提取栝楼籽油的方法，其特征是依次包括以下步骤1)、将栝楼籽粉碎后，加入pH6.0～7.0的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液，栝楼籽与磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液的重量/体积比为1g∶3～5mL；然后加入中性蛋白酶和纤维素酶，中性蛋白酶为栝楼籽重量的2～4％，纤维素酶为栝楼籽重量的1～3％，置于水浴中于45～55℃酶解3～5小时，得酶解液；2)、将步骤1)所得酶解液经离心后，分别收集上层游离清油和乳油，该上层游离清油为一级游离清油；3)、将步骤2)所得乳油经离心破乳后，收集上层游离清油，该上层游离清油为二级游离清油；将上述一级游离清油与二级游离清油合并，得栝楼籽油。
2. 根据权利要求1所述的提取栝楼籽油的方法，其特征在于所述步骤1)中的中性蛋 白酶的酶活力为^ 100000U/g，纤维素酶的酶活力为^ 160000U/g。
3. 根据权利要求1或2所述的提取栝楼籽油的方法，其特征在于所述步骤1)中的中 性蛋白酶和纤维素酶均为食品级酶。
4. 根据权利3所述的提取栝楼籽油的方法，其特征在于所述步骤2)中于2500 3500rpm离心20 30min。
5. 根据权利4所述的提取栝楼籽油的方法，其特征在于所述步骤3)中于5500 6500rpm离心15 25min。
6. 根据权利要求5所述的提取栝楼籽油的方法，其特征在于所述步骤1)中加入 pH7. 0的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液，栝楼籽与磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液的重量 /体积比为lg : 5mL;中性蛋白酶为栝楼籽重量的3^，纤维素酶为栝楼籽重量的l^，置于 水浴中于45t:酶解5小时，得酶解液。
全文摘要
本发明公开了一种提取栝楼籽油的方法，包括以下步骤1)将栝楼籽粉碎后，加入pH6.0～7.0的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液，然后加入中性蛋白酶和纤维素酶，置于水浴中于45～55℃酶解3～5小时，得酶解液；2)将步骤1)所得酶解液经离心后，分别收集上层游离清油和乳油，该上层游离清油为一级游离清油；3)将步骤2)所得乳油经离心破乳后，收集上层游离清油，该上层游离清油为二级游离清油；将上述一级游离清油与二级游离清油合并，得栝楼籽油。采用本发明的方法提取栝楼籽油具有简易、快速、提油率高、生产成本低的特点。
文档编号C12P7/64GK101717799SQ20091015429
公开日2010年6月2日 申请日期2009年11月19日 优先权日2009年11月19日
发明者于海宁, 林秋生, 沈生荣 申请人:浙江大学