用于杂草控制的方法和组合物的制作方法

用于杂草控制的方法和组合物的制作方法
【专利摘要】本发明提供用于增强杂草控制的新颖组合物。具体地说，本发明提供了调节杂草种类中的乙酰辅酶A羧化酶的方法和组合物。本发明还提供了增强杂草控制的组合物与方法的组合。
【专利说明】用于杂草控制的方法和组合物
[0001] 本申请依据35USC§ 119(e)要求2011年9月13日提交的美国临时申请序列号 61/534, 073的权益，该案以引用的方式整体并入本文中。文件中所含的名为"40_21 (58637) B seq listing, txt"的序列表为2, 094, 591个字节（在操作系统MS-Windows中测量）并 且于2012年9月6日创建，与本案一起提交并以引用的方式并入本文中。 发明领域
[0002] 本发明大体上涉及杂草管理领域。更具体地说，本发明涉及似杂草植物中的乙酰 辅酶A羧化酶（ACC酶）基因以及含有供调节其表达的多核苷酸分子的组合物。本发明还 提供了可用于杂草控制的方法和组合物。
[0003] 发明背景
[0004] 杂草是在农艺环境中与耕种的植物竞争的植物，并且农场主每年在作物损失和控 制杂草尝试方面要花费上亿美元。杂草还充当作物疾病和虫害的宿主。在农业生产环境中 由杂草引起的损失包括作物产量降低、作物质量下降、灌溉成本增加、收割成本增加、土地 价值降低、损伤牲畜以及由杂草携带的昆虫和病害所引起的作物损害。杂草造成这些影响 的主要手段有：1)与作物竞争水、养分、阳光以及供生长和发育的其它必需要素；2)产生有 毒或刺激性化学物质，这些化学物质引起了人类或动物健康问题；3)产生极大量的种子或 营养繁殖部分或两者，从而污染了农业产品并且使这些物种在农业用地中长期存在；以及 4)在农业和非农业用地上产生大量必须除掉的植被。耐除草剂的杂草是几乎所有正在使用 的除草剂所面临的一个问题，需要有效地管理这些杂草。目前有超过365种杂草生物型被 除草剂抗性行动委员会（Herbicide Resistance Action Committee，HRAC)、北美除草剂抗 性行动委员会（North American Herbicide Resistance Action Committee，NAHRAC)和美 国治草科学学会（Weed Science Society of America, WSSA)鉴别为对一种或多种除草剂 具有除草剂抗性。
[0005] 乙酰辅酶A羧化酶（ACC酶）催化乙酰辅酶A的生物素依赖性羧化，从而产生丙二 酰辅酶A，这是长链脂肪酸生物合成中的第一个并且必要的步骤。这种酶是包括芳氧基苯氧 基丙酸酯类、环己二酮类及苯基吡唑啉化学品家族的成员在内的许多除草剂的靶。
[0006] 发明概述
[0007] 在一个方面中，本发明提供一种似杂草植物控制方法，该方法包括向似杂草植物 外部施用一种包含多核苷酸和转移剂的组合物，其中该多核苷酸与ACC酶基因序列或其片 段，或与所述ACC酶基因序列或其片段的RNA转录物基本上同一或基本上互补，其中所述 ACC酶基因序列选自SEQ ID NO :1-92或其多核苷酸片段，由此使该似杂草植物生长或发育 或繁殖能力降低，或使得该似杂草植物对ACC酶抑制剂除草剂的敏感性高于未用所述组合 物处理的似杂草植物。以此方式，可以使已经对施用含ACC酶抑制剂的除草剂产生抗性的 植物更易于受含ACC酶抑制剂的除草剂的除草作用影响，由此加强该除草剂的作用。该多 核苷酸片段为至少18个连续核苷酸、至少19个连续核苷酸、至少20个连续核苷酸或至少 21个连续核苷酸长度并且与选自SEQ ID NO :1-92的ACC酶基因序列至少85%同一，并且 该转移剂是一种有机硅酮组合物或化合物。该多核苷酸片段还可以是有义或反义ssDNA或 ssRNA、dsRNA或dsDNA，或dsDNA/RNA杂交体。该组合物可以包括超过一个多核苷酸片段， 并且该组合物可以包括ACC酶抑制剂除草剂和/或增强该组合物的杂草控制活性的其它除 草剂。
[0008] 在本发明的另一个方面中，提供了用于调节似杂草植物物种中ACC酶基因表达的 多核苷酸分子和方法。该方法降低、阻遏或以其它方式延迟似杂草植物中ACC酶基因的表 达，包括向似杂草植物外部施用一种包含多核苷酸和转移剂的组合物，其中该多核苷酸与 ACC酶基因序列，阻遏或以其它方式延迟，或与该ACC酶基因序列的RNA转录物基本上同一 或基本上互补，阻遏或以其它方式延迟，其中该ACC酶基因序列选自SEQ ID N0:l-92或其 多核苷酸片段。该多核苷酸片段为至少18个连续核苷酸、至少19个连续核苷酸、至少20 个连续核苷酸或至少21个连续核苷酸长度并且与选自SEQ ID NO :1-92的ACC酶基因序列 至少85%同一，并且该转移剂是一种有机硅酮组合物或化合物。该多核苷酸片段还可以是 有义或反义ssDNA或ssRNA、dsRNA或dsDNA，或dsDNA/RNA杂交体。
[0009] 在本发明的又一方面中，本发明的包含多核苷酸分子的组合物可以与其它除草用 化合物组合以提供对于耕种植物的田地中不想要的植物的额外控制。
[0010] 在又一方面中，该多核苷酸分子组合物可以与任一种或多种其它的农用化学品组 合，以形成多组分杀虫剂，从而得到甚至更广谱的农业保护，这些农用化学品诸如为杀昆虫 齐U、杀真菌剂、杀线虫剂、杀细菌剂、杀螨剂、生长调控剂、化学绝育剂、化学信息素、驱避剂、 引诱剂、信息素、取食剌激剂、生物杀虫剂、微生物杀虫剂或其它生物活性化合物。
[0011] 附图简述
[0012] 以下图式形成了本说明书的一部分并且被包括用来进一步说明本发明的某些方 面。通过参照一个或多个附图并结合本文所呈现的具体实施方案的详细说明，可以更好地 理解本发明。由以下【专利附图】

【附图说明】，可以更完整地理解本发明：
[0013] 图1.用ssDNA触发多核苷酸（trigger polynucleotide)和ACC酶抑制剂除草剂 烯草酮（clethodim)处理长芒览（Amaranthus palmeri)。
[0014] 发明详述
[0015] 本发明提供了调控、阻遏或延迟ACC酶（乙酰辅酶A羧化酶）基因表达并且增强 对似杂草植物物种和重要的是ACC酶抑制剂抗性杂草生物型的控制的方法和含多核苷酸 的组合物。该方法的各个方面可以用于管理农艺和其它耕种环境中的各种似杂草植物。
[0016] 提供以下定义和方法以更好地定义本发明并且指导本领域技术人员实践本发明。 除非另作注释，否则各术语应根据相关领域技术人员的常规用法来理解。在一个术语以单 数形式提供的情况下，本发明人也预期由该术语的复数形式所描述的本发明的各个方面。
[0017] "不可转录的"多核苷酸意思指，这些多核苷酸不包含完整的聚合酶II转录单元。 如本文所使用，"溶液"是指均匀混合物和不均匀混合物，诸如悬浮液、胶体、胶束及乳液。
[0018] 似杂草植物是与耕种的植物竞争的植物，特别重要的那些包括但不限于，作物 生产中的重要入侵性和有害的杂草及除草剂抗性生物型，诸如苋属物种（Amaran thu s species)一 白览（A. albus)、北美览（A. blitoides)、绿穗览（A. hybridus)、长芒览 (△?卩&111161'；〇、鲍威氏览（六4〇?^11；[；0、反枝览（六.代1：1'0；1^161118)、刺览（六.8。；[1108118)、糙果 览（A. tuberculatus)及皱果览（A. viridis);豚草属物种（Ambrosia species) -三裂叶 豚草（A. trifida)、美洲豚草（A. artemisifolia);黑麦草属物种（Lolium species) -多花 黑麦草（L. multiflorum)、硬直黑麦草（L. rigidium)、多年生黑麦草（L. perenne);马唐属 物种（Digitaria species)-两耳草（D. insularis);大戟属物种（Euphorbia species) - 白荀猩猩草（E. heterophylla);地肤属物种（Kochia species) -扫帚草（K. scoparia); 高梁属（Sorghum species) - 约翰逊草（S. halepense);白酒草属（Conyza species) - 香丝草（C.bonariensis)、小蓬草（C. canadensis)、苏门白酒草（C.sumatrensis);虎尾 草属物种（Chloris species) -截头虎尾草（C. truncate);稗草属物种（Echinochola species)一光头稗（Ε· colona)、大骨草（Ε· crus-galli);穆属物种（Eleusine species) - 牛筋草（E. indica);早熟禾属物种（Poa species) -一年生早熟禾（P. annua);车前属物 种（Plantago species) -长叶车前草（Ρ· lanceolata);燕麦属物种（Avena species) - 野燕麦（A. fatua);藜草属物种（Chenopodium species) -灰蓼头草（C. album);狗尾草属 物种（Setaria species) -灰藜（S. viridis)、苘麻（Abutilon theophrasti)、番薯属物种 (Ipomoea species)、田菁属物种（Sesbania species)、决明属物种（Cassia species)、黄 花稳属物种（Sida species)、臂形草属物种（Brachiaria species)及煎属物种（Solanum species)0
[0019] 耕种区中所见的其它似杂草植物物种包括大穗看麦娘（Alopecurus myosuroides)、不实燕麦（Avena sterilis)、长颖燕麦（Avena sterilis ludoviciana)、 车前臂形草（Brachiaria plantaginea)、双雄雀麦（Bromus diandrus)、硬雀麦（Bromus rigidus)、洋狗尾草（Cynosurus echinatus)、升马唐(Digitaria ciliaris)、止血 马唐(Digitaria ischaemum)、马唐(Digitaria sanguinalis)、稻稗(Echinochloa oryzicola)、水稗（Echinochloa phyllopogon)、路易斯安纳野黍（Eriochloa punctata)、 大麦草（Hordeum glaucum)、墙大麦（Hordeum leporinum)、田间鸭嘴草（Ischaemum rugosum)、千金子(Leptochloa chinensis)、欧黑麦草（Lolium persicum)、小藹草 (Phalaris minor)、变形藹草（Phalaris paradoxa)、筒轴茅（Rottboellia exalta)、大狗 尾草（Setaria faberi)、巨狗尾草（Setaria viridis var robusta-alba schreiber)、 狗尾草变种(Setaria viridis var robusta-purpurea)、Snowdenia polystachea、苏 丹高梁（Sorghum Sudanese)、泽泻(Alisma plantago-aquatica)、凹头觅（Amaranthus lividus)、青觅（Amaranthus quitensis)、耳基水觅（Ammania auriculata)、红花水觅 (Ammania coccinea)、臭春黄菊（Anthemis cotula)、阿披拉草（Apera spica-venti)、圆 叶虎耳（Bacopa rotundifolia)、三叶鬼针草（Bidens pilosa)、Bidens subalternans、 非洲芥末（Brassica toumefortii)、旱雀麦（Bromus tectorum)、小果亚麻莽（Camelina microcarpa)、茼蒿（Chrysanthemum coronarium)、田野宽丝子（Cuscuta campestris)、 异型莎草（Cyperus difformis)、Damasonium minus、播娘嵩（Descurainia sophia)、细 叶二行芥（Diplotaxis tenuifolia)、车前叶蓝蓟（Echium plantagineum)、三蕊沟繁缕 (Elatine triandra var pedicellata)、白荀猩猩草、卷莖蓼（Fallopia convolvulus)、 水風草（Fimbristylis miliacea)、融辧花（Galeopsis tetrahit)、锅锅藤（Galium spurium)、向日葵（Helianthus annuus)、假苍耳（Iva xanthifolia)、单刚毛狗尾草 (Ixophorus unisetus)、变色牵牛（Ipomoea indica)、圆叶牵牛（Ipomoea purpurea)、毛 莖暮(Ipomoea sepiaria)、雍菜（Ipomoea aquatic)、三裂叶暮（Ipomoea triloba)、毒 莴苣（Lactuca serriola)、黄花绒叶草（Limnocharis flava)、直立石龙尾（Limnophila erecta)、无柄花石龙尾（Limnophila sessiliflora)、美洲母草（Lindemia dubia)、 美洲母草主变种（Lindemia dubia var major)、狭叶母草（Lindemia micrantha)、陌 上草（Lindemia procumbens)、冰叶日中花(Mesembryanthemum crystal1inum)、雨 久花(Monochoria korsakowii)、甲鸟舌草(Monochoria vaginalis)、球果芥(Neslia paniculata)、虞美人（Papaver rhoeas)、银胶菊（Parthenium hysterophorus)、Pentzia suffruticosa、小子藹草（Phalaris minor)、野萝卜（Raphanus raphanistrum)、秋冬 萝卜（Raphanus sativus)、皱果莽（Rapistrum rugosum)、印度节节菜原变种（Rotala indica var uliginosa)、冠果草（Sagittaria guyanensis)、蒙特登慈姑（Sagittaria montevidensis)、矮慈姑（Sagittaria pygmaea)、俄国大蓟（Salsola iberica)、萤蔺欧 万斯变种（Scirpus juncoides var ohwianus)、北水毛花（Scirpus mucronatus)、金色 狗尾草（Setaria lutescens)、刺金午时花（Sida spinosa)、野芥（Sinapis arvensis)、 戟叶柿娘蒿（Sisymbrium orientale)、大蒜芥（Sisymbrium thellungii)、东方龙葵 (Solanum ptycanthum)、花叶潰苦菜（Sonchus asper)、苦苣菜（Sonchus oleraceus)、 甜高梁（Sorghum bicolor)、繁缕（Stellaria media)、薪蓂（Thlaspi arvense)、苍 耳（xanthium strumarium)、南非金盖草（Arctotheca calendula)、苏门白酒草、革 命菜(Crassocephalum crepidiodes)、萼距花(Cuphea carthagenenis)、Epilobium adenocaulon、费城飞莲（Erigeron philadelphicus)、紫萍（Landoltia punctata)、北美 独行菜（Lepidium virginicum)、雨久花（Monochoria korsakowii)、少花龙葵（Solanum americanum)、龙葵（Solanum nigrum)、欧洲福克斯泰尔羊茅（Vulpia bromoides)、黄 鹤菜（Youngia japonica)、下轮叶黑藻（Hydrilla verticillata)、垂花飞廉（Carduus nutans)、意大利蓟（Carduus pycnocephalus)、黄星蓟（Centaurea solstitialis)、丝路蓟 (Cirsium arvense)、节节草（Commelina diffusa)、田方宠花（Convolvulus arvensis)、野古月 萝卜（Daucus carota)、止血马唐、孔雀稗（Echinochloa crus-pavonis)、水風草、融辧花、 锅锅藤、直立石龙尾、淡甘菊（Matricaria perforate)、虞美人、乌头叶毛茛（Ranunculus acris)、翅果假吐金菊（Soliva sessilis)、尖辧花（Sphenoclea zeylanica)、繁缕、三 叉针茅（Nassella trichotoma)、智利针草（Stipa neesiana)、匍匍翦股颖（Agrostis stolonifera)、扁蓄蓼（Polygonum aviculare)、日本看麦娘（Alopecurus japonicus)、茼 草（Beckmannia syzigachne)、旱雀麦、孟仁草（Chloris inf late)、Echinochloa erecta、 马齿觅（Portulaca oleracea)及欧洲千里光（Senecio vulgaris)。据信，所有植物在其基 因组中都含有八氢番茄红素脱氢酶基因，其序列可以被分离出来，并且根据本发明的方法 制造出可用于调控、抑制或延迟这些植物中靶ACC酶基因的表达以及经过处理的植物的生 长或发育的多核苷酸。
[0020] -些耕种的植物当出现在不想要的环境中时也可以是似杂草植物。举例来说，生 长在大豆田中的玉米植物。具有一种或多种除草剂耐药性的转基因作物将需要专门的管理 方法来控制杂草和自生作物。本发明能够靶向针对除草剂耐药性的转基因，以使经过处理 的植物变得对该除草剂敏感。举例来说，在包括DAS-40278-9的转基因事件中的转基因 ACC 酶DNA序列。
[0021] "触发因子"或"触发多核苷酸"是与靶基因多核苷酸同源或互补的多核苷酸分子。 这些触发多核苷酸分子当与转移剂一起局部施用到植物表面时，将调节靶基因的表达，由 此相对于未用含触发因子分子的组合物处理的植物，用所述组合物处理的植物的生长或发 育或繁殖能力受到调控、抑制或延迟，或所述植物因含所述多核苷酸的组合物而对ACC酶 抑制剂除草剂更敏感。
[0022] 预期本发明的组合物将含有多种多核苷酸和除草剂，包括但不限于，ACC酶基因触 发多核苷酸和ACC酶抑制剂除草剂以及任一种或多种其它除草剂靶基因触发多核苷酸和 相关除草剂，及任一种或多种其它必需基因触发多核苷酸。必需基因是植物中提供有机体 或细胞生长或存活必需的或植物正常生长和发育所涉及的关键酶或其它蛋白质的基因，例 如生物合成酶、代谢酶、受体、信号转导蛋白、结构基因产物、转录因子或转运蛋白；或调控 性 RNA，诸如微 RNA 的基因 （Meinke 等，Trends Plant Sci. 2008 年 9 月；13(9) :483-91)。 抑制必需基因使除草剂影响不同于抑制的必需基因的基因产物的功能的作用增强。本发明 的组合物可以包括各种调节除ACC酶外的必需基因的表达的触发多核苷酸。
[0023] 针对植物耐药性的转基因已经得到证实并且可以应用本发明方法的除草剂包 括但不限于：类生长素除草剂、草甘膦（glyphosate)、草铵膦（glufosinate)、磺酰脲 类、咪唑啉酮类、溴苯腈（bromoxynil)、茅草枯（delapon)、麦草畏（dicamba)、环己二 酮（cyclohezanedione)、原卩卜啉原氧化酶抑制剂类（protoporphyrionogen oxidase inhibitors)、4_羟苯基-丙酮酸双加氧酶抑制剂类除草剂。举例来说，编码除草剂 耐药性中所涉及的蛋白质的转基因及其多核苷酸分子是本领域已知的，并且包括但不 限于，5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合成酶（EPSPS)，例如，更完整地描述于美国专利号 7, 807, 791 (SEQ ID NO :5)、6, 248, 876B1、5, 627, 061、5, 804, 425、5, 633, 435、5, 145, 783、 4, 971，908、5, 3072, 910、5, 188, 642、4, 940, 835、5, 866, 775、6, 225, 114B1、6, 130, 366、 5, 3070, 667、4, 535, 060、4, 769, 061、5, 633, 448、5, 510, 471 ;美国专利号 Re. 36, 449 ;美国 专利号RE37, 287E及5, 491，288中；对磺酰脲和/或咪唑啉酮的耐药性，例如，更完整地描 述于美国专利号 5, 605,011、5, 013, 659、5, 141，870、5, 767, 361、5, 7307, 180、5, 304, 732、 4, 761，373、5, 3307, 107、5, 928, 937 及 5, 378, 824 ;及国际公布 W096/33270 中；植物中 对于羟苯基丙酮酸双加氧酶抑制性除草剂的耐药性描述于美国专利号6, 245, 968B1、 6, 268, 549 及 6, 069, 115 ;美国专利公布 20110191897 及 US7, 3072, 379SEQ ID N0 :3 ; US7, 935, 869 ;US7, 304, 209, SEQ ID NO :1、3、5及15中；芳氧基链烷酸酯双加氧酶多核苷 酸，其赋予对2, 4-D和其它苯氧基生长素除草剂，以及对芳氧基苯氧基丙酸酯除草剂的耐 药性，如例如W02005/107437 ;US7, 838, 733SEQ ID N0 :5中所描述的；及耐麦草畏的多核 苷酸，如例如Herman等（2005) J. Biol. Chem. 280 :24759-24767中所描述的。耐除草剂性 状的其它实例包括由编码外源膦丝菌素乙酰转移酶的多核苷酸所赋予的那些，如美国专 利号 5, 969, 213、5, 489, 520、5, 550, 3078、5, 874, 265、5, 919, 675、5, 561，236、5, 648, 477、 5, 646, 024、6, 177, 616及5, 879, 903中所描述。含有外源膦丝菌素乙酰转移酶的植物可以 对抑制谷氨酰胺合成酶的草铵膦除草剂展现出改善的耐药性。此外，耐除草剂多核苷酸包 括由赋予改变的原卟啉原氧化酶（protox)活性的多核苷酸所赋予的那些，如美国专利号 6, 288, 306B1、6, 282, 837B1及5, 767, 373 ;以及W001/12825中所描述。含有这些多核苷酸 的植物对于祀向protox酶的多种除草剂（又称为protox抑制剂）中的任一种可以展现出 改善的耐药性。编码草甘膦氧化还原酶和草甘膦-N-乙酰转移酶的多核苷酸（G0X描述于 美国专利5, 463, 175中并且GAT描述于美国专利公布20030083480中；麦草畏单加氧酶， 美国专利公布20030135879,全部以引用的方式并入本文中）；编码溴苯腈腈水解酶的多核 苷酸分子（Bxn描述于美国专利号4, 810, 648,以引用的方式并入本文中；针对溴苯腈耐药 性）；编码八氢番茄红素脱氢酶的多核苷酸分子（crtl)(描述于Misawa等（1993)Plant J. 4 :833-840 和 Misawa 等（1994)Plant J. 6 :481-489 中；针对达草灭（norflurazon)耐 药性）；编码乙酰乳酸合成酶的多核苷酸分子（AHAS，也称为ALS)(描述于Sathasiivan等 (1990) Nucl. Acids Res. 18 :3078-2193中；针对磺酰脲除草剂耐药性）；及bar基因（描述 于DeBlock等（1987)EMB0 J. 6 :2513-2519中；针对草铵膦和双丙氨磷（bialaphos)耐药 性）。耐除草剂基因的转基因编码区和调控元件是可包括在本发明组合物中的多核苷酸触 发因子和除草剂的靶。
[0024] 本发明的组合物包括一种作为ACC酶抑制剂除草剂的组分，其包括芳氧基苯氧基 丙酸酯类、环己二酮类及苯基吡唑啉化学品家族的成员，包括但不限于，芳氧基苯氧基丙酸 酯类，包含炔草酸（〇1〇(1;[1^€(^)(丙酸2-[4-[(5-氯-3-氟-2-批陡基）氧基]苯氧基]-, 丙炔酯，（2R))、氰氟草酸（cyhalofop)((2R)-2-[4_(4-氰基-2-氟苯氧基）苯氧基]丙 酸丁酯）、禾草灵（diclofop) (2-[4-(2, 4-二氯苯氧基）苯氧基]丙酸甲酯）、精恶唑禾草 灵（fenoxaprop) ((R)-2-[4-(6-氯-1,3-苯并卩惡唑-2-基氧基）苯氧基]丙酸乙酯）、批 氟禾草灵（fluazifop) (2R)_2_[4_[[5-(二氟甲基）_2_批陡基]氧基]苯氧基]丙酸）、 氟批甲禾灵（haloxyfop) (2_[4_[ [3_氯_5_ (二氟甲基）_2_批陡基]氧基]苯氧基]丙 酸）、喔草酯（propaquizafop) ((2R)-2-[4_[(6-氯-2喹喔啉基）氧基]苯氧基]丙酸 2-[[(1_甲基次乙基）氨基]氧基]乙酯）及喹禾灵（quizalofop) (2R)-2-[4_[(6-氯-2-喹 喔啉基）氧基]苯氧基]丙酸；环己二酮，包含禾草灭（alloxydim) (2,2-二甲基-4, 6-二 氧代-5-[(1Ε)-1-[(2-丙烯-1-基氧基）亚氨基]丁基]环己烷甲酸甲酯）、丁苯草 酮（butroxydim) (2-[1_(乙氧基亚氨基）丙基]-3-轻基_5-[2,4, 6-三甲基-3-(1-氧 代丁基）苯基]-2-环己烯-1-酮）、烯草酮（clethodim) (2-[l-[[[(2E)-3-氯-2-丙 烯-卜基]氧基]亚氨基]丙基]-5_ [2-(乙硫基）丙基]_3_轻基_2_环己烯-1-酮）、 噻草酮（cycloxydim) (2-[1-(乙氧基亚氨基）丁基]-3-轻基-5-(四氢-2H-硫代批 喃-3-基）-2_环己烯-1-酮）、环苯草酮（profoxydim) (2-[1-[[2-(4_氯苯氧基）丙氧 基]亚氨基]丁基]-3-羟基-5-(四氢-2H-硫代吡喃-3-基）-2-环己烯-1-酮）、稀禾 定（sethoxydim) (2-[1-(乙氧基亚氣基）丁基]-5-[2 -(乙硫基）丙基]轻基环 己烯-1-酮）、批喃草酮（tepraloxydim) (2-[1-[[[(2Ε)-3-氯-2-丙烯-1-基]氧基] 亚氨基]丙基]-3-羟基-5-(四氢-2H-吡喃-4-基）-2-环己烯-1-酮）及三甲苯草酮 (tralkoxydim) (2_[1_(乙氧基亚氨基）丙基]-3-轻基-5-(2,4,6-三甲基苯基）_2_环 己烯-1-酮）；苯基批唑啉，包含唑啉草酯（pinoxaden) (2,2_二甲基丙酸8_(2, 6-二乙 基-4-甲基苯基）-1，2,4,5_四氢-7-氧代-7H-吡唑并[l，2-d] [1，4,5]氧杂二氮口-9_基 酯）。
[0025] 许多具有类似或不同作用模式的可用除草剂（本文中称为共除草剂）可以添加到 本发明的组合物中，例如包括但不限于以下的除草剂家族成员：酰胺除草剂类、芳香酸除草 剂类、含砷除草剂类、苯并噻唑除草剂类、苯甲酰基环己二酮除草剂类、烷基磺酸苯并呋喃 基酯除草剂类、氨基甲酸酯除草剂类、环己烯肟除草剂类、环丙基异噁唑除草剂类、二甲酰 亚胺除草剂类、二硝基苯胺除草剂类、二硝基苯酚除草剂类、二苯基醚除草剂类、二硫代氨 基甲酸酯除草剂类、卤代脂肪族除草剂类、咪唑啉酮除草剂类、无机除草剂类、腈除草剂类、 有机磷除草剂类、噁二唑酮除草剂类、噁唑除草剂类、苯氧基除草剂类、苯二胺除草剂类、批 唑除草剂类、哒嗪除草剂类、哒嗪酮除草剂类、吡啶除草剂类、嘧啶二胺除草剂类、嘧啶氧基 苯甲胺除草剂类、季铵除草剂类、硫代氨基甲酸酯除草剂类、硫代碳酸酯除草剂类、硫脲除 草剂类、三嗪除草剂类、三嗪酮除草剂类、三唑除草剂类、三唑酮除草剂类、三唑并嘧啶除草 剂类、尿嘧啶除草剂类及脲除草剂类。具体地说，可以使包含本发明的多核苷酸的组合物中 添加的除草剂的使用量降低。另外添加的除草剂的使用量可以降低10% -25%、 26% -50%、51 % -75%或更多，并且这些可增强多核苷酸与除草剂的组合物的活性的除草 剂涵盖在本文中作为本发明的一个方面。这些家族的代表性共除草剂包括但不限于，乙草 胺（acetochlor)、氟锁草醚（acifluorfen)、氟羧草醚钠（acifluorfen-sodium)、苯草醚 (aclonifen)、丙烯醒（acrolein)、草不绿（alachlor)、禾草灭（alloxydim)、烯丙醇、莠灭 净（ametryn)、氨唑草酮（amicarbazone)、氨基啼横隆（amidosulfuron)、氯氨卩比陡酸 (aminopyralid)、氨基三唑（amitrole)、横胺酸铵（ammonium sulfamate)、莎稗憐 (anilofos)、黄草灵（asulam)、阿特拉通（atraton)、阿特拉津（atrazine)、四唑啼横隆 (azimsulfuron)、BCPC、氟丁 酰草胺（beflubutamid)、草除灵（benazolin)、氟草胺 (benfluralin)、咲草黄（benfuresate)、节啼横隆（bensulfuron)、甲基节啼横隆 (bensulfuron-methyl)、地散憐（bensulide)、噻草平（bentazone)、双苯啼草酮、苯并双环 酮（benzobicyclon)、卩比草酮（benzofenap)、治草醚、双丙氨憐（bilanafos)、双草醚 (bispyribac)、双草醚钠（bispyribac-sodium)、硼砂（borax)、除草定（bromacil)、溴丁酉先 草胺（bromobutide)、溴苯腈、去草胺（butachlor)、布芬草、抑草磷（butamifos)、地乐胺 (butralin)、丁苯草酮（butroxydim)、丁草敌（butylate)、二甲胖酸（cacodylic acid)、氯 酸隹丐、唑草胺（cafenstrole)、长杀草（carbetamide)、唑草酮（carfentrazone)、唑酮草酯、 CDEA、CEPC、整形醇（chlorflurenol)、整形素（chlorflurenol-methyl)、杀草敏 (chloridazon)、氯啼横隆（chlorimuron)、乙基氯啼横隆（chlorimuron-ethyl)、氯醋酸 (chloroacetic acid)、绿麦隆（chlorotoluron)、氯苯胺灵（chlorpropham)、绿黄隆 (chlorsulfuron)、敌草索（chlorthal)、氯酞酸二甲酯（chlorthal-dimethyl)、卩引哚酮草 酯、环庚草醚（cinmethylin)、西速隆（cinosulfuron)、落草胺（cisanilide)、烯草酮 (clethodim)、块草酸（clodinafop)、块草酯（clodinafbp-propargyl)、异草酮 (clomazone)、稗草胺（clomeprop)、二氯批陡酸（clopyralid)、氯酯磺草胺 (cloransulam)、氯甲酯横草胺（cloransulam-methyl)、CMA、4_CPB、CPMF、4_CPP、CPPC、甲 酚、节草隆（cumyluron)、氨腈（cyanamide)、氰乙酰肼（cyanazine)、草灭特（cycloate)、环 丙啼磺隆（cyclosulfamuron)、噻草酮（cycloxydim)、氰氟草酸（cyhalofop)、氰氟草酯 (cyhalofop-butyl)、2,4-D、3,4_DA、杀草隆（daimuro)、茅草枯（dalapon)、棉隆 (dazomet)、2,4-DB、3,4-DB、2,4_DEB、甜菜安（desmedipham)、麦草畏、敌草臆 (dichlobenil)、邻二氯苯（ortho-dichlorobenzen)、对二氯苯（para-dichlorobenzene)、 滴丙酸（dichlorprop)、滴丙酸-P (dichlorprop-P)、禾草灵（diclofop)、甲基禾草灵 (diclofop-methyl)、双氯磺草胺（diclosulam)、燕麦枯（difenzoquat)、野燕枯甲基硫酸 酯（difenzoquat metilsulfate)、卩比氟草胺（diflufenican)、二氟卩比隆（diflufenzopyr)、 恶唑隆（dimefuron)、哌草丹（dimepiperate)、二甲草胺（dimethachlor)、异戊乙净 (dimethametryn)、二甲吩草胺（dimethenamid)、二甲吩草胺-P(dimethenamid-P)、噻节因 (dimethipin)、二甲基砷酸（dimethylarsinic acid)、敌乐安（dinitramine)、特乐酌· (dinoterb)、草乃敌（diphenamid)、杀草快（diquat)、二溴敌草快（diquat dibromide)、氟 硫草定（dithiopyr)、敌草隆（diuron)、DN0C、3,4-DP、DSM、EBEP、草多索（endothal)、 EPTC、禾草畏（esprocarb)、丁氟消草（ethalfluralin)、胺苯横隆（ethametsulfuron)、甲 基胺苯横隆（ethametsulfuron-methyl)、乙咲草黄（ethofumesate)、氯氟草醚 (ethoxyfen)、乙氧啼磺隆（ethoxysulfuron)、乙氧苯草胺（etobenzanid)、精恶唑禾草灵 (fenoxaprop-P)、乙基精恶唑禾草灵（fenoxaprop-P-ethyl)、四唑草胺（fentrazamide)、 硫酸亚铁、麦草伏甲酯（flamprop-M)、陡啼磺隆（flazasulfuron)、双氟磺草胺 (florasulam)、卩比氟禾草灵（fluazifop)、丁基卩比氟禾草灵（fluazifop-butyl)、精卩比氟禾 草灵（fluazifop-P)、丁基精批氟禾草灵（fluazifop-P-butyl)、氟酮磺隆 (flucarbazone)、氟酮横隆钠（flucarbazone-sodium)、氟卩比横隆（flucetosulfuron)、氯 乙氟灵（￡111(3111(^31；!_11)、氟噻草胺（：[11^6仙060、氟_嗪草酮（：[11^6叩71')、氟_嗪草酯 (flufenpyr-ethyl)、唑啼磺草胺（flumetsulam)、氟烯草酸（flumiclorac)、氟烯草酸戊 酯、丙炔氟草胺、伏草隆（fl uometuron)、乙羧氟草醚、乙羧氟草醚乙酯、氟丙酸 (flupropanate)、卩比羧啼磺隆（flupyrsulfuron)、 氟陡啼磺隆钠 (flupyrsulfuron-methyl-sodium)、抑草丁（flurenol)、氟陡酮（fluridone)、氟咯草酮 (fluorochloridone)、氟草烟（fluoroxypyr)、咲草酮（flurtamone)、氟螨嗪 (fluthiacet)、氟噻甲草酯、氟磺胺草醚（fomesafen)、甲酰胺磺隆（foramsulfuron)、调节 膦（fosamine)、草铵膦（glufosinate)、草铵膦铵盐（glufosinate-ammonium)、草甘膦、氯 批啼磺隆（halosulfuron)、甲基氯批啼磺隆（halosulfuron-methyl)、氟批甲禾灵 (haloxyfop)、氟卩比甲禾灵-P(haloxyfop-P)、HC-252、环嗪酮（hexazinone)、咪草酸 (imazamethabenz)、咪草酸甲酯（imazamethabenz-methyl)、甲氧咪草烟（imazamox)、甲咪 唑烟酸（imazapic)、灭草烟（imazapyr)、咪唑喹啉酸（imazaquin)、咪草烟（imazethapyr)、 唑舭啼磺隆（imazosulfuron)、萌草酮（indanofan)、碘甲焼、碘甲磺隆、碘甲磺隆钠盐 (iodosulfuron-methyl-sodium)、碘苯臆（ioxynil)、异丙隆（isoproturon)、异恶隆 (isouron)、异恶酰草胺（isoxaben)、异卩惡氯草酮（isoxachlortole)、异卩惡唑草酮 (isoxaflutole)、特胺灵（karbutilate)、乳氟禾草灵（lactofen)、环草陡（lenacil)、利谷 隆（linuron)、MAA、MAMA、MCPA、MCPA-硫代乙酯、MCPB、氯苯氧丙酸（mecoprop)、氯苯氧丙 酸-P(mecoprop-P)、苯噻酰草胺（mefenacet)、氟草磺（mefluidide)、甲磺胺磺隆 (mesosulfuron)、甲基甲横胺横隆（mesosulfuron-methyl)、硝横草酮（mesotrione)、威百 亩（metam)、恶唑酸草胺（metamifop)、苯嗪草酮（metamitron)、卩比唑草胺（metazachlor)、 甲基苯噻隆（methabenzthiazuron)、甲基砷酸、甲基杀草隆（methyldymron)、异硫氰酸甲 酯、甲氧苯草隆（metobenzuron)、异丙甲草胺（metolachlor)、精异丙甲草胺 (S-metolachlor)、横草唑胺（metosulam)、甲氧隆（metoxuron)、嗪草酮（metribuzin)、甲 横隆（metsulfuron)、甲基甲横隆（metsulfuron-methyl)、MK_66、草达灭（molinate)、绿谷 隆（monolinuron)、MSMA、萘丙胺（naproanilide)、敌草胺（napropamide)、抑草生 (naptalam)、草不隆（neburon)、烟啼磺隆（nicosulfuron)、壬酸、达草灭、油酸（脂肪酸）、 坪草丹（orbencarb)、甲啼陡横隆（orthosulfamuron)、黄草消（oryzalin)、丙块恶草酮、恶 草灵、环氧啼磺隆（oxasulfuron)、恶嗪草酮（oxaziclomefone)、乙氧氟草醚、百草枯 (paraquat)、百草枯二氯化物（paraquat dichloride)、克草猛（pebulate)、二甲戊乐灵 (pendimethalin)、五氟磺草胺（penoxsulam)、五氯酚（pentachlorophenol)、甲氯酰草胺 (pentanochlor)、环戊恶草酮、烯草胺（pethoxamid)、石油油料（petrolium oils)、苯敌草 (phenmedipham)、乙基甜菜宁（phenmedipham-ethyl)、毒養定（picloram)、氣卩比酸草胺 (picolinafen)、唑啉草酯（pinoxaden)、派草磷（piperophos)、亚砷酸钾、叠氮化钾、丙草 胺（pretilachlor)、氟啼横隆（primisulfuron)、甲基氟啼横隆（primisulfuron-methyl)、 氨基丙乐灵（prodiamine)、氟唑草胺、环苯草酮（profoxydim)、扑灭通（prometon)、扑草净 (prometryn)、毒草安（propachlor)、敌草索（propanil)、喔草酯（propaquizafop)、扑灭津 (propazine)、苯胺灵（propham)、异丙草胺（propisochlor)、丙苯磺隆 (propoxycarbazone)、丙苯横隆钠（propoxycarbazone-sodium)、块苯酸草胺 (propyzamide)、节草丹（prosulfocarb)、氟横隆（prosulfuron)、双唑草臆（pyraclonil)、 哌芬草（卩7『&：[11^611)、卩比草醚（卩7『&：[11^611-6也71)、节草唑（卩7『&201711&16)、卩比啼横隆 (pyrazosulfuron)、乙基批啼横隆（pyrazosulfuron-ethyl)、节草唑（pyrazoxyfen)、啼陡 月亏草醚（pyribenzoxim)、稗草丹（pyributicarb)、草醇（pyridafol)、草特 (pyridate)、环酯草醚（pyriftalid)、啼草醚（pyriminobac)、甲基啼草醚 (pyriminobac-methyl)、批啼沙泛（pyrimisulfan)、啼硫苯甲酸（pyrithiobac)、啼硫苯甲 酸钠（pyrithiobac-sodium)、二氯喹啉酸（quinclorac)、氯甲喹啉酸（quinmerac)、灭藻醌 (quinoclamine)、喹禾灵（quizalofop)、喹禾灵-P(quizalofop-P)、讽啼横隆 (rimsulfuron)、稀禾定（sethoxydim)、环草隆（siduron)、西玛津（simazine)、西草净 (simetryn)、SMA、亚砷酸钠、叠氮化钠、氯酸钠、磺草酮（sulcotrione)、甲磺草胺 (sulfentrazone)、甲啼横隆（sulfometuron)、甲基甲啼横隆（sulfometuron-methyl)、草 硫膦（sulfosate)、磺酰磺隆（sulfosulfuron)、硫酸、煤焦油、2,3,6-TBA、TCA、三氯醋酸钠 (TCA-sodium)、特丁隆（tebuthiuron)、卩比喃草酮（tepraloxydim)、特草定（terbacil)、特 丁通（terbumeton)、特丁津（terbuthylazine)、特丁净（terbutryn)、噻吩草胺 (thenylchlor)、噻草陡（thiazopyr)、噻吩横隆（thifensulfuron)、甲基噻吩横隆 (thifensulfuron-methyl)、禾草丹（thiobencarb)、仲草丹（tiocarbazil)、苯苯卩比唑草 (topramezone)、三甲苯草酮（tralkoxydim)、野麦畏（tri-allate)、醚苯横隆 (triasulfuron)、三嗪氟草胺（triaziflam)、苯横隆（tribenuron)、甲基苯横隆 (tribenuron-methyl)、杀草畏（tricamba)、绿草定（triclopyr)、草达津（trietazine)、三 氟陡磺隆（trifloxysulfuron)、三氟陡磺隆钠（trifloxysulfuron-sodium)、氟乐灵 (trifluralin)、氟胺横隆（triflusulfuron)、甲基氟胺横隆（triflusulfuron-methyl)、 三轻嗪（trihydroxytriazine)、三氟甲磺隆（tritosulfuron)、[3_[2_ 氯-4-氟-5-(-甲 基_6_二氣甲基_2,4_二氧代-，2, 3,4_四氧啼陡_3_基）苯氧基]_2_卩比陡氧基]乙酸乙 酯（CAS RN353292-3-6)、4-[(4,5-二氢-3-甲氧基-4-甲基-5-氧代）-H-，2,4-三唑-基 羰基-氨磺酰基]-5-甲基噻吩-3-甲酸（BAY636)、BAY747(CAS RN33504-84-2)、苯吡唑草 酮（0六3尺呢063-68-8)、4-羟基-3-[[2-[(2-甲氧基乙氧基）甲基]-6-(三氟甲基）-3-吡 啶基]羰基]-双环[3. 2.]辛-3-烯-2-酮（CAS RN35200-68-5)及 4-羟基-3- [ [2- (3-甲 氧基丙基）-6-(二氟甲基）-3-批陡基]撰基]-双环[3. 2.]半-3-烯-2-酮。此外，还包 括未指定作用模式的除草化合物，如以下专利中所描述：CN101279950A、CN101279951A、 DE10000600A1、DE10116399A1、DE102004054666A1、DE102005014638A1、DE102005014906A1、 DE102007012168A1、DE102010042866A1、DE10204951A1、DE10234875A1、DE10234876A1、 DE10256353A1、DE10256354A1、DE10256367A1、EP1157991A2、EP1238586A1、EP2147919A1、 EP2160098A2、 JP03968012B2、 JP2001253874A、 JP2002080454A、 JP2002138075A、 JP2002145707A、JP2002220389A、JP2003064059A、JP2003096059A、JP2004051628A、 JP2004107228A、 JP200500R583A、 JP2005239675A、 JP2005314407A、 JP2006232R24A、 JP2006282552A、 JP2007153847A、 JP2007161701A、 JP2007182404A、 JP2008074840A、 JP2008074841A、 JP2008133207A、 JP2008133218A、 JP2008169121A、 JP2009067739A、 JP2009114128A、JP2009126792A、JP2009137851A、US20060111241A1、US20090036311A1、 US20090054240A1, US20090215628AK US20100099561AK US20100152443AK US20110105329AUUS20110201501AUW02001055066A2,ff02001056975AUff02001056979AU W02001090071A2, W02001090080AU W02002002540AU W02002028182AU W02002040473AU W02002044173A2, W02003000679A2, W02003006422AU W02003013247AU W02003016308AU W02003020704AU W02003022051AU W02003022831AU W02003022843AU W02003029243A2, W02003037085AU W02003037878AU W02003045878A2, W02003050087A2, W02003051823AU W02003051824A1、W02003051846A2、W02003076409A1、W02003087067A1、W02003090539A1、 W02003091217AU W02003093269A2, W02003104206A2, W02004002947AU W02004002981A2, W02004011429AU W02004029060AU W02004035545A2, W02004035563AU W02004035564AU W02004037787AU W02004067518AU W02004067527AU W02004077950AU W02005000824AU W02005007627AU W02005040152AU W02005047233AU W02005047281AU W02005061443A2, W02005061464AU W02005068434AU W02005070889AU W02005089551AU W02005095335AU W02006006569AU W02006024820AU W02006029828AU W02006029829AU W02006037945AU W02006050803AU W02006090792AU W02006123088A2, W02006125687AU W02006125688AU W02007003294AU W02007026834AU W02007071900AU W02007077201AU W02007077247AU W02007096576AU W02007119434AU W02007134984AU W02008009908AU W02008029084AU W02008059948AU W02008071918AU W02008074991AU W02008084073AU W02008100426A2, W02008102908AU W02008152072A2, W02008152073A2, W02009000757AU W02009005297A2, W02009035150A2, W02009063180AU W02009068170A2, W02009068171A2, W02009086041AU W02009090401A2, W02009090402A2, W02009115788AU W02009116558AU W02009152995AU W02009158258AU W02010012649AU W02010012649AU W02010026989AU W02010034153AU W02010049270AU W02010049369AU W02010049405AU W02010049414AU W02010063422AU W02010069802AU W02010078906A2, W02010078912AU W02010104217AU W02010108611AU W02010112826A3, W02010116122A3, W02010119906AU W02010130970AU W02011003776A2, W02011035874A1、W02011065451A1，全部以引用的方式并入本文中。
[0026] 通过将本发明的组合物直接施用（诸如通过喷雾）到正在生长的植物的表面，来 对需要植物控制的农田进行处理。举例来说，应用该方法，通过向具有作物的田地喷洒该组 合物来控制该田地中的杂草。该组合物可以作为桶混合剂、连续的组分处理（一般为含有 多核苷酸的组合物随后除草剂）或来自单独容器的该组合物的一种或多种组分的同时处 理或混合来提供。田地的处理可以根据需要进行以提供杂草控制，并且该组合物各组分可 以被调整成通过利用能够选择性靶向有待控制的特定物种或植物科的特定多核苷酸或多 核苷酸组合物来靶向特定杂草种类或杂草科。该组合物可以根据施用到田地的时间，例如 在种植前、种植时、种植后、收获后，以有效使用量施用。ACC酶抑制剂除草剂可以向田地按 10到500g ai/ha(每公顷的活性成分量）或更高量施用。取决于田地中的杂草范围所需触 发分子的数量，该组合物的多核苷酸可以按每英亩1到30克的比率施用。
[0027] 需要杂草控制的作物包括但不限于，i)玉米、大豆、棉花、油菜、甜菜、苜蓿、甘蔗、 稻米及小麦；ii)蔬菜类植物，包括但不限于，马铃薯、甜椒、辣椒、瓜、西瓜、黄瓜、茄子、花 椰菜、椰菜、莴苣、菠菜、洋葱、豌豆、胡萝卜、甜玉米、大白菜、韭葱、茴香、南瓜、倭瓜或葫芦、 萝卜、球芽甘蓝、粘果酸浆、青刀豆、干豆或秋葵；iii)烹饪用植物，包括但不限于，罗勒、欧 芹、咖啡树或茶树；或iv)水果类植物，包括但不限于，苹果树、梨树、樱桃树、桃树、李树、杏 树、香蕉、车前草、鲜食葡萄、酿酒葡萄、柑橘、鳄梨树、芒果或浆果；v)生长用于观赏或商业 用途的树，包括但不限于，果树或坚果树；或vi)观赏性植物（例如观赏性开花植物或灌木 或草坪草）。本文提供的方法和组合物还可以施用于通过插条、克隆或嫁接方法产生的植 物（即，不是由种子生长的植物），包括果树和植物，包括但不限于，柑橘、苹果树、鳄梨树、 番茄、茄子、黄瓜、瓜类、西瓜和葡萄，以及各种观赏性植物。
[0028] 杀虫混合物
[0029] 这些多核苷酸组合物还可以作为与各种农业化学品和/或杀昆虫剂、杀螨 剂以及杀真菌剂、杀虫剂和生物杀虫剂的混合物来使用。实例包括但不限于，甲基 谷硫磷（azinphos-methyl)、高灭磷（acephate)、异卩惡唑磷（isoxathion)、异丙胺磷 (isofenphos)、乙硫憐（ethion)、乙啼硫憐（etrimfos)、讽吸憐（oxydemeton-methyl)、 异亚讽憐（oxydeprofos)、喹硫憐（quinalphos)、毒死蝶（chlorpyrifos)、甲基毒死 蝶（chlorpyrifos-methyl)、毒虫畏（chlorfenvinphos)、杀螟臆（cyanophos)、蔬 果憐（dioxabenzofos)、二氯松（dichlorvos)、二硫松（disulfoton)、甲基毒虫畏 (dimethylvinphos)、乐果（dimethoate)、硫丙憐（sulprofos)、二嗪憐（diazinon)、甲 基乙拌憐（thiometon)、杀虫威（tetrachlorvinphos)、双硫憐（temephos)、丁基啼陡憐 (tebupirimfos)、特丁硫憐（terbufos)、二溴憐（naled)、姆灭多（Vamidothion)、批唑硫憐 (pyraclofos)、咕嗪硫磷（pyridafenthion)、甲基啼陡磷（pirimiphos-methyl)、杀螟硫磷 (fenitrothion)、倍硫憐（fenthion)、稻丰散（phenthoate)、批氟硫憐（flupyrazophos)、 丙硫磷（prothiofos)、丙虫磷（propaphos)、丙溴磷（profenofos)、辛硫磷（phoxime)、伏 杀硫磷（phosalone)、亚胺硫磷（phosmet)、安果（formothion)、甲拌磷（phorate)、马拉硫 憐（malathion)、灭姆憐（mecarbam)、线虫灵（mesulfenfos)、甲胺憐（methamidophos)、 杀扑憐（methidathion)、对硫憐（parathion)、甲基对硫憐（methyl parathion)、久 效憐（monocrotophos)、敌百虫（trichlorphon)、EPN、异唑憐（isazophos)、衣胺憐 (isamidofos)、硫线憐（cadusafos)、苯基胺憐（diamidaphos)、除线憐（dichlofenthion)、 虫线磷（thionazin)、克线磷（fenamiphos)、噻唑硫磷（fosthiazate)、丁 硫环磷 (fosthietan)、憐虫威（phosphocarb)、DSP、灭线憐（ethoprophos)、棉铃威（alanycarb)、 涕灭威（aldicarb)、异丙威（isoprocarb)、乙硫苯威（ethiofencarb)、西维因（carbaryl)、 丁咲喃（carbosulfan)、灭杀威（xylylcarb)、硫双威（thiodicarb)、抗虫牙威（pirimicarb)、 仲丁威（fenobucarb)、咲线威（furathiocarb)、残杀威（propoxur)、恶虫威（bendiocarb)、 丙硫克百威（benfuracarb)、灭多威（methomyl)、速灭威（metolcarb)、XMC、克百威 (carbofuran)、涕灭砜威（aldoxycarb)、杀线威（oxamyl)、氟丙菊酯（acrinathrin)、丙 烯菊酯（allethrin)、氰戊菊酯（esfenvalerate)、烯炔菊酯（empenthrin)、拟除虫菊酯 (cycloprothrin)、三氟氯氰菊酯（cyhalothrin)、γ-氯氟氰菊酯（gamma-cyhalothrin)、 入 -氯氟氰菊酯（lambda-cyhalothrin)、氟氯氰菊酯（cyf luthrin)、β -氟氯氰菊酯 (beta_cyfluthrin)、氣氛菊酉旨（cypermethrin)、α _ 氣氛菊酉旨（alpha-cypermethrin)、 氯氰菊酯（zeta-cypermethrin)、氟娃菊酯（silafluofen)、胺菊酯（tetramethrin)、 七氟菊酯（tefluthrin)、溴氰菊酯（deltamethrin)、四溴菊酯（tralomethrin)、联 苯菊酯（bifenthrin)、苯醚菊（酯phenothrin)、氰戊菊酯（fenvalerate)、甲氰菊 酯（fenpropathrin)、炔咲菊酯（furamethrin)、炔丙菊酯（prallethrin)、氟氰戊菊 酯（flucythrinate)、氟胺氰菊酯（fluvalinate)、溴氟菊酯（flubrocythrinate)、 氯菊酯（permethrin)、节咲菊酯（resmethrin)、醚菊酯（ethofenprox)、杀螟丹 (cartap)、虫噻焼（thiocyclam)、杀虫横（bensultap)、卩比虫清（acetamiprid)、卩比虫啉 (imidacloprid)、噻虫胺（clothianidin)、咲虫胺（dinotefuran)、噻虫啉（thiacloprid)、 噻虫嗪（thiamethoxam)、烯陡虫胺（nitenpyram)、氟陡脈（chlorfluazuron)、除 虫脲（diflubenzuron)、氟苯脲（teflubenzuron)、杀铃脲（triflumuron)、双苯氟 脲（novaluron)、多氟脲（noviflumuron)、双三氟虫脲（bistrifluoron)、陡蜱脲 (fluazuron)、氟环脈（flucycloxuron)、氟虫脈（flufenoxuron)、氟铃脈（hexaflumuron)、 氟丙氧脲（lufenuron)、环虫酰肼（chromafenozide)、抑虫肼（tebufenozide)、氯虫酰 餅（halofenozide)、甲氧虫酉先餅（methoxyfenozide)、苯虫醚（diofenolan)、灭妮胺 (cyromazine)、蚊妮醚（pyriproxyfen)、噻嗪酮（buprofezin)、烯虫酯（methoprene)、烯 虫乙酯（hydroprene)、抑虫灵（kinoprene)、唑虫牙威（triazamate)、硫丹（endosulfan)、 杀蝴醋（chlorfenson)、乙基杀蝴醇（chlorobenzilate)、三氣杀蝴醇（dicofol)、漠蝴 酉旨（bromopropylate)、乙酉先虫月青（acetoprole)、氣虫月青（fipronil)、乙虫?青（ethiprole)、 除虫菊酯（pyrethrin)、鱼藤酮（rotenone)、硫酸尼古丁 （nicotine sulphate)、 BT(苏云金芽孢杆菌（Bacillus Thuringiensis))剂、艾克敌（spinosad)、阿维菌素 (abamectin)、灭螨醌（acequinocyl)、横胺螨酯（amidoflumet)、双甲脉（amitraz)、乙螨 唑（etoxazole)、灭螨猛、四螨嗪（clofentezine)、苯丁锡（fenbutatin oxide)、除螨灵 (dienochlor)、三环锡（cyhexatin)、螺螨酯（spirodiclofen)、螺甲螨酯（spiromesifen)、 三氯杀螨砜（tetradifon)、卩比螨胺（tebufenpyrad)、乐杀螨（binapacryl)、联苯肼酯 (bifenazate)、螨灵（pyridaben)、啼螨醚（pyrimidifen)、喹螨醚（fenazaquin)、 苯硫威（fenothiocarb)、唑螨酯（fenpyroximate)、啼螨酯（fluacrypyrim)、氟陡胺 (fluazinam)、氟螨嗪（flufenzin)、噻螨酮（hexythiazox)、块螨特（propargite)、苯螨 特（benzomate)、多萘菌素复合物（polynactin complex)、密灭汀（milbemectin)、氟 丙氧脈（lufenuron)、灭姆憐（mecarbam)、甲硫威（methiocarb)、速灭憐（mevinphos)、 节螨醚（halfenprox)、印棟素（azadirachtin)、 丁啼脈（diafenthiuron)、萌虫 威（indoxacarb)、因灭汀苯甲酸盐（emamectin benzoate)、油酸钾、油酸钠、溴虫腈 (chlorfenapyr)、唑虫酸胺（tolfenpyrad)、卩比姆酮（pymetrozine)、苯氧威（fenoxycarb)、 氟蚁腙（hydramethylnon)、轻丙基淀粉、陡虫丙醚（pyridalyl)、啼虫胺（flufenerim)、 氟虫酰胺（flubendiamide)、氟陡虫酰胺（flonicamid)、氰氟虫腙（metaflamizole)、雷 皮菌素（lepimectin)、TPIC、阿苯 _ 唑（albendazole)、丙氧苯咪唑（oxibendazole)、 奥芬达唑（oxfendazole)、水杨菌胺（trichlamide)、繁福松（fensulfothion)、芬苯达 唑（fenbendazole)、盐酸左旋咪唑（levamisole hydrochloride)、酒石酸噻烯氢啼陡 (morantel tartrate)、棉隆、威百亩（metam-sodium)、三唑酮（triadimefon)、六那唑 (hexaconazole)、丙环唑（propiconazole)、种菌唑（ipconazole)、咪酸胺（prochloraz)、 氟菌唑（triflumizole)、戊唑醇（tebuconazole)、氟环唑（epoxiconazole)、苯醚 甲环唑（difenoconazole)、氟娃唑（flusilazole)、三唑醇（triadimenol)、环丙唑 醇（cyproconazole)、叶菌唑（metconazole)、喹唑菌酮（fluquinconazole)、联苯三 唑醇（bitertanol)、四氟醚唑（tetraconazole)、灭菌唑（triticonazole)、粉唑醇 (flutriafol)、戊菌唑（penconazole)、烯唑醇（diniconazole)、臆苯唑（fenbuconazole)、 糖菌唑（bromuconazole)、亚胺唑（imibenconazole)、娃氟唑（simeconazole)、臆菌唑 (myclobutanil)、土菌消（hymexazole)、烯菌灵（imazalil)、福拉比（furametpyr)、噻咲 灭（thifluzamide)、氯唑灵（etridiazole)、恶咪唑（oxpoconazole)、恶咪唑延胡索酸 盐（oxpoconazole fumarate)、稻痕酯（pefurazoate)、丙硫菌唑（prothioconazole)、 P定斑B亏（pyrifenox)、氯苯啼陡醇（fenarimol)、氟苯啼陡醇（nuarimol)、乙啼酚磺酸酯 (bupirimate)、啼菌胺（mepanipyrim)、啼菌环胺（cyprodinil)、啼霉胺（pyrimethanil)、 甲霜灵（metalaxyl)、精甲霜灵（mefenoxam)、恶霜灵（oxadixyl)、苯霜灵（benalaxyl)、 托布津（thiophanate)、甲基硫菌灵（thiophanate-methyl)、苯菌灵（benomyl)、多菌灵 (carbendazim)、麦穗宁（fuberidazole)、噻菌灵（thiabendazole)、代森猛锋（manzeb)、 甲基代森锌（propineb)、代森锌（zineb)、代森联（metiram)、代森猛（maneb)、福美 锋（ziram)、福美双（thiuram)、百菌清（chlorothalonil)、噻唑菌胺（ethaboxam)、 氧化萎锈灵（oxycarboxin)、萎锈灵（carboxin)、氟酰胺（flutolanil)、娃噻菌胺 (silthiofam)、灭镑胺（mepronil)、烯酸吗啉（dimethomorph)、苯镑陡（fenpropidin)、粉 镑啉（fenpropimorph)、葚抱菌素（spiroxamine)、十三吗啉（tridemorph)、十二环吗啉 (dodemorph)、氟吗啉（flumorph)、臆啼菌酯（azoxystrobin)、醚菌酯（kresoxim-methyl)、 苯氧菌胺（metominostrobin)、月亏醚菌胺（orysastrobin)、氟啼菌酯（fluoxastrobin)、 布洛芬（trifloxystrobin)、醚菌胺（dimoxystrobin)、百克敏（pyraclostrobin)、P定 氧菌酯（picoxystrobin)、异菌脲（iprodione)、腐霉利（procymidone)、乙烯菌核利 (vinclozolin)、克氯得（chlozolinate)、氟硫灭（flusulfamide)、棉隆、异硫氰酸甲酯、 氯化苦（chloropicrin)、石黄菌威（methasulfocarb)、恶霉灵（hydroxyisoxazole)、轻 基异卩惡唑钾、氯唑灵（echlomezol)、D-D、氨基甲酸酯（carbarn)、碱式氯化铜、碱式硫酸 铜、壬基苯酌·横酸铜（copper nonylphenolsulfonate)、轻基喹啉铜（oxine copper)、 DBEDC、无水硫酸铜、五水硫酸铜、氢氧化铜、无机硫、可湿性硫、石硫合剂（lime sulfur)、 硫酸锌、三苯锡（fentin)、碳酸氢钠、碳酸氢钾、次氯酸钠、银、敌痕磷（edifenphos)、 甲基立枯憐（tolclofos-methyl)、福赛得（fosetyl)、异稻痕净（iprobenfos)、消螨 普（dinocap)、卩比啼磷（pyrazophos)、加普胺（carpropamid)、四氯苯酞（fthalide)、 三环唑（tricyclazole)、百快隆（pyroquilon)、双氯氰菌胺（diclocymet)、芬太尼 (fenoxanil)、春雷霉素（kasugamycin)、井网霉素（validamycin)、多氧霉素（polyoxins)、 杀稻痕素 S(blasticiden S)、土霉素（oxytetracycline)、灭粉霉素（mildiomycin)、 链霉素（streptomycin)、菜籽油、机械油、苯噻菌胺（benthiavalicarbisopropyl)、 丙森锋（iprovalicarb)、霜霉威（propamocarb)、乙霉威（diethofencarb)、唑咲草 (fluoroimide)、氟菌臆（fludioxanil)、拌种咯（fenpiclonil)、喹氧灵（quinoxyfen)、P惡 喹酸（oxolinic acid)、百菌清（chlorothalonil)、克菌丹（captan)、灭菌丹（folpet)、 烯丙苯噻唑（probenazole)、阿拉酸式苯-S-甲基（acibenzolar-S-methyl)、噻酸菌胺 (tiadinil)、环氟菌胺（cyflufenamid)、环酸菌胺（fenhexamid)、二氟林（diflumetorim)、 苯菌酮（metrafenone)、氟卩比菌胺（picobenzamide)、丙氧喹啉（proquinazid)、恶 唑菌酮（famoxadone)、氰霜唑（cyazofamid)、咪唑菌酮（fenamidone)、苯酸菌胺 (zoxamide)、陡酰菌胺（boscalid)、霜脲氰（cymoxanil)、二氰蒽醌（dithianon)、 氟陡胺（fluazinam)、抑菌灵（dichlofluanide)、嗪胺灵（triforine)、稻痕灵 (isoprothiolane)、啼菌腙（ferimzone)、t?i菌酮（diclomezine)、叶枯酞（tecloftalam)、 戊菌隆（pencycuron)、灭螨猛（chinomethionat)、双狐辛胺乙酸盐（iminoctadine acetate)、双胍辛胺焼苯磺酸盐（iminoctadine albesilate)、代森铵（ambam)、福代锌 (polycarbamate)、噻二嗪（thiadiazine)、地茂散（chloroneb)、二甲基二硫代氨基甲 酸儀（nickel dimethyldithiocarbamate)、双辛狐胺（guazatine)、十二焼基狐乙酸盐 (dodecylguanidine-acetate)、五氯石肖基苯（quintozene)、甲苯氟石黄胺（tolylfluanid)、 敌菌灵（anilazine)、间硝酞异丙酯（nitrothalisopropyl)、种衣酯（fenitropan)、 甲菌定（dimethirimol)、苯并噻唑、肝素蛋白、氟联苯菌（f lumetover)、双炔酰菌胺 (mandipropamide)及批噻菌胺（penthiopyrad) 〇
[0030] 多核苷酸
[0031] 如本文所使用，术语"DNA"、"DNA分子"、"DNA多核苷酸分子"是指基因组或合成来 源的单链DNA(ssDNA)或双链DNA(dsDNA)分子，诸如，脱氧核糖核苷酸碱基的聚合物或DNA 多核苷酸分子。如本文所使用，术语"DNA序列"、"DNA核苷酸序列"或"DNA多核苷酸序列" 是指DNA分子的核苷酸序列。如本文所使用，术语"RNA"、"RNA分子"、"RNA多核苷酸分子" 是指基因组或合成来源的单链RNA(ssRNA)或双链RNA(dsRNA)分子，诸如，包含单链或双链 区的核糖核苷酸碱基的聚合物。除非另作说明，否则所给的在本说明书正文中的核苷酸序 列是从左向右，即，5'至3'方向读取。本文中使用的命名是按美国联邦法规（United States Code of Federal Regulations) § 1.822 第 37 款所规定的并且在 WIP0 标准 ST. 25 (1998)， 附录2,表1和表3中有所阐述。
[0032] 如本文所使用，"多核苷酸"是指含有多个核苷酸的DNA或RNA分子，并且一般是指 "寡核苷酸"（典型地长度为50个或更少核苷酸的多核苷酸分子）和具有51个或更多个核 苷酸的多核苷酸两者。本发明的实施方案包括了包括以下的组合物：长度为18-25个核苷 酸（18聚体、19聚体、20聚体、21聚体、22聚体、23聚体、24聚体或25聚体）的寡核苷酸， 例如寡核苷酸SEQ ID NO :3901-4530或其片段；或长度为26个或更多个核苷酸的中等长 度多核苷酸（具有 26、27、28、29、30、307、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、 46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、约65、约70、约75、约80、约85、约90、 约 95、约 100、约 110、约 120、约 130、约 140、约 150、约 160、约 170、约 180、约 190、约 200、 约210、约220、约230、约240、约250、约260、约270、约280、约290或约300个核苷酸的多 核苷酸），例如寡核苷酸SEQ ID NO :93-3900或其片段；或长度大于约300个核苷酸的较长 多核苷酸（例如长度在约300到约400个核苷酸之间、在约400到约500个核苷酸之间、在 约500到约600个核苷酸之间、在约600到约700个核苷酸之间、在约700到约800个核苷 酸之间、在约800到约900个核苷酸之间、在约900到约1000个核苷酸之间、在约300到约 500个核苷酸之间、在约300到约600个核苷酸之间、在约300到约700个核苷酸之间、在 约300到约800个核苷酸之间、在约300到约900个核苷酸之间，或为约1000个核苷酸，或 长度甚至超过约1000个核苷酸的多核苷酸，例如最多靶基因的整个长度，包括该靶基因的 编码或非编码或者编码与非编码部分在内），例如表1的多核苷酸（SEQ ID NO :1-93)，其中 所选多核苷酸或其片段与SEQ ID NO :1-93同源或互补，其抑制、阻遏或以其它方式延迟靶 ACC酶基因的表达。靶基因包含植物细胞中靶基因的表达受本发明的方法和组合物调节的 任何多核苷酸分子或其片段。在多核苷酸为双链的情况下，其长度可以类似地按照碱基对 来描述。可以使本发明的寡核苷酸和多核苷酸与基因的相邻遗传元件，例如横跨内含子与 外显子的接合区、启动子与转录区的接合区、5'前导序列与编码序列的接合区、3'非翻译区 与编码序列的接合区基本上同一或基本上互补。
[0033] 本发明的各种实施方案中所使用的多核苷酸组合物包括了含寡核苷酸或多核苷 酸或两者的混合物，包括RNA或DNA或RNA/DNA杂交体，或者化学修饰的寡核苷酸或多核 苷酸或其混合物的组合物。在一些实施方案中，该多核苷酸可以是核糖核苷酸与脱氧核糖 核苷酸的组合，例如主要由核糖核苷酸组成但具有一个或多个末端脱氧核糖核苷酸的合成 多核苷酸，或主要由脱氧核糖核苷酸组成但具有一个或多个末端双脱氧核糖核苷酸的合成 多核苷酸。在一些实施方案中，该多核苷酸包括非经典核苷酸，诸如肌苷、硫尿核苷或假 尿苷。在一些实施方案中，该多核苷酸包括化学修饰的核苷酸。化学修饰的寡核苷酸或 多核苷酸的实例是本领域中众所周知的；参见例如，美国专利公布20110171287、美国专利 公布20110171176及美国专利公布20110152353、美国专利公布20110152346、美国专利 公布20110160082,以引用的方式并入本文中。举例来说，包括但不限于，寡核苷酸或多核 苷酸的天然存在的磷酸二酯主链可以用硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯或甲基膦酸酯核苷酸 间键修饰部分或完全地进行修饰，经过修饰的核苷碱基或经过修饰的糖可以用于寡核苷 酸或多核苷酸合成中，并且寡核苷酸或多核苷酸可以用荧光部分（例如，荧光素或罗丹明 (rhodamine))或其它标记（例如生物素）进行标记。
[0034] 这些多核苷酸可以单链或双链RNA，或单链或双链DNA，或双链DNA/RNA杂交体， 或其经过修饰的类似物，并且可以具有寡核苷酸长度或更长。在本发明的更特定的实施方 案中，在植物细胞中提供单链RNA的多核苷酸选自：(a)单链RNA分子（ssRNA) ;(b)自杂 交形成双链RNA分子的单链RNA分子；（c)双链双链RNA分子（dsRNA) ; (d)单链DNA分子 (ssDNA) ;(e)自杂交形成双链DNA分子的单链DNA分子；及（f)转录成RNA分子的单链DNA 分子，包括经过修饰的Pol ΠΙ基因；（g)双链DNA分子（dsDNA) ; (h)转录成RNA分子的双 链DNA分子，包括经过修饰的Pol III基因；（i)杂交的双链RNA/DNA分子；或其组合。在一 些实施方案中，这些多核苷酸包括化学修饰的核苷酸或非经典核苷酸。在一些实施方案中， 这些寡核苷酸可以为平末端的，或可以包含至少一条或两条链的1-5个核苷酸的3'突出。 该寡核苷酸的其它配置是本领域中已知的并且涵盖于本文中。在该方法的实施方案中，这 些多核苷酸包括通过分子内杂交形成的双链DNA、通过分子间杂交形成的双链DNA、通过分 子内杂交形成的双链RNA或通过分子间杂交形成的双链RNA。在一个实施方案中，这些多核 苷酸包括自杂交形成发夹结构的单链DNA或单链RNA，其具有至少部分双链的结构，包括至 少一个将与由有待抑制的基因所转录的RNA杂交的区段。不希望受任何机制的束缚，据信 这些多核苷酸产生或将产生具有至少一个将与由有待抑制的基因所转录的RNA杂交的区 段的单链RNA。在某些其它实施方案中，这些多核苷酸另外包括启动子，一般是在植物中起 作用的启动子，例如P〇l II启动子、P〇l III启动子、P〇l IV启动子或pol V启动子。
[0035] 术语"基因"是指染色体DNA、质粒DNA、cDNA、内含子和外显子DNA、人工DNA多核 苷酸，或编码肽、多肽、蛋白质或RNA转录物分子的其它DNA，以及侧接涉及表达调控的编码 序列的遗传元件，诸如启动子区、5'前导区、3'非翻译区。该基因的任何组分都是本发明的 寡核苷酸和多核苷酸的潜在靶。
[0036] 本发明的多核苷酸分子被设计成通过诱导植物中内源ACC酶基因的调控或抑制 来调节表达，并且被设计成具有与植物内源ACC酶基因（包括在植物中提供除草剂耐药性 ACC酶的转基因）的核苷酸序列或由植物内源ACC酶基因转录的RNA序列基本上同一或基 本上互补的核苷酸序列，这些核苷酸序列可以是编码序列或非编码序列。调节表达的有效 分子被称为"触发分子或触发多核苷酸"。"基本上同一"或"基本上互补"意思指触发多核 苷酸（或双链多核苷酸的至少一条链或其部分，或单链多核苷酸的一部分）被设计成与内 源基因非编码序列或与由该内源基因转录的RNA (称为信使RNA或RNA转录物）杂交，以实 现对该内源基因表达的调控或抑制。触发分子是通过用反义或有义多核苷酸的部分重叠的 探针或非重叠探针"铺盖（tiling) "这些基因靶来鉴别，这些反义或有义多核苷酸与内源 基因的核苷酸序列基本上同一或基本上互补。可以将多个靶序列对准并且根据本发明的方 法将共有同源性的序列区域鉴别为多个靶的潜在触发分子。各种长度（例如18-25个核苷 酸、26-50个核苷酸、51-100个核苷酸、101-200个核苷酸、201-300个核苷酸或更长）的多 个触发分子可以汇集于少许处理中以便研究覆盖了一部分基因序列（例如，编码区的一部 分对非编码区的一部分，或基因的5'部分对3'部分）或包括靶基因的编码区和非编码区 在内的整个基因序列的多核苷酸分子。所汇集的触发分子的多核苷酸分子可以分成更小的 集合或单个分子，以便鉴别出提供希望的作用的触发分子。
[0037] 靶基因 RNA和DNA多核苷酸分子（表1，SEQ ID NO :1-93)是通过许多可用的方 法和设备进行测序。一些测序技术是可商购的，诸如Affymetrix公司（加利福尼亚州森尼 维尔（Sunnyvale，Calif·))的杂交测序平台（sequencing-by-hybridization platform) 以及 454Life Sciences (康涅狄克州布莱德福德（Bradford, Conn.))、Illumina/ Solexa(加利福尼州海沃德（Hayward，Califf·))和 Helicos Biosciences (马萨诸塞 州剑桥（Cambridge，Mass·))的合成测序平台（sequencing-by-synthesis platform), 及Applied Biosystems (加利福尼亚州福斯特市（Foster City, Calif.))的连接测序平 台（sequencing-by-ligation platform)，如下文所描述。除使用 Helicos Biosciences 的合成测序法进行的单分子测序外，本发明的方法还涵盖其它单分子测序技术，并且包括 Pacific Biosciences 的SMRT.TM.技术、Ion Torrent. TM.技术以及由例如Oxford Nanopore Technologies开发的纳米孔测序技术。包含ACC酶靶基因的DNA或RNA可以使用与SEQ ID NO :1-93或其片段基本上互补或基本上同源的引物或探针进行分离。聚合酶链反应（PCR) 基因片段可以使用与SEQ ID NO :1-93或其片段基本上互补或基本上同源的引物来产生，该 基因片段可用于从植物基因组中分离出ACC酶基因 。SEQ ID NO :1-93或其片段可以用于各 种序列捕获技术中以分离另外的靶基因序列，例如，包括但不限于，Roche NimbleGen? (威斯康星州麦迪逊（Madis〇n，wI))和抗生蛋白链菌素偶联的Dynabeads? (纽约州格兰 德岛（Grand Island，NY)的 Life Technologies)，以及 US20110015084,该案以引用的方式 整体并入本文中。
[0038] 功能性单链多核苷酸的实施方案具有的序列互补性无需为100%，但至少足以允 许与由靶基因或靶基因的DNA转录的RNA杂交，从而形成双链体以允许基因沉默机制。因 此，在实施方案中，多核苷酸片段被设计成与靶ACC酶基因序列或由该靶基因转录的信使 RNA中的18个或更多个连续核苷酸的序列基本上同一或基本上互补。"基本上同一"意思 指当与靶基因或由该靶基因转录的RNA中的18个或更多个连续核苷酸的序列相比较时，具 有 100%序列同一性，或至少约 83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、 93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列同一性；"基本上互补"意思指当与靶基因或 由该靶基因转录的RNA中的18个或更多个连续核苷酸的序列相比较时，具有100%序列 互补性，或至少约 83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、 95%、96%、97%、98%或99%序列互补性。在本发明的一些实施方案中，多核苷酸分子被 设计成与指定靶基因的一个等位基因或一个家族成员（本发明的基因的编码或非编码序 列）具有100%序列同一性或互补性；在其它实施方案中，这些多核苷酸分子被设计成与指 定靶基因的多个等位基因或家族成员具有100%序列同一性或互补性。
[0039] 在某些实施方案中，组合物中使用的与靶基因或转录物基本上同一或基本上互补 的多核苷酸将包含该组合物中的优势核酸。因此，在某些实施方案中，与靶基因或转录物 基本上同一或基本上互补的多核苷酸将包含该组合物中所提供的至少约50%、75%、95%、 98%或100%的核酸（以质量或摩尔浓度计）。然而，在某些实施方案中，与靶基因或转录物 基本上同一或基本上互补的多核苷酸可以包含该组合物中所提供的至少约1%到约50%、 约10%到约50%、约20%到约50%或约30%到约50%的核酸（以质量或摩尔浓度计）。 还提供了这样一些组合物，其中与靶基因或转录物基本上同一或基本上互补的多核苷酸可 以包含该组合物中所提供的至少约1%到100%、约10%到100%、约20%到约100%、约 30 %到约50 %或约50 %到100 %的核酸（以质量或摩尔浓度计）。
[0040] "同一性"是指两个多核酸或蛋白质序列之间的相似性程度。这两个序列的比对是 通过适合计算机程序进行的。广泛使用并且得到认可的用于进行序列比对的计算机程序是 CLUSTALW vl. 6 (Thompson 等，Nucl. Acids Res.，22 :4673-4680,1994)。匹配碱基或氨基酸 的数量除以碱基或氨基酸总数，并乘以100,得到同一性百分比。举例来说，如果两个有580 个碱基对的序列具有145个匹配碱基，那么它们将为25%同一的。如果比较的两个序列具 有不同长度，那么匹配的数量除以两个长度中较短的长度。举例来说，如果一个有200个氨 基酸的蛋白质与一个有400个氨基酸的蛋白质之间有100个匹配的氨基酸，那么它们相对 于较短的序列具有50%同一性。如果较短的序列的长度不到150个碱基或50个氨基酸，那 么匹配的数量除以150 (对于核酸碱基）或50 (对于氨基酸），并乘以100,得到同一性百分 比。
[0041] 针对特定基因家族成员的触发分子可以由一种植物或多种植物的基因家族的编 码和/或非编码序列，通过比对并从比对序列的最小同源区中选出200-300个多核苷酸片 段来鉴别，并且使用局部施用的多核苷酸（有义或反义ssDNA或ssRNA、dsRNA或dsDNA) 进行评估以确定这些分子在诱导除草表型方面的相对功效。这些有效区段进一步细分成 50-60个多核苷酸片段，根据最小同源性区分优先次序，并使用局部施用的多核苷酸进行再 评估。这50-60个有效多核苷酸片段细分成19-30个多核苷酸片段，根据最小同源性区分 优先次序，并再次针对产率/质量表型的诱导进行评估。一旦确定了相对功效，就单独地利 用这些片段，或结合一种或多种其它片段对其再次评估，以确定用于提供产率/质量表型 的触发组合物或触发多核苷酸的混合物。
[0042]用于广谱活性的触发分子可以由一种植物或多种植物的基因家族的编码和/或 非编码序列，通过比对并从比对序列的最高同源性区域中选出200-300个多核苷酸片段来 鉴别，并且使用局部施用的多核苷酸（有义或反义ssDNA或ssRNA、dsRNA或dsDNA)进行 评估以确定这些分子在诱导产率/质量表型方面的相对功效。这些有效区段进一步细分成 50-60个多核苷酸片段，根据最高同源性区分优先次序，并使用局部施用的多核苷酸进行再 评估。这50-60个有效多核苷酸片段细分成19-30个多核苷酸片段，根据最高同源性区分 优先次序，并再次针对产率/质量表型的诱导进行评估。一旦确定了相对功效，就利用单独 这些片段或其与一种或多种其它片段的组合，以确定用于提供产率/质量表型的触发组合 物或触发多核苷酸的混合物。
[0043] 制备多核苷酸的方法是本领域众所周知的。本领域中已知化学合成、体内合成 及体外合成方法和组合物，并且包括各种病毒元件、微生物细胞、经过修饰的聚合酶及经 过修饰的核苷酸。市面上的寡核苷酸制剂通常在有义链的3'端上提供两个脱氧核糖核 苷酸。较长的多核苷酸分子可以由可商购的试剂盒来合成，例如Applied Biosystems/ Ambion(德克萨斯州奥斯汀（Austin，TX)))的试剂盒在微生物表达盒中在5'端上连接有 DNA，该微生物表达盒包括一个细菌Τ7聚合酶启动子，其产生能组装成dsRNA的RNA链；及 由各种制造商提供的试剂盒，包括HRiboMax Express (威斯康星州麦迪逊的Promega)、 AmpliScribe T7_Flash(威斯康星州麦迪逊的 Epicentre)及 TranscriptAid T7High Yield(马里兰州格伦伯尼（Glen Bumie，MD)的Fermentas)。dsRNA分子可以由微生物表 达盒在具有经过调控或不足的RNA酶III酶活性的细菌细胞中产生（Ongvarrasopone等， ScienceAsia33 :35-39 ;Yin，Appl. Microbiol. Biotechnol84 :323_333,2009 ;Liu 等，BMC BiotechnologylO :85,2010)，或使用各种病毒载体产生以产生足量的dsRNA。在本发明中， 将ACC酶基因片段插入微生物表达盒中表达这些片段以产生可用于本文所描述的方法中 的ssRNA或dsRNA的位置中，以调控靶ACC酶基因的表达。在一些实施方案中，设计参数， 诸如 Reynolds 评分（Reynolds 等，Nature Biotechnology22, 326-330 (2004)) ;Tuschl 规 则（（Pei 和 Tuschl，Nature Methods3(9) :670-676,2006)、i 评分（Nucleic Acids Res35: el23, 2007)、i-Score Designer 工具和相关算法（Nucleic Acids Res32 :936-948, 2004; Biochem Biophys Res Commun316 ： 1050-1058,2004 ；Nucleic Acids Res32 :893-901, 2004；Cell Cycle3 :790-5,2004 ；Nat Biotechnol23 :995-1001,2005；Nucleic Acids Res35 :e27,2007 ;BMC Bioinformatics7 :520,2006 ;Nucleic Acids Res35 :el23,2007 ; Nat Biotechnol22 :326-330, 2004)，是本领域中已知的并且可以用于选择有效进行基因沉 默的多核苷酸序列。在一些实施方案中，针对预定植物的基因组DNA来筛选多核苷酸序列 以使其它基因的无意沉默减到最少。
[0044] 触发多核苷酸和寡核苷酸分子多核苷酸组合物呈组合物形式是有用的，所述组合 物诸如包含在相同溶液中或在还提供转移剂的单独施用的液体中的单独的或与其它组分 (例如一种或多种除草剂分子）一起组合的低浓度的这些多核苷酸分子的液体。尽管可用 于本发明的方法中的多核苷酸分子的浓度和剂量不存在上限，但对于功效来说，一般需要 较低的有效浓度和剂量。这些浓度可以根据喷药量或施用到植物叶子或其它植物部分表面 (诸如花瓣、茎、块茎、果实、花粉囊、花粉或种子）的处理进行调整。在一个实施方案中，使 用25聚体寡核苷酸分子对草本植物进行的有用处理是每株植物约1纳摩尔（nmol)寡核 苷酸分子，例如每株植物约0.05到lnmol。有关草本植物的其它实施方案包括每株植物约 0. 05到约lOOnmol，或约0. 1到约20nmol，或约lnmol到约lOnmol多核苷酸的有用范围。 极大的植物、树或藤本植物可能相应地需要较大量的多核苷酸。当使用能加工成多个寡核 苷酸的长dsRNA分子时，可以使用较低的浓度。为了说明本发明的实施方案，当应用于寡核 苷酸分子时，任意地使用因子lx来表不每株植物〇. 8nmol多核苷酸分子的处理；10X表不 每株植物8nmol多核苷酸分子；并且100X表7]^每株植物80nmol多核苷酸分子。
[0045] 本发明的多核苷酸组合物呈组合物形式是有用的，所述组合物诸如包含在相同液 体中或在还提供转移剂的单独施用的液体中的单独的或与其它组分一起组合的低浓度的 多核苷酸分子的液体。如本文所使用，转移剂是当与多核苷酸组合于局部施用于靶植物表 面的组合物中时使该多核苷酸能够进入植物细胞的一种试剂。在某些实施方案中，转移剂 是调节植物组织的表面（例如叶、茎、根、花或果实）以使多核苷酸分子能渗透入植物细胞 中的一种试剂。通过向植物组织预先或同时施用多核苷酸转移剂可以有助于将多核苷酸转 移到植物细胞中。在一些实施方案中，该转移剂是在施用了多核苷酸组合物之后施用。多 核苷酸转移剂为多核苷酸穿过角质层蜡质屏障、气孔和/或细胞壁或膜屏障进入植物细胞 中提供了一条途径。有助于多核苷酸转移到植物细胞中的适合转移剂包括增加植物外部 的渗透性或增加植物细胞对寡核苷酸或多核苷酸的渗透性的试剂。这些有助于组合物转 移到植物细胞中的试剂包括化学试剂，或物理试剂，或其组合。用于调节或转移的化学试 剂包括（a)表面活性剂、（b)有机溶剂或含水溶液或有机溶剂的含水混合物、（c)氧化剂、 (d)酸、（e)碱、（f)油、（g)酶，或其组合。该方法的实施方案可以任选地包括温育步骤、 中和步骤（例如，中和酸、碱或氧化剂，或者使酶失活）、冲洗步骤或其组合。用于调节植物 对多核苷酸的渗透的试剂或处理的实施方案包括乳液、反相乳液、脂质体及其它类胶束组 合物。用于调节植物对多核苷酸的渗透的试剂或处理的实施方案包括平衡离子或已知与 核酸分子结合的其它分子，例如无机铵离子、烷基铵离子、锂离子、多胺（诸如精胺、亚精胺 或腐胺）及其它阳离子。可用于调节植物对多核苷酸的渗透的有机溶剂包括DMS0、DMF、批 啶、N-吡咯烷、六甲基磷酰胺、乙腈、二噁烷、聚丙二醇，与水可混溶或将磷酸核苷酸溶解于 非水系统（诸如用于合成反应中）中的其它溶剂。可以使用含或不含表面活性剂或乳化剂 的天然来源或合成的油，例如可以使用植物来源的油、作物油（诸如第9版《除草剂佐剂纲 要》（ 9thCompendium of Herbicide Adjuvants)中所列的那些，在国际互联网（网络）的 herbicide, adjuvants, com上公开可用），例如石錯油、多元醇脂肪酸酯，或具有用酰胺或 多胺（诸如聚乙烯亚胺或N-吡咯烷）修饰的短链分子的油。转移剂包括但不限于，有机硅 酮制剂。
[0046] 在某些实施方案中，可以使用以Silwet? L-77表面活性剂商购的有机硅酮制剂 来制备多核苷酸组合物，该表面活性剂具有CAS编号27306-78-1和EPA编号：CAL. REG. NO. 5905-50073-AA，并且目前可从 Momentive Performance Materials (纽约州奥尔巴尼 (Albany, New York))获得。在使用Silwet L-77有机硅酮制剂作为植物叶或其它植物表 面的喷药前处理的某些实施方案中，新鲜制备的以重量计在约0.015到约2% (wt%)范围 内（例如约 〇· 01wt%、0. 015wt%、0. 02wt%、0. 025wt%、0. 03wt%、0. 035wt%、0. 04wt%、 0. 045wt %,0. 05wt %,0.055wt %,0. 06wt %,0.065wt %,0.07wt %,0.075wt %,0.08wt %, 0. 085wt%>0. 09wt%>0. 095wt%>0. lwt%>0. 2wt%>0. 3wt%>0. 4wt%>0. 5wt%>0. 6wt%> 0. 7wt % >0. 8wt % >0. 9wt % > 1. Owt % > 1. lwt % > 1. 2wt % > 1. 3wt % > 1. 4wt % > 1. 5wt % > 1. 6wt %、1. 7wt %、1. 8wt %、1. 9wt %、2. Owt %、2. lwt %、2. 2wt%、2. 3wt%、2. 5wt % )的浓度 可有效准备叶或其它植物表面以便将多核苷酸分子通过局部施用于该表面转移到植物细 胞中。在本文提供的方法和组合物的某些实施方案中，使用或提供的组合物包含多核苷酸 分子以及包含以重量计在约0.015到2% (wt% )范围内（例如约0.01wt%、0.015wt%、 0.02wt % ,0.025wt %,0.03wt %,0.035wt %,0.04wt %,0.045wt %,0. 05wt %,0. 055wt %, 0.06wt %,0.065wt %,0.07wt %,0.075wt %,0.08wt %,0.085wt %,0.09wt %,0.095wt %, 0. lwt %>0. 2wt %>0. 3wt %>0. 4wt %>0. 5wt %>0. 6wt %>0. 7wt %>0. 8wt %>0. 9wt %> 1. Owt % > 1. lwt % > 1. 2wt % > 1. 3wt % > 1. 4wt % > 1. 5wt % > 1. 6wt % > 1. 7wt % > 1. 8wt % > 1. 9wt%、2. Owt%、2. lwt%、2. 2wt%、2. 3wt%、2. 5wt% )的 Silwet L-77 的有机娃酮制剂。
[0047] 在某些实施方案中，可以使用所提供的任何可商购的有机硅酮制剂作为多核苷酸 组合物中的转移剂，诸如以下的fceakthru S321、fceakthru S200(目录号67674-67-3)、 fceakthru 0E441(目录号 68937-55-3)、fceakthru S278(目录号 27306-78-1)、fceakthru S243、Breakthru S233(目录号 13418〇-76_0)，都可从制造商 Evonik Goldschmidt(德国） 获得；Silwet? HS429、Silwet? HS312、Silwet? HS508、Silwet? HS604(纽约州奥尔巴 尼的Momentive Performance Materials)。在使用有机娃酮制剂作为植物叶或其它表面 的喷药前处理的某些实施方案中，新鲜制备的以重量计在约0.015到约2% (wt%)范围 内（例如约 〇· 01wt%、0. 015wt%、0. 02wt%、0. 025wt%、0. 03wt%、0. 035wt%、0. 04wt%、 0.045wt %,0.05wt %,0.055wt %,0.06wt %,0.065wt %,0.07wt %,0.075wt %,0.08wt %, 0. 085wt%>0. 09wt%>0. 095wt%>0. lwt%>0. 2wt%>0. 3wt%>0. 4wt%>0. 5wt%>0. 6wt%> 0. 7wt % >0. 8wt % >0. 9wt % > 1. Owt % > 1. lwt % > 1. 2wt % > 1. 3wt % > 1. 4wt % > 1. 5wt % > 1. 6wt %、1. 7wt %、1. 8wt %、1. 9wt %、2. Owt %、2. lwt %、2. 2wt %、2. 3wt %、2. 5wt % )的浓 度可有效准备叶或其它植物表面以便将多核苷酸分子通过局部施用于该表面而转移到植 物细胞中。在本文提供的方法和组合物的某些实施方案中，使用或提供的组合物包含多核 苷酸分子以及以重量计在约0.015到2% (wt%)范围内（例如约0. 01wt%、0. 015wt%、 0.02wt %,0.025wt %,0.03wt %,0.035wt %,0. 04wt %,0. 045wt %,0. 05wt %,0. 055wt %, 0.06wt %,0.065wt %,0.07wt % ,0.075wt %,0.08wt %,0.085wt %,0.09wt %,0.095wt %, 0. lwt % >0. 2wt % >0. 3wt % >0. 4wt % >0. 5wt % >0. 6wt % >0. 7wt % >0. 8wt % >0. 9wt % > 1. Owt % > 1. lwt % > 1. 2wt % > 1. 3wt % > 1. 4wt % > 1. 5wt % > 1. 6wt % > 1. 7wt % > 1. 8wt % > 1. 9wt%、2. Owt%、2. lwt%、2. 2wt%、2. 3wt%、2. 5wt% )的有机娃酮制剂。
[0048] 本文提供的方法和组合物中所使用的有机硅酮制剂可以包含一种或多种有效有 机硅酮化合物。如本文所使用，短语"有效有机硅酮化合物"是用于描述在使多核苷酸能够 进入植物细胞中的有机硅酮制剂中所发现的任何有机硅酮化合物。在某些实施方案中，有 效有机硅酮化合物可以使多核苷酸以允许多核苷酸介导的抑制植物细胞中靶基因表达的 方式进入植物细胞中。一般说来，有效有机硅酮化合物包括但不限于，可以包含以下的化合 物：i)共价连接的三硅氧烷头基；ii)共价连接的烷基连接基，包括但不限于，正丙基连接 基；iii)共价连接的聚二醇链；iv)端基。这些有效有机硅酮化合物的三硅氧烷头基包括但 不限于，七甲基三硅氧烷。烷基连接基可以包括但不限于，正丙基连接基。聚二醇链包括但 不限于，聚乙二醇或聚丙二醇。聚二醇链可以包含一种提供平均链长度"η"为约"7. 5"的 混合物。在某些实施方案中，平均链长度"η"可以在约5到约14间变化。端基可以包括但 不限于，烷基，诸如甲基。据信，有效有机硅酮化合物包括但不限于，三硅氧烷乙氧化物表面 活性剂或聚环氧烷改性的七甲基三硅氧烷。
[0049]
【权利要求】
1. 一种植物控制方法，包括：用包含多核苷酸和转移剂的组合物处理植物，其中所述 多核苷酸与ACC酶基因序列或其片段，或与所述ACC酶基因序列或其片段的RNA转录物基 本上同一或基本上互补，其中所述ACC酶基因序列选自SEQ ID N0:l-92或其多核苷酸片 段，由此相对于未用所述组合物处理的植物，所述植物生长或发育或繁殖能力有所降低，或 所述植物对ACC酶抑制剂除草剂更敏感。
2. 如权利要求1所述的方法，其中所述转移剂是有机硅酮表面活性剂组合物或其中所 含的化合物。
3. 如权利要求1所述的方法，其中所述多核苷酸片段为18个连续核苷酸、19个连续核 苷酸、20个连续核苷酸或至少21个连续核苷酸长度并且与选自SEQ ID NO :1-92的ACC酶 基因序列至少85%同一。
4. 如权利要求3所述的方法，其中所述多核苷酸片段选自有义或反义ssDNA或ssRNA、 dsRNA 或 dsDNA，或 dsDNA/RNA 杂交体。
5. 如权利要求1所述的方法，其中所述植物选自：长芒苋、西部苋、绿耳苋、萨恩博格氏 苋、匍匐苋、绿穗苋、凹头苋、刺苋、苘麻、三裂叶豚草、节节草、小蓬草、多花黑麦草、约翰逊 草、苍耳、白苞猩猩草、扫帚草及马唐。
6. 如权利要求1所述的方法，其中所述组合物另外包含所述ACC酶抑制剂除草剂并且 向植物外部施用所述组合物。
7. 如权利要求6所述的方法，其中所述组合物另外包含一种或多种不同于所述ACC酶 抑制剂除草剂的除草剂。
8. 如权利要求3所述的方法，其中所述组合物包含所述多核苷酸片段中两个或更多个 的任何组合并且向植物外部施用所述组合物。
9. 一种包含多核苷酸和转移剂的组合物，其中所述多核苷酸与ACC酶基因序列，或与 所述ACC酶基因序列的RNA转录物基本上同一或基本上互补，其中所述ACC酶基因序列选 自SEQ ID NO :1-92或其多核苷酸片段，并且由此相对于未用所述组合物处理的植物，用所 述组合物处理的植物的生长或发育或繁殖能力得到调控、抑制或延迟，或所述植物因所述 含多核苷酸的组合物而对ACC酶抑制剂除草剂更敏感。
10. 如权利要求9所述的组合物，其中所述转移剂是有机硅酮组合物。
11. 如权利要求9所述的组合物，其中所述多核苷酸片段为18个连续核苷酸、19个连 续核苷酸、20个连续核苷酸或至少21个连续核苷酸长度并且与选自SEQ ID NO :1-92的ACC 酶基因序列至少85%同一。
12. 如权利要求9所述的组合物，其中所述多核苷酸选自SEQ ID N0:308-2912。
13. 如权利要求9所述的组合物，其中所述多核苷酸选自SEQ ID NO :2913-5012。
14. 如权利要求9所述的组合物，另外包含ACC酶抑制剂除草剂。
15. 如权利要求14所述的组合物，其中所述ACC酶抑制剂分子选自芳氧基苯氧基丙酸 酯类、环己二酮类及苯基吡唑啉。
16. 如权利要求14所述的组合物，另外包含非ACC酶抑制剂除草剂。
17. -种减少植物中ACC酶基因的表达的方法，包括：向植物外部施用包含多核苷酸和 转移剂的组合物，其中所述多核苷酸与ACC酶基因序列或其片段，或与所述ACC酶基因序 列或其片段的RNA转录物基本上同一或基本上互补，其中所述ACC酶基因序列选自SEQ ID NO :1-92或其多核苷酸片段，由此所述ACC酶基因的所述表达相对于未施用所述组合物的 植物有所减少。
18. 如权利要求17所述的方法，其中所述转移剂是有机硅酮化合物。
19. 如权利要求17所述的方法，其中所述多核苷酸片段为19个连续核苷酸、20个连续 核苷酸或至少21个连续核苷酸长度并且与选自SEQ ID NO :1-92的ACC酶基因序列至少 85% 同一。
20. 如权利要求17所述的方法，其中所述多核苷酸分子选自有义或反义ssDNA或 ssRNA、dsRNA 或 dsDNA，或 dsDNA/RNA 杂交体。
21. -种微生物表达盒，包含长度为18个连续核苷酸、19个连续核苷酸、20个连续核苷 酸或至少21个连续核苷酸并且与选自SEQ ID NO :1-92的ACC酶基因序列至少85%同一 的多核苷酸片段。
22. -种制备多核苷酸的方法，包括a)将如权利要求21所述的微生物表达盒转化到 微生物中；b)使所述微生物生长；c)从所述微生物收获多核苷酸，其中所述多核苷酸为18 个连续核苷酸、19个连续核苷酸、20个连续核苷酸或至少21个连续核苷酸长度并且与选自 SEQ ID NO :1-92的ACC酶基因序列至少85%同一。
23. -种鉴别当外部处理植物时可用于调节ACC酶基因表达的多核苷酸的方法，包括： a)提供多种多核苷酸，所述多核苷酸包含与长度为18个连续核苷酸、19个连续核苷酸、20 个连续核苷酸或至少21个连续核苷酸并且与选自SEQ ID NO :1-92的ACC酶基因序列至 少85%同一的多核苷酸片段基本上同一或基本上互补的区域；b)用所述多核苷酸中的一 种或多种和转移剂外部处理所述植物；c)针对ACC酶基因表达的调节对所述植物或提取物 进行分析，并且由此相对于未用所述组合物处理的植物，用所述组合物处理的植物的生长 或发育或繁殖能力得到调控、抑制或延迟，或所述植物因所述含多核苷酸的组合物而对ACC 酶抑制剂除草剂更敏感。
24. 如权利要求23所述的方法，其中所述植物选自：长芒苋、西部苋、绿耳苋、萨恩博格 氏苋、匍匐苋、绿穗苋、凹头苋、刺苋、苘麻、三裂叶豚草、节节草、小蓬草、多花黑麦草、约翰 逊草、苍耳、白苞猩猩草、扫帚草及马唐。
25. 如权利要求23所述的方法，其中所述ACC酶基因表达相对于未用所述多核苷酸片 段和转移剂处理的植物有所减少。
26. 如权利要求23所述的方法，其中所述转移剂是有机硅酮化合物。
27. -种包含多核苷酸与ACC酶抑制剂和共除草剂的混合物的农用化学组合物，其中 所述多核苷酸与一部分ACC酶基因序列，或与所述ACC酶基因序列的一部分RNA转录物基 本上同一或基本上互补，其中所述ACC酶基因序列选自SEQ ID N0:l-92或其多核苷酸片 段，并且由此相对于未用所述组合物处理的植物，用所述组合物处理的植物的生长或发育 或繁殖能力得到调控、抑制或延迟，或所述植物因所述含多核苷酸的组合物而对ACC酶抑 制剂除草剂更敏感。
28. 如权利要求27所述的农用化学组合物，其中所述共除草剂选自：酰胺除草剂类、含 砷除草剂类、苯并噻唑除草剂类、苯甲酰基环己二酮除草剂类、烷基磺酸苯并呋喃基酯除草 剂类、环己烯肟除草剂类、环丙基异噁唑除草剂类、二甲酰亚胺除草剂类、二硝基苯胺除草 剂类、二硝基苯酚除草剂类、二苯基醚除草剂类、二硫代氨基甲酸酯除草剂类、甘氨酸除草 剂类、齒代脂肪烃除草剂类、咪唑啉酮除草剂类、无机除草剂类、腈除草剂类、有机磷除草剂 类、噁二唑酮除草剂类、噁唑除草剂类、苯氧基除草剂类、苯二胺除草剂类、吡唑除草剂类、 哒嗪除草剂类、哒嗪酮除草剂类、吡啶除草剂类、嘧啶二胺除草剂类、嘧啶氧基苯甲胺除草 剂类、季铵除草剂类、硫代氨基甲酸酯除草剂类、硫代碳酸酯除草剂类、硫脲除草剂类、三嗪 除草剂类、三嗪酮除草剂类、三唑除草剂类、三唑酮除草剂类、三唑并嘧啶除草剂类、尿嘧啶 除草剂类及脲除草剂类。
29. -种包含多核苷酸与ACC酶抑制剂除草剂和杀虫剂的混合物的农用化学组合物， 其中所述多核苷酸与一部分ACC酶基因序列，或与所述ACC酶基因序列的一部分RNA转录 物基本上同一或基本上互补，其中所述ACC酶基因序列选自SEQ ID NO :1-92或其多核苷酸 片段，由此具有需要杂草和虫害控制的作物的田地用所述组合物进行处理，并且由此相对 于未用所述组合物处理的植物，用所述组合物处理的植物的生长或发育或繁殖能力得到调 控、抑制或延迟，或所述植物因所述含多核苷酸的组合物而对ACC酶抑制剂除草剂更敏感。
30. 如权利要求29所述的农用化学组合物，其中所述杀虫剂选自：杀昆虫剂、杀真菌 齐IJ、杀线虫剂、杀细菌剂、杀螨剂、生长调控剂、化学绝育剂、化学信息素、驱避剂、引诱剂、信 息素、取食刺激剂及生物杀虫剂。
31. -种除草剂组合物，包含ACC酶抑制剂除草剂以及多核苷酸和转移剂，其中所述多 核苷酸选自SEQ ID NO :4538或者其补体或多核苷酸片段，并且由此相对于未用所述组合物 处理的植物，用所述组合物处理的植物的生长或发育或繁殖能力得到调控、抑制或延迟，或 所述植物因所述含多核苷酸的组合物而对ACC酶抑制剂除草剂更敏感。
【文档编号】C12N15/82GK104160028SQ201280054179
【公开日】2014年11月19日 申请日期:2012年9月12日 优先权日:2011年9月13日
【发明者】D·阿德, M·W·迪米克, 李兆隆, R·D·萨蒙斯, R·H·沙, N·陶, 王大伏 申请人:孟山都技术公司