一种石斛胚芽茶的生产方法
【专利摘要】本发明涉及一种石斛胚芽茶的制作方法。该方法首先采用超声波辅助浸提联合膜分离制得石斛寡糖素，然后通过石斛寡糖素协同阶段性光质调节促使石斛种胚快速萌发、分化形成胚芽，最后采用低温烘焙制成石斛胚芽茶。本发明通过石斛寡糖素协同阶段性光质调节促使石斛种胚快速萌发、分化形成胚芽，一方面显著缩短了石斛胚芽的生产周期，另一方面避免了外源激素对人体健康的危害；通过低温烘焙方法制作的胚芽茶，清香宜饮，口感甘甜，食用方便，便于携带和贮藏。
【专利说明】一种石斛胚芽茶的生产方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于保健饮品领域，具体涉及一种石斛胚芽茶的生产方法。 技术背景
[0002] 石斛是我国名贵的中草药，属于单子叶兰科草本植物，一颗石斛蒴果里种子数量 巨大，约有2?3万粒种子，但其种胚未分化，缺少胚乳。适宜的营养、光照、温度条件下，石 斛种胚会逐渐膨大，萌发形成绿色原球茎，继续培养原球茎顶端会突起产生绿色叶原基，不 断分化发育成幼叶，最后形成2?3 cm高的石斛胚芽。目前多采用添加外源激素的方法，促 使种胚或原球茎膨大、萌发、分化形成胚芽，进一步形成试管苗。如CN 102657083 A的发明 提供了一种铁皮石斛苗茶的制备方法中使用了 BA及NAA来促使原球茎分化成胚芽。但外源 激素的添加，会随着生长的进行，富集到植物机体内，对食用的安全性存在很大的隐患。寻 求安全有效的促进石斛种胚快速萌发、分化产生胚芽的方法对解决现有石斛生产周期长、 产品安全性差等问题具有重要意义。
[0003] 胚芽是种子萌发、分化成苗过程中的中间形态，石斛胚芽具有和石斛植株相同的 功效，富含多糖，具有抗疲劳、抗衰老、抗氧化、提高免疫力等功效。在胚芽茶的加工过程中， 由于胚芽的茎含水量高、多糖含量高、叶片细小、茎粗大、叶茎纤维含量低，所以采用传统的 制茶工艺制作胚芽茶时，会产生焦叶、爆斑、叶片和茎干燥不同步、翻动时易结团和产生碎 叶末等现象，严重影响胚芽茶的品质。
[0004] 寡糖又称低聚糖，是指二至十个单糖单位通过糖苷键连接起来，形成直链或支链 的一类糖，具有调节植物抗病毒、增产壮苗、促进植物生长发育等作用，在农业方面具有重 要的应用。例如使用较多的低聚壳寡糖可作为一种非特异性信号，对许多植物显示出强烈 的免疫诱导活性；还可以产生抗病毒的植保素及免疫蛋白，达到抗病毒的目的。根瘤菌中分 泌的根瘤寡糖素(又称结瘤因子）是豆科植物与根瘤菌间形成共生关系的重要糖信号分子。 研究结果显示，从人参、红花、黑节草中提取的寡糖素添加到培养基中均能影响西洋参和人 参愈伤组织的生长和皂苷的形成。不同植物细胞壁多糖具有不同的糖苷键连接方式，造成 其结构的复杂性和物种的专一性，因此，细胞壁断裂产生不同的寡糖分子，作为早期细胞激 活信号也具有反应的专一性。目前，石斛寡糖素在霍山石斛种子萌发中作为诱导分化产生 胚芽的诱导物质，还未见有报道。
【发明内容】
[0005] 为了解决现有石斛胚芽生产过程中外源激素的添加、生产周期长、石斛产品结构 单一等问题，本发明提供一种石斛胚芽茶的生产方法。
[0006] 一种石斛胚芽茶的生产方法包括以下操作步骤： (1)石斛胚芽的制备；将成熟的石斛荚果的种胚接种于培养基A上，在温度25±2°C、每 天光照12小时的条件下培养100?120天，得到绿色石斛胚芽； 所述液体培养基A为添加了石斛寡糖素的MS液体培养基；所述石斛寡糖素中寡糖含量 不低于70% ; (2)石斛胚芽茶的制作：将绿色石斛胚芽杀青，揉捻成条形，压片，烘焙，即得到石斛胚 芽茶；所得胚芽茶色泽淡绿，条形扁平。
[0007] -种石斛胚芽茶的生产方法按照下述步骤进行操作： (1) 石斛寡糖素的制备 按lg : 10?80 ml的比例将石斛和蒸馏水，超声波辅助浸提1?2 h，得到浸提液；浸提 液在6000?10000 r/min、室温条件下离心4?5 min,得到上清液和沉淀A ;将沉淀A按上 述条件重复浸提一次，收集并合并两次上清液为上清液A，将上清液A在55?65 °C、真空 度-0. 07?-0. 10 MPa条件下减压浓缩，得到浓缩提取液A ;向浓缩提取液A中添加95%乙 醇至乙醇体积百分比为80%，室温条件下静置12?24 h，6000?10000 r/min、室温条件下 离心4?5 min，得上清液B和沉淀B，取沉淀B溶于蒸馏水中，得到石斛寡糖粗提液；取石 斛寡糖粗提液，每毫升石斛寡糖粗提液中加入1X l〇3U的木瓜蛋白酶，在55 °C下、pH 5. 7条 件下酶解6?8 h，接着在100 °C灭活3?5 min，得到石斛寡糖酶解液；取石斛寡糖酶解液， 通过截留分子量为2. 5?5 KDa的超滤膜组件，在压力0. 05?0. 5 MPa、流速为0. 1?5. 0 m/s条件下超滤，收集透过液，截留液经1400 W、2450 MHz微波裂解5?6 min,冷却至室温， 再次通过上述超滤膜组件，在上述相同条件下超滤，合并两次透过液，得到石斛寡糖酶解透 过液；石斛寡糖酶解透过液通过反渗透系统浓缩，得反渗透浓缩液；将反渗透浓缩液进行 干燥，得到石斛寡糖素，所述石斛寡糖素中寡糖含量不低于70% ; (2) 石斛胚芽的制备 取成熟的石斛荚果，首先用1 g/L的升汞水溶液进行表面浸泡消毒40 min，接着用无 菌蒸馏水清洗4?5次，然后切开果实，取出种胚，接种于含培养基A的培养板上，在温度 25±2 °C、不同光质、每天光照12小时的条件下培养100?120天，得到绿色石斛胚芽； 所述液体培养基A为添加10?100 mg/L的石斛寡糖素的MS液体培养基； 所述不同光质为：第1?60天，光照强度为35 μ mol / (m2 *s)，光能比为红光：蓝光 =2 : 3 ;从第61天开始，光照强度为50 μ mol / (m2 · s)，光能比为白光：蓝光=5 : 1 ; (3) 石斛胚芽茶的制作 将绿色石斛胚芽在温度为200?300 °C条件下杀青2?3 min ;得到杀青石斛胚芽；取 杀青石斛胚芽揉捻并摆成本体条形，压片，接着放入40±2 °C条件下烘焙8?10 h，即得到 石斛胚芽茶；所得胚芽茶色泽淡绿，条形扁平。
[0008] 所述石斛为霍山石斛或铁皮石斛或铜皮石斛。
[0009] 本发明通过从石斛中提取的石斛寡糖素促进石斛胚芽的形成，为石斛胚芽茶的生 产提供原料，制得的石斛胚芽茶不仅为人们的养生保健提供了新选择，而且有利于石斛胚 芽的保存。
[0010] 本发明的有益技术效果体现在以下方面： (1) 本发明采用石斛寡糖素取代外源激素来促使石斛种胚的萌发、分化及生长，从源头 上阻断了外源激素对人体健康的危害； (2) 本发明通过添加石斛寡糖素并结合阶段性调节光质组合的使用，促进种子萌发及 生长，将石斛胚芽生产周期从7?8个月缩短到3?4个月； (3) 本发明采用压片、低温烘焙方法制得胚芽茶，可避免碎末茶的出现，同时清香宜饮， 口感甘甜，便于贮存和运输。
[0011] 寡糖含量的测定方法：采用苯酚-硫酸法测定，以无水葡萄糖为参比。
【具体实施方式】
[0012] 下面结合具体的实施方式对本发明作进一步地说明。本发明的特点和优点将随着 描述而更清楚，但这些示例性的实施例仅仅用来说明本发明，并不对本发明的范围构成任 何限制。
[0013] 实施例1 : 一种石斛胚芽茶的生产方法包括以下操作步骤： 步骤一、石斛寡糖素的制备 取1 kg的霍山石斛鲜品，打碎，添加10 L的蒸馏水，在温度30 °C，超声功率600 W，占空 比1 : 0. 1的条件下，超声波辅助浸提2 h，经6000 r/min室温条件下离心5 min,得到上清 液和沉淀A ;将沉淀A按上述条件重复浸提一次，收集并合并两次上清液为上清液A，将上清 液A在55 °C、真空度-0. 10 MPa条件下减压浓缩，得到浓缩提取液A ;向浓缩提取液A中添 加95%乙醇至乙醇体积百分比为80%，室温条件下静置12 h，6000 r/min室温条件下离心5 min，得上清液B和沉淀B，取沉淀B溶于蒸馏水中，得到石斛寡糖粗提液；取石斛寡糖粗提 液，每毫升石斛寡糖粗提液加入1X l〇3U的木瓜蛋白酶，在55 °C下、pH 5. 7条件下酶解6 h， 接着在100 °C灭活5 min，得石斛寡糖酶解液；取石斛寡糖酶解液，通过截留分子量为5 KDa 的超滤膜组件，在压力〇. 05 MPa，流速0. lm/s下超滤，收集透过液，截留液重复经1400 W、 2450 MHz微波裂解5 min，冷却至室温，再次通过超滤膜组件，合并两次透过液，得到石斛寡 糖酶解透过液；石斛寡糖酶解透过液通过反渗透系统浓缩，在进膜压力0. 5 MPa下，膜通量 为1 I7(m2*h)条件下，浓缩至原体积的20%，得反渗透浓缩液。取反渗透浓缩液进行真空冷 冻干燥，得到石斛寡糖素，根据苯酚-硫酸法测得寡糖含量为79. 1% ; 步骤二、石斛胚芽的制备 取成熟的霍山石斛荚果，首先用1 g/L的升汞水溶液进行表面浸泡消毒40 min，接着 用无菌蒸馏水清洗5次，然后切开果实，取出种胚，接种于含培养基的培养板上，培养基为 添加了 10 mg/L的石斛寡糖素的MS液体培养基，在温度25±2 °C、第1?60天，光照强度 35 μ mol / (m2 · s)，光能比为：红光：蓝光=2 : 3 ;第61?120天，光照强度50 μ mol / (m2 *s)，光能比为：白光：蓝光=5 : 1、每天光照12小时的条件下培养120天，得到绿色霍 山石斛胚芽； 步骤三、石斛胚芽茶的制作： 将300 g霍山石斛胚芽在温度为200 °C条件下，杀青3 min ;将杀青后的胚芽，揉捻并摆 成本体条形后压片。将压片后的胚芽放入40±2 °C温度下，烘8小时后，得胚芽茶16. 8 g。 所得胚芽茶色泽淡绿，条形扁平，冲泡后茶色青亮透明，入口清香，口感微甜。
[0014] 实施例2 : 一种石斛胚芽茶的生产方法包括以下操作步骤： 步骤一、石斛寡糖素的制备 取0. 5 kg的霍山石斛干品，打碎，添加30 L比例的蒸馏水，在温度30 °C，超声功率600 W，占空比1 : 0.1的条件下，超声波辅助浸提2 h，经6000 r/min室温条件下离心5 min,得 到上清液和沉淀A ;将沉淀A按上述条件重复浸提一次，收集并合并两次上清液为上清液A， 将上清液A在55 °C、真空度-0. 10 MPa条件下减压浓缩，得到浓缩提取液A ;向浓缩提取液 A中添加95%乙醇至乙醇体积百分比为80%，室温条件下静置12 h，6000 r/min室温条件下 离心5 min，得上清液B和沉淀B，取沉淀B溶于蒸馏水中，得到石斛寡糖粗提液；取石斛寡 糖粗提液，每毫升石斛寡糖粗提液加入1X l〇3U的木瓜蛋白酶，在55 °C下、pH 5. 7条件下酶 解6 h，接着在100 °C灭活5 min，得石斛寡糖酶解液；取石斛寡糖酶解液，通过截留分子量 为2. 5 KDa的超滤膜组件，在压力0. 30 MPa，流速3 m/s下超滤，收集透过液，截留液重复经 1400 W、2450 MHz微波裂解5 min，冷却至室温，再次通过超滤膜组件，合并两次透过液，得到 石斛寡糖酶解透过液；石斛寡糖酶解透过液通过反渗透系统浓缩，在进膜压力2. 5 MPa下， 膜通量为7 I7(m2*h)条件下，浓缩至原体积的20%，得反渗透浓缩液。取反渗透浓缩液进行 真空干燥，得到石斛寡糖素，根据苯酚-硫酸法测得寡糖含量为80. 3% ; 步骤二、石斛胚芽的制备 取成熟的霍山石斛荚果，首先用1 g/L的升汞水溶液进行表面浸泡消毒40 min，接着 用无菌蒸馏水清洗5次，然后切开果实，取出种胚，接种于含培养基的培养板上，培养基为 添加了 60 mg/L的石斛寡糖素的MS液体培养基，在温度25±2 °C、第1?60天，光照强度 35 μ mol / (m2 · s)，光能比为：红光：蓝光=2 : 3 ;第61?120天，光照强度50 μ mol / (m2 *s)，光能比为：白光：蓝光=5 : 1、每天光照12小时的条件下培养120天，得到绿色霍 山石斛胚芽； 步骤三、石斛胚芽茶的制作： 将300 g霍山石斛胚芽在温度为200 °C条件下，杀青3 min ;将杀青后的胚芽，揉捻并摆 成本体条形后压片。将压片后的胚芽放入40±2 °C温度下，烘8小时后，得胚芽茶17. 6 g。 所得胚芽茶色泽淡绿，条形扁平，冲泡后茶色青亮透明，入口清香，口感微甜。
[0015] 实施例3: 一种石斛胚芽茶的生产方法包括以下操作步骤： 步骤一、石斛寡糖素的制备 取1 kg的铁皮石斛鲜品，打碎，添加15 L比例的蒸馏水，在温度40 °C，超声功率700 W， 占空比1 : 0.4的条件下，超声波辅助浸提1.5 h，经8000 r/min室温条件下离心4. 5 min, 得到上清液和沉淀A ;将沉淀A按上述条件重复浸提一次，收集并合并两次上清液为上清液 A，将上清液A在60 °C、真空度-0. 08 MPa条件下减压浓缩，得到浓缩提取液A ;向浓缩提取 液A中添加95%乙醇至乙醇体积百分比为80%，室温条件下静置18 h，8000 r/min室温条件 下离心4. 5 min，得上清液B和沉淀B，取沉淀B溶于蒸馏水中，得到石斛寡糖粗提液；取石 斛寡糖粗提液，每毫升石斛寡糖粗提液加入1X l〇3U的木瓜蛋白酶，在55 °C下、pH 5. 7条件 下酶解7 h，接着在100 °C灭活4 min，得石斛寡糖酶解液；取石斛寡糖酶解液，通过截留分子 量为3. 5 KDa的超滤膜组件，在压力0. 10 MPa，流速0. 5 m/s下超滤，收集透过液，截留液重 复经1400 W、2450 MHz微波裂解5. 5 min，冷却至室温，再次通过超滤膜组件，合并两次透过 液，得到石斛寡糖酶解透过液；石斛寡糖酶解透过液通过反渗透系统浓缩，在进膜压力1. 〇 MPa下，膜通量为3 I7(m2*h)条件下，浓缩至原体积的15%，得反渗透浓缩液。取反渗透浓缩 液进行真空干燥，得到石斛寡糖素，根据苯酚-硫酸法测得寡糖含量为78. 6% ; 步骤二、石斛胚芽的制备 取成熟的铁皮石斛荚果，首先用lg/L的升汞水溶液进行表面浸泡消毒40 min，接着 用无菌蒸馏水清洗5次，然后切开果实，取出种胚，接种于含培养基的培养板上，培养基为 添加了 30 mg/L的石斛寡糖素的MS液体培养基，在温度25±2 °C、第1?60天，光照强度 35 μ mol / (m2 · s)，光能比为：红光：蓝光=2 : 3 ;第61?110天，光照强度50 μ mol / (m2 *s)，光能比为：白光：蓝光=5 : 1、每天光照12小时的条件下培养110天，得到绿色铁 皮石斛胚芽； 步骤三、石斛胚芽茶的制作： 将300 g铁皮石斛胚芽在温度为250 °C条件下，杀青2. 5 min ;将杀青后的胚芽，揉捻并 摆成本体条形后压片。将压片后的胚芽放入40±2 °C温度下，烘9小时后，得胚芽茶17.0 g。所得胚芽茶色泽淡绿，条形扁平，冲泡后茶色青亮透明，入口清香，口感微甜。
[0016] 实施例4: 一种石斛胚芽茶的生产方法包括以下操作步骤： 步骤一、石斛寡糖素的制备 取0. 5 kg的铁皮石斛干品，打碎，添加35 L比例的蒸馏水，在温度40 °C，超声功率700 W，占空比1 : 0.4的条件下，超声波辅助浸提1.5 h，经8000 r/min室温条件下离心4. 5 min, 得到上清液和沉淀A ;将沉淀A按上述条件重复浸提一次，收集并合并两次上清液为上清液 A，将上清液A在60 °C、真空度-0. 08 MPa条件下减压浓缩，得到浓缩提取液A ;向浓缩提取 液A中添加95%乙醇至乙醇体积百分比为80%，室温条件下静置18 h，8000 r/min室温条件 下离心4. 5 min，得上清液B和沉淀B，取沉淀B溶于蒸馏水中，得到石斛寡糖粗提液；取石 斛寡糖粗提液，每毫升石斛寡糖粗提液加入1X l〇3U的木瓜蛋白酶，在55 °C下、pH 5. 7条件 下酶解7 h，接着在100 °C灭活4 min，得石斛寡糖酶解液；取石斛寡糖酶解液，通过截留分子 量为3. 5 KDa的超滤膜组件，在压力0. 40 MPa，流速4 m/s下超滤，收集透过液，截留液重复 经1400 W、2450 MHz微波裂解5. 5 min，冷却至室温，再次通过超滤膜组件，合并两次透过液， 得到石斛寡糖酶解透过液；石斛寡糖酶解透过液通过反渗透系统浓缩，在进膜压力3. 0 MPa 下，膜通量为9 I7(m2*h)条件下，浓缩至原体积的15%，得反渗透浓缩液。取反渗透浓缩液 进行真空冷冻干燥，得到石斛寡糖素，根据苯酚-硫酸法测得寡糖含量为78. 8% ; 步骤二、石斛胚芽的制备 取成熟的铁皮石斛荚果，首先用1 g/L的升汞水溶液进行表面浸泡消毒40 min，接着 用无菌蒸馏水清洗5次，然后切开果实，取出种胚，接种于含培养基的培养板上，培养基为 添加了 80 mg/L的石斛寡糖素的MS液体培养基，在温度25±2 °C、第1?60天，光照强度 35 μ mol / (m2 · s)，光能比为：红光：蓝光=2 : 3 ;第61?110天，光照强度50 μ mol / (m2 *s)，光能比为：白光：蓝光=5 : 1、每天光照12小时的条件下培养110天，得到绿色铁 皮石斛胚芽； 步骤三、石斛胚芽茶的制作： 将300 g铁皮石斛胚芽在温度为250 °C条件下，杀青2. 5 min ;将杀青后的胚芽，揉捻并 摆成本体条形后压片。将压片后的胚芽放入40±2 °C温度下，烘9小时后，得胚芽茶17. 8 g。所得胚芽茶色泽淡绿，条形扁平，冲泡后茶色青亮透明，入口清香，口感微甜。
[0017] 实施例5: 一种石斛胚芽茶的生产方法包括以下操作步骤： 步骤一、石斛寡糖素的制备 取1 kg的铜皮石斛鲜品，打碎，添加20 L比例的蒸馏水，在温度50 °C，超声功率800 W， 占空比1 : 0. 6的条件下，超声波辅助浸提1 h，经10000 r/min室温条件下离心4 min,得 到上清液和沉淀A ;将沉淀A按上述条件重复浸提一次，收集并合并两次上清液为上清液A， 将上清液A在65 °C、真空度-0. 07 MPa条件下减压浓缩，得到浓缩提取液A ;向浓缩提取液 A中添加95%乙醇至乙醇体积百分比为80%，室温条件下静置24 h，10000 r/min室温条件下 离心4 min，得上清液B和沉淀B，取沉淀B溶于蒸馏水中，得到石斛寡糖粗提液；取石斛寡 糖粗提液，每毫升石斛寡糖粗提液加入1X l〇3U的木瓜蛋白酶，在55 °C下、pH 5. 7条件下酶 解8 h，接着在100 °C灭活3 min，得石斛寡糖酶解液；取石斛寡糖酶解液，通过截留分子量为 2. 5 KDa的超滤膜组件，在压力0. 20 MPa，流速1. 0 m/s下超滤，收集透过液，截留液重复经 1400 W、2450 MHz微波裂解6 min，冷却至室温，再次通过超滤膜组件，合并两次透过液，得到 石斛寡糖酶解透过液；石斛寡糖酶解透过液通过反渗透系统浓缩，在进膜压力2. 0 MPa下， 膜通量为5 I7(m2*h)条件下，浓缩至原体积的10%，得反渗透浓缩液。取反渗透浓缩液进行 真空冷冻干燥，得到石斛寡糖素，根据苯酚-硫酸法测得寡糖含量为76. 7% ; 步骤二、石斛胚芽的制备 取成熟的铜皮石斛荚果，首先用1 g/L的升汞水溶液进行表面浸泡消毒40 min，接着 用无菌蒸馏水清洗5次，然后切开果实，取出种胚，接种于含培养基的培养板上，培养基为 添加了 50 mg/L的石斛寡糖素的MS液体培养基，在温度25±2 °C、第1?60天，光照强度 35 μ mol / (m2 · s)，光能比为：红光：蓝光=2 : 3 ;第61?100天，光照强度50 μ mol / (m2 *s)，光能比为：白光：蓝光=5 : 1、每天光照12小时的条件下培养100天，得到绿色铜 皮石斛胚芽； 步骤三、石斛胚芽茶的制作： 将300 g铜皮石斛胚芽在温度为300 °C条件下，杀青2 min ;将杀青后的胚芽，揉捻并摆 成本体条形后压片。将压片后的胚芽放入40±2 °C温度下，烘9小时后，得胚芽茶17. 1 g。 所得胚芽茶色泽灰绿，条形扁平，冲泡后茶色青亮透明，入口清香，口感微甜。
[0018] 实施例6: 一种石斛胚芽茶的生产方法包括以下操作步骤： 步骤一、石斛寡糖素的制备 取0. 5 kg的铜皮石斛干品，打碎，添加40 L比例的蒸馏水，在温度50 °C，超声功率800 W，占空比1 : 0.6的条件下，超声波辅助浸提lh，经10000 r/min室温条件下离心4 min, 得到上清液和沉淀A ;将沉淀A按上述条件重复浸提一次，收集并合并两次上清液为上清液 A，将上清液A在65 °C、真空度-0. 07 MPa条件下减压浓缩，得到浓缩提取液A ;向浓缩提取 液A中添加95%乙醇至乙醇体积百分比为80%，室温条件下静置24 h，10000 r/min室温条 件下离心4 min，得上清液B和沉淀B，取沉淀B溶于蒸馏水中，得到石斛寡糖粗提液；取石 斛寡糖粗提液，每毫升石斛寡糖粗提液加入1X l〇3U的木瓜蛋白酶，在55 °C下、pH 5. 7条件 下酶解8 h，接着在100 °C灭活3 min，得石斛寡糖酶解液；取石斛寡糖酶解液，通过截留分子 量为5 KDa的超滤膜组件，在压力0. 50 MPa，流速5 m/s下超滤，收集透过液，截留液重复经 1400 W、2450 MHz微波裂解6 min，冷却至室温，再次通过超滤膜组件，合并两次透过液，得到 石斛寡糖酶解透过液；石斛寡糖酶解透过液通过反渗透系统浓缩，在进膜压力4. 0 MPa下，
【权利要求】
1. 一种石斛胚芽茶的生产方法，其特征在于包括以下操作步骤： (1) 石斛胚芽的制备；将成熟的石斛荚果的种胚接种于培养基A上，在温度25±2°C、每 天光照12小时的条件下培养100?120天，得到绿色石斛胚芽； 所述液体培养基A为添加了石斛寡糖素的MS液体培养基；所述石斛寡糖素中寡糖含量 不低于70% ; (2) 石斛胚芽茶的制作：将绿色石斛胚芽杀青，揉捻成条形，压片，烘焙，即得到石斛胚 芽茶；所得胚芽茶色泽淡绿，条形扁平。
2. 根据权利要求1所述一种石斛胚芽茶的生产方法，其特征在于按照下述步骤进行操 作： (1) 石斛寡糖素的制备 按lg : 10?80 ml的比例将石斛和蒸馏水，超声波辅助浸提1?2 h，得到浸提液；浸提 液在6000?10000 r/min、室温条件下离心4?5 min,得到上清液和沉淀A ;将沉淀A按上 述条件重复浸提一次，收集并合并两次上清液为上清液A，将上清液A在55?65 °C、真空 度-0. 07?-0. 10 MPa条件下减压浓缩，得到浓缩提取液A ;向浓缩提取液A中添加95%乙 醇至乙醇体积百分比为80%，室温条件下静置12?24 h，6000?10000 r/min、室温条件下 离心4?5 min，得上清液B和沉淀B，取沉淀B溶于蒸馏水中，得到石斛寡糖粗提液；取石 斛寡糖粗提液，每毫升石斛寡糖粗提液中加入1X l〇3U的木瓜蛋白酶，在55 °C下、pH 5. 7条 件下酶解6?8 h，接着在100 °C灭活3?5 min，得到石斛寡糖酶解液；取石斛寡糖酶解液， 通过截留分子量为2. 5?5 KDa的超滤膜组件，在压力0. 05?0. 5 MPa、流速为0. 1?5. 0 m/s条件下超滤，收集透过液，截留液经1400 W、2450 MHz微波裂解5?6 min,冷却至室温， 再次通过上述超滤膜组件，在上述相同条件下超滤，合并两次透过液，得到石斛寡糖酶解透 过液；石斛寡糖酶解透过液通过反渗透系统浓缩，得反渗透浓缩液；将反渗透浓缩液进行 干燥，得到石斛寡糖素，所述石斛寡糖素中寡糖含量不低于70% ; (2) 石斛胚芽的制备 取成熟的石斛荚果，首先用1 g/L的升汞水溶液进行表面浸泡消毒40 min，接着用无 菌蒸馏水清洗4?5次，然后切开果实，取出种胚，接种于含培养基A的培养板上，在温度 25±2 °C、不同光质、每天光照12小时的条件下培养100?120天，得到绿色石斛胚芽； 所述液体培养基A为添加10?100 mg/L的石斛寡糖素的MS液体培养基； 所述不同光质为：第1?60天，光照强度为35 μ mol / (m2 *s)，光能比为红光：蓝光 =2 : 3 ;从第61天开始，光照强度为50 μ mol / (m2 · s)，光能比为白光：蓝光=5 : 1 ; (3) 石斛胚芽茶的制作 将绿色石斛胚芽在温度为200?300 °C条件下杀青2?3 min ;得到杀青石斛胚芽；取 杀青石斛胚芽揉捻并摆成本体条形，压片，接着放入40±2 °C条件下烘焙8?10 h，即得到 石斛胚芽茶；所得胚芽茶色泽淡绿，条形扁平。
3. 根据权利要求1或2所述的一种石斛胚芽茶的生产方法，其特征在于：所述石斛为 霍山石斛或铁皮石斛或铜皮石斛。
4. 根据权利要求2所述的一种石斛胚芽茶的生产方法，其特征在于：所述的超声辅助 浸提条件为超声温度30?50 °C，超声功率600?800 W，占空比1 : 0.1?1 : 0.6。
5. 根据权利要求2所述的一种石斛胚芽茶的生产方法，其特征在于：所述反渗透浓缩 条件为进膜压力0. 5?4. 0 MPa，膜通量为1?10 iv(m2*h)，浓缩至体积为原体积的10? 20%。
6.根据权利要求2所述的一种石斛胚芽茶的生产方法，其特征在于：所述干燥为真空 冷冻干燥或真空干燥。
【文档编号】A23F3/34GK104041413SQ201410267850
【公开日】2014年9月17日 申请日期:2014年6月17日 优先权日:2014年6月17日
【发明者】罗建平, 孟海涛, 潘利华, 杨雪飞, 査学强 申请人:合肥工业大学