一种显微操作持定针的制作方法
【专利摘要】本发明公开了显微操作持定针的制作方法。该制作方法包括如下步骤：(1)毛细玻璃管经加热后进行拉伸，在外径为150～170μm处断开，得到连接有尖端部分的管体；(2)加热所述管体的尖端部分，使所述尖端部分的内径收缩至40～50μm；(3)将经步骤(2)处理后的所述管体与热源水平放置且位于所述热源的上方，沿水平方向上，使所述管体的尖端与所述热源的距离为2～3mm；将所述管体进行加热至其尖端部分向下弯曲至20～30°；至此即实现显微操作持定针的制作。本发明提供的制作方法简单快捷，利用本发明的制作方法制备得到的持定针能有效降低显微操作持定针的制作成本，且该方法制作的持定针外径在150～170μm，能有效固定猪的卵母细胞以及胚胎。
【专利说明】
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种显微操作持定针的制作方法，属于显微操作工具制作【技术领域】。 一种显微操作持定针的制作方法
【背景技术】
[0002] 显微操作针是制作转基因动物、体细胞核移植动物和嵌合体动物等操作的必备工 具之一。光滑、平整的操作针不仅能提高操作效率，减小对卵母细胞和胚胎的伤害，而且有 助于胚胎的恢复。目前商业化生产的持定针，其内外直径较小，在用于猪体细胞核移植操作 以及胚胎操作时，不能对其进行有效固定，且由于内径较小，在压力较大时易对猪卵母细胞 造成损伤。另外，商业化的持定针价格较贵，增加了显微操作的成本。而使用拉针仪自行制 作持定针还需要另外购买昂贵的拉针仪。因此，提供一种制作方便，价格低廉且能有效固定 猪卵母细胞的显微操作持定针显得尤为重要。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的是提供一种显微操作持定针的制作方法。本发明提供的显微操作持 定针的制作方法简单快速，成本低廉，制备得到的持定针可有效固定猪卵母细胞以及胚胎， 方便注射和去核操作。
[0004] 本发明提供的显微操作持定针的制作方法，包括如下步骤：
[0005] (1)毛细玻璃管经加热后进行拉伸，在外径为150?170 μ m处断开，得到连接有尖 端部分的管体。
[0006] (2)加热所述管体的尖端部分，使所述尖端部分的内径收缩至40?50 μ m ;
[0007] (3)将经步骤（2)处理后的所述管体与热源水平放置且位于所述热源的上方，沿 水平方向上，使所述管体的尖端与所述热源的距离为2?3mm ;将所述管体进行加热至其尖 端部分向下弯曲至20?30° ;至此即实现显微操作持定针的制作。
[0008] 上述制作方法，步骤（1)中，所述毛细玻璃管的外径可为1. 0mm，内径可为0. 8mm， 长度可为1〇〇謹。
[0009] 上述制作方法，步骤（1)中，控制所述拉伸的长度可为40?50mm，具体操作时可使 用小砂轮断开所述管体。
[0010] 上述制作方法，步骤（2)和步骤（3)中，具体可利用锻针仪进行加热。
[0011] 上述制作方法，步骤（3)中，控制所述管体的尖端与所述锻针仪的电热丝的距离 为2?3mm。
[0012] 上述制作方法，步骤（3)中，利用锻针仪中的电热丝对所述尖端部分加热后，所述 尖端部分变软，且可在自身重力的作用下弯曲。
[0013] 本发明具有如下优点：
[0014] 本发明提供的制作方法简单快捷，利用本发明的制作方法制备得到的持定针能有 效降低显微操作持定针的制作成本，且该方法制作的持定针外径为150?170 μ m，能有效 固定猪的卵母细胞以及胚胎。
【专利附图】
【附图说明】
[0015] 图1为显微操作持定针的结构示意图。
[0016] 图2为显微操作持定针的尖端部分的结构示意图。
[0017] 图3为拉伸过程示意图，其中，图3(a)为拉伸过程示意图，图3(b)为拉伸之后毛 细玻璃管的示意图。
[0018] 图4为加热过程示意图，其中，图4(a)为煅烧前，图4(b)为煅烧后。
[0019] 图5为弯针过程示意图，其中，图5(a)为弯针前，图5(b)为弯针后。
[0020] 图6为本发明提供的显微操作持定针和商业化的显微操作持定针的对比图，其 中，图6(a)为本发明提供的显微操作持定针，图6(b)为商业化的持定针。
[0021] 图7为利用商业化持定针固定猪卵母细胞时进行显微操作的照片，其中，图7(a) 为入针，图7(b)和图7(c)为入针导致卵母细胞从持定针上滑开，箭头为滑动的方向，图 7(d)为退针。
[0022] 图8为本发明提供的显微操作持定针固定猪卵母细胞进行显微操作的照片，其 中，图8(a)为侧面入针，图8(b)和图8(c)为侧面入针可以使卵母细胞原地转动，但不会脱 离持定针，箭头为转动的方向，图7(d)为退针。
【具体实施方式】
[0023] 下面结合实施例对本发明做进一步说明，但本发明并不局限于以下实施例。
[0024] 实施例1、显微操作持定针的制作
[0025] 本发明提供的显微操作持定针的制作方法，包括如下步骤：
[0026] (1)拉伸：如图3所示，用两手固定BJ-40毛细玻璃管（外径1.0mm，内径0.8mm， 长100mm)，在酒精灯外焰上旋转加热中部，感觉到融化后迅速运力拉伸，同时离开酒精灯外 焰。选择外径在150?170 μ m的部分，用小砂轮断开一端。
[0027] 如图1和图2所示，毛细玻璃管拉伸之前外径为1. 0mm，内径0· 8mm ;拉伸之后，拉 细部分的外径为150?170 μ m，长度为1?2cm。若拉伸后无法找到外径在150?170 μ m 的部分，则需重新拉制。
[0028] (2)锻烧：如图4所示，把上述拉伸后的毛细玻璃管的尖端靠近电热丝，并固定到 MF-900型锻针仪上，断续加热电热丝，将尖端接近电热丝，开始加热使之融化。同时利用目 镜中的标尺观察尖端内径的变化情况，使之收缩到40?50 μ m左右。
[0029] (3)弯针：如图5所示，将经步骤（2)处理后的管体水平放置到MF-900型煅针仪 上，使其位于电热丝上方，尖端末端突出加热丝约2?3mm。移动电热丝，使其几乎接触固定 针，断续加热电热丝直到针变软在自身重力作用下弯曲20?30°。
[0030] 如图1所示，弯曲部分的长度为2?3mm，弯曲部分与管体的夹角为20?30°。
[0031] 利用上述制作方法制作得到的显微操作持定针如图6(a)所示，图6(b)为商业化 的显微操作持定针的对比图。由图6可知，利用本发明的制作方法制得的持定针与商业化 的持定针相比，外径和内径更大，这为对猪卵母细胞以及胚胎操作提供了有利条件。
[0032] 实施例2、利用显微操作持定针固定猪卵母细胞
[0033] 利用本发明提供的制作方法制得的持定针和商业化的持定针分别固定猪卵母细 胞进行显微操作，对比实验效果：
[0034] 图7为利用商业化持定针固定猪卵母细胞时进行显微操作的照片，由图7可以看 出，图7(b)和图7(c)中的入针操作导致卵母细胞从持定针上滑开，其中图中箭头为滑动 的方向；图8为本发明提供的显微操作持定针固定猪卵母细胞进行显微操作的照片，由图 8 (b)和图8 (c)可以看出，侧面入针可使卵母细胞原地转动，但不会脱离持定针，图中的箭 头为转动的方向。
[0035] 这是由于商业化的持定针外径较小，在对猪的卵母细胞或者胚胎进行显微操作 时，细胞或胚胎容易从持定针上划开，导致操作失败。而本方法制作获得的持定针外径与猪 卵母细胞基本相当，在显微操作中能有效固定细胞或胚胎，且可以使用注射针对细胞或胚 胎进行转动，调整其方位。
【权利要求】
1. 一种显微操作持定针的制作方法，包括如下步骤： (1) 毛细玻璃管经加热后进行拉伸，在外径为150?170 μ m处断开，得到连接有尖端部 分的管体； (2) 加热所述管体的尖端部分，使所述尖端部分的内径收缩至40?50 μ m ; (3) 将经步骤（2)处理后的所述管体与热源水平放置且位于所述热源的上方，沿水平 方向上，使所述管体的尖端与所述热源的距离为2?3mm ;将所述管体进行加热至其尖端部 分向下弯曲至20?30° ;至此即实现显微操作持定针的制作。
2. 根据权利要求1所述的制作方法，其特征在于：步骤（1)中，所述毛细玻璃管的外径 为1. 0mm,内径为0· 8mm,长度为100mm。
3. 根据权利要求1或2所述的制作方法，其特征在于：步骤（1)中，控制所述拉伸的长 度为40?50mm。
4. 根据权利要求1-3中任一项所述的制作方法，其特征在于：步骤（2)和步骤（3)中， 利用锻针仪进行加热。
5. 根据权利要求1-4中任一项所述的制作方法，其特征在于：步骤（2)中，所述尖端部 分与所述加热的热源垂直放置。
6. 根据权利要求4或5所述的制作方法，其特征在于：步骤⑶中，控制所述管体的尖 端与所述锻针仪的电热丝的距离为2?3mm。
【文档编号】C12M1/00GK104099239SQ201410328051
【公开日】2014年10月15日 申请日期:2014年7月10日 优先权日:2014年7月10日
【发明者】刘志国, 李奎, 李林 申请人:中国农业科学院北京畜牧兽医研究所