振荡型单细胞分离器的制造方法
【专利摘要】本发明提供了一种振荡型单细胞分离器，包括底层振荡器，上层旋转体和毛细管，底层振荡器和上层旋转体组成倒T型，底层振荡器为圆盘状，上层旋转体为圆柱体状，上层旋转体上设置有至少一圈毛细管，毛细管管道为S型弯曲状，毛细管为玻璃材质，底层振荡器内设置有振动马达并与上层旋转体连接，上层旋转体内腔的上部设置有旋转马达。至少一圈毛细管通过上层旋转体外部的固定卡扣顺时针螺旋下降固定在旋转体上。本发明用以从细胞悬浮液中分离出单细胞。通过在上层旋转体上设置的至少一圈毛细管，其管道呈S型弯曲状，在管道内的细胞悬浮液在底层振荡器的振荡和上层旋转体的旋转下，将单细胞从细胞悬浮液中分离出来。
【专利说明】振荡型单细胞分离器
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种振荡型单细胞分离器，属于生物医药仪器设备。
【背景技术】
[0002]当前基于单细胞水平的研究越来越受到重视并成为今后研究的一种趋势。已广泛应用于单细胞的DNA扩增、基因组测序和单细胞水平亚细胞给药系统研究等领域。而单细胞分离技术的成功解决是实现单细胞水平研究的基础。如何有效的获得单细胞以进一步研究其生物学特性问题常常困扰着研究者。
[0003]传统的方法就是反复多次有限稀释法，有限稀释法即把细胞稀释到理论上的I个细胞每2~5 μ L，然后用移液器吸取相应容积的细胞悬液进行单细胞分离。但实际的操作中，该法效率不高，一般在20%左右，大量存在的空白孔和多细胞孔(细胞数大于或等于2)需要研究人员观察排除，费时费力。该操作方法简单，但是整个过程周期长，费时费力，而且不能保证单个细胞的获取。
[0004]单细胞显微操作法，移液器体积偏大在显微镜下操作不方便，且稳定性差，加之移液尖尖端直径太大，吸液量大且容易吸进显微镜视野下不同层面的多个细胞。
[0005]目前高端的流式细胞仪不仅可以实现活细胞的多通道分选(荧光激活细胞分选，FACS)，还可以进行单细胞的分离种植分选，为大规模的单细胞研究奠定技术基础。但是这些分选设备价格昂贵，目前还难以普及。由于FACS过程因为涉及细胞的消化及分选，可能对细胞的活性及表面标记产生影响从而影响实验结果的准确性。而且流式细胞仪获得的是细胞群体信息的平均值，并不能反映单细胞内部的生理生化变化。
[0006]以上各种方法，有的方法效率不高或操作不方便或价格昂贵，容易损伤细胞，因此，探索一个操作简单、快速、高效的单细胞分离方法十分有意义。
【发明内容】
[0007]为了解决上述问题，进一步简化技术模式，方便操作，提高准确性和效率，减轻工作量，不损伤细胞，方便检测单细胞内生理生化反应，本发明提供一种振荡型单细胞分离器，能够快速分离单细胞，可在生物安全柜中无菌操作、分离器各部件可拆卸、灭菌后使用、操作简单、且对细胞本身无损伤，还有利于细胞的后续培养及检测。
[0008]本发明的技术方案是:
一种振荡型单细胞分离器，包括底层振荡器，上层旋转体和毛细管，底层振荡器和上层旋转体组成倒T型，底层振荡器为圆盘状，上层旋转体为圆柱体状，上层旋转体上设置有至少一圈毛细管，毛细管管道为S型弯曲状，毛细管为玻璃材质，底层振荡器内设置有振动马达并与上层旋转体连接，上层旋转体内腔的上部设置有旋转马达。
[0009]至少一圈毛细管通过上层旋转体外部的固定卡扣顺时针螺旋下降固定在旋转体上。
[0010]至少一圈毛细管的材质可为玻璃材质。
[0011]至少一圈毛细管的管道内径自流入口到流出口逐渐减小至与细胞相吻合的尺寸。
[0012]本发明的有益效果是:本发明用以从细胞悬浮液中分离出单细胞。通过在上层旋转体上设置的至少一圈毛细管，其管道呈S型弯曲状，在管道内的细胞悬浮液在底层振荡器的振荡和上层旋转体的旋转下，将单细胞从细胞悬浮液中分离出来。
【专利附图】
【附图说明】
[0013]图1是振荡型单细胞分离器的主视图；
图2是振荡型单细胞分离器的剖面图；
图3是玻璃毛细管内部的精细结构图；
图4是振荡型单细胞分离器分离出单细胞时的状态图。
[0014]图中:10—底层振荡器，101—弹黃，102—底座，103—轴承，104—振动马达，20—上层旋转体，201—固定卡扣，202—旋转马达，203—锁紧盖，30—毛细管，301—加入口，302—流出口，40—单细胞。
【具体实施方式】
[0015]为了使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面结合附图和具体实施例对本发明进行详细描述。
[0016]如图1至图4所示，本发明的一种振荡型单细胞分离器，包括底层振荡器10，上层旋转体20和毛细管30，底层振荡器10和上层旋转体20组成倒T型，底层振荡器10为圆盘状，上层旋转体20为圆柱体状，上层旋转体20上设置有至少一圈毛细管30，毛细管30管道为S型弯曲状，毛细管30为玻璃材质，底层振荡器10内设置有振动马达104并与上层旋转体20连接，上层旋转体20内腔的上部设置有旋转马达202。
[0017]毛细管30通过上层旋转体20外部的固定卡扣201顺时针螺旋下降固定在上层旋转体20上。
[0018]毛细管30的材质为玻璃材质。本实施方式中，毛细管30材质为石英。
[0019]毛细管30的管道内径自流入口到流出口逐渐减小至与细胞相吻合的尺寸。
[0020]底层振荡器10和所述上层旋转体20材质为不锈钢或金属。本实施方式中，底层振荡器10和上层旋转体20材质为金属铝。
[0021]底层振荡器10外部包括底座102和弹簧101，内部包括振动马达104和轴承103，底层振荡器10通过振动马达104进行上下振荡。
[0022]上层旋转体20包括外部的固定卡扣201，内部的旋转马达202和锁紧盖203，上层旋转体20在旋转马达202的作用下逆时针旋转。上层旋转体20与底层振荡器10通过轴承103连接。
[0023]毛细管30通过固定卡扣201由上而下顺时针固定在上层旋转体20上，毛细管30内部管道为S型弯曲状，使得细胞在其中排列整齐。本实施方式中，有四圈毛细管通过固定卡扣201固定在上层旋转体20上。
[0024]细胞悬浮液从加入口 301流入毛细管30，在毛细管30内经底层振荡器10的振荡和上层旋转体20的旋转作用下，细胞在毛细管内部S型弯曲的管道内进行排列，并在重力势能的作用下一个个的从流出口 302滴出，从而分离出单细胞40，保证无菌，简单，易操作，过程中不损伤细胞。毛细管30的圆弧直径根据细胞大小分为不同尺寸，如100 μ m, 150 μ m,200 μ m等，从而降低液体下流速度，利于单细胞分离。
本实施方式中的振荡型单细胞分离器在获得单个完整细胞后，可用于单细胞的光电同步检测。
[0025]综上所述，本发明的振荡型单细胞分离器通过将至少一圈毛细管30固定在上层旋转体20上，通过至少一圈毛细管30的S型弯曲的管道、底层振荡器10的振荡和上层旋转体20的旋转，即可轻松将单细胞从细胞悬浮液中分离出来。本发明振荡型单细胞分离器可在生物安全柜中操作，保证无菌操作，所述毛细管可拆卸，灭菌后使用。本发明的振荡型单细胞分离器对操作人员的操作技能要求较宽，可大大减轻研发人员的时间和精力，同时还能快速分离单个细胞，且对细胞本身无损伤，还对细胞的后期培养和检测无影响。
【权利要求】
1.一种振荡型单细胞分离器，其特征在于:包括底层振荡器，上层旋转体和毛细管，所述底层振荡器和所述上层旋转体组成倒T型，所述底层振荡器为圆盘状，所述上层旋转体为圆柱体状，所述上层旋转体上设置有至少一圈毛细管，毛细管管道为S型弯曲状，毛细管为玻璃材质，底层振荡器内设置有振动马达并与上层旋转体连接，所述上层旋转体内腔的上部设置有旋转马达。
2.根据权利要求1所述的振荡型单细胞分离器，其特征在于:所述至少一圈毛细管通过上层旋转体外部的固定卡扣顺时针螺旋下降固定在旋转体上。
3.根据权利要求1所述的振荡型单细胞分离器，其特征在于:所述至少一圈毛细管的材质为玻璃材质。
4.根据权利要求1所述的振荡型单细胞分离器，其特征在于:所述至少一圈毛细管的管道内径自流入口到流出 口逐渐减小至与细胞相吻合的尺寸。
【文档编号】C12M1/00GK104130936SQ201410401533
【公开日】2014年11月5日 申请日期:2014年8月14日 优先权日:2014年8月14日
【发明者】徐艇 申请人:江苏瑞明生物科技有限公司