本发明涉及一种罗氏沼虾亲虾抗应激促繁殖颗粒饲料及其制备方法，属于水产配合饲料技术领域。
背景技术：
罗氏沼虾（macrobrachiumrosenbergii）又名马来西亚大虾、淡水长臂大虾、金钱虾、大河虾，为世界上最大的淡水虾类，原产于整个南亚和东南亚地区以及大洋洲北部和西太平洋岛屿，全年生活在这些地区的淡水或咸淡水水域中，并在受潮水影响的河口地区进行繁殖。罗氏沼虾体形较大、食性广、病害少、易生存、生长快、营养好，因此具有重要的经济价值。
罗氏沼虾亲虾的饲料营养对提高亲虾的产卵量、卵和仔虾质量及仔虾生长、成活率等有重要影响。亲虾的质量好坏直接影响苗种的质量，影响罗氏沼虾的养殖生长。在罗氏沼虾育苗生产过程中，许多育苗场的产量时高时低，苗种质量时好时坏，生产很不稳定，造成这种现象的原因一方面是幼体培育技术及其开口饵料外，另一方面是亲虾培育技术与营养强化有关，造成抱卵亲虾的质量差或数量不足，影响了正常的育苗生产，特别是育的后期，种虾的繁育能力逐渐下降。近年来一般苗场使用普通的罗氏沼虾商业饲料，搭配一些螺丝、冰鲜鱼等天然饵料，一方面饲料浪费大，易污染水体，另一方面螺丝、冰鲜鱼等天然饵料可能携带病原导致种虾发生，同时携带病原也可能通过垂直传播给种苗，造成亲虾产卵少、繁殖率低，鱼苗的成活率低。
应激动物的一种非常常见的生理状态,它是动物机体对外界环境或身体内部产生异常刺激时做出的各种生理应答反应的总和。这是动物的本能反应,处于应激状态的动物往往不能正常生长和繁殖。水产动物,包括鱼类、虾蟹类和贝类等都会产生应激反应。根据罗氏沼虾的育苗时期来看，11月左右开始近种虾入室内温室大棚养殖，进行营养强化2-3个月，来年的3月份左右正式繁苗。此过程罗氏沼虾种虾持续经历运输、温度变化、低氧、密度等应激因子，降低繁殖性能，易发生病害、甚至死亡。如何避免罗氏沼虾亲虾产生应激的负作用是提高养殖效率和生产效益十分重要的技术要。
以上可知，育苗过程中罗氏沼虾种虾经受环境应激、食物营养缺乏等多方面的应激胁迫，造成亲虾产卵少、繁殖率低，鱼苗的成活率低，同时也造成养殖后代苗种质量不问题，带来“铁壳虾”等病害多，养殖风险大等产业难题，不利于罗氏沼虾的产业的健康发展。针对这些问题，洪越群等（2016）申请专利（201610010269.7）一种罗氏沼虾亲虾颗粒饲料及其制备方法，主要通过常规营养平衡，提高虾的饲料利用率，提高虾繁殖性能。王吉桥（2002）阐述了应激刺激对养殖鱼类繁殖的影响，如：惊扰或操作可使虹鳟提前或推迟繁殖,也可加速或完全抑制尼罗罗非鱼繁殖，这些应激源可通过改变配子或后代的质量来影响繁殖。汪敏节等(2016）申请专利（201611090050.9）一种增强罗氏沼虾抗病和抗应激能力的羽毛水解粉饲料及其制备方法。袁野等（2016）申请专利（201610151676.x）一种罗氏沼虾用的抗应激增强剂及其应用。但是有关提高虾罗氏沼虾种虾应激与繁殖的论文与专利还少见，能提高种虾免疫与抗应激能力，有助于提高繁殖性能的颗粒饲料及其制备使用方法，还未见报道。因此，本专利针对罗氏沼虾亲虾的饲料，从鱼体繁殖的角度，提高罗氏沼虾亲虾的繁殖能力，另一方面能提高罗氏沼虾亲虾的免疫与抗抗应激能力，增强抗病能力，开发一种提供营养全面、丰富、平衡的配合饲料。
技术实现要素：
本发明的目的在于克服上述不足之处，提供一种罗氏沼虾亲虾抗应激促繁殖颗粒饲料及其制备方法，其饲料营养全面、丰富，提高罗氏沼虾亲虾的抗应激能力，增强繁殖能力，有利于繁殖期营养需要与生长。
按照本发明提供的技术方案，罗氏沼虾亲虾抗应激促繁殖颗粒饲料，配方比例按重量份计如下：鱼粉32.0-35.0份、乌贼粉3.0-5.0份、虾粉6.0-8.0份、豆粕18.0-20.0份、菜粕9.0-12.0份、普通面粉11.5-13.0份、鱼油5.0-7.0份、大豆磷脂粉0.50-1.20份、氯化胆碱0.5-1.2份、磷酸二氢钙2.10-2.50份、蜕壳素0.2-0.4份、山梨酸钾防霉剂0.2-0.4份、沸石粉0.84-1.07份、渔用预混料0.9-1.2份、维生素e0.06-0.15份、维生素a0.3-0.5份、l-蛋氨酸0.3-0.5份、甘氨酰-l-谷氨酰胺0.001-0.003份、辣木叶发酵产物0.025-0.075份、桑叶提取物0.002-0.004份、大黄提取物0.001-0.003份；
先将鱼粉、豆粕、乌贼粉、菜粕、普通面粉粉碎，后与鱼油、山梨酸钾防霉剂、大豆磷脂粉、氯化胆碱、渔用预混料、维生素e、辣木叶发酵产物、桑叶提取物、大黄提取物、沸石粉及磷酸二氢钙等搅拌混合混匀；搅拌混匀后经过粉碎机粉碎为混合物料，最后利用颗粒饲料的常规方法制成罗氏沼虾亲虾抗应激促繁殖颗粒饲料。
所述罗氏沼虾亲虾抗应激促繁殖颗粒饲料的制备方法，按重量份计步骤如下：
（1）一次混合与粉碎：将鱼粉32.0-35.0份、乌贼粉3.0-5.0份、虾粉6.0-8.0份、豆粕18.0-20.0份、菜粕9.0-12.0份和普通面粉11.5-13.0份投入粉碎机中进行第一次粉碎，粉碎速度为400-500r/min，得到混合粗物料，并过40-60目筛网；
（2）二混料：在步骤（1）所得混合粗物料中加入鱼油5.0-7.0份、大豆磷脂粉0.50-1.20份、氯化胆碱0.5-1.2份、磷酸二氢钙2.10-2.50份、蜕壳素0.2-0.4份、山梨酸钾防霉剂0.2-0.4份和沸石粉0.84-1.07份，投入混合机中混合均匀，投料时混合机转速为18-20r/min；
（3）二次粉碎：取步骤（2）所得混合均匀的物料投入粉碎机中进行第二次粉碎，并通过40-60目筛网；粉碎机粉碎速度，粉碎速度为400-500r/min；
（4）三次混料：在步骤（3）所得混合粗物料中加入渔用预混料0.9-1.2份、维生素e0.06-0.15份、维生素a0.3-0.5份、l-蛋氨酸0.3-0.5份、甘氨酰-l-谷氨酰胺0.001-0.003份、辣木叶发酵产物0.025-0.075份、桑叶提取物0.002-0.004份和大黄提取物0.001-0.003份，投入混合机中混合均匀，投料时混合机转速为18-20r/min；
（5）三次粉碎：取步骤（4）所得混合均匀的物料投入粉碎机中进行第三次粉碎，并通过40-60目筛网；粉碎机粉碎速度，粉碎速度为400-500r/min；
（6）后处理：取步骤（5）制得的二次粉碎后的混合物料投入水产饲料制粒机，制得颗粒饲料；将颗粒饲料置入干燥机中90-100℃的温度下烘干；将烘干后的颗粒饲料在冷却器中冷却后进行包装，即得产品罗氏沼虾亲虾抗应激促繁殖颗粒饲料。
步骤（4）所述辣木叶发酵产物制备方法为：取辣木叶粉粹至40-80目，制得辣木叶粉末；加入到ph为4.0-6.0的水溶液中，辣木叶与水质量比为8-12:1，并置于发酵罐中，同时在发酵罐中加入解淀粉芽孢杆菌，设置发酵罐罐温为30-40℃，搅拌速度为4-8r/min，培养16-32h；将所得的发酵液倒入旋转蒸发仪的容量瓶内，设置温度为50-55℃，气压为0.001-0.003mpa，重复提取2~4次，将2~4次所得旋出液在旋转蒸发仪内浓缩，浓缩温度为70-80℃，气压为0.001-0.003mpa，浓缩至浓稠膏状物为止，即得所述辣木叶发酵产物。
所述ph为4.0-6.0的水溶液采用醋酸-醋酸钠为ph调节剂；所述解淀粉芽孢杆菌ffrc-s24在2013年5月9日保藏于中国奠定培养物保藏中心，保藏编号为：cctccno：m2013191，规格为100亿cfu/g。
所述颗粒饲料粒径为1.0-3.0mm。
本发明的有益效果：
1、配合饲料中添加了桑叶提取物、维生素e、维生素a等能增加罗氏沼虾亲虾产卵，提高繁殖能力。
2、配合饲料中添加了辣木叶发酵产物、甘氨酰-l-谷氨酰胺、大黄提取物，大黄提取物等免疫增强剂，可以增强虾的抗应激能力，减少应激的危害。
3、本颗粒饲料添加了含量为大豆磷脂粉、氯化胆碱及l-蛋氨酸，能改善能量利用率，减轻应激与繁殖条件下因蛋氨酸需要量不足的缺乏症，提高饲料利用率与鱼体肝脏脂肪的代谢，降低鱼体脂肪肝的发生，并且具有一定的诱食作用，增加适口性，有利于降低饵料系数，提高其生长。
4、本专利饲料配方所选原料来源充足，采用了三次混合与三次粉碎的工艺，保证饲料原料的粉碎粒度与混合均匀度，增加虾料在水中的稳定性，提供饲料利用率。
5、本颗粒饲料营养全面、丰富，与传统的螺丝、冰鲜鱼等罗氏沼虾亲虾饵料相比，能提高抗应激能力，增加怀卵量，提高罗氏沼虾繁殖力，增加仔虾成活率。
具体实施方式
以下实施例中所述的桑叶提取物有主要成份是黄酮类、生物碱、桑叶多糖等，多糖10%-30%，由宝鸡市方晟生物开发有限公司提供。所述的甘氨酰-l-谷氨酰胺，含量为98%，由浙江衢州塞姆中宇生物技术有限公司提供。大黄素，含量为98%，由什邡市巨邦植物原料有限公司提供。所述的l-蛋氨酸由郑州福润德生物工程有限公司为您提供。所述的氯化胆碱含量为50%，由河北环球饲料添加剂厂提供。所述的蜕壳素，由山东华威生物科技有限公司提供。所述的山梨酸钾防霉剂由宁波王龙科技有限公司提供。所述的维生素e，为50%维生素e醋酸酯，由浙江东工制药有限公司提供。所述的维生素a，含量500000u/克，由浙江东工制药有限公司提供。所述的大豆磷脂粉由淄博齐兴饲料有限公司提供。所述的渔用预混料为含有多种维生素与矿物元素的1%淡水鱼用预混料，由无锡华诺威动物保健有限公司提供。
下面本发明将结合实施例作进一步描述：
实施例1一种罗氏沼虾亲虾抗应激促繁殖颗粒饲料及其制备方法，采用以下工艺步骤：
本发明配制100kg饲料其各原料组成：
35.0kg鱼粉、3.0kg乌贼粉、8.0kg虾粉、18.0kg豆粕、10.0kg菜粕、11.7kg普通面粉、7.0kg鱼油、0.5kg大豆磷脂粉、0.5kg氯化胆碱、2.5kg磷酸二氢钙、0.2kg蜕壳素、0.3kg山梨酸钾防霉剂、0.84kg沸石粉、1.0kg渔用预混料、0.05kg维生素e、0.3kg维生素a、0.5kgl-蛋氨酸、0.002kg甘氨酰-l-谷氨酰胺、0.05kg辣木叶发酵产物、0.003kg桑叶提取物、0.003kg大黄提取物。
（1）一次混合与粉碎：先将鱼粉、豆粕、蚕蛹、菜粕、棉粕、普通面粉、次粉、洗米糠、山梨酸钾防霉剂经粉碎机第一次粉碎为混合粗物料，粉碎速度为400r/min，并通过40目筛网；
（2）二混料：再将混合粗物料与鱼油、大豆磷脂粉、氯化胆碱、磷酸二氢钙、蜕壳素、山梨酸钾防霉剂、沸石粉等搅拌在混合机（v型混合机，溧阳市汇达机械有限公司）内混匀后为二次混合物料；混合机投料转速：18转/分；
（3）二次粉碎：后经粉碎机第二次粉碎，并通过40目筛网；粉碎机粉碎速度：400转/分；
（4）三次混料：随后将混合物料再加入维生素添加剂、矿物质添加剂、维生素e、维生素a、l-蛋氨酸、谷氨酰胺、辣木叶发酵产物、桑叶提取物、大黄提取物等搅拌在混合机（v型混合机，溧阳市汇达机械有限公司）内混匀后为三次混合物料；混合机投料转速：18转/分；
（5）三次粉碎：后经粉碎机第三次粉碎，并通过40目筛网；粉碎机粉碎速度：400转/分；
（6）后处理：最后将所得的混合物料用水产饲料制粒机（stzg系列，正昌集团公司）制成饲料颗粒。饲料颗粒粒径：1.0mm；后将饲料颗粒在干燥机（dwt系列带式干燥机，正昌集团公司）中95℃温度下烘干；将烘干后的膨化饲料在冷却器中（sklg900滚筒冷却器，正昌集团公司）冷却后进行包装。
所述辣木叶发酵产物制备方法为：将辣木叶粉粹至40目，制得辣木叶粉末；加入到ph为4.0的水溶液中，辣木叶与水质量比为8:1，并置于发酵罐中，同时在发酵罐中加入解淀粉芽孢杆菌（ffrc-s24），设置发酵罐罐温为30℃，搅拌速度为4转/分钟，培养16h；将所得的发酵液倒入旋转蒸发仪的容量瓶内，设置温度为50℃，气压为0.001mpa，重复提取三次，将三次所得的旋出液在旋转蒸发仪内浓缩，浓缩温度为70℃，气压为0.001mpa，浓缩至浓稠膏状物为止，即得所述辣木叶发酵产物。所述ph为4.0的水溶液采用醋酸-醋酸钠为ph调节剂；所述解淀粉芽孢杆菌（ffrc-s24）在2013年5月9日保藏于中国奠定培养物保藏中心，保藏编号为：cctccno：m2013191，规格为100亿cfu/g。
养殖实验：罗氏沼虾由江苏扬州罗氏沼虾育苗公司提供。试验选择健康、规格基本一致的罗氏沼虾亲虾，随机分组，设有对照组与试验组，其中对照组不含辣木叶发酵产物、桑叶提取物。试验组含有0.05%辣木叶发酵产物和0.002%桑叶提取物等罗氏沼虾亲虾抗应激促繁殖颗粒饲料。每组设3个平行试验，每平行组30尾虾，共6个水泥池（规格为200cm×150cm×100cm）。罗氏沼虾驯化15d后投喂对照组基础日粮和抗应激促繁殖颗粒试验饲料8周，测定其抗应激能力、怀卵量、繁殖力、成活率等指标。
结果表明：与对照组相比，抗应激促繁殖颗粒试验组存活率分别提高了6.58%，显著降低丙二醛浓度8.77%，增加了过氧化氢酶11.34%、超氧化物歧化酶活性7.58%，并且提高怀卵量16.78%，增加仔鱼的成活率9.89%。因此，该抗应激促繁殖颗粒饲料养殖实验表明能增加罗氏沼虾的抗应激能力与繁殖能力。
实施例2本发明一种罗氏沼虾亲虾抗应激促繁殖颗粒饲料及其制备方法，采用以下工艺步骤：
本发明配制100kg饲料其各原料组成：
32.0kg鱼粉、4.0kg乌贼粉、6.0kg虾粉、20.0kg豆粕、12.0kg菜粕、11.5kg普通面粉、6.0kg鱼油、1.0kg大豆磷脂粉、1.0kg氯化胆碱、2.1kg磷酸二氢钙、0.3kg蜕壳素、0.2kg山梨酸钾防霉剂、1.07kg沸石粉、1.2kg渔用预混料、0.15kg维生素e、0.5kg维生素a、0.4kgl-蛋氨酸、0.001kg甘氨酰-l-谷氨酰胺、0.075kg辣木叶发酵产物、0.002kg桑叶提取物、0.002kg大黄提取物。
（1）一次混合与粉碎：先将鱼粉、豆粕、蚕蛹、菜粕、棉粕、普通面粉、次粉、洗米糠、山梨酸钾防霉剂经粉碎机第一次粉碎为混合粗物料，粉碎速度为500r/min，并通过50目筛网；
（2）二混料：再将混合粗物料与鱼油、大豆磷脂粉、氯化胆碱、磷酸二氢钙、蜕壳素、山梨酸钾防霉剂、沸石粉等搅拌在混合机（v型混合机，溧阳市汇达机械有限公司）内混匀后为二次混合物料；混合机投料转速：19转/分；
（3）二次粉碎：后经粉碎机第二次粉碎，并通过40目筛网；粉碎机粉碎速度：450转/分；
（4）三次混料：随后将混合物料再加入维生素添加剂、矿物质添加剂、维生素e、维生素a、l-蛋氨酸、谷氨酰胺、辣木叶发酵产物、桑叶提取物、大黄提取物等搅拌在混合机（v型混合机，溧阳市汇达机械有限公司）内混匀后为三次混合物料；混合机投料转速：19转/分；
（5）三次粉碎：后经粉碎机第三次粉碎，并通过40目筛网；粉碎机粉碎速度：450转/分；
（6）后处理：最后将所得的混合物料用水产饲料制粒机（stzg系列，正昌集团公司）制成饲料颗粒。饲料颗粒粒径：2.0mm；后将饲料颗粒在干燥机（dwt系列带式干燥机，正昌集团公司）中95℃温度下烘干；将烘干后的膨化饲料在冷却器中（sklg900滚筒冷却器，正昌集团公司）冷却后进行包装。
所述辣木叶发酵产物制备方法为：将辣木叶粉粹至60目，制得辣木叶粉末；加入到ph为5.0的水溶液中，辣木叶与水质量比为10:1，并置于发酵罐中，同时在发酵罐中加入解淀粉芽孢杆菌（ffrc-s24），设置发酵罐罐温为35℃，搅拌速度为6转/分钟，培养24h；将所得的发酵液倒入旋转蒸发仪的容量瓶内，设置温度为52℃，气压为0.002mpa，重复提取三次，将三次所得的旋出液在旋转蒸发仪内浓缩，浓缩温度为75℃，气压为0.002mpa，浓缩至浓稠膏状物为止，即得所述辣木叶发酵产物。所述ph为5.0的水溶液采用醋酸-醋酸钠为ph调节剂；所述解淀粉芽孢杆菌（ffrc-s24）在2013年5月9日保藏于中国奠定培养物保藏中心，保藏编号为：cctccno：m2013191，规格为100亿cfu/g。
养殖实验：罗氏沼虾由江苏扬州罗氏沼虾育苗公司提供。试验选择健康、规格基本一致的罗氏沼虾亲虾，随机分组，设有对照组与试验组，其中对照组不含辣木叶发酵产物、桑叶提取物。试验组含有0.025%辣木叶发酵产物、0.003%桑叶提取物等罗氏沼虾亲虾抗应激促繁殖颗粒饲料。每组设3个平行试验，每平行组30尾虾，共6个水泥池（规格为200cm×150cm×100cm）。罗氏沼虾驯化15d后投喂对照组基础日粮和抗应激促繁殖颗粒试验饲料8周，测定其抗应激能力、怀卵量、繁殖力、成活率等指标。
结果表明：与对照组相比，抗应激促繁殖颗粒试验组存活率分别提高了7.34%，显著降低丙二醛浓度9.82%，增加了过氧化氢酶9.11%、超氧化物歧化酶活性13.32%，并且提高怀卵量15.88%，增加仔鱼的成活率12.26%。因此，该抗应激促繁殖颗粒饲料养殖实验表明能增加罗氏沼虾的抗应激能力与繁殖能力。
实施例3本发明一种罗氏沼虾亲虾抗应激促繁殖颗粒饲料及其制备方法，采用以下工艺步骤：
本发明配制100kg饲料其各原料组成：
33.0kg鱼粉、5.0kg乌贼粉、7.0kg虾粉、19.0kg豆粕、9.0kg菜粕、13.0kg普通面粉、5.0kg鱼油、1.2kg大豆磷脂粉、1.2kg氯化胆碱、2.0kg磷酸二氢钙、0.4kg蜕壳素、0.4kg山梨酸钾防霉剂、1.12kg沸石粉、0.9kg渔用预混料、、0.10kg维生素e、0.4kg维生素a、0.3kgl-蛋氨酸、0.003kg甘氨酰-l-谷氨酰胺、0.025kg辣木叶发酵产物、0.004kg桑叶提取物、0.001kg大黄提取物。
（1）一次混合与粉碎：先将鱼粉、豆粕、蚕蛹、菜粕、棉粕、普通面粉、次粉、洗米糠、山梨酸钾防霉剂经粉碎机第一次粉碎为混合粗物料，粉碎速度为450r/min，并通过60目筛网；
（2）二混料：再将混合粗物料与鱼油、大豆磷脂粉、氯化胆碱、磷酸二氢钙、蜕壳素、山梨酸钾防霉剂、沸石粉等搅拌在混合机（v型混合机，溧阳市汇达机械有限公司）内混匀后为二次混合物料；混合机投料转速：20转/分；
（3）二次粉碎：后经粉碎机第二次粉碎，并通过40目筛网；粉碎机粉碎速度：500转/分；
（4）三次混料：随后将混合物料再加入维生素添加剂、矿物质添加剂、维生素e、维生素a、l-蛋氨酸、谷氨酰胺、辣木叶发酵产物、桑叶提取物、大黄提取物等搅拌在混合机（v型混合机，溧阳市汇达机械有限公司）内混匀后为三次混合物料；混合机投料转速：20转/分；
（5）三次粉碎：后经粉碎机第三次粉碎，并通过40目筛网；粉碎机粉碎速度：500转/分；
（6）后处理：最后将所得的混合物料用水产饲料制粒机（stzg系列，正昌集团公司）制成饲料颗粒。饲料颗粒粒径：3.0mm；后将饲料颗粒在干燥机（dwt系列带式干燥机，正昌集团公司）中95℃温度下烘干；将烘干后的膨化饲料在冷却器中（sklg900滚筒冷却器，正昌集团公司）冷却后进行包装。
所述辣木叶发酵产物制备方法为：将辣木叶粉粹至80目，制得辣木叶粉末；加入到ph为6.0的水溶液中，辣木叶与水质量比为12:1，并置于发酵罐中，同时在发酵罐中加入解淀粉芽孢杆菌（ffrc-s24），设置发酵罐罐温为40℃，搅拌速度为8转/分钟，培养32h；将所得的发酵液倒入旋转蒸发仪的容量瓶内，设置温度为55℃，气压为0.003mpa，重复提取三次，将三次所得的旋出液在旋转蒸发仪内浓缩，浓缩温度为80℃，气压为0.003mpa，浓缩至浓稠膏状物为止，即得所述辣木叶发酵产物。所述ph为6.0的水溶液采用醋酸-醋酸钠为ph调节剂；所述解淀粉芽孢杆菌（ffrc-s24）在2013年5月9日保藏于中国奠定培养物保藏中心，保藏编号为：cctccno：m2013191，规格为100亿cfu/g。
养殖实验：罗氏沼虾由江苏扬州罗氏沼虾育苗公司提供。试验选择健康、规格基本一致的罗氏沼虾亲虾，随机分组，设有对照组与试验组，其中对照组不含辣木叶发酵产物、桑叶提取物。试验组含有0.075%辣木叶发酵产物、0.004%桑叶提取物的罗氏沼虾亲虾抗应激促繁殖颗粒饲料。每组设3个平行试验，每平行组30尾虾，共6个水泥池（规格为200cm×150cm×100cm）。罗氏沼虾驯化15d后投喂对照组基础日粮和抗应激促繁殖颗粒试验饲料8周，测定其抗应激能力、怀卵量、繁殖力、成活率等指标。
结果表明：与对照组相比，抗应激促繁殖颗粒试验组存活率分别提高了8.87%，显著降低丙二醛浓度10.21%，增加了过氧化氢酶7.94%、超氧化物歧化酶活性13.61%，并且提高怀卵量14.76%，增加仔鱼的成活率11.23%。因此，该抗应激促繁殖颗粒饲料养殖实验表明能增加罗氏沼虾的抗应激能力与繁殖能力。