本发明涉及一种营养保健饮料加工，具体是一种滁菊蝉花虫草发酵饮料及其制备方法，属于保健食品领域。
背景技术：
蝉花虫草，也称金蝉花(cordycepscicadae)，在我国不同地区也被称为蝉草、蝉茸、虫花、胡蝉等；为蝉棒束孢寄生在蝉幼虫所形成的虫菌复合体，为我国传统名贵中药材。其性寒、味甘、无毒，能疏散风热、定惊镇痉、明目透疹、滋补强壮。早在公元五世纪的南北朝时期即有记载，雷斅在《雷公炮炙论》记载了蝉花的加工方法：“凡使，要白花全者，收得后于屋下东南角悬干，去土后，用浆水煮一日至夜，焙干碾细用之”，后来，隋、唐甄权的《药性论》、宋代苏颂的《图经本草》、明代李时珍的《本草纲目》均有记载。千余年来，蝉花一直应用于强身健体，防病疗疾。我国云南、广东、四川、福建和浙江、江苏一带有长期食用习惯，已开发出众多蝉花药膳滋补食谱，适合不同体质、病症的人以及健康人群对症或健身选用。蝉花虫草在我国具有广泛食用区域和悠久的食用历史。
近年研究表明，无论天然蝉花还是人工培养的蝉花均富含蛋白质、氨基酸(包括8种人体必需的氨基酸)、纤维素、脂肪酸、多种维生素、微量元素及糖类等营养物质。人工培养的蝉花，与天然蝉花存在相同的营养成分，而且芳香适口，对天然蝉花具有很好的替代性。蝉花并能产生多种在医疗保健上有重要作用的生理活性物质，包括多糖类、环肽类、核苷类、甾醇类、球壳菌素等。kiho和nagai从蝉花中分离出半乳甘露聚糖c-3(galactomannan)，它是一种水溶性多糖，相对分子量27000，由d-甘露糖和d-半乳糖以4:3比例组成，以20mg/kg的剂量对小鼠s180肉瘤的抗肿瘤作用，结果抑制率为47％。duarten等从蝉花中分离得五种环肽化合物，分别为白僵菌酮(bassiatin)、白僵菌酮甲(bassiatina)、白僵菌素(beauvericin)、白僵菌素甲(beauvericina)、白僵菌素乙(beauvericinb)。白僵菌酮和白僵菌酮甲具有相似的药理作用，为一种新型的血小板凝聚抑制剂，均对adp诱导的兔血小板凝聚有明显的抑制作用(ic50＝1.9×10-4mol/l)。药理实验结果显示白僵菌素类成分具有抗肿瘤、抗惊厥、抗心律失常、镇静等作用。蝉花中核苷类成分包括腺苷、虫草素、鸟苷、尿苷、腺嘌呤、鸟嘌呤等。腺苷是一种嘌呤核苷，其含量是评价各种虫草内在质量的主要指标。腺苷涉及到中枢神经系统中不同生理过程的调节，能抑制中枢神经元的兴奋性，可以扩张冠状及周围血管、增加冠状动脉血流量、降低血压、减慢心率等作用，腺苷还具有抗血小板聚集、抗辐射和抗肿瘤等作用。kuo和lin从蝉花菌丝体中分离出麦角固醇(ergosterol)和麦角固醇过氧化物(ergosterolperoxide)。麦角固醇是真菌类细胞膜上重要的固醇类，在虫草类真菌中含量相对稳定，通常作为质量控制指标之一，具有抗氧化能力，且为维生素d2的前驱物，具有重要的药理作用。kuo和weng报道麦角固醇过氧化物具有抑制肿瘤生长及抗炎的活性以及抗动脉粥样硬化的作用，可抑制植物血球凝聚素(pha)活化的人t细胞分化与增殖。
takano和yahagi从蝉花发酵液中分离出一种可以促进th1免疫反应的蛋白多糖，该多糖可以增加大鼠派氏集合淋巴结细胞中白介素-2和干扰素-γ的浓度，并且通过毒理实验表明该蛋白多糖对大鼠没有毒副作用。zhurong等人研究发现蝉花虫草提取物可以有效减少实验模型鼠的肾脏纤维化进程。wanghualin等人通过蛋白质组学研究发现蝉花虫草水提取物可减慢肝癌细胞mhcc97h细胞的增值。wengsc等人研究发现蝉花虫草提取物还具有免疫调节的作用。
目前野生蝉花虫草主要是作为中药材或作为食材，作为食材主要是煲汤。但是由于野生蝉花虫草数量有限，且野生蝉花虫草质量参差不齐，特别是野生蝉花易出现重金属超标现象。同时，采集野生参还会对自然环境造成一定的破坏。近年来，人工培养蝉花虫草技术得到了迅速发展。但是目前人工蝉花虫草主要是以粉碎后的粉状物或者蝉花浸泡酒的形式出售，产品的形式比较单一，且众所周知饮酒不利于身体健康。
滁菊是国家地理标志产品，是滁州的特产，主要产于安徽省滁州市，味甘，性微寒，因具有良好的药用功效，被誉为我国“四大药菊”之首，俗称白菊，甘菊，是卫生部明确批准的可以药食两用的食物，并且距今已经有了2000多年的种植历史。现代研究有表明，滁菊中含黄酮类、精油、多糖类和多酚类物质等天然有效成分，具有抗菌、解热、降压、抗衰老、抗病毒、增强免疫、明目平肝解毒等多种功能。但滁菊的主要产品仍是以干燥花瓣作为花草茶为主，产品形式也十分贫乏。且滁菊泡茶饮用具有一定的苦味，导致很多人不喜欢饮用。
技术实现要素：
本发明提供一种蝉花虫草发酵饮料的制备方法，目的是为丰富饮料市场和蝉花虫草产品形式而提供一种营养丰富、具有多种生理调节功能的发酵蝉花虫草复合饮料。
本发明是通过以下技术方案实现的：
一种滁菊蝉花虫草发酵饮料，由滁菊、蝉花虫草和其他配料经液体发酵制成。
优选地，包括如下原料：蝉花虫草孢子悬浮液1×105-6个/ml，滁菊2.5～3.5wt％，食用胶0.6～1.4wt‰，蔗糖3～5wt‰，柠檬酸0.05～0.15wt‰，维生素c0.02～0.04wt‰，色素0～0.02wt‰。
优选地，所述食用胶为结冷胶或者为瓜尔豆胶和黄原胶的混合物。
更进一步地，所述结冷胶的添加量为0.6～0.9wt‰。
更进一步地，所述瓜尔豆胶和黄原胶的添加量为1.2～1.4wt‰，且二者的重量比为1:1。
本发明的另一目的在于提供所述滁菊蝉花虫草发酵饮料的制备方法，包括以下步骤：
步骤1.菌种活化
将洗净去皮的马铃薯200g切成薄片加入一定量的水煮沸半小时，用6-8层细纱布滤去马铃薯残渣，加入蔗糖20g，琼脂20g，用水量补足1000ml，加热煮沸5分钟以内，待琼脂完全溶化，趁热迅速分装到试管内，每个试管装5-7ml，用硅胶塞塞紧封口后开始灭菌，高压灭菌锅温度达到121℃-123℃时保压30分钟出锅，趁热将试管摆成斜面，培养基不得接触硅胶塞，冷却后斜面成固体状。将在冰箱保存的蝉花虫草菌种(蝉棒束孢cuic0001，isariacicadaecuic0001，该菌种已于2015年12月14日在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号为cctccno.2015745，保藏地址为中国.武汉.武汉大学)转接至新配制的斜面培养基上，然后将试管放入20-25℃的恒温培养箱中培养15-20天左右，至大量产孢后即可备用。
步骤2.蝉花菌种培养
将洗净去皮的马铃薯200g切成薄片加入一定量的水煮沸半小时，用细纱布滤去马铃薯残渣，加入蔗糖20g、磷酸二氢钾0.3g、硫酸镁0.15g、硒酸盐20mg、用水量补足1000ml，加热煮沸5分钟混匀，分装于三角瓶500ml中，每瓶装200-250ml。用硅胶塞封口，置于灭菌锅中灭菌。温度达到121℃-123℃时保压20分钟，冷却后放入超净工作台，连同其他接种用品用具一起照射紫外线30分钟，准备接种。添加磷酸二氢钾、硫酸镁的作用是由于蝉花在液体培养的过程中，ph值会减低，添加两种盐首先可以缓冲培养液的ph值变化，其次是给菌种生长提供矿质元素。
接种过程要严格遵守无菌操作规程，所以接种用品用具和操作人员必须经过无菌化处理之后方可进行操作。接种过程是将产孢良好的蝉花虫草斜面试管菌种，注入10ml灭菌的蒸馏水，用接种环刮下孢子后倒入50ml三角瓶配制成孢子悬浮液。每个500ml三角瓶接种5-10ml孢子悬浮液。液体培养基量增大时，接种量按上述比例类推增加。将接种好的三角瓶放置于恒温振荡培养箱中，置于130-160r/min，25℃条件下的振荡培养箱培养36-56小时。
步骤3.种子罐发酵培养
在30l气升式发酵罐中装入20l液体培养基和食用消泡剂，在121℃，0.11mpa条件下保压灭菌30分钟；灭菌后，冷却至20-25℃时，将1瓶上述培养好的500ml摇瓶菌种在火焰保护下种接到发酵罐中，在培养温度为25±1℃，通气量为1.5vvm的条件下培养36-48小时。
步骤4.发酵罐发酵培养
在300-500l气升式发酵罐中装入2/3液体培养基和食用消泡剂，配制该液体培养基使用的2.5-3.5％滁菊菊花热水浸提液，即每升80-95℃热水加25-35g精选的滁菊菊花浸泡5-10分钟，用之按照步骤2中的配方配制液体发酵培养基。在121℃，0.11mpa条件下保压灭菌30-45分钟；灭菌后，冷却至20-25℃时，将种子发酵罐中培养好菌种通过以灭菌的移种管道转入到发酵罐中，培养温度为25±1℃，通气量为1.5vvm，经36-48小时通气培养，达到对数生长期后备用。
步骤5.向发酵好的蝉花虫草发酵液中按照1000ml添加结冷胶粉0.6-0.9g或瓜尔豆胶粉和黄原胶粉按(1：1)1.2-1.4g、蔗糖3-5g、柠檬酸0.05-0.15g、维生素c0.02-0.04g，混匀。
步骤6.灌装
将步骤5配制好的饮料分装到包装瓶中。
步骤7.灭菌
将灌装好的饮料在120-125℃、压力0.11mpa下灭菌15-30分钟。
步骤8.脱气
用真空脱气机抽去饮料中的空气，在无菌条件下进行。
步骤9.封盖
用封盖机将脱气后的包装瓶密封，在无菌条件下进行。
本发明的有益效果在于：
本发明将滁菊经过蝉花虫草液体发酵制备发酵饮料，拓展了滁菊、蝉花虫草产品的形式；所得发酵饮料无滁菊单独泡茶时的苦味，呈现特有宜人的清香味；且营养丰富、具有提高人体免疫力、滋补强壮、养肝明目、抗衰老、抗病毒等保健功效。同时还充分利用了蝉花虫草液体发酵过程中的发酵液，减少了环境污染。制备方法操作简单、周期短；另外，本发明实施条件容易达到，能进行大规模行业推广。
具体实施方式
为更好理解本发明，下面结合实施例对本发明作进一步描述，以下实施例仅是对本发明进行说明而非对其加以限定。
实施例1有菌球滁菊蝉花虫草发酵饮料的制备
步骤1.菌种活化
将洗净去皮的马铃薯200g切成薄片加入一定量的水煮沸半小时，用6-8层细纱布滤去马铃薯残渣，加入蔗糖20g，琼脂20g，用水量补足1000ml，加热煮沸5分钟以内，待琼脂完全溶化，趁热迅速分装到试管内，每个试管装5-7ml，用硅胶塞塞紧封口后开始灭菌，高压灭菌锅温度达到121℃时保压30分钟出锅，趁热将试管摆成斜面，培养基不得接触硅胶塞，冷却后斜面成固体状。将在冰箱保存的蝉花虫草菌种转接至新配制的斜面培养基上，然后将试管放入25℃的恒温培养箱中培养15天左右，至大量产孢后即可备用。
步骤2.蝉花菌种培养
将洗净去皮的马铃薯200g切成薄片加入一定量的水煮沸半小时，用细纱布滤去马铃薯残渣，加入蔗糖20g、磷酸二氢钾0.3g、硫酸镁0.15g、硒酸盐20mg、用水量补足1000ml，加热煮沸5分钟混匀，分装于500ml三角瓶中，每瓶装200-250ml。用硅胶塞封口，置于灭菌锅中灭菌。温度达到121℃时保压20分钟，冷却后放入超净工作台，连同其他接种用品用具一起照射紫外线30分钟，准备接种。添加磷酸二氢钾、硫酸镁的作用是由于蝉花在液体培养的过程中，ph值会减低，添加两种盐首先可以缓冲培养液的ph值变化，其次是给菌种生长提供矿质元素。
接种过程要严格遵守无菌操作规程，所以接种用品用具和操作人员必须经过无菌化处理之后方可进行操作。接种过程是将产孢良好的蝉花虫草斜面试管菌种，注入10ml灭菌的蒸馏水，用接种环刮下孢子后倒入50ml三角瓶配制成孢子悬浮液。每个500ml三角瓶接种5ml孢子悬浮液。液体培养基量增大时，接种量按上述比例类推增加。将接种好的三角瓶放置于恒温振荡培养箱中，置于130r/min，25℃条件下的振荡培养箱培养36小时。
步骤3.种子罐发酵培养
在30l气升式发酵罐中装入20l液体培养基和食用消泡剂，在121℃，0.11mpa条件下保压灭菌30分钟；灭菌后，冷却至25℃时，将1瓶上述培养好的500ml摇瓶菌种在火焰保护下种接到发酵罐中，在培养温度为25±1℃，通气量为1.5vvm的条件下培养36小时。
步骤4.发酵罐发酵培养
在300l气升式发酵罐中装入2/3液体培养基和食用消泡剂，配制该液体培养基使用的3％滁菊菊花热水浸提液，即每升80-95℃热水加30g精选的滁菊菊花浸泡10分钟，用之按照步骤2中的配方配制液体发酵培养基。在121℃，0.11mpa条件下保压灭菌30分钟；灭菌后，冷却至25℃时，将种子发酵罐中培养好菌种通过以灭菌的移种管道转入到发酵罐中，培养温度为25±1℃，通气量为1.5vvm，经48小时通气培养，达到对数生长期后备用。
步骤5.向发酵好的蝉花虫草发酵液中按照1000ml添加结冷胶粉0.7g、蔗糖5g、柠檬酸0.1g、维生素c0.02g，天然色素适量，混匀。
步骤6.灌装
将步骤5配制好的饮料分装到包装瓶中。
步骤7.灭菌
将灌装好的饮料在121℃、压力0.11mpa下灭菌20分钟。
步骤8.脱气
用真空脱气机抽去饮料中的空气，在无菌条件下进行。
步骤9.封盖
用封盖机将脱气后的包装瓶密封，在无菌条件下进行。
实施例2有菌球滁菊蝉花虫草发酵饮料的制备
步骤1.菌种活化
将洗净去皮的马铃薯200g切成薄片加入一定量的水煮沸半小时，用6-8层细纱布滤去马铃薯残渣，加入蔗糖20g，琼脂20g，用水量补足1000ml，加热煮沸5分钟以内，待琼脂完全溶化，趁热迅速分装到试管内，每个试管装5-7ml，用硅胶塞塞紧封口后开始灭菌，高压灭菌锅温度达到121℃时保压30分钟出锅，趁热将试管摆成斜面，培养基不得接触硅胶塞，冷却后斜面成固体状。将在冰箱保存的蝉花虫草菌种转接至新配制的斜面培养基上，然后将试管放入25℃的恒温培养箱中培养15天左右，至大量产孢后即可备用。
步骤2.蝉花菌种培养
将洗净去皮的马铃薯200g切成薄片加入一定量的水煮沸半小时，用细纱布滤去马铃薯残渣，加入蔗糖20g、磷酸二氢钾0.3g、硫酸镁0.15g、硒酸盐20mg、用水量补足1000ml，加热煮沸5分钟混匀，分装于500ml三角瓶中，每瓶装200-250ml。用硅胶塞封口，置于灭菌锅中灭菌。温度达到121℃时保压20分钟，冷却后放入超净工作台，连同其他接种用品用具一起照射紫外线30分钟，准备接种。添加磷酸二氢钾、硫酸镁的作用是由于蝉花在液体培养的过程中，ph值会减低，添加两种盐首先可以缓冲培养液的ph值变化，其次是给菌种生长提供矿质元素。
接种过程要严格遵守无菌操作规程，所以接种用品用具和操作人员必须经过无菌化处理之后方可进行操作。接种过程是将产孢良好的蝉花虫草斜面试管菌种，注入10ml灭菌的蒸馏水，用接种环刮下孢子后倒入50ml三角瓶配制成孢子悬浮液。每个500ml三角瓶接种5ml孢子悬浮液。液体培养基量增大时，接种量按上述比例类推增加。将接种好的三角瓶放置于恒温振荡培养箱中，置于130r/min，25℃条件下的振荡培养箱培养36小时。
步骤3.种子罐发酵培养
在30l气升式发酵罐中装入20l液体培养基和食用消泡剂，在121℃，0.11mpa条件下保压灭菌30分钟；灭菌后，冷却至25℃时，将1瓶上述培养好的500ml摇瓶菌种在火焰保护下种接到发酵罐中，在培养温度为25±1℃，通气量为1.5vvm的条件下培养36小时。
步骤4.发酵罐发酵培养
在300l气升式发酵罐中装入2/3液体培养基和食用消泡剂，配制该液体培养基使用的3％滁菊菊花热水浸提液，即每升80-95℃热水加30g精选的滁菊菊花浸泡10分钟，用之按照步骤2中的配方配制液体发酵培养基。在121℃，0.11mpa条件下保压灭菌30-45分钟；灭菌后，冷却至25℃时，将种子发酵罐中培养好菌种通过以灭菌的移种管道转入到发酵罐中，培养温度为25±1℃，通气量为1.5vvm，经48小时通气培养，达到对数生长期后备用。
步骤5.向发酵好的蝉花虫草发酵液中按照1000ml添加瓜尔豆胶粉和黄原胶粉(按质量比1：1)1.3g、蔗糖3g、柠檬酸0.08g、维生素c0.03g，天然色素适量，混匀。
步骤6.灌装
将步骤5配制好的饮料分装到包装瓶中。
步骤7.灭菌
将灌装好的饮料在121℃、压力0.11mpa下灭菌20分钟。
步骤8.脱气
用真空脱气机抽去饮料中的空气，在无菌条件下进行。
步骤9.封盖
用封盖机将脱气后的包装瓶密封，在无菌条件下进行。
实施例3无菌球滁菊蝉花虫草发酵饮料的制备
步骤1.菌种活化
将洗净去皮的马铃薯200g切成薄片加入一定量的水煮沸半小时，用6-8层细纱布滤去马铃薯残渣，加入蔗糖20g，琼脂20g，用水量补足1000ml，加热煮沸5分钟以内，待琼脂完全溶化，趁热迅速分装到试管内，每个试管装5-7ml，用硅胶塞塞紧封口后开始灭菌，高压灭菌锅温度达到121℃时保压30分钟出锅，趁热将试管摆成斜面，培养基不得接触硅胶塞，冷却后斜面成固体状。将在冰箱保存的蝉花虫草菌种转接至新配制的斜面培养基上，然后将试管放入25℃的恒温培养箱中培养15天左右，至大量产孢后即可备用。
步骤2.蝉花菌种培养
将洗净去皮的马铃薯200g切成薄片加入一定量的水煮沸半小时，用细纱布滤去马铃薯残渣，加入蔗糖20g、磷酸二氢钾0.3g、硫酸镁0.15g、硒酸盐20mg、用水量补足1000ml，加热煮沸5分钟混匀，分装于500ml三角瓶中，每瓶装200-250ml。用硅胶塞封口，置于灭菌锅中灭菌。温度达到121℃时保压20分钟，冷却后放入超净工作台，连同其他接种用品用具一起照射紫外线30分钟，准备接种。添加磷酸二氢钾、硫酸镁的作用是由于蝉花在液体培养的过程中，ph值会减低，添加两种盐首先可以缓冲培养液的ph值变化，其次是给菌种生长提供矿质元素。
接种过程要严格遵守无菌操作规程，所以接种用品用具和操作人员必须经过无菌化处理之后方可进行操作。接种过程是将产孢良好的蝉花虫草斜面试管菌种，注入10ml灭菌的蒸馏水，用接种环刮下孢子后倒入50ml三角瓶配制成孢子悬浮液。每个500ml三角瓶接种5ml孢子悬浮液。液体培养基量增大时，接种量按上述比例类推增加。将接种好的三角瓶放置于恒温振荡培养箱中，置于130r/min，25℃条件下的振荡培养箱培养36小时。
步骤3.种子罐发酵培养
在30l气升式发酵罐中装入20l液体培养基和食用消泡剂，在121℃，0.11mpa条件下保压灭菌30分钟；灭菌后，冷却至25℃时，将1瓶上述培养好的500ml摇瓶菌种在火焰保护下种接到发酵罐中，在培养温度为25±1℃，通气量为1.5vvm的条件下培养36小时。
步骤4.发酵罐发酵培养
在300l气升式发酵罐中装入2/3液体培养基和食用消泡剂，配制该液体培养基使用的2.7％滁菊菊花热水浸提液，即每升80-95℃热水加30g精选的滁菊菊花浸泡10分钟，用之按照步骤2中的配方配制液体发酵培养基。在121℃，0.11mpa条件下保压灭菌30-45分钟；灭菌后，冷却至25℃时，将种子发酵罐中培养好菌种通过以灭菌的移种管道转入到发酵罐中，培养温度为25±1℃，通气量为1.5vvm，经48小时通气培养，达到对数生长期后备用。
步骤5.将发酵好蝉花虫草发酵醪通过管式离心机10000r/min离心，将菌球和菌丝与发酵液分离，得到发酵液。
步骤6.向离心所得的发酵液中按照1000ml添加结冷胶0.7g、蔗糖3g、柠檬酸0.08g、维生素c0.03g，天然色素适量，混匀。
步骤7.灌装
将步骤6配制好的饮料分装到包装瓶中。
步骤8.灭菌
将灌装好的饮料在121℃、压力0.11mpa下灭菌20分钟。
步骤9.脱气
用真空脱气机抽去饮料中的空气，在无菌条件下进行。
步骤10.封盖
用封盖机将脱气后的包装瓶密封，在无菌条件下进行。
实施例4有菌球滁菊蝉花虫草发酵饮料的制备
步骤1.菌种活化
将洗净去皮的马铃薯200g切成薄片加入一定量的水煮沸半小时，用6-8层细纱布滤去马铃薯残渣，加入蔗糖20g，琼脂20g，用水量补足1000ml，加热煮沸5分钟以内，待琼脂完全溶化，趁热迅速分装到试管内，每个试管装5-7ml，用硅胶塞塞紧封口后开始灭菌，高压灭菌锅温度达到121℃时保压30分钟出锅，趁热将试管摆成斜面，培养基不得接触硅胶塞，冷却后斜面成固体状。将在冰箱保存的蝉花虫草菌种转接至新配制的斜面培养基上，然后将试管放入20℃的恒温培养箱中培养20天左右，至大量产孢后即可备用。
步骤2.蝉花菌种培养
将洗净去皮的马铃薯200g切成薄片加入一定量的水煮沸半小时，用细纱布滤去马铃薯残渣，加入蔗糖20g、磷酸二氢钾0.3g、硫酸镁0.15g、硒酸盐20mg、用水量补足1000ml，加热煮沸5分钟混匀，分装于500ml三角瓶中，每瓶装200-250ml。用硅胶塞封口，置于灭菌锅中灭菌。温度达到122℃时保压20分钟，冷却后放入超净工作台，连同其他接种用品用具一起照射紫外线30分钟，准备接种。添加磷酸二氢钾、硫酸镁的作用是由于蝉花在液体培养的过程中，ph值会减低，添加两种盐首先可以缓冲培养液的ph值变化，其次是给菌种生长提供矿质元素。
接种过程要严格遵守无菌操作规程，所以接种用品用具和操作人员必须经过无菌化处理之后方可进行操作。接种过程是将产孢良好的蝉花虫草斜面试管菌种，注入10ml灭菌的蒸馏水，用接种环刮下孢子后倒入50ml三角瓶配制成孢子悬浮液。每个500ml三角瓶接种10ml孢子悬浮液。液体培养基量增大时，接种量按上述比例类推增加。将接种好的三角瓶放置于恒温振荡培养箱中，置于160r/min，25℃条件下的振荡培养箱培养56小时。
步骤3.种子罐发酵培养
在30l气升式发酵罐中装入20l液体培养基和食用消泡剂，在121℃，0.11mpa条件下保压灭菌30分钟；灭菌后，冷却至20℃时，将1瓶上述培养好的500ml摇瓶菌种在火焰保护下种接到发酵罐中，在培养温度为25±1℃，通气量为1.5vvm的条件下培养48小时。
步骤4.发酵罐发酵培养
在500l气升式发酵罐中装入2/3液体培养基和食用消泡剂，配制该液体培养基使用的3.5％滁菊菊花热水浸提液，即每升80-95℃热水加35g精选的滁菊菊花浸泡10分钟，用之按照步骤2中的配方配制液体发酵培养基。在121℃，0.11mpa条件下保压灭菌30-45分钟；灭菌后，冷却至20℃时，将种子发酵罐中培养好菌种通过以灭菌的移种管道转入到发酵罐中，培养温度为25±1℃，通气量为1.5vvm，经48小时通气培养，达到对数生长期后备用。
步骤5.向发酵好的蝉花虫草发酵液中按照1000ml添加瓜尔豆胶粉和黄原胶粉(按质量比1：1)1.4g、蔗糖4g、柠檬酸0.15g、维生素c0.04g，天然色素适量，混匀。
步骤6.灌装
将步骤5配制好的饮料分装到包装瓶中。
步骤7.灭菌
将灌装好的饮料在121℃、压力0.11mpa下灭菌20分钟。
步骤8.脱气
用真空脱气机抽去饮料中的空气，在无菌条件下进行。
步骤9.封盖
用封盖机将脱气后的包装瓶密封，在无菌条件下进行。
实施例5无菌球滁菊蝉花虫草发酵饮料的制备
步骤1.菌种活化
将洗净去皮的马铃薯200g切成薄片加入一定量的水煮沸半小时，用6-8层细纱布滤去马铃薯残渣，加入蔗糖20g，琼脂20g，用水量补足1000ml，加热煮沸5分钟以内，待琼脂完全溶化，趁热迅速分装到试管内，每个试管装5-7ml，用硅胶塞塞紧封口后开始灭菌，高压灭菌锅温度达到123℃时保压30分钟出锅，趁热将试管摆成斜面，培养基不得接触硅胶塞，冷却后斜面成固体状。将在冰箱保存的蝉花虫草菌种转接至新配制的斜面培养基上，然后将试管放入25℃的恒温培养箱中培养15天左右，至大量产孢后即可备用。
步骤2.蝉花菌种培养
将洗净去皮的马铃薯200g切成薄片加入一定量的水煮沸半小时，用细纱布滤去马铃薯残渣，加入蔗糖20g、磷酸二氢钾0.3g、硫酸镁0.15g、硒酸盐20mg、用水量补足1000ml，加热煮沸5分钟混匀，分装于500ml三角瓶中，每瓶装200-250ml。用硅胶塞封口，置于灭菌锅中灭菌。温度达到123℃时保压20分钟，冷却后放入超净工作台，连同其他接种用品用具一起照射紫外线30分钟，准备接种。添加磷酸二氢钾、硫酸镁的作用是由于蝉花在液体培养的过程中，ph值会减低，添加两种盐首先可以缓冲培养液的ph值变化，其次是给菌种生长提供矿质元素。
接种过程要严格遵守无菌操作规程，所以接种用品用具和操作人员必须经过无菌化处理之后方可进行操作。接种过程是将产孢良好的蝉花虫草斜面试管菌种，注入10ml灭菌的蒸馏水，用接种环刮下孢子后倒入50ml三角瓶配制成孢子悬浮液。每个500ml三角瓶接种5ml孢子悬浮液。液体培养基量增大时，接种量按上述比例类推增加。将接种好的三角瓶放置于恒温振荡培养箱中，置于130r/min，25℃条件下的振荡培养箱培养36小时。
步骤3.种子罐发酵培养
在30l气升式发酵罐中装入20l液体培养基和食用消泡剂，在121℃，0.11mpa条件下保压灭菌30分钟；灭菌后，冷却至25℃时，将1瓶上述培养好的500ml摇瓶菌种在火焰保护下种接到发酵罐中，在培养温度为25±1℃，通气量为1.5vvm的条件下培养36小时。
步骤4.发酵罐发酵培养
在300l气升式发酵罐中装入2/3液体培养基和食用消泡剂，配制该液体培养基使用的2.5％滁菊菊花热水浸提液，即每升80-95℃热水加25g精选的滁菊菊花浸泡10分钟，用之按照步骤2中的配方配制液体发酵培养基。在121℃，0.11mpa条件下保压灭菌30-45分钟；灭菌后，冷却至25℃时，将种子发酵罐中培养好菌种通过以灭菌的移种管道转入到发酵罐中，培养温度为25±1℃，通气量为1.5vvm，经36小时通气培养，达到对数生长期后备用。
步骤5.将发酵好蝉花虫草发酵醪通过管式离心机10000r/min离心，将菌球和菌丝与发酵液分离，得到发酵液。
步骤6.向离心所得的发酵液中按照1000ml添加结冷胶0.6g、蔗糖3g、柠檬酸0.05g、维生素c0.03g，天然色素适量，混匀。
步骤7.灌装
将步骤6配制好的饮料分装到包装瓶中。
步骤8.灭菌
将灌装好的饮料在121℃、压力0.11mpa下灭菌20分钟。
步骤9.脱气
用真空脱气机抽去饮料中的空气，在无菌条件下进行。
步骤10.封盖
用封盖机将脱气后的包装瓶密封，在无菌条件下进行。
实施例6无菌球滁菊蝉花虫草发酵饮料的制备
步骤1.菌种活化
将洗净去皮的马铃薯200g切成薄片加入一定量的水煮沸半小时，用6-8层细纱布滤去马铃薯残渣，加入蔗糖20g，琼脂20g，用水量补足1000ml，加热煮沸5分钟以内，待琼脂完全溶化，趁热迅速分装到试管内，每个试管装5-7ml，用硅胶塞塞紧封口后开始灭菌，高压灭菌锅温度达到121℃时保压30分钟出锅，趁热将试管摆成斜面，培养基不得接触硅胶塞，冷却后斜面成固体状。将在冰箱保存的蝉花虫草菌种转接至新配制的斜面培养基上，然后将试管放入25℃的恒温培养箱中培养15天左右，至大量产孢后即可备用。
步骤2.蝉花菌种培养
将洗净去皮的马铃薯200g切成薄片加入一定量的水煮沸半小时，用细纱布滤去马铃薯残渣，加入蔗糖20g、磷酸二氢钾0.3g、硫酸镁0.15g、硒酸盐20mg、用水量补足1000ml，加热煮沸5分钟混匀，分装于500ml三角瓶中，每瓶装200-250ml。用硅胶塞封口，置于灭菌锅中灭菌。温度达到121℃时保压20分钟，冷却后放入超净工作台，连同其他接种用品用具一起照射紫外线30分钟，准备接种。添加磷酸二氢钾、硫酸镁的作用是由于蝉花在液体培养的过程中，ph值会减低，添加两种盐首先可以缓冲培养液的ph值变化，其次是给菌种生长提供矿质元素。
接种过程要严格遵守无菌操作规程，所以接种用品用具和操作人员必须经过无菌化处理之后方可进行操作。接种过程是将产孢良好的蝉花虫草斜面试管菌种，注入10ml灭菌的蒸馏水，用接种环刮下孢子后倒入50ml三角瓶配制成孢子悬浮液。每个500ml三角瓶接种5ml孢子悬浮液。液体培养基量增大时，接种量按上述比例类推增加。将接种好的三角瓶放置于恒温振荡培养箱中，置于130r/min，25℃条件下的振荡培养箱培养36小时。
步骤3.种子罐发酵培养
在30l气升式发酵罐中装入20l液体培养基和食用消泡剂，在121℃，0.11mpa条件下保压灭菌30分钟；灭菌后，冷却至25℃时，将1瓶上述培养好的500ml摇瓶菌种在火焰保护下种接到发酵罐中，在培养温度为25±1℃，通气量为1.5vvm的条件下培养36小时。
步骤4.发酵罐发酵培养
在300l气升式发酵罐中装入2/3液体培养基和食用消泡剂，配制该液体培养基使用的2.5％滁菊菊花热水浸提液，即每升80-95℃热水加25g精选的滁菊菊花浸泡10分钟，用之按照步骤2中的配方配制液体发酵培养基。在121℃，0.11mpa条件下保压灭菌30-45分钟；灭菌后，冷却至25℃时，将种子发酵罐中培养好菌种通过以灭菌的移种管道转入到发酵罐中，培养温度为25±1℃，通气量为1.5vvm，经48小时通气培养，达到对数生长期后备用。
步骤5.将发酵好蝉花虫草发酵醪通过管式离心机10000r/min离心，将菌球和菌丝与发酵液分离，得到发酵液。
步骤6.向离心所得的发酵液中按照1000ml添加结冷胶0.9g、蔗糖3g、柠檬酸0.08g、维生素c0.03g，天然色素适量，混匀。
步骤7.灌装
将步骤6配制好的饮料分装到包装瓶中。
步骤8.灭菌
将灌装好的饮料在121℃、压力0.11mpa下灭菌20分钟。
步骤9.脱气
用真空脱气机抽去饮料中的空气，在无菌条件下进行。
步骤10.封盖
用封盖机将脱气后的包装瓶密封，在无菌条件下进行。
实施例7有菌球滁菊蝉花虫草发酵饮料的制备
步骤1.菌种活化
将洗净去皮的马铃薯200g切成薄片加入一定量的水煮沸半小时，用6-8层细纱布滤去马铃薯残渣，加入蔗糖20g，琼脂20g，用水量补足1000ml，加热煮沸5分钟以内，待琼脂完全溶化，趁热迅速分装到试管内，每个试管装5-7ml，用硅胶塞塞紧封口后开始灭菌，高压灭菌锅温度达到121℃时保压30分钟出锅，趁热将试管摆成斜面，培养基不得接触硅胶塞，冷却后斜面成固体状。将在冰箱保存的蝉花虫草菌种转接至新配制的斜面培养基上，然后将试管放入25℃的恒温培养箱中培养15天左右，至大量产孢后即可备用。
步骤2.蝉花菌种培养
将洗净去皮的马铃薯200g切成薄片加入一定量的水煮沸半小时，用细纱布滤去马铃薯残渣，加入蔗糖20g、磷酸二氢钾0.3g、硫酸镁0.15g、硒酸盐20mg、用水量补足1000ml，加热煮沸5分钟混匀，分装于500ml三角瓶中，每瓶装200-250ml。用硅胶塞封口，置于灭菌锅中灭菌。温度达到121℃时保压20分钟，冷却后放入超净工作台，连同其他接种用品用具一起照射紫外线30分钟，准备接种。添加磷酸二氢钾、硫酸镁的作用是由于蝉花在液体培养的过程中，ph值会减低，添加两种盐首先可以缓冲培养液的ph值变化，其次是给菌种生长提供矿质元素。
接种过程要严格遵守无菌操作规程，所以接种用品用具和操作人员必须经过无菌化处理之后方可进行操作。接种过程是将产孢良好的蝉花虫草斜面试管菌种，注入10ml灭菌的蒸馏水，用接种环刮下孢子后倒入50ml三角瓶配制成孢子悬浮液。每个500ml三角瓶接种5ml孢子悬浮液。液体培养基量增大时，接种量按上述比例类推增加。将接种好的三角瓶放置于恒温振荡培养箱中，置于130r/min，25℃条件下的振荡培养箱培养36小时。
步骤3.种子罐发酵培养
在30l气升式发酵罐中装入20l液体培养基和食用消泡剂，在121℃，0.11mpa条件下保压灭菌30分钟；灭菌后，冷却至25℃时，将1瓶上述培养好的500ml摇瓶菌种在火焰保护下种接到发酵罐中，在培养温度为25±1℃，通气量为1.5vvm的条件下培养36小时。
步骤4.发酵罐发酵培养
在300l气升式发酵罐中装入2/3液体培养基和食用消泡剂，配制该液体培养基使用的3％滁菊菊花热水浸提液，即每升80-95℃热水加30g精选的滁菊菊花浸泡10分钟，用之按照步骤2中的配方配制液体发酵培养基。在121℃，0.11mpa条件下保压灭菌30-45分钟；灭菌后，冷却至25℃时，将种子发酵罐中培养好菌种通过以灭菌的移种管道转入到发酵罐中，培养温度为25±1℃，通气量为1.5vvm，经48小时通气培养，达到对数生长期后备用。
步骤5.向发酵好的蝉花虫草发酵液中按照1000ml添加瓜尔豆胶粉和黄原胶粉(按质量比1：1)1.2g、蔗糖3g、柠檬酸0.08g、维生素c0.03g，天然色素适量，混匀。
步骤6.灌装
将步骤5配制好的饮料分装到包装瓶中。
步骤7.灭菌
将灌装好的饮料在121℃、压力0.11mpa下灭菌20分钟。
步骤8.脱气
用真空脱气机抽去饮料中的空气，在无菌条件下进行。
步骤9.封盖
用封盖机将脱气后的包装瓶密封，在无菌条件下进行。
将上述实施例1～7制备的滁菊蝉花虫草发酵饮料和普通滁菊茶分别进行感官分析，分析标准和结果如下表1和2所示：
表1.有菌球滁菊蝉花虫草发酵饮料和普通滁菊茶感官分析表
注：不同字母表示在p<0.01水平上差异显著。
表2.无菌球滁菊蝉花虫草发酵饮料和普通滁菊茶感官分析表
注：不同字母表示在p<0.01水平上差异显著。
由上述结果可见，本发明制备的滁菊蝉花虫草发酵饮料与普通滁菊茶之间具有极显著差异，滁菊浸提液经过蝉花虫草菌发酵后显著改善了滁菊的风味和口感。
以上所述实施方式仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案作出的各种变形和改进，均应落入本发明的权利要求书确定的保护范围内。