甘油和过瘤胃氯化胆碱在制备预防和/或治疗湖羊妊娠毒血症饲料添加剂或者药物中的应用的制作方法

本发明属于动物饲料添加剂、药物领域，具体涉及甘油和过瘤胃氯化胆碱在制备预防和/或治疗湖羊妊娠毒血症饲料添加剂或者药物中的应用。

背景技术：

妊娠后期是湖羊妊娠毒血症的高发阶段。湖羊由于其多羔的特点受到生产者的青睐，但是多羔引起胎儿对能量的需求增加。有研究表明，胎儿生长发育的80％均发生在妊娠后期。此时，一方面，由于胎儿生长发育对能量需求急剧增加；另一方面，多羔快速生长发育，致使子宫体积迅速扩大，进而机械性挤压瘤胃空间，导致母羊采食量下降，母羊能量摄入减少。两方面共同加剧母羊能量负平衡。能量负平衡可导致弱羔、死羔，严重可导致母羊死亡，对湖羊生产造成重大经济损失。然而，目前关于湖羊妊娠毒血症的预防及治疗缺乏有效的措施。有研究表明，甘油可在瘤胃中被瘤胃微生物降解产生挥发性脂肪酸，为机体提供能量，另外，甘油也可被吸收入血，并作为糖异生的底物，缓解能量负平衡。此外，能量负平衡条件下，湖羊应答性动用体脂进行β氧化，引起血酮升高及脂肪肝。有研究表明，氯化胆碱可与肝脏中甘油三酯结合，并以极低密度脂蛋白的形式运输出肝脏。因此，探究甘油和过瘤胃氯化胆碱在预防湖羊妊娠毒血症中的应用十分有必要。

甘油分子式为：c3h8o3，结构式如下：

氯化胆碱分子式为：c5h14clno，结构式如下：

但是目前甘油或者过瘤胃氯化胆碱大多分别用于奶牛产后酮病，没有关于在预防湖羊妊娠毒血症中的应用报道。

发明目的

技术实现要素：
针对现有技术存在的问题，本发明提供甘油和过瘤胃氯化胆碱在制备预防和/或治疗湖羊妊娠毒血症饲料添加剂或者药物中的应用。本发明提出了一种甘油和过瘤胃氯化胆碱的新功能，可以在湖羊妊娠后期日粮中作为添加剂或药物，预防和治疗湖羊妊娠毒血症，减少该病死亡率，提高经济效益。

技术方案：为了实现上述目的，如本发明所述的甘油和过瘤胃氯化胆碱在制备预防和/或治疗湖羊妊娠毒血症饲料添加剂或者药物中的应用。

其中，所述添加剂为湖羊饲料的添加剂。

其中，所述饲料用于湖羊妊娠后期。

进一步地，所述湖羊为怀多羔妊娠母羊。

作为优选，所述饲料添加剂或者药物用量为甘油添加量为40ml/只(怀多羔妊娠母羊)/天，过瘤胃氯化胆碱添加量为10g/只(怀多羔妊娠母羊)/天。

进一步地，所述甘油通过提高瘤胃液中挥发性脂肪酸的浓度，提高血液中葡萄糖水平，降低血液中β-羟丁酸浓度以及过瘤胃氯化胆碱通过将肝脏中多余的游离脂肪酸转运出肝脏(提高血液中游离脂肪酸和极低密度脂蛋白水平)，并被其它组织利用，提高血液中葡萄糖水平在制备预防和/或治疗湖羊妊娠毒血症饲料添加剂或者药物中的应用。

结果表明，甘油在瘤胃中被瘤胃微生物降解增加生糖前体物(挥发性脂肪酸)，提高血糖水平，同时降低了体脂动员和脂肪酸氧化(β-羟丁酸浓度)，从而达到预防和/或治疗妊娠毒血症的目的。而过瘤胃氯化胆碱可通过将肝脏中过度动员的脂肪酸以极低密度脂蛋白的形式转运出肝脏(血液中游离脂肪酸和极低密度脂蛋白水平升高)，一方面减少了游离脂肪酸在肝脏中的沉积，缓解脂肪肝，维持正常肝功能(糖异生和脂肪酸氧化等)；另一方面，将过量动员的游离脂肪酸转运出肝脏，使其可被机体其它组织利用，减少对机体葡萄糖的消耗，缓解能量负平衡状态。

本发明所述的用于预防和/或治疗湖羊妊娠毒血症饲料添加剂或者药物组合物，其特征在于，包括甘油和过瘤胃氯化胆碱作为有效成分，以及饲料添加剂或者药物组合物所需辅料。

有益效果：与现有技术相比，本发明具有如下优点：

本发明的甘油和过瘤胃氯化胆碱作为湖羊饲料添加剂或者药物预防和/或治疗湖羊妊娠毒血症，减少该病死亡率，提高经济效益。甘油可提高瘤胃液中挥发性脂肪酸的浓度，提高血液中葡萄糖水平，降低血液中β-羟丁酸浓度，预防妊娠毒血症。过瘤胃氯化胆碱可提高血液中葡萄糖水平，并且提高血液中游离脂肪酸和极低密度脂蛋白水平，暗示过瘤胃氯化胆碱可将肝脏中沉积的多余甘油三酯运送出肝脏，保护肝功能。过瘤胃氯化胆碱提高血液葡萄糖水平的原因主要是通过保护肝功能，从而提高肝脏糖异生能力而实现的。此外，本发明结果表明，同时添加甘油和过瘤胃氯化胆碱在预防湖羊妊娠毒血症中的应用中表现最好。

本发明中甘油可在瘤胃中被瘤胃微生物降解产生挥发性脂肪酸，为机体提供能量，另外，甘油也可被吸收入血，并作为糖异生的底物，缓解能量负平衡。氯化胆碱可与肝脏中甘油三酯结合，并以极低密度脂蛋白的形式运输出肝脏，从而缓解脂肪肝，维持肝功能正常。

本发明中甘油和过瘤胃氯化胆碱同时作为添加剂联合使用可以协同增效，使用具有更好的效果。与单独添加甘油组相比，同时添加甘油和过瘤胃氯化胆碱显著提高瘤胃液丙酸含量，提示在相同发酵底物情况下(甘油)添加过瘤胃氯化胆碱组可能具有改善机体代谢，进而提高瘤胃微生物发酵活性的作用，增加了生糖前体物(丙酸)含量，最终提高了血糖水平。添加过瘤胃氯化胆碱更多的起到机体内能量物质重分配和保肝的作用，而不额外增加机体能量。添加甘油可为机体提供额外的能量，但是添加的甘油只有被肝脏有效利用进行糖异生才能发挥作用，在能量负平衡比较严重，肝脏脂肪沉积多时，肝脏糖异生功能受损，添加甘油无法发挥最佳效果。因此，同时添加甘油和过瘤胃氯化胆碱，一方面，添加甘油可为机体提供额外能量；另一方面，添加过瘤胃氯化胆碱既可重新分配机体内的能量物质又可将肝脏中蓄积的脂肪酸转运出去以维持正常肝脏糖异生功能，提高了甘油的生糖效率，使得两者同时添加具有协同增效作用。

附图说明

图1为甘油和过瘤胃氯化胆碱对限饲湖羊体增重的影响关系图；

图2为甘油和过瘤胃氯化胆碱对限饲湖羊血液β-羟丁酸浓度的影响关系图；

图3为甘油和过瘤胃氯化胆碱对限饲湖羊血液生化指标的影响关系图。

具体实施方式

以下结合附图和实施例对本发明做进一步说明。

本发明是所使用的原料和仪器都是市售可得。

过瘤胃氯化胆碱购自杭州康德权饲料有限公司。甘油购自上海九洁实业有限公司。

便携式ph计(hi9024；hamainstruments，美国)。

血酮仪及血酮试纸条购自雅培贸易(上海)有限公司。血浆葡萄糖、游离脂肪酸、甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白和极低密度脂蛋白试剂盒购自南京建成生物工程研究所。

气相色谱仪(gb-2014；日本岛津仪器公司，日本)。

实施例1

试验选取24只体况良好，胎次一致，采用同期发情且妊娠期均为101天的湖羊。随机分为对照组(饲喂正常饲喂量的30％)、甘油组(饲喂正常饲喂量的30％+40ml/只/天甘油)、过瘤胃氯化胆碱组(饲喂正常饲喂量的30％+10g/只/天过瘤胃氯化胆碱)和甘油+过瘤胃氯化胆碱组(饲喂正常饲喂量的30％+40ml/只/天甘油+10g/只/天过瘤胃氯化胆碱)。试验期间，每天将各组对应添加剂拌于少量精料中，待湖羊采食后，再饲喂剩余饲料。试验期间，湖羊单栏饲喂、自由饮水。日粮组成及营养成分见表1。

表1试验日粮组成及营养水平

实施例2

试验期间测定各组湖羊初始及试验结束时的体重，并计算体增重，结果如图1所示。

如图1所示，与对照组相比，添加甘油以及同时添加甘油和过瘤胃氯化胆碱可减少限饲引起的体重下降。而添加过瘤胃氯化胆碱对限饲引起的体重下降无显著影响。上述结果说明，添加甘油以及同时添加甘油和过瘤胃氯化胆碱可为机体提供能量，从而减少体储的动员。

实施例3

取实施例1的湖羊，在试验期第0、3、6和9天，于晨饲前采集颈静脉血液，立即用血酮仪及血酮试纸条测定血液β-羟丁酸浓度。结果如图2所示。

如图2所示，对照组血液β-羟丁酸浓度持续升高。与对照组相比，添加甘油和过瘤胃氯化胆碱防止限饲诱导血液β-羟丁酸浓度上升。上述结果说明，添加甘油和过瘤胃氯化胆碱可防止体脂过度动员。

实施例4

取实施例1的湖羊，在试验期第0和9天，于晨饲前采集颈静脉血液，随后1000g4℃离心15分钟，取上清，立即冻存于-20℃冰箱，用于血液生化指标检测。在试验期第9天，用口腔采集瘤胃液装置采集饲喂后4小时瘤胃液，立即测定瘤胃ph。测定完ph值后的瘤胃内容物四层纱布过滤收集瘤胃液，-20℃保存，备测挥发性脂肪酸浓度。

实施例5

对实施例4的瘤胃液进行挥发性脂肪酸测定，考察甘油和过瘤胃氯化胆碱对瘤胃发酵参数的影响，结果如表2所示。

表2添加甘油和过瘤胃氯化胆碱对瘤胃发酵参数的影响

如表2所示，与对照组相比，添加甘油以及同时添加甘油和过瘤胃氯化胆碱显著降低瘤胃ph值，显著提高丙酸的浓度，显著降低乙丙比。添加甘油和过瘤胃氯化胆碱有提高总vfa的趋势。与对照组相比，同时添加甘油和过瘤胃氯化胆碱显著提高丁酸和戊酸浓度。上述结果说明，添加甘油可在瘤胃中发酵生成丙酸，因此，添加甘油显著降低瘤胃液中乙丙比，显著降低瘤胃液ph值，且具有提高总vfa水平的趋势。此外，与其它三组相比，同时添加甘油和过瘤胃氯化胆碱组瘤胃液中丙酸浓度最高，表明添加过瘤胃氯化胆碱可增加瘤胃微生物的活性，提高发酵效率。

实施例6

对实施例4的血液进行血液生化指标测定，考察甘油和过瘤胃氯化胆碱对血液生化指标的影响，结果如图3所示。

血浆葡萄糖、游离脂肪酸、甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白和极低密度脂蛋白试剂盒购自南京建成生物工程研究所。

如图3所示，与对照组相比，添加甘油和过瘤胃氯化胆碱均可提高血液葡萄糖水平，其中，同时添加甘油和过瘤胃氯化胆碱作用最大。与对照组相比，添加过瘤胃氯化胆碱显著提高血液中游离脂肪酸和极低密度脂蛋白水平。上述结果说明，添加甘油和过瘤胃氯化胆碱均可提高血液葡萄糖水平，但其作用机制不同，由实施例5中结果可知，甘油降低瘤胃液中乙丙比，提高丙酸比例，而丙酸是反刍动物糖异生成葡萄糖的主要前体物。而过瘤胃氯化胆碱也可提高血液葡萄糖水平，并且提高血液中游离脂肪酸和极低密度脂蛋白水平，暗示过瘤胃氯化胆碱可将肝脏中沉积的多余甘油三酯运送出肝脏，保护肝功能。过瘤胃氯化胆碱提高血液葡萄糖水平的原因可是通过保护肝功能，从而提高肝脏糖异生能力而实现的。单独添加甘油效果不如同时添加甘油和过瘤胃氯化胆碱的主要是，单独添加甘油只提高了生糖前体物，但由于肝脏脂肪酸沉积过多导致肝脏糖异生功能下降，而同时添加过瘤胃氯化胆碱则可将肝脏中的脂肪酸转运出去从而提高肝脏糖异生功能。而单独添加过瘤胃氯化胆碱，虽然能提高肝脏的糖异生功能，但是由于缺乏足够的生糖前体物，糖异生产生的葡萄糖也不如同时添加甘油和过瘤胃氯化胆碱多。因此，同时添加甘油和过瘤胃氯化胆碱要比单独添加两者之一能起到更好的效果。