本发明属于生物制品技术领域，具体的涉及一种用于单环刺螠育苗及养殖的中草药组合物及应用。
背景技术：
单环刺螠(urechisunicinctus)，属于螠虫动物门(echiura)、螠纲(echiurida)、无管螠目(xenopneusta)、刺螠科(urechidae)、刺螠属(urechis)，是中国黄渤海沿岸潮间带和潮下带常见的底栖生物，俗称“海肠子”。单环刺螠肉味鲜美且营养丰富，被称为“活海参”，作为名贵的海鲜食品畅销于我国和日、韩等国家和地区，有很大的养殖开发前景。近年来，研究表明单环刺螠的体内存在多种生物活性肽，具有抗肿瘤、抗菌、免疫调节等功能。所以，单环刺螠除了作为食品之外在生物药用制品的应用价值也越来越受到重视。但是随着过度捕捞、环境污染和栖息地减少等原因，野生的单环刺螠远不能满足日益增加的市场需求，单环刺螠的人工增养殖成为近年来研究的热点。
单环刺螠在人工养殖过程中，当幼体生长到一定阶段后(约4-12月龄)，时会存在产生较为明显的生长停滞阶段，表现为摄食量减少，体重增加缓慢，具体原因未明。
人工增养殖过程为增加单位产量，时会通过添加抗生素类物质减少病原微生物的种类和数量，或通过在饲料中添加类似物质，提高增养殖生物抵抗病原感染的能力。但如果长期使用抗生素、化学合成药物和激素类的饲料添加剂，会使动物体内病原菌产生抗药性，甚至引起突变，最终导致养殖出现各种问题，也给人类健康带来了危害。
中草药有成本低、加工方便、较少抗药性和药物残留、副作用小、效果显著、资源丰富等优点，中草药饲料添加剂因其能减少抗生素残留、提高营养物质利用和食品安全等优势而逐渐在人工增养殖领域被广泛应用。但是中草药提取物在单环刺螠的人工增养殖饲料中的应用暂未有研究。
技术实现要素：
针对以上现有技术的不足，本发明提供了一种适用于单环刺螠幼体培育及成体养殖的中草药提取物，及其在单环刺螠育苗及养殖中的应用。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：
一种用于培育单环刺螠的中草药组合，组合物包含黑米花青素、青皮提取物、白藜芦醇、紫锥菊提取物、山豆根提取物、蝉蜕提取物、栀子提取物、丝瓜络提取物、艾叶提取物中的几种。
所述组合物按重量份数计，5-10份黑米花青素、17-22份青皮提取物、8-15份白藜芦醇、2-5份紫锥菊提取物、16-21份山豆根提取物、5-10份蝉蜕提取物、15-20份栀子提取物、2-5份丝瓜络提取物、2-5份艾叶提取物。
所述组合物中各成分的提取物为，以各成分中草药为原料通过水或醇提所得的标准提取物。
一种用于培育单环刺螠的中草药组合的应用，所述组合物作为培育单环刺螠的饲料添加剂。
所述组合物添加至单环刺螠饵料中，混合后作为单环刺螠饲料。
所述组合物与饵料混合，其中，组合物的添加量为饲料总质量的0.3％-1.0％。
本发明的有益效果是：
本发明中草药组合物添加至单环刺螠的育苗及养殖用的饲料中，中草药组合物是由中草药原药或从中提取的单一或混合成分以单独或联合组方制成的。通过在饲料产品中加入中草药提取物，可利于饲料的加工和贮藏、降低饲料加工业和养殖业对环境的污染、改善饲料产品外观，同时其可以改善饲料适口性、预防疾病、补充营养、改善动物产品质量、提高饲料利用率等。
本发明选用特殊成分以及比例混配所得组合物可促进单环刺螠的摄食和生长，并提高单环刺螠肠道组织中溶菌酶、黄嘌呤氧化酶、酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、过氧化物酶的活性，增强其抵抗力，提高其营养价值。
本发明的组合物可用于单环刺螠幼体摄食人工配合饲料的阶段，具体指幼体发育至蠕虫状幼虫后期至最终养成的环节(4月龄以后)。由于在不同养殖阶段的饲料构成和颗粒大小等存在较大差异，本组合物可根据饲料的成分做轻微调整。包括但不限于组分含量的变化及添加比例的改变。
由于本组合物中黑米花青素、白藜芦醇等具有较好抗氧化效果，可提高生物的抗氧化能力、促进相关酶的表达；紫锥菊提取物、栀子提取物、艾叶提取物等具有较好的免疫调节活性，可促进溶菌酶的分泌，提高机体的免疫力；青皮提取物、山豆根提取物、蝉蜕提取物、丝瓜络提取物等有利于消化，促进相关酶的表达。
具体实施方式
为了进一步理解本发明，下面结合实施例对本发明的具体实施方式做进一步的描述，并不因此将本发明限制在所述的实施例范围中。
本发明中草药组合物按重量份计：5-10份黑米花青素、17-22份青皮、8-15份白藜芦醇、2-5份紫锥菊提取物、16-21份山豆根提取物、5-10份蝉蜕提取物、15-20份栀子提取物、2-5份丝瓜络提取物、2-5份艾叶提取物。
花青素为黑米中的主要黄酮类物质,是一种广泛存在于自然界植物中的水溶性天然色素,在自然状态下常与各种单糖形成糖苷,称为花色苷。花青素作为一种天然食用色素，安全、无毒、资源丰富,而且具有一定营养和药理作用,在食品、化妆品、医药、保健等方面有着巨大的应用潜力。大量研究表明,花青素具有很强的抗氧化作用,有助于清除体内的自由基、降低氧化酶的适性等多种生理功能。花青素作为饲料添加剂应用于饲料中,主要作用是促生长、抗炎与提高免疫力,其作用机制可能与花青素的抗氧化和清除自由基的功能有关。多项研究表明，花青素对动物的生长有较好的促进作用，通过在基础饲料中加入花青素，可增加养殖动物的日增重，并降低料重比，同时可提高动物的非特异性免疫能力，从而利于提高动物的健康水平。
白藜芦醇是非黄酮类的多酚化合物，于1940年首次从毛叶藜芦的根部分离得到。近年来对白藜芦醇的多项研究显示白藜芦醇有抗氧化、抗菌、抗炎等功能，在医药和保健品领域有很大的应用价值。研究表明，白藜芦醇能够提高鼠类动物的sod活性，降低mda水平，增强其体液免疫应答和细胞免疫应答，从而调节其免疫功能。另外白藜芦醇能够增强鱼类的lzm活性，有助于提高其免疫能力。
紫锥菊是原产于北美和加拿大南部的一类松果菊类植物。研究表明，紫锥菊可通过刺激机体的免疫系统而增强机体对细菌和病毒感染的抵抗力，具有类抗生素的作用。通过在鱼类饲养中添加紫锥菊，可促进其增重和相对生长率的提高，并可以降低饵料系数。
山豆根又名广豆根、苦豆根，是豆科植物越南槐的干燥根和根茎。研究表明在畜牧饲料中添加山豆根可明显提高其生长速度和饲料转化率。从山豆根中提取的山豆根总碱可对革兰氏阳性球菌、革兰氏阴性杆菌等12种菌起到明显的抑制作用。从山豆根中提取的多糖可抑制邻苯三酚的自氧化，对羟自由基有清除作用。
栀子又名黄栀子、红栀子，其成熟果实可入药，是常用的中药材之一。栀子中提取的栀子苷等药物成分对真菌、金黄色葡萄球菌、双球菌等有抑制作用，可增强养殖动物的抗病能力，而且其营养成分丰富，安全无毒，是一种新型天然抗菌中草药饲料添加剂。
丝瓜络是葫芦科植物丝瓜干燥果实的维管束，又称丝瓜筋、丝瓜网，其主要化学成分为木聚糖和纤维素，还含有甘露聚糖、半乳聚糖及木质素等，有通经活络、解毒消肿的功效，也广泛应用于鸡、猪及鱼类幼苗的人工养殖中。
艾叶是菊科多年生草本植物，不仅含有质量较好的粗蛋白、粗脂肪、碳水化合物，还含有多种维生素和矿物质，是一种可以预防畜禽多种疾病的良好的饲料添加剂。通过在饲料中添加艾叶，不仅可以预防疾病，增强体质，而且可促进机体代谢和生长发育，提高饲料的转化率。
将上述中草药组合物添加至单环刺螠的育苗及养殖用饲料中，使用时按照重量百分比0.3％-1.0％的中草药组合与普通饵料混合均匀。
上述组合物中各成分提取物的提取方法为，以各中草药为原料通过水提或醇(乙醇、甲醇等)提取，经蒸馏、喷雾干燥后制备标准提取物粉。
实施例1：
适用于单环刺螠育苗及养殖的中草药组合物，按照下述重量份混合均匀而成：8份黑米花青素、20份青皮、10份白藜芦醇、5份紫锥菊提取物、20份山豆根提取物、8份蝉蜕提取物、20份栀子提取物、5份丝瓜络提取物、5份艾叶提取物。
将上述混合均匀的中草药组合物与单环刺螠普通饵料混合在单环刺螠育育苗后期以及单环刺螠养殖期内作为饲料进行投喂；其中，育苗后期中草药组合物添加量为饲料总质量的0.5％；养殖期间中草药组合物的添加量为饲料总质量的1.0％。
实施例2：对单环刺螠生长的影响
本实施例所用的培养箱规格为20cm×25cm×30cm透明玻璃箱，箱内铺沙取自相同粒径普通潮间带细砂，使用前用海水充分洗净，厚度为5.0cm。培养箱内注入高出底质10.0cm的自然海水，玻璃箱中央放置1个充气石(高2.0cm、底面直径为2.5cm)用于充氧。试验期间水温为(12±1)℃，ph为(7.50±0.2)，溶解氧为(5.5±0.5)mg/l，光照周期为自然光周期。
本实施例选用健康的4月龄单环刺螠苗种和1年龄单环刺螠苗种各4只，测量其体长(自然状态下)体重(自然排掉直肠和肛门囊中的水)。单环刺螠暂养一周，每日多次、均等、少量投喂普通饲料，使单环刺螠充分适应。添加上述实施例获得中草药组合物的饲料的喂养环境，试验开始前停食1天。对所选取的两组单环刺螠每天分四个时间点按体重的2wt％投喂实施例1所得到的中草药饲料，同时以投喂不添加中草药的同规格、同批次饲料作为对照。通过投喂，一周后对比单环刺螠的体重体长变化，结果如表1所示。
表1
结果表明投喂一周后，添加实施例1所得到中草药饲料的单环刺螠的体重和体长增长均明显高于对照组的单环刺螠，表明实施例1所得的中草药提取物可促进单环刺螠的生长。
实施例3对单环刺螠摄食情况的影响
将实施例2所得到的4月龄单环刺螠进一步观察饲料中添加中草药组合物对单环刺螠的摄食情况的影响。研究单环刺螠在人工养殖条件下的摄食节律情况，实验中将实施例1所得到的中草药组合物饲料与水按重量比1∶10比例混合均匀后形成浊液，用分光光度法在470nm波长处测暂养水体浊度变化，通过计算投饵每间隔1h后养殖水体因单环刺螠摄食造成的浊度的改变值，来获得各时段单环刺螠的摄食强度。每个玻璃箱投饵各投5ml，每个水样取不同位置三组检测3次，取其平均值作为该水样的吸光值，同时以不添加中草药的同规格、同批次普通饲料作为对照，所得结果如表2所示。
表2
结果显示，与对照组相比，实施例1所得的中草药提取物可明显增加单环刺螠的摄食效果。
实施例4组织酶学活性分析
将实施例2所得到的1年龄单环刺螠进行解剖取出肠道内容物，研磨后放入离心机进行离心取上清液做组织酶学活性分析。用bca蛋白质试剂盒测定组织中蛋白质浓度并得到标准曲线y＝0.0277x+0.195(r2＝0.8962)，根据蛋白质浓度标准曲线计算样本蛋白质浓度，然后根据计算两组单环刺螠的溶菌酶lzm、黄嘌呤氧化酶xod、酸性磷酸酶acp、碱性磷酸酶akp、过氧化物酶pod和总抗氧化能力t-aoc水平，同时以未添加中草药的饲料饲喂的个体组织作为对照，分析结果如表3所示。
表3
结果显示，与对照组相比，实施例1所得的中草药提取物可显著促进单环刺螠肠道组织中溶菌酶、黄嘌呤氧化酶、酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、过氧化物酶活性和总抗氧化能力水平。
由以上结果可以看出，本发明提供的一种适用于单环刺螠育苗及养殖的中草药提取物应用于单环刺螠育苗及养殖用饲料中，可促进单环刺螠的摄食和生长，并提高单环刺螠肠道组织中溶菌酶、黄嘌呤氧化酶、酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、过氧化物酶的活性，增强其抵抗力，提高其营养价值。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。