一种化疗后辅助修复消化道粘膜的功能性食品及其应用的制作方法

[0001]
本发明涉及功能性食品技术领域，更具体地说是涉及一种化疗后辅助修复消化道粘膜的组合物及其应用。


背景技术：

[0002]
化疗是化学药物治疗的简称，是利用化学药物阻止癌细胞的增殖、浸润、转移，直至最终杀灭癌细胞的一种治疗方式。它是一种全身性治疗手段，和手术、放疗一起，并称为癌症的三大治疗手段。由于化疗药物的选择性不强，在杀灭癌细胞的同时也会不可避免地损伤人体正常的细胞，从而出现药物的不良反应。因此，在接受化疗药物的时候，一方面希望能够达到最佳的抗肿瘤作用，另一方面也要注意预防和识别化疗药物的不良反应。
[0003]
功能性食品是指具有特定功能的食品，适宜于特定人群食用，可调节机体的功能，又不以治疗为目的，在化疗过程中，最常见的就是恶心、呕吐等消化道反应。
[0004]
胃肠道粘膜细胞和骨髓细胞同属增殖型细胞，具有高度生长功能，所以，胃肠道粘膜细胞对化疗药物均敏感，在用药数小时内即可出现毒性反应。胃肠道反应，可直接由药物刺激引起，也可由于药物对消化道粘膜修补增生抑制引起；还有一部分是通过非自主神经系统而引起。胃肠道不良反应可以是食欲减退、恶心、呕吐、腹痛、便秘、腹泻、甚至是血性腹泻，严重破坏肠道屏障；若能够研发一种功能性食品使其能够辅助修复肠道粘膜，缓解化疗后带来的副作用，就可减少肿瘤患者的痛苦。
[0005]
因此，如何提供一种化疗后辅助修复消化道粘膜的功能性食品是本领域技术人员亟需解决的问题。


技术实现要素：

[0006]
有鉴于此，本发明提供了一种化疗后辅助修复消化道粘膜的功能性食品，其可以有效修复消化道黏膜屏障，提高肿瘤患者的免疫力，有效降低化疗药物对消化道的副作用。
[0007]
为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
[0008]
一种化疗后辅助修复消化道粘膜的功能性食品，包括：低聚半乳糖0.2-0.5g、水苏糖0.5-2g、低聚甘露糖0.1-0.3g、谷氨酰胺0.8-1.3g、维生素a 100-300μgre、维生素d32.5-3.5μg、维生素e1.6-10mgα-te、维生素b10.25-1mg、维生素b20.25-1mg、维生素b60.2-1mg、维生素b
12
0.3-3μg、维生素c 20-65mg、烟酸2.2-5mg、叶酸60-70μg、泛酸1-3.5mg、生物素10-30μg、胆碱1-10mg、肌醇1-10mg、钙30-140mg、钾10-15mg、镁10-40mg、铁2.0-3.0mg、锌2.5-3.5mg、碘20-25μg、硒10-17μg、铜0.15-0.27mg、锰0.5-0.7mg、dha 50-60mg、epa 75-90mg、omega-3135-150mg、磷脂酰丝氨酸7-10mg。
[0009]
作为本发明优选的技术方案，所述功能性食品包括：低聚半乳糖0.3g、水苏糖0.8g、低聚甘露糖0.2g、谷氨酰胺1.0g、维生素a 215μgre、维生素d33.0μg、维生素e 5.4mgα-te、维生素b10.65 mg、维生素b20.65 mg、维生素b60.65 mg、维生素b
12
0.15μg、维生素c 40mg、烟酸3.5mg、叶酸66μg、泛酸2.0mg、生物素21μg、胆碱7.5mg、肌醇7.5mg、钙100mg、钾
12.5mg、镁25mg、铁2.5mg、锌3.0mg、碘22μg、硒14.5μg、铜0.20mg、锰0.6mg、dha 55mg、epa 85mg、omega-3142mg、磷脂酰丝氨酸8.5mg。
[0010]
上述技术方案达到的技术效果是：
[0011]
低聚半乳糖、水苏糖和低聚甘露糖是一种功能性低聚糖，食后不能被小肠吸收，直入大肠，被大肠中广泛存在的微生物菌群利用，发酵产生有机酸，降低肠道中的ph值，抑制腐败作用，促进双歧杆菌、乳酸菌等益生菌的生长和活性，从而起到与食用益生菌同样的健康效用，如能减预防便秘，抑制肿瘤的生长，促进矿物元素吸收等，并能刺激机体免疫功能；
[0012]
谷氨酰胺是半必需氨基酸，可肠上皮细胞提高能量，维持肠道细胞正常的通透性；谷氨酰胺可能通过刺激肠黏膜igf1、cln和gln合成酶mrna表达，下调肠黏膜细胞凋亡，从而促进肠黏膜修复；此外，谷氨酰胺能促进黏膜淋巴组织分泌s-iga，降低细菌对黏膜的附着和定植，防止其穿越肠黏膜上皮细胞层，以减少细菌和内毒素的易位；
[0013]
维生素a被小肠吸收后，促进糖蛋白的合成，可提高机体的免疫功能，抑制肿瘤的生长，同时，能促进肠道细胞的增殖，降低化疗药物对肠道细胞增殖的抑制作用；
[0014]
维生素d3提高肌体对钙、磷的吸收，使血浆钙和血浆磷的水平达到饱和程度，抑制结肠癌、乳腺癌、肺癌的发生；
[0015]
维生素e可以调节自主神经系统，促进血液循环，因此可以促进胃肠道蠕动，防止便秘；
[0016]
维生素b1可以促进儿童神经系统的发育，可维持正常的消化腺分泌和胃肠道蠕动从而促进消化，增强肿瘤患者的食欲；
[0017]
维生素b2作为一种辅酶，可在一定程度上促进消化；
[0018]
维生素b6参与蛋白质合成与分解代谢，参与所有氨基酸代谢；维生素b群、维生素b1、维生素b2、泛酸、维生素c、镁、钾、钠、亚麻油酸的存在会提升维生素b6的功能；
[0019]
维生素b
12
促进红细胞的发育和成熟，使机体造血机能处于正常状态；
[0020]
维生素c具有较强的抗氧化能力，且能促进体内蛋白的合成，预防贫血，增强肠道血管壁的弹性，防止出现消化道出血；
[0021]
烟酸，能促进消化系统的健康，减轻胃肠障碍；促进血液循环，减轻腹泻现象；
[0022]
叶酸，是人体在利用糖分和氨基酸时的必要物质，是机体细胞生长和繁殖所必需的物质，在体内以四氢叶酸的形式起作用。参与嘌呤、胸腺嘧啶的合成，直接影响dna的合成；参与氨基酸之间的相互代谢转化，如丝氨酸与甘氨酸之间的转换、组氨酸转化为谷氨酸、同型半胱氨酸与蛋氨酸的互相转换等；参与血红蛋白和其他甲氨基化合物的合成，如肾上腺素、胆碱、肌酸等。
[0023]
泛酸，以乙酰辅酶a的形式参加代谢过程，是二碳单位的载体，也是体内乙酰化酶的辅酶，可以帮助肠道新生细胞的形成，维持正常发育和中枢神经系统的发育；同时，泛酸具有制造抗体功能，能帮助抵抗传染病，缓和多种抗生素副作用及毒性，并有助于减轻过敏症状；
[0024]
生物素，能增强机体的免疫反应和对感染的抵抗能力，稳定正常组织的溶酶体膜，维持机体的体液免疫、细胞免疫并影响一系列细胞因子的分泌；
[0025]
胆碱，是一种强有机碱，是卵磷脂的组成成分，可以改善脂肪的吸收和利用，促进胃肠道平滑肌收缩，促进胃肠道蠕动；
[0026]
肌醇，可以促进细胞的代谢，促进消化，增加食欲；
[0027]
钙、钾、镁作为常量元素，其中，钙是人体骨骼和牙齿的重要成分，它参与人体的许多酶反应、血液凝固，维持心肌的正常收缩，抑制神经肌肉的兴奋，巩固和保持细胞膜的完整性；钾在人体内的主要作用是维持酸碱平衡，参与能量代谢以及维持神经肌肉的正常功能；镁作为酶的激活剂参与300余种酶促反应，参与骨骼的构成和生长，维持神经肌肉的兴奋性，并影响甲状旁腺激素的分泌；
[0028]
铁、锌、碘、硒、铜、锰作为微量元素，参与体内蛋白质的合成，促进维生素的吸收，且可以抑制肿瘤细胞的生长，提高人体的免疫力；
[0029]
化疗患者因为呕吐，维生素(维生素a、维生素d、维生素e、维生素b1、维生素b2、维生素b6、维生素b12、维生素c、烟酸、叶酸、泛酸)和矿物质(钾、钠、镁、钙、铁、锌)的大量丢失，导致电解质失衡,所以应及时予以补充；
[0030]
dha(二十二碳六烯酸)作为一种必需脂肪酸，是神经系统细胞生长及维持的主要营养物质，也是大脑和视网膜的重要组成成分，在增强记忆与思维能力、提高智力等方面作用显著；人群流行病学研究发现，体内dha含量高的人的心理承受力较强、智力发育指数也高；而且，dha及其衍生物在机体中能够杀死癌细胞，为癌症的治疗提供了新的方法；
[0031]
epa(二十碳五烯酸)具有降血脂、降血压、降血糖作用，可预防和改善动脉硬化，防止高血压；
[0032]
omega-3可促进中性或酸性胆固醇自粪便排出，抑制肝内脂质及脂蛋白合成，能降低血浆中胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、极低密度脂蛋白含量，增加高密度脂蛋白含量；还可以参与花生四烯酸代谢，生成前列腺素类化合物pgi3及txa3；花生四烯酸的代谢物为前列环素和血栓素；pgi3可舒张血管及抗血小板聚集、防止血栓形成；txa3则可使血管痉挛、促进血小板聚集和血栓形成；
[0033]
磷脂酰丝氨酸可以提高大脑机能集中注意力，改善记忆力，可以缓解压力，促进用脑疲劳的人恢复平衡情绪，另外还可以帮助修复大脑损伤。
[0034]
本发明还旨在提供一种化疗后辅助修复消化道粘膜的功能性食品在辅助恢复化疗后消化道功能中的应用。
[0035]
本发明提供了一种化疗后辅助修复消化道粘膜的功能性食品，以功能性低聚糖、复合维生素、常量元素、微量元素和鱼油复配成功能性低聚糖，对预防化疗后便秘、腹泻、消化道出血有显著的效果，而且，本组方中，鱼油和微量元素的存在可以显著促进肠道对复合维生素的吸收，dha、epa、omega-3和磷脂酰丝氨酸组合，不仅可以促进神经系统的发育，还具有显著的抗癌效果，较单一组分，抗癌效果提升，同时，具有通便、修复肠道粘膜的效果；功能性低聚糖也可以促进维生素和微量元素、常量元素的吸收，所以，各组分间相互配合，协同增效，共同行使功能，最大程度地达到了修复肠粘膜和胃粘膜的功能。
[0036]
综上所述，本发明提供的功能性食品涵盖多种营养成分，富含谷氨酰胺、ω-3脂肪酸、复合维生素、益生元等，经过科学匹配，增强了患者对放化疗的耐受力，提高了患者的机体免疫力，控制了急性炎性反应，调节了肠道菌群，起到了修复肠黏膜屏障功能，减少了并发症，缩短了住院时间，降低了治疗费用；而且，该功能性食品适口性较好，可在一定程度上提高患者的食欲。
附图说明
[0037]
图1附图为本发明实施例5丝裂霉素对ges-1胃粘膜细胞损伤示意图；
[0038]
图2附图为本发明实施例5功能性食品对ges-1胃粘膜细胞修复结果示意图；
[0039]
图3附图为本发明实施例6丝裂霉素对小鼠体重影响示意图；
[0040]
图4附图为本发明实施例6ihc检测结果图；
[0041]
图5附图为本发明实施例6tunel检测结果图；
[0042]
图6附图为本发明实施例6elisa检测结果图；
[0043]
图7附图为本发明实施例6zo-1蛋白表达水平图；
[0044]
图8附图为本发明实施例6ecadherin蛋白表达水平图；
[0045]
图9附图为本发明实施例6β-catenin蛋白表达水平图；
[0046]
图10附图为本发明实施例6occludin蛋白表达水平图；
[0047]
图11附图为本发明实施例6zo-1 mrna表达水平图；
[0048]
图12附图为本发明实施例6e-cadherin mrna表达水平图；
[0049]
图13附图为本发明实施例6β-catenin mrna表达水平图；
[0050]
图14附图为本发明实施例6occludin mrna表达水平图。
具体实施方式
[0051]
下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
[0052]
实施例1
[0053]
一种化疗后辅助修复消化道粘膜的功能性食品，包括：低聚半乳糖0.2g、水苏糖2g、低聚甘露糖0.1g、谷氨酰胺1.3g、棕榈酸视黄酯100μgre、麦角钙化醇3.5μg、d-α-生育酚1.6mgα-te、盐酸硫胺素1mg、核黄素-5
’-
磷酸钠0.25mg、烟酸吡哆醇1mg、盐酸氰钴胺0.3μg、磷酸酯镁65mg、烟酸2.2mg、叶酸70μg、泛酸1mg、生物素30μg、胆碱1mg、肌醇10mg、钙30mg、钾15mg、镁10mg、铁3.0mg、锌2.5mg、碘25μg、硒10μg、铜0.27mg、锰0.5mg、dha60 mg、epa75mg、omega-3150mg、磷脂酰丝氨酸7mg。
[0054]
实施例2
[0055]
一种化疗后辅助修复消化道粘膜的功能性食品，包括：低聚半乳糖0.3g、水苏糖0.8g、低聚甘露糖0.2g、谷氨酰胺1.0g、β-胡萝卜素215μgre、胆钙化醇3.0μg、d-α-醋酸生育酚5.4mgα-te、硝酸硫胺素0.65mg、核黄素0.65mg、烟酸吡哆醇0.65mg、羟钴胺0.15μg、抗坏血酸棕榈酸酯40mg、烟酸3.5mg、叶酸66μg、泛酸2.0mg、生物素21μg、胆碱7.5mg、肌醇7.5mg、钙100mg、钾12.5mg、镁25mg、铁2.5mg、锌3.0mg、碘22μg、硒14.5μg、铜0.20mg、锰0.6mg、dha55 mg、epa85mg、omega-3142mg、磷脂酰丝氨酸8.5mg。
[0056]
实施例3
[0057]
一种化疗后辅助修复消化道粘膜的功能性食品，包括：低聚半乳糖0.5g、水苏糖0.5g、低聚甘露糖0.3g、谷氨酰胺0.8g、醋酸视黄酯300μgre、胆钙化醇2.5μg、dl-α-生育酚10mgα-te、硝酸硫胺0.25mg、核黄素1mg、烟酸吡哆醇0.2mg、氰钴胺3μg、l-抗坏血酸钠20mg、
烟酸5mg、叶酸60μg、泛酸3.5mg、生物素10μg、胆碱10mg、肌醇1mg、钙140mg、钾10mg、镁40mg、铁2.0mg、锌3.5mg、碘20μg、硒17μg、铜0.15mg、锰0.7mg、dha50 mg、epa90mg、omega-3135mg、磷脂酰丝氨酸10mg。
[0058]
实施例1-3中，提供钙元素的原料为碳酸钙；提供钾元素的原料为葡萄糖酸钾；提供镁元素的原料为氧化镁；提供铁元素的原料为富马酸亚铁；提供锌元素的原料为硫酸锌；提供碘元素的原料为碘化钠；提供硒元素的原料为亚硒酸钠；提供铜元素的原料为硫酸铜；提供锰元素的原料为硫酸锰。
[0059]
实施例1-3中的功能性食品的制备过程为：
[0060]
(1)称取预定量的各原料，其中、低聚半乳糖、水苏糖、低聚甘露糖、维生素、微量元素、常量元素、epa、omega-3、磷脂酰丝氨酸等原料预先制备成预混料；
[0061]
(2)将剩余原料逐渐加入加入进行混合，混合10-30分钟，出料。
[0062]
(3)上述各原料配制前及配制完成后均经过杀菌处理；营养配方的剂型包括：营养粉、营养乳剂、胶囊剂、片剂、丸剂、口服液。
[0063]
实施例4急性毒性试验
[0064]
选取8周龄无特殊病原体的sd大鼠进行急性毒性试验，分为9组，每组5只；
[0065]
将实施例1-3制备得到的功能性食品分别悬浮于0.5％的甲基纤维素溶液中，每种功能性食品分别以1g/kg、5g/kg和10g/kg的剂量一次口服施用于每组的5只sd大鼠，观察大鼠的死亡、临床症状以及体重变化，并进行血液试验和血液生化试验，在尸检时，肉眼检查胸腹部胃肠组织的任何异常现象；
[0066]
结果显示：实施例1-3所述的功能性食品未引起任何特定的临床症状、体重变化或死亡，血液试验、血液生化试验和尸检也没有变化。因此，由于直至10g/kg的剂量不会引起大鼠的任何中毒变化，可判断其半数致死量(ld50)远远大于10g/kg，实施例1-3涉及的功能性食品被评定为安全无毒物质。
[0067]
实施例5实施例3的功能性食品对化疗后ges-1胃粘膜细胞的修复作用
[0068]
取对数生长期的ges-1胃粘膜细胞，每孔接种细胞悬液100μl于96孔培养板中。37℃、5％co2培养过夜。次日取出细胞板，弃上清，加入丝裂霉素20μl+功能性食品100μl，每一处理均做6复孔。对照组加入丝裂霉素20μl，另做一孔不加细胞，只加培养液(比色时用此孔调零)。外周加pbs保持细胞培养板内部水分，在37℃、5％co2条件下培养。于培养时间结束时，依次在每孔中加入浓度为5mg/ml的mtt溶液10μl，继续孵育4h。弃去孔中培养上清液，再于每孔加入100μl dmso充分震荡至结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪上选择570nm波长，测定各孔光吸收值(od值)；结果见图1和图2。
[0069]
图1结果显示，丝裂霉素显著损伤了胃粘膜细胞，降低了其生存率；图2结果显示，实施例3中的功能性食品对ges-1胃粘膜细胞增殖效果明显，可以有效提高化疗后胃粘膜细胞的存活率，抑制化疗药物对胃粘膜细胞的损伤。
[0070]
实施例6验证实施例3的功能性食品对化疗后肠道粘膜细胞的促增殖作用
[0071]
取balb/c小鼠，雌性，6～8周龄，适应性饲养3～7天后，按体重随机分为正常组(10只)和荷瘤组(50只)。荷瘤组接种4t1乳腺癌细胞(1
×
105个/只)，建立小鼠乳腺癌模型。造模24h后各组按表1给药21天，连续21天，正常组和模型组给予等体积的生理盐水。
[0072]
表1
[0073][0074][0075]
实验过程中，每3天记录一次体重。末次给药后24h，脱臼处死各组动物，从眼眶静脉丛采集静脉血，部分置于洁净ep管中，静置后分离得到血清，用elisa试剂盒测定脂多糖含量。同时剖取小肠约8cm(回肠结上端1cm处)，部分组织进行苏木精-伊红染色观察组织变化，并进行免疫组化实验观察小肠细胞增殖能力，原位末端脱氧核苷酸转移酶介导的dutp缺口末端标记实验观察小肠细胞凋亡水平；另取部分组织进行免疫印迹实验检测小肠上皮连接蛋白表达水平，包括紧密连接蛋白1(zo-1)、钙黏蛋白e(e-cadherin)、β连环蛋白(β-catenin)、闭合蛋白(occludin)表达水平；剩下部分组织进行实时荧光定量聚合酶链式反应检测上述小肠上皮连接蛋白所对应基因表达水平。其中与正常组比较，“*”“**”分别表示p<0.05，p<0.01；与模型组比较，“#”“##”分别表示p<0.05，p<0.01；与丝裂霉素组比较，
“△”“△△”
分别表示p<0.05，p<0.01。
[0076]
如图3所示，给药21天后，与正常组和模型组相比，丝裂霉素组小鼠体重明显下降，小肠结构发生改变，主要集中在侧肌层疏松，肠绒毛明显缩短，而与丝裂霉素组相比，联合用药组小鼠体重均有明显上升趋势，且小肠绒毛明显增加，间距明显缩短，结构得到恢复。说明实施例3中的功能性食品能缓解由丝裂霉素引起的肠道损伤症状。
[0077]
ihc和tunel检测结果表明(图4、图5)，与正常组和模型组相比，丝裂霉素组小肠组织中pcna表达水平明显降低，细胞凋亡水平明显升高，而与丝裂霉素组相比，联合用药组pcna表达水平明显上升而细胞凋亡水平明显下降。说明实施例3中的功能性食品可促进小肠细胞增殖并抑制凋亡，对肠道损伤有明显改善作用。
[0078]
elisa检测结果(图6)、wb分析结果(图7～10)以及rt-qpcr检测结果(图11～14)表明与正常组和模型组相比，丝裂霉素组小鼠血清中lps含量明显上升，组织中小肠上皮连接蛋白(zo-1、e-cadherin、β-catenin、occludin)及其所对应基因表达水平均明显降低，而与丝裂霉素组相比，联合用药组血清lps含量明显降低且小肠上皮连接蛋白及其所对应基因表达水平均明显上升。上述结果说明实施例3中的功能性食品可缓解由丝裂霉素引起的小肠损伤，促进小肠组织修复，恢复肠道屏障完整性。
[0079]
实施例7
[0080]
十名患有白血病的儿童服用实施例3中的功能性食品，血浆中营养指标的变化见表2-表6；
[0081]
表2
[0082]
[0083][0084]
表3
[0085]
[0086]
[0087][0088]
表4
[0089]
[0090][0091]
表5
[0092]
[0093][0094]
表6
[0095]
[0096]
[0097][0098]
由表2-表6可知，实施例3的功能性食品确实可以修复肠道粘膜功能，促进营养物质的吸收，重塑化疗儿童的肠道菌群结构，利于提高其抵抗力，还能在一定程度上提高白血病儿童的生存率。
[0099]
除此之外，经过跟踪调查证实，本发明的功能性食品，在儿童进行骨髓移植后，也可以一直服用，无任何副作用，且可以降低抗排异药物对肝肾、肠道带来的毒副作用。
[0100]
本说明书中各个实施例采用递进的方式描述，每个实施例重点说明的都是与其他实施例的不同之处，各个实施例之间相同相似部分互相参见即可。对于实施例公开的装置而言，由于其与实施例公开的方法相对应，所以描述的比较简单，相关之处参见方法部分说明即可。
[0101]
对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。