专利名称：丹参水溶性成分提取去除杂质工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及药学领域，具体而言，涉及丹参水溶性成分提取过程的杂质去除工艺。
背景技术：
中药丹参具有活血化瘀、养血安神与凉血消痈的功效。由丹参水溶性成分提取液制得的丹参注射液、复方丹参注射液(香丹注射液、丹香冠心注射液)、丹参大输液、复方丹参大输液等丹参制剂具有扩张血管、增加冠状动脉血管量的作用，已经广泛用于冠心病的胸闷、心绞痛、心肌梗塞及缺血性中风等疾病的治疗，成为临床上常用的治疗心血管疾病药物。
目前丹参水溶性成分提取采用水提醇沉淀法，其工艺包括以下步骤(a)获得丹参煎液。将丹参生药用水煎煮三次，合并煎液，过滤，浓缩。
(b)第一次乙醇沉淀加乙醇至含醇量约为75％，冷处静置数十小时，滤取醇液，回收乙醇。
(c)第二次乙醇沉淀浓缩液再加乙醇至含醇量约为85％，冷处静置数十小时，滤取醇液，回收乙醇。
(d)碱性物质调节pH和第一次活性炭处理。浓缩液加入数倍量的注射用水中，冷藏，过滤，滤液浓缩，冷藏，用10％氢氧化钠溶液调节pH值，加适量活性炭煮沸，过滤，得到滤液。
(e)酸洗物质调节pH和第二次活性炭处理。滤液用稀盐酸酸化至pH值为4，加适量活性炭煮沸，冷藏，过滤，得到滤液。
(f)调节pH，制得成品。用10％氢氧化钠溶液调节pH值，过滤后即可配制各种丹参注射、输液用制剂。
然而，目前的工艺存在以下几个主要缺点。(一)除杂质不尽，产品容易发生澄明度不良以及注射时产生疼痛的情况。(二)采用两次醇沉步骤，乙醇用量较大，价格较贵，不经济。(三)水沉后的过滤较困难。(四)步骤烦琐，时间较长。
因此，本领域迫切需要开发新的快速、简便、和杂质去除效率高的丹参水溶性成分的提取方法。
发明内容
本发明的目的在于提供一种丹参水溶性成分提取方法，与现有的工艺相比，该方法具有操作简便、经济实用、提取时间短、和/或去除杂质效果好等优点。
在本发明的目的是通过以下技术方案实现的一种丹参水溶性成分提取方法，包括步骤(a)用酸将丹参煎液的pH调节至2.0-3.5，放置8-24小时，过滤得到滤液；(b)向滤液中加入乙醇至最终体积浓度为75±10％，然后放置36-72小时，过滤得到滤液；(c)用碱将滤液pH调节至7.5-8.5，放置8-24小时，过滤得到滤液；(d)用酸将滤液pH调节至5.0-7.0，回收乙醇并得到浓缩液；(e)将浓缩液用活性炭进行脱色处理，过滤得到滤液；(f)调节滤液至pH6.8±0.5，得到丹参水溶性成分提取液。
在另一优选例中，步骤(a)中所述的丹参煎液是将丹参生药用水煎煮三次，合并煎液，过滤，浓缩后获得的煎液。
在另一优选例中，步骤(a)中所述的酸包括盐酸，重量百分比浓度为5-30％。
在另一优选例中，步骤(b)中加入乙醇至最终体积浓度为75-85％。
在另一优选例中，步骤(c)中所述的碱包括氢氧化钠，其重量百分比浓度为5-40％。
在另一优选例中，步骤(d)中所述的酸包括盐酸，重量百分比浓度为5-30％。
在另一优选例中，步骤(e)中活性炭的处理条件是加入0.3±0.2％活性炭煮沸30±15分钟。
在另一优选例中，还包括步骤(g)将丹参水溶性成分提取液制成丹参注射液、复方丹参注射液(如香丹注射液、丹香冠心注射液)、丹参大输液、或复方丹参大输液。
在另一优选例中，步骤(e)中活性炭的处理次数为一次。
在另一优选例中，步骤(a)中所述的放置是在常温下放置。
图1显示了本发明一个实施例中的丹参水溶性成分提取方法的流程简图。
具体实施例方式
本发明人对丹参水溶性成分提取/去除杂质工艺进行了深入研究，根据丹参提取液中杂质的理化特性，首次在丹参水溶性成分提取工艺中采用水提醇沉淀法配置酸性沉淀法、醇性溶液调pH法等技术手段，从而开发出了新的快速、简便、和杂质去除效率高的丹参水溶性成分提取方法。
具体而言，本发明方法包括以下步骤(a)用酸将丹参煎液的pH调节至2.0-3.5，放置8-24小时，过滤得到滤液；(b)向滤液中加入乙醇至最终体积浓度为75±10％，然后放置36-72小时，过滤得到滤液；(c)用碱将滤液pH调节至7.5-8.5，放置8-24小时，过滤得到滤液；(d)用酸将滤液pH调节至5.0-7.0，回收乙醇并得到浓缩液；(e)将浓缩液用活性炭进行脱色处理，过滤得到滤液；(f)调节滤液至pH6.8±0.5，得到丹参水溶性成分提取液。
参见图1。在一具体优选例中，本发明方法包括(a)用盐酸溶液(5％-30％)将丹参煎液酸化至pH值(2.0-3.5)，静置数小时以上，过滤得到滤液。
(b)滤液加乙醇至含醇量为75％至85％，冷处静置数十小时，过滤得到滤液。
(c)滤液用氢氧化钠溶液(5％-40％)调节pH值(7.5-8.5)，冷处静置数小时以上，过滤得到滤液。
(d)用盐酸溶液(5％-30％)调节pH值至5.0-7.0，回收乙醇，得到浓缩液。
(e)浓缩液加入数倍量的注射用水中，冷藏，过滤，滤液浓缩得到浓缩液。浓缩液可冷藏。然后加适量活性炭煮沸，冷藏，过滤得到滤液。
(f)用氢氧化钠溶液(5％-40％)或盐酸溶液(5％-30％)调节pH值，过滤后即可配制各种丹参注射、输液用制剂。
本发明的发明点主要在步骤(a)-(d)，至于步骤(e)和(f)可以本领域常规技术进行。
此外，可用于本发明的丹参煎液没有限制，可用各种常规方法制得的丹参煎液。一种优选的丹参煎液是将丹参生药用水煎煮三次，合并煎液，过滤，浓缩后得到的浓缩液。
依本发明的丹参水溶性成分提取方法所制得的丹参提取液可按本领域常规的各种技术指标进行检验。常用的指标包括性能黄棕色或棕色的澄明液体。
pH值5.0-7.0。
无菌试验合格。
热原试验合格。
蛋白质取相当于1g丹参生药的丹参提取液，加鞣酸试液1-3滴，不得出现浑浊。
草酸盐取相当于2g丹参生药的丹参提取液，加3％氯化钙溶液2-3滴，放置10分钟，不得出现浑浊或沉淀。
鞣质取相当于1g丹参生药的丹参提取液，加新配制的含1％鸡蛋清的生理盐水5ml，放置10分钟，不得出现浑浊或沉淀。
炽灼残渣精密量取2g丹参生药的丹参提取液，蒸干，依法检查(中国药典2000年版一部附录IX J)，不得过1.5％(g/ml)。
重金属取炽灼残渣项下的残渣，依法检查(中国药典2000年版一部附录IX E第二法)，不得过百万分之五。
砷盐精密量取2g丹参生药的丹参提取液，置坩埚中，水浴上蒸干，加2％硝酸镁乙醇溶液5ml，点燃，熄灭后，用小火炽灼至炭化，放冷，加硝酸0.5ml，蒸干，至氧化氮蒸汽除尽后，在500℃-600℃炽灼使完全灰化，放冷，依法检查(中国药典2000年版一部附录IX F第一法)，不得过千万分之五。
钾离子精密量取2g丹参生药的丹参提取液，依法检查(中国药典2000年版一部附录IX S)，应符合规定。
总固体精密量取10g丹参生药的丹参提取液，置已恒重的蒸发皿中，蒸干，在105℃干燥3小时，移置干燥器中，冷却30分钟，迅速精密称定重量，计算。遗留残渣不得少于2.0％。
吸收度取1g丹参生药的丹参提取液，加水稀释成500ml，照分光光度法(中国药典2000年版一部附录V A)测定，在281±3nm的波长处有最大吸收，吸收度不得低于0.35。
对本发明方法所制得的丹参水溶性成分提取液进行的各种检测表明，其产品质量完全符合各种技术指标的要求。
本发明的主要优点在于(一)用酸性沉淀法、醇性溶液调PH法使现有工艺中的两步醇沉淀可变成一步醇沉淀，乙醇用量明显减少，经济合算。
(二)酸性沉淀法、醇性溶液调PH法相对可减少的醇沉淀步骤操作上更简便。
(三)酸性沉淀法不需冷冻处理，可提高冷库的利用率，减少能源的耗用。
(四)在生药煎煮浓缩后，立即采用酸性沉淀法可有效地破坏热原，提高产品质量。
(五)水提醇沉淀法配置酸性沉淀法、醇性溶液调PH法，可有效地去除其中的杂质，如鞣质、树脂，过滤方便，产品澄明度好，可减少临床上因鞣质所致的疼痛。
(六)提取步骤少，时间较短。
下面结合实施例进一步阐述本发明。应理解，这些实施例不对本发明起限定作用。
实施例1将1000g丹参生药用水煎煮三次，每次2小时，合并煎液，过滤，滤液浓缩至480ml。用5％盐酸溶液酸化pH值至3.5，静置16小时，过滤，滤液加乙醇至含醇量为75％，冷处静置48小时，过滤，滤液用5％氢氧化钠溶液调节pH值至7.5，冷处静置24小时，过滤，用5％盐酸溶液调节pH值至7.0，回收乙醇，浓缩至120ml，浓缩液加入880ml的注射用水中，冷藏16小时，过滤，滤液浓缩至250ml，冷藏72小时，加0.4％活性炭煮沸30分钟，冷藏24小时，过滤，用5％氢氧化钠溶液调节pH值至6.8，过滤后即得。
制得的丹参提取液的吸收度(281±3nm)为0.730，pH值、无菌试验、热原试验、蛋白质、草酸盐、鞣质、炽灼残渣、重金属、砷盐、钾离子、总固体、吸收度等各项指标均符合要求。
实施例2将1000g丹参生药用水煎煮三次，每次2小时，合并煎液，过滤，滤液浓缩至480ml，用20％盐酸溶液酸化pH值至2.8，静置12小时，过滤，滤液加乙醇至含醇量为80％，冷处静置48小时，过滤，滤液用20％氢氧化钠溶液调节pH值至8.0，冷处静置12小时，过滤，用20％盐酸溶液调节pH值至6.0，回收乙醇，浓缩至120ml，浓缩液加入880ml的注射用水中，冷藏16小时，过滤，滤液浓缩至250ml，冷藏72小时，加0.3％活性炭煮沸30分钟，冷藏24小时，过滤，用20％氢氧化钠溶液调节pH值至6.8，过滤后即得。
制得的丹参提取液的吸收度(281±3nm)为0.554，pH值、无菌试验、热原试验、蛋白质、草酸盐、鞣质、炽灼残渣、重金属、砷盐、钾离子、总固体、吸收度等各项指标均符合要求。
实施例3将1000g丹参生药用水煎煮三次，每次2小时，合并煎液，过滤，滤液浓缩至500ml，用30％盐酸溶液酸化pH值至2.0，静置8小时，过滤，滤液加乙醇至含醇量为85％，冷处静置48小时，过滤，滤液用40％氢氧化钠溶液调节pH值至8.5，冷处静置8小时，过滤，用30％盐酸溶液调节pH值至5.0，回收乙醇，浓缩至120ml，浓缩液加入880ml的注射用水中，冷藏16小时，过滤，滤液浓缩至250ml，冷藏72小时，加0.1％活性炭煮沸30分钟，冷藏24小时，过滤，用40％氢氧化钠溶液调节pH值至6.8，过滤后即得。
制得的丹参提取液的吸收度(281±3nm)为0.447，pH值、无菌试验、热原试验、蛋白质、草酸盐、鞣质、炽灼残渣、重金属、砷盐、钾离子、总固体、吸收度等各项指标均符合要求。
表实施例1-3的提取方法参数和产品性能
应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
权利要求
1.一种丹参水溶性成分提取方法，其特征在于，包括步骤(a)用酸将丹参煎液的pH调节至2.0-3.5，放置8-24小时，过滤得到滤液；(b)向滤液中加入乙醇至最终体积浓度为75±10％，然后放置36-72小时，过滤得到滤液；(c)用碱将滤液pH调节至7.5-8.5，放置8-24小时，过滤得到滤液；(d)用酸将滤液pH调节至5.0-7.0，回收乙醇并得到浓缩液；(e)将浓缩液用活性炭进行脱色处理，过滤得到滤液；(f)调节滤液至pH6.8±0.5，得到丹参水溶性成分提取液。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(a)中所述的丹参煎液是将丹参生药用水煎煮三次，合并煎液，过滤，浓缩后获得的煎液。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(a)中所述的酸包括盐酸，重量百分比浓度为5-30％。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(b)中加入乙醇至最终体积浓度为75-85％。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(c)中所述的碱包括氢氧化钠，其重量百分比浓度为5-40％。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(d)中所述的酸包括盐酸，重量百分比浓度为5-30％。
7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(e)中活性炭的处理条件是加入0.3±0.2％活性炭煮沸30±15分钟。
8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，还包括步骤(g)将丹参水溶性成分提取液制成丹参注射液、复方丹参注射液、丹参大输液、或复方丹参大输液。
9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(e)中活性炭的处理次数为一次。
10.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(a)中所述的放置是在常温下放置。
全文摘要
本发明提供了一种丹参水溶性成分提取去除杂质工艺。该工艺根据丹参提取液中杂质的理化特性，采用水提醇沉淀法配置酸性沉淀法、醇性溶液调pH值法。其操作简便、经济实用、提取时间短、去除杂质效果好。用本发明制得的丹参水溶性成分提取液可用于制备丹参注射液、复方丹参注射液(香丹注射液、丹香冠心注射液)、丹参大输液、复方丹参大输液等丹参制剂。
文档编号A61P9/10GK1537567SQ03116470
公开日2004年10月20日 申请日期2003年4月18日 优先权日2003年4月18日
发明者陈伟, 陈 伟 申请人:上海通用药业股份有限公司