专利名称：膀胱内灌注治疗膀胱癌的5－氟尿嘧啶壳聚糖微球的构建的制作方法
技术领域：
本发明以壳聚糖为材料，以5-氟尿嘧啶(5-Fu)为模型药物，采用W/O型乳剂制备技术和离子交联固化法，制备了载有5-Fu的壳聚糖缓释微球。
本发明有两个独特的优点，首先，在制备微球时，巧妙地利用了材料的理化特性，用离子交联法代替了目前广泛使用的甲醛和戊二醛交联固化法，为载药微球的精制纯化提供了方便；其次，利用载药微球的缓释特点和壳聚糖的生物粘附性，通过膀胱内灌注给药来使微球粘附在膀胱内壁，缓慢释放的药物对肿瘤组织产生持久的杀伤作用，从而达到治疗膀胱肿瘤的效果。
背景技术：
膀胱肿瘤属于临床上比较常见的肿瘤，对于这种肿瘤的治疗，最为常用的方法是手术切除和电灼。但是，由于一些特殊的原因，有的膀胱癌患者不便进行手术切除，即便是对于手术切除的患者，为了巩固治疗，也往往需要通过化疗作为辅助治疗手段。
临床上用到的化疗药物都是细胞毒物质，其作用是全身的，传统的静脉或口服给药方式除了对肿瘤有杀伤作用外，也对正常的组织产生强烈的毒性，特别是心肌和骨髓等重要组织。膀胱内灌注抗癌药物的溶液剂，虽然在给药方式上实现了局部给药，但是膀胱内药物的扩散，不仅会使药物进入其他组织和器官以及由此产生不必要的毒性，而且治疗部位的药物浓度也会迅速降低，难以达到有效的治疗效果。
本发明制备的是具有粘附作用的缓释微球，经膀胱内灌注以后可以粘附于膀胱内壁，从而避免了进入其他组织和器官，另外，药物在癌组织周围的缓慢释放可以对肿瘤组织产生持久的杀伤效果，这两个特点正是治疗膀胱肿瘤所需要的。粘附缓释微球的以上特点可以实现定位给药，因此，不仅提高了疗效和降低了毒性，而且用药剂量也会降低。
本发明的描述本发明采用壳聚糖为材料，用5-Fu为模型药物，通过乳化离子交联法制备微球。本发明所用的材料壳聚糖易溶于酸性介质，在中性和碱性介质中不溶解。由于这种溶解是可逆的，因此可以利用其这种特性，通过离子中和的方法进行固化。首先，采用制备乳剂的方法，将油相、水相和表面活性剂加入同一容器，在搅拌下制备W/O型乳剂，然后，加入碱性溶液来使内水相的pH值达到弱碱性，从而使壳聚糖恢复其固体状态，再通过离心将微球分离和纯化，最后，将载药微球制备成混悬液，通过导管灌注到膀胱内。
简图1首先，油相(环己烷、二氯甲烷、液体石蜡)与表面活性剂Span-80混合，在高速搅拌下，加入水相(壳聚糖的和5-氟尿嘧啶水溶液)，形成W/O型乳剂，滴加氢氧化钠水溶液，使水相中的壳聚糖固化成微球。离心将微球分离，用无水乙醇洗涤，干燥得微球。
实施例1.一份环己烷加入3％(W/W)Span-80，与0.2份2％(W/W)壳聚糖稀盐酸(10-1000)溶液(其中，壳聚糖与药物的比例为3∶1 w/w)，制备成W/O乳剂，在搅拌下滴加20％氢氧化钠溶液至pH值7.5。搅拌30min，3000rpm离心，弃去上清夜，下层沉淀物用无水乙醇洗涤后再离心，弃去乙醇，减压干燥得到载药微球。
2.一份液体石蜡加入3％(W/W)Span-80，与0.3份2％(W/W)壳聚糖稀盐酸(10-1000)溶液(壳聚糖与药物的比例为3∶1 w/w)，制备成W/O乳剂，在搅拌下滴加20％氢氧化钠溶液至pH值7.5。搅拌30min，3000rpm离心，弃去上清夜，下层沉淀物用无水乙醇洗涤后再离心，弃去乙醇，减压干燥得到载药微球。
3.一份二氯甲烷加入3％(W/W)Span-80，与0.2份2％(W/W)壳聚糖稀盐酸(10-1000)溶液(壳聚糖与药物的比例为3∶1 w/w)，制备成W/O乳剂，在搅拌下滴加20％氢氧化钠溶液至pH值7.5。搅拌30min，3000rpm离心，弃去上清夜，下层沉淀物用无水乙醇洗涤后再离心，弃去乙醇，减压干燥得到载药微球。
4.一份三氯甲烷加入3％(W/W)Span-80，与0.2份2％(W/W)壳聚糖稀盐酸(10-1000)溶液(壳聚糖与药物的比例为3∶1 w/w)，制备成W/O乳剂，在搅拌下滴加20％氢氧化钾溶液至pH值7.5。搅拌30min，3000rpm离心，弃去上清夜，下层沉淀物用无水乙醇洗涤后再离心，弃去乙醇，减压干燥得到载药微球。
权利要求
1.一种由壳聚糖为材料制备的载有抗癌药物的微球，微球的粒径在1-100微米之间。这种载药微球具有生物粘附性。
2.根据权利要求1，载药微球所包含的药物为对膀胱肿瘤敏感的5-氟尿嘧啶(5-Fu)，所用的材料为脱乙酰度＞80％壳聚糖，药物与壳聚糖的比例为0.05～0.3∶1(w/w)。
3.根据权利要求书2，制备微球的方法为乳化固化法。制备W/O型乳剂的油相为环己烷、二氯甲烷、三氯甲烷、植物油；乳化剂为Span-80、Span-60、胆固醇；水相为2％的壳聚糖水溶液。所用的固化剂为浓度1-30％的氢氧化钠。
4.根据以上所有权利要求，本发明制备的载有抗癌药物的微球经分离以后，以混悬液剂型经膀胱灌注，通过载药微球在膀胱内壁粘附后缓慢释药来治疗膀胱癌。
全文摘要
本发明涉及到一种载有抗癌药物的微球，其模型药物是5氟尿嘧啶(5－Fu)，制备微球的材料是壳聚糖(Chitosan)。在制备这种载药微球时，利用壳聚糖仅在酸性环境下溶解、在中性和碱性环境不溶解和的特点，采用离子中和法用碱性溶液对壳聚糖的进行固化。这种固化方法用氢氧化钠等物质代替了目前广泛使用的固化剂戊二醛和甲醛，为微球的进一步纯化提供了方便。本发明制备的载药微球，可以通过膀胱内灌注的方式使微球粘附于膀胱壁，药物在肿瘤部位缓慢释放，从而可以达到治疗膀胱肿瘤的目的。
文档编号A61K47/36GK1621093SQ20031011526
公开日2005年6月1日 申请日期2003年11月27日 优先权日2003年11月27日
发明者李勇, 魏振平, 韩静 申请人:北京大学