专利名称：原苏木素b作为制备抗膀胱癌灌注液的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及原苏木素B的用途，具体是一种浓度为O. 2-2. 4%的原苏木素B溶液作为制备抗膀胱癌灌注液的应用。
背景技术：
苏木(Caesalpinia sappan Linn.),又名苏枋、芳方木、苏方,为小乔木,花期5-10月，果期7月至翌年3月。我国云南、贵州、四川、广西、广东、福建和台湾省都有栽培苏木，它原产印度、緬甸、越南、马来半岛及斯里兰卡。目前，从苏木中已分离到多种化学成分，根据成分的骨架类型，可将其分成5个部分苏木素类、原苏木素类、高异黄酮类、苏木查尔酮、以及苯丙素类。原苏木素类有原苏木素A、原苏木素B、10-0-甲基原苏木素B、异原苏木素BUO-O-甲基异原苏木素B、以及由苏木素类成分与原苏木素类成分聚合形成的原苏木素El和原苏木素E2 ;苏木中还分离到二苯类化合物苏枋木酚、云实品P、( ± )_南烛树脂醇；除以上化合物外，苏木中还含有丁香脂素以及谷留醇等60余种化合物。
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苏木总提取物具有动物体内抗肿瘤活性。任连生等用Iml含Ig原药材的苏木水剪液进行EAC、P388、和L1210荷瘤小鼠抑瘤实验，每日腹腔注射，连续7天，O. 2ml剂量组EAC、P388和L1210小鼠平均延长生存期分别为185%、107. 8%和117. 5% (任连生、徐建国、马俊英等在中国中药杂志上发表的苏木抗癌作用的研究，1990. 15(5) : 50-51 ;徐建国、马俊英、任连生等在中国中药杂志上发表的苏木煎液抗小鼠白血病作用的研究，1991. 16(5) :306)。原苏木素B可直接从市场中购得，为固态药物，其结构式如下
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国内关于原苏木素B的研究报导仅见于中药苏木质量标准建立时作为标准品的使用(中国中药杂志，2010. 35(16) :2068-2070);日本学者Sasaki Y等研究发现原苏木素B有抑制亚油酸氧化的作用(Biol Pharm Bull, 2007. 30 (I) : 193-196)；ffashiyama M 等报道了原苏木素B等苏木提取物具有良好的抗炎作用(Biol Pharm Bull 2009. 32 (5) : 941-944);目前国内外还没有对原苏木素B更多的研究报道出现
发明内容
本发明为了填补国内外对原苏木素B的研究空白，提供了原苏木素B的一种新用途，具体是浓度为O. 2-2. 4%的原苏木素B溶液作为制备抗膀胱癌灌注液的应用。本发明采用人膀胱癌细胞株T24、小鼠膀胱癌细胞株BTT进行实验，在两种细胞株中均加入原苏木素B并将两种细胞株中均加入水作为对照组；实验结果表明加入原苏木素B的人膀胱癌细胞株T24、小鼠膀胱癌细胞株BTT中的细胞20分钟内就接近全部死亡而对照组中的细胞数呈波动趋势，说明原苏木素B对膀胱癌细胞具有显著的杀伤作用。同时将人膀胱癌细胞株T24、小鼠膀胱癌细胞株BTT接种于小鼠体内形成膀胱癌，对小鼠分组后分别给予注射用水、丝裂霉素、原苏木素B进行实验；实验结果表明给予丝裂霉素、原苏木素B的小鼠生命延长，瘤重减小，具有抑瘤效果；说明原苏木素B有显著的抑制膀胱癌细胞作用，可广泛适用于制备抗膀胱癌灌注液中。
具体实施方式
实施例I :下面用原苏木素B对膀胱癌细胞的杀伤作用实验说明其在制药领域的新用途
I、实验细胞及药物
细胞株人膀胱癌细胞株T24，购自中科院上海生命科学研究院；小鼠膀胱癌细胞株BTT,山西医科大学第一附属医院泌尿外科杨晓峰主任惠赠；
原苏木素B :用注射用水配制成浓度为O. 4%的药液，高压灭菌；
台盼蓝染液。2.实验方法
(I)消化、收集细胞、1000rp/5min离心，人膀胱癌细胞株T24、小鼠膀胱癌细胞株BTT分别用注射用水调整细胞浓度为2X IO6 /ml。(2)原苏木素B组在离心管中加入T24细胞悬液500μ ，采用倍比稀释的方法向Τ24细胞悬液中加入500μ 原苏木素B溶液，使原苏木素B终浓度为O. 2% ;对照组在离心管中加入Τ24细胞悬液500μ 后加入500μ 注射用水。在37°C、5%C02条件下的培养箱中进行培养，O分钟作为基本对照；分别于药物作用20min、40min、60min、80min、IOOmin时，各组分别取ΙΟΟμΙ的细胞悬液，加等量的台盼蓝染色计数细胞，置100倍光学显微镜下计数4个大格内的细胞总数，分别计数活细胞(未着色的细胞)和死细胞(染成蓝黑色的细胞)数，按如下公式计算细胞死亡率细胞死亡率=死细胞数/ (死细胞数+活细胞数)X 100%。(3)采用上述方法观察原苏木素B对BTT细胞的杀伤作用。3.实验结果
如下表I所示，加入原苏木素B的膀胱癌细胞20分钟内就会接近全部死亡而对照组中的细胞数呈波动趋势；说明原苏木素B对膀胱癌细胞具有显著的杀伤作用。
权利要求
1.浓度为O. 2-2. 4%的原苏木素B溶液作为制备抗膀胱癌灌注液的应用。
全文摘要
本发明涉及原苏木素B的用途，具体是一种浓度为0.2-2.4%的原苏木素B溶液作为制备抗膀胱癌灌注液的应用。本发明为了填补国内外对原苏木素B的研究空白，提供了原苏木素B的一种新用途。本发明将人膀胱癌细胞株T24、小鼠膀胱癌细胞株BTT接种于小鼠体内形成膀胱癌，对小鼠分组后分别给予注射用水、丝裂霉素、原苏木素B进行实验；实验结果表明给予丝裂霉素、原苏木素B的小鼠生命延长，瘤重减小，具有抑瘤效果；说明原苏木素B有显著的抑制膀胱癌的作用，可广泛适用于制备抗膀胱癌灌注液。
文档编号A61K31/335GK102670578SQ201210189969
公开日2012年9月19日 申请日期2012年6月11日 优先权日2012年6月11日
发明者任连生, 杨喜花, 王国平, 王晋芬 申请人:山西省肿瘤医院