专利名称：青藤碱新用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及药物领域，更具体地涉及青藤碱及其药物组合物在制备治疗癌症恶病质的药物中的应用。
背景技术：
癌症恶病质(cachexia)是指中晚期癌症病人出现的食欲不振、极度消瘦、全身代谢改变及进行性体质消耗为特征的临床综合征。癌症一旦发展到恶病质，将使患者失去手术、放疗、化疗的机会，而且严重影响患者的生活质量及缩短患者的生存期，恶病质是肿瘤患者引起死亡的最常见的原因之一，在死亡的肿瘤病人中约占80％。
恶病质的发病机制尚未完全阐明，目前认为与代谢异常、宿主免疫系统产生的前炎症因子、循环中肿瘤组织产生的分解因子、摄食减少等有关。
青藤碱(sinomenine)是我国沿用已久的抗风湿中药，经国内外研究证明，青风藤中的青藤碱具有消炎镇痛、活血化瘀、增强免疫力、降低血沉(ESR)使类风湿因子(RF)阴转、改善功能障碍，并有延缓类风湿关节炎(RA)复发时间及减轻复发症状的作用[梅学仁.抗风灵(青藤碱)的研制与临床应用..中西医结合治疗风湿类疾病学.天津科技出版社；1989.p267-70.][史甫敏.青风藤总碱治疗类风湿性关节炎60例.新医学1986；17292-4.]，同时具有镇痛、降压、抗心率失常的药理作用，其用于制备治疗风湿及类风湿性关节炎、慢性肾炎、眼科免疫性疾病、治癌药剂已有报道，但该化合物在制备治疗癌症恶病质的药物中的应用未见报道。
鉴于目前临床上缺乏有效的治疗恶病质的药物，因此，本领域迫切需要开发新的可有效改善癌症恶病质的药物。
发明内容
本发明的目的就是提供一种有效改善癌症恶病质的药物，所述的药物还有青藤碱作为治疗癌症恶病质的主要活性成分。
在本发明的第一方面，提供了一种青藤碱及其药学上可接受的盐的用途，它被用于制备治疗癌症恶病质的药物。
在另一优选例中，所述药物的剂型是片剂、胶囊、可分散的粉末、颗粒剂、悬浮液、糖浆、酏剂，注射剂。
在另一优选例中，所述的药物以口服或静脉内方式给药。
在另一优选例中，所述药物以0.05-500mg/kg体重给药。
在另一优选例中，所述药物以0.1-100mg/kg体重给药。
在另一优选例中，所述药物以0.5-50mg/kg体重给药。
在另一优选例中，所述药物还含有选自下组的治疗剂TNFα、环磷酰胺。
在另一优选例中，所述药物中含有0.5-99.5wt％青藤碱或其药学上可接受的盐。
在本发明的第二方面，提供了青藤碱及其药学上可接受的盐的用途，它用于制备治疗癌症恶病质的保健品(或饮食补充剂)。
在另一优选例中，所述保健品(或饮食补充剂)中含有0.01-99wt％青藤碱或其药学上可接受的盐。
具体实施例方式
已有的大量文献报道，导致癌症恶病质的原因，长期以来大多认为是因肿瘤细胞过度分裂增殖，增加了对人体营养物质的过度消耗，但是强迫性营养摄入并不能逆转癌症恶病质状态。因此恶病质的机理较为复杂。本发明人结果研究发现，青藤碱可以治疗恶病质和改善癌症病人的生存质量。此外，动物试验表明，青藤碱可改善荷瘤小鼠癌症恶病质状态、恢复荷瘤小鼠血液生化指标和细胞因子改变、调节蛋白酶体和钙激活蛋白酶活性。
活性成分如本文所用，术语“本发明化合物”或“活性成分”指青藤碱。青藤碱可以是从中草药清风藤(防己科植物青藤和毛青藤的干燥藤茎)中提取的单体化合物，也可以是含青藤碱的提取物。青藤碱可以从天然植物中提取的青藤碱，也可以用化学合成的青藤碱。
本发明中所用青藤碱是由中药清风藤(防己科植物青藤和毛青藤的干燥藤茎)中提取，具体提取方法参见(中草药，2001，32(18)702；中医药信息，2002，19(5)55；中医研究，2002，15(6)25；中国药业，2003，454)。
本发明中所用的青藤碱可以以由药学上或生理学可接受的酸或碱衍生的盐形式使用。这些盐包括(但不限于)与如下无机酸形成的盐如盐酸、硫酸、硝酸、磷酸，以及与有机酸形成的盐，而有机酸则指乙酸、草酸、丁二酸和马来酸。其他盐包括与碱金属或碱土金属(如钠、钾、钙或镁)形成的盐，以及以酯、氨基甲酸酯或其他常规的“前体药物”的形式(当以这种形式给药时，在体内可转化成活性部分)。
药物组合物本发明还包括含有青藤碱及其药学上可接受的盐的药物组合物。本发明的青藤碱及其药物组合物可用于治疗癌症恶病质，即给哺乳动物施用安全有效量的青藤碱。
当青藤碱或其药学上可接受的盐用于治疗恶病质时，它可与一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂混合，如溶剂、稀释剂等，从而形成药物组合物。
液态载体包括无菌水、聚乙二醇、非离子型表面活性剂和食用油(如玉米油、花生油和芝麻油)，而固态载体包括淀粉、乳糖、磷酸氢钙、微晶纤维素、蔗糖和白陶土，只要适合活性成分的特性和所需的特定给药方式。在制备药物组合物中通常使用的佐剂也可有利地被包括，例如调味剂、色素、防腐剂和抗氧化剂如维生素E、维生素C、2，6-二叔丁基对甲酚(BHT)和叔丁基羟基茴香醚(BHA)。
通常，本发明的药物组合物包括以下剂型如下口服给药片剂、胶囊、可分散的粉末、颗粒或悬浮液(混悬剂)(含有如约0.05-5％悬浮剂(助溶剂))、糖浆(含有如约10-50％糖)、和酏剂(含有约20-50％乙醇)，或者以无菌可注射溶液或混悬剂形式(在等渗介质中含有约0.05-5％助溶剂)进行非肠胃给药。这些药物制剂通常可含有与载体混合的约0.5-99.5wt％，较佳地2.5-90wt％，更佳地5％-60wt％(重量)的活性成分(青藤碱或其药学上可接受的盐)，按组合物的总重量计。
本发明所用的青藤碱可通过静脉内、肌内或皮下以及口服途径给药。优选静脉给药方式。
本发明所用的青藤碱可肠胃外或腹腔内给药。也可在适当混合有表面活性剂(如羟丙基纤维素)的水中制备这些活性化合物(作为游离碱或药学上可接受的盐)的溶液或悬浮液。还可在甘油、液体、聚乙二醇及其在油中的混合物中制备分散液。在常规储存和使用条件下，这些制剂中含有防腐剂以防止微生物生长。
适应于注射的药物形式包括无菌水溶液或分散液和无菌粉(用于临时制备无菌注射溶液或分散液)。在所有情况中，这些形式必须是无菌的且必须是流体以易于注射器排出流体。在制造和储存条件下必须是稳定的，且必须能防止微生物(如细菌和真菌)的污染影响。载体可以是溶剂或分散介质，其中含有如水、醇(如甘油、丙二醇和液态聚乙二醇)、它们的适当混合物和植物油。
在使用本发明所述的青藤碱时，还可与其他肿瘤治疗手段(如放疗)或其他治疗剂(如TNFα等)联用。
所用的活性成分的有效剂量可随给药的模式和待治疗的疾病的严重程度而变化。然而，通常当本发明化合物每天以约0.05-500mg/kg动物体重(较佳地0.1-100mg/kg体重，更佳地0.5-50mg/kg体重给药)的剂量给予时，能得到令人满意的效果，较佳地每天以1-4次的剂量给予，或以缓释形式给药。对大部分大型哺乳动物而言，每天的总剂量约为1-1000mg或更高，较佳地5-500mg。适用于内服的剂量形式，包含与固态或液态药学上可接受的载体混合的约0.5-500mg的活性化合物。可调节此剂量方案以提供最佳治疗应答。例如，由治疗状况的迫切要求，可每天给予若干次分开的剂量，或将剂量按比例地减少。
从易于制备和给药的立场看，优选的药物组合物是液态组合物。青藤碱的静脉给药是优选的。
保健品或食品补充剂除了制备药物组合物用于治疗恶病质之外，在本发明中，还可将青藤碱或其药学上可接受的盐或提取物用于制备保健品或饮食补充剂(或食品添加剂)，从而用于预防恶病质或改善癌症病人生存质量。
所谓饮食补充剂(dietary supplement)是利用植物制成的制品，它也与化学药物一样经过严格的科学和临床研究，一般讲比较廉价、比较安全，治疗慢性病比西药更有效，而且在美国不需经FDA批准就能上市。
在本发明中，保健品和饮食补充剂可互换使用，它们含有安全有效量(如0.01-99wt％)的青藤碱或其药学上可接受的盐或提取物和药学上可接受(或保健品上可接受)的载体。
本发明的保健品或饮食补充剂可与药物组合物一样含有相同含量的青藤碱或其药学上可接受的盐或提取物。通常，保健品或饮食补充剂中青藤碱的含量(纯度)可略低一些，例如含0.01-50wt％青藤碱或其药学上可接受的盐。
本发明的保健品或饮食补充剂，可以通过常规方法制成任何常规的制剂形式，优选的是片剂、口服液、颗粒剂和胶囊制剂。
本发明的主要优点在于，(a)青藤碱对实验性癌症恶病质具有明显的治疗作用；(b)青藤碱是已知的，在中药上早已广泛使用的活性成分，因此安全性好。
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。
实施例1以B16黑色素瘤荷瘤小鼠恶病质模型研究青藤碱的抗癌症恶病质作用试验用小鼠黑色素瘤细胞系(B16)，购自中科院上海细胞所细胞库，L929细胞和B9.9细胞购自第二军医大学。
一、试验方法(1)小鼠恶病质模型及药物作用C57BL/6小鼠腹腔注射B16黑色素瘤细胞1.5×106，第二天起灌胃给予青藤碱(剂量为25，50或100mg/kg)，11天后，小鼠心脏取血，测定血液甘油三酯(TG)、非酯化脂肪酸(non-esterified fattyacid，NEFA)、葡萄糖和总胆固醇以及用ELISA法测定血清中TNF和IL-6水平；测定小鼠尸体干重、附睾脂肪全身脂肪和腓肠肌。同时测定小鼠每日食物和水摄入情况。
(2)腓肠肌中蛋白酶体和钙激活蛋白酶测定参照文献(Biochem J，1998；332315和EMBO J，1999；184988)方法通过酶切荧光底物Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-AMC(Sigma产品)和Suc-Leu-Tyr-AMC(Calbiochem产品)分别测定腓肠肌中蛋白酶体和钙激活蛋白酶活性。腓肠肌制成匀浆，离心，然后收集上清并用Lorry法测定蛋白浓度。酶反应系统为50μg蛋白与不同底物37℃孵育60分钟。荧光强度用荧光光度计测定(380nm/460nm激发/发射)。
(3)体外细胞因子的诱生和测定制备小鼠腹腔巨噬细胞，加入24孔板中，然后同时加入青藤碱和LPS(10μg/ml)共育24小时，收集细胞上清液，分别用小鼠胸腺细胞、B9.9细胞和L929细胞测定巨噬细胞释放的细胞因子IL-1，IL-6和TNF活性。
二、试验结果(1)青藤碱对B16荷瘤小鼠癌症恶病质的影响小鼠荷瘤10后，小鼠体重、腓肠肌、附睾脂肪和全身脂肪均显著减少，呈现恶病质状态。青藤碱可显著改善荷瘤小鼠腓肠肌、附睾脂肪和全身脂肪减少等恶病质状态(表1)。
表1青藤碱对B16荷瘤小鼠恶病质的影响
N＝10，##P＜0.01vs正常对照，*P＜0.05，**P＜0.01vs对照组。
(2)青藤碱对B16荷瘤小鼠生化指标和细胞因子的影响青藤碱可显著恢复荷瘤小鼠血液生化指标改变(表2)，同时降低荷瘤小鼠升高的TNF和IL-6细胞因子水平(表3)。
表2青藤碱对B16荷瘤小鼠血液参数的影响
N＝10，##P＜0.01vs 正常对照，*P＜0.05，**P＜0.01vs对照组。
表3青藤碱对B16荷瘤小鼠血清TNF和IL-6的影响
N＝10，*P＜0.05，**P＜0.01vs对照组。
(3)青藤碱对B16荷瘤小鼠腓肠肌中蛋白酶体和钙激活蛋白酶的影响呈恶病质状态的荷瘤小鼠腓肠肌蛋白酶体和钙激活蛋白酶活性显著增加。青藤碱能剂量依赖地抑制腓肠肌中升高的蛋白酶体和钙激活蛋白酶的活性(表4)。
表4腓肠肌中蛋白酶体和钙激活蛋白酶的活性
N＝10，##P＜0.01vs正常对照，*P＜0.05，**P＜0.01vs对照组。
(4)体外青藤碱对小鼠巨噬细胞产生细胞因子的影响青藤碱与小鼠腹腔巨噬细胞共育，能浓度依赖地抑制LPS诱导巨噬细胞释放炎症细胞因子IL-1，IL-6和TNF(表5)。
表5青藤碱对脂多糖诱导小鼠腹腔巨噬细胞释放IL-1、TNF和IL-6的影响
n＝3，x±s，*P＜0.05，**P＜0.01vs 0.
实施例2口服胶囊的制备按常规方法混合以下成分，制得口服胶囊口服胶囊配方20毫克青藤碱提取物冻干粉，180毫克可溶性淀粉。
将制备的口服胶囊给一个化疗的癌症病人(自愿者)服用，剂量为每日3次，每次一片，共30天。结果，病人的食欲得到改善，没有出现过分消瘦情况。
实施例3口服液的制备按常规方法混合以下成分，制得口服液口服液配方20毫克青藤碱，30毫克葡萄糖，50毫克牛磺酸，pH6.5，总体积10毫升。
将制备的口服液给一个放疗的癌症病人(自愿者)服用，剂量为每日3次，每次10毫升，共25天。结果，病人的食欲得到改善，没有出现过分消瘦情况。
在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
权利要求
1.青藤碱及其药学上可接受的盐的用途，其特征在于，用于制备治疗癌症恶病质的药物。
2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述药物的剂型是片剂、胶囊、可分散的粉末、颗粒剂、悬浮液、糖浆、酏剂，注射剂。
3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的药物以口服或静脉内方式给药。
4.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述药物以0.05-500mg/kg体重给药。
5.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述药物以0.1-100mg/kg体重给药。
6.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述药物以0.5-50mg/kg体重给药。
7.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述药物还含有选自下组的治疗剂TNFα、环磷酰胺。
8.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述药物中含有0.5-99.5wt％青藤碱或其药学上可接受的盐。
9.青藤碱及其药学上可接受的盐的用途，其特征在于，用于制备治疗癌症恶病质的保健品。
10.如权利要求9所述的用途，其特征在于，所述保健品中含有0.01-99wt％青藤碱或其药学上可接受的盐。
全文摘要
本发明提供了青藤碱及其药学上可接受的盐在治疗癌症恶病质方面的用途以及相应的用于治疗癌症恶病质的药物组合物。青藤碱可以是从中草药清风藤(防己科植物青藤和毛青藤的干燥藤茎)中提取的单体化合物，也可以是含青藤碱的提取物。用青藤碱制成的药物对实验性癌症恶病质具有明显的治疗作用。
文档编号A61K31/4748GK1679574SQ20041001744
公开日2005年10月12日 申请日期2004年4月5日 优先权日2004年4月5日
发明者游素芬, 戈萌 申请人:上海泉晟生物医药有限公司