专利名称：含有透明质酸和硫酸皮肤素的保健食品的制作方法
技术领域：
本发明涉及含有透明质酸和硫酸皮肤素的保健食品。
背景技术：
硫酸皮肤素是被称为硫酸软骨素B的分子量为2-40万的葡糖胺聚糖的一种。一般来说，硫酸皮肤素是以下述结构式1(化1)所示的L-艾杜糖醛酸和N-乙酰半乳糖胺-4-硫酸构成的二糖单元的重复成为主体，但是存在下列情况糖醛酸的一部分为L-艾杜糖醛酸硫酸或者D-葡糖醛酸的情况、或者当N-乙酰半乳糖胺-4-硫酸的一部分没有被硫酸化的情况，或者4，6-二硫酸化的情况。可以认为如果口服摄取硫酸皮肤素，硫酸皮肤素能够被体内吸收。
化1
透明质酸是具有下述结构式2(化2)所示的O-β-D-葡糖醛酰基(1→3)-N-乙酰基-β-D-葡糖胺基(1→4)单元的二糖重复结构的葡糖胺聚糖的一种，主要存在于动物的滑液或眼球玻璃体液、脐带、真皮表层等结缔组织等中。由于分子量在数十万～200万以上，因此，可以认为通过口服摄取，也不会被体内吸收。
化2
在生物体内，硫酸皮肤素与硫酸软骨素A及C一起与透明质酸结合。由于这些被称为葡糖胺聚糖的硫酸皮肤素、硫酸软骨素A以及C、透明质酸是阴离子性分子，因此当上述分子互相结合而形成高分子结构时，可以含有大量的水分子。因此，可以指出这些高分子化合物可以保持皮肤的水分，一旦口服摄取硫酸皮肤素或硫酸软骨素，它们就被体内吸收，并与体内的透明质酸结合，从而提高保持皮肤水分的效果。关于含有透明质酸的保健食品，已提出一些方案(专利文献1、2)，但是关于同时含有透明质酸和硫酸皮肤素的保健食品，还没有相关申请。
专利文献1特开2002-360292号公报专利文献2特开平9-98739号公报发明内容当口服摄取透明质酸时，只有低分子量(分子量5万-10万以下)的透明质酸才能在体内被吸收，但是，可以认为口服的透明质酸能吸引多种多样的分子，这些分子对促进小肠内的吸收起了一定作用。特别是在体内，能够加速与透明质酸结合的硫酸皮肤素或硫酸软骨素A及C在体内的吸收。
本发明人根据上述考察，制造至少含有透明质酸和硫酸皮肤素的保健食品，并对其效果进行检验，发现在皮肤的水份保持、皮肤的柔软性、肌质、健康的改善方面具有优异的效果，从而完成本发明。
本发明的课题是提供含有透明质酸和硫酸皮肤素的保健食品。
技术方案1所述的发明涉及一种保健食品，其至少含有透明质酸和硫酸皮肤素。
技术方案2所述的发明涉及美化肌肤和便秘症改善剂，其至少含有透明质酸和硫酸皮肤素。
技术方案3所述的发明涉及技术方案2所述的美化肌肤和便秘症改善剂，其中，上述透明质酸和上述硫酸皮肤素的混合比例为1∶0.001～200。
技术方案4所述的发明涉及美化肌肤和脱发抑制剂，其至少含有透明质酸和硫酸皮肤素。
技术方案5所述的发明涉及技术方案4所述的美化肌肤和脱发抑制剂，其中，上述透明质酸和上述硫酸皮肤素的混合比例为1∶0.001～200。
技术方案6所述的发明涉及保健食品，其含有技术方案2或3所述的美化肌肤和便秘症改善剂。
技术方案7所述的发明涉及保健食品，其含有技术方案4或5所述的美化肌肤和脱发抑制剂。
技术方案8所述的发明涉及技术方案1、6或7中任一项所述的保健食品，其含有硫酸软骨素A和/或硫酸软骨素C。
技术方案9所述的发明涉及技术方案1、6～8中任一项所述的保健食品，其含有肽。
含有透明质酸和硫酸皮肤素的本发明的保健食品可以同时食用透明质酸和硫酸皮肤素。此外，在含有透明质酸和硫酸皮肤素的本发明的保健食品中所含的透明质酸，可以加速在小肠中硫酸皮肤素的吸收，能够提高吸收效率。此外，还具有下列效果使皮肤年龄变年轻的效果、提高皮肤柔软性的效果、提高皮肤保湿性的效果、提高皮肤新陈代谢的效果、降低紫外线对皮肤损伤的效果、消除皮肤的暗淡、减少脸上的斑点的效果、改良化妆品的附着性的效果、减少细小皱纹的效果、在眼睛周围展现神采的效果、消除疹的效果、展现全身润泽的效果、改善指甲颜色的效果、治疗干燥肌肤的效果、治疗嘴唇破裂的效果、改善红色脸的效果、改善肩酸的效果、减少产生宿醉的次数，即使产生宿醉，也可以提早恢复的效果、治疗怕冷症的效果、使伤口提前愈合的效果、使指甲坚硬的效果、改善腰痛的效果、减少健忘的效果、改善朦胧眼的效果、改善关节疼痛的效果、改善生殖器官衰老症的效果、改善生理疼痛的效果、使脚跟角蛋白柔软的效果、疲劳恢复的效果、恢复青春的效果、治疗便秘的效果、减少脱发的效果。
图1是显示实验例2的结果的显微镜照片，添加1.4mg/ml含有透明质酸和硫酸皮肤素的物质的表皮细胞的显微镜照片。
图2是显示实验例2的结果的显微镜照片，添加0.8mg/ml含有透明质酸和硫酸皮肤酸的物质的表层细胞的显微镜照片。
图3是显示实验例2的结果的显微镜照片，添加0.5mg/ml含有透明质酸和硫酸皮肤酸的物质的表层细胞的显微镜照片。
图4是显示实验例2的结果的显微镜照片，添加0.25mg/ml含有透明质酸和硫酸皮肤酸的物质的表层细胞的显微镜照片。
图5是显示实验例2的结果的显微镜照片，添加0.125mg/ml含有透明质酸和硫酸皮肤酸的物质的表层细胞的显微镜照片。
图6是显示实验例2的结果的显微镜照片，添加0.0625mg/ml含有透明质酸和硫酸皮肤酸的物质的表层细胞的显微镜照片。
图7是显示实验例2的结果的显微镜照片，完全不添加含有透明质酸和硫酸皮肤酸的物质的表层细胞的显微镜照片。
图8是紫外线曝光表皮的剖面照片。
图9是紫外线曝光表皮的剖面照片。
图10是表皮的剖面照片。
具体实施例方式
含有透明质酸和硫酸皮肤素的本发明的保健食品作为必需成分包含透明质酸和硫酸皮肤素。
硫酸皮肤素是被称为硫酸软骨素B的分子量为2-40万的葡糖胺聚糖的一种。一般来说，硫酸皮肤素是以下述结构式3(化3)所示的L-艾杜糖醛酸和N-乙酰半乳糖胺-4-硫酸构成的二糖单元的重复成为主体，但存在下列情况糖醛酸的一部分为L-艾杜糖醛酸硫酸或者D-葡糖醛酸的情况、或者N-乙酰半乳糖胺-4-硫酸的一部分没有被硫酸化的情况、或者4，6-二硫酸化的情况。可知如果口服摄取硫酸皮肤素，则能够被体内吸收。
化3
透明质酸是具有下述结构式4(化4)所示的O-β-D-葡糖醛酰基(1→3)-N-乙酰基-β-D-葡糖胺基(1→4)单元的二糖重复结构的葡糖胺聚糖的一种，主要存在于动物的滑液或者眼球玻璃体液、脐带、真皮表层等结缔组织等中。由于分子量在数十万～200万以上，因此可知通过口服摄取，也不会被体内吸收。
化4
本发明中所使用的透明质酸和硫酸皮肤素可以是合成品，或者也可以是半合成品，还可以是从鸟类、鱼类、哺乳类等提取的天然物质提取物。而且，所谓合成品，是指通过化学合成而制造的物质，所谓半合成品是指对化学合成品或者天然物质提取物进行进一步合成而获得的物质。当透明质酸和硫酸皮肤素为天然物质提取物时，对于提取源没有特别限制，但优选与人类相同的哺乳类，在哺乳类中，更优选源于被认为与人类的组织相容性高的猪(Sus类)的动物。而且，作为猪的品种，可以列举杜洛克种(Duroc)、巴克夏种(Berkshire)、汉普夏种(Hampshire)、兰德瑞斯类(Landrace)、大约克夏种(LargeYorkshire，Large White)、中约克夏种(Middle Yorkshire，Middle White)等以及上述这些的杂交种类等。
透明质酸和硫酸皮肤素的混合比例没有特别限制，以重量比计，相对1份透明质酸，硫酸皮肤素优选为0.001-200，更优选为0.005-100。需要上述范围内的混合比例的原因，可以认为是，如果透明质酸和硫酸皮肤素的混合比例差别太大，硫酸皮肤素就不会被有效地吸收。此外，根据不同的人，会发生过敏反应，在皮肤上会出现疹。
除了作为必需成分的透明质酸和硫酸皮肤素以外，还可以向含有透明质酸和硫酸皮肤素的本发明的保健食品中添加硫酸软骨素A、硫酸软骨素C、肽。通过添加硫酸软骨素A、硫酸软骨素C，含有透明质酸和硫酸皮肤素的本发明的保健食品所有的皮肤的水分保持、皮肤的柔软性、肌质、健康改善的效果得到成倍提高。此外，通过添加肽，可以成倍地提高皮肤组织恢复青春的效果。
硫酸软骨素A是被称为4-硫酸软骨素的葡糖胺聚糖，是指大多在4位具有硫酸基的硫酸软骨素。其分子量为数千～数万，根据动物种类·龄期·组织的种类或部位，链的长度或细微结构存在各种变化。
硫酸软骨素C是被称为6-硫酸软骨素的葡糖胺聚糖，是指大多在6位具有硫酸基的硫酸软骨素。分子量与硫酸软骨素B相同。
向含有透明质酸和硫酸皮肤素的本发明的保健品中添加的硫酸软骨素A和/或者C，没有特别限制，其提取源优选是与人类相同的哺乳类，在哺乳中，更优选源于被认为与人类的组织相容性高的猪(Sus类)的动物。
硫酸软骨素A和/或硫酸软骨素C的混合量没有特别限制，相对1重量份的透明质酸，优选添加0.001～100左右，更优选添加0.01～50左右，进一步优选添加0.05～20左右。其理由可以认为是如果透明质酸和硫酸软骨素A和/或硫酸软骨素C的混合比例差别太大，硫酸软骨素A和/或硫酸软骨素C就不会被有效地吸收。此外，根据不同的人，会发生过敏反应，在皮肤上会出现疹。
向含有透明质酸和硫酸皮肤素的本发明的保健食品中添加的肽的种类，没有特别限制，最好是氨基酸的键数为50000以下的肽，优选键数为5～5000的肽、更优选键数为5～500的肽，进一步优选键数5～50的肽。这是因为如果氨基酸的键数太多，唯恐不会被体内吸收，如果氨基酸的键数越少，就越容易被体内吸收。
对于肽的提取源没有特别限制，优选为与人相同的哺乳动物，在哺乳动物中，更优选源于被认为与人类的组织相容性高的猪的动物。或者，通过化学合成，合成与人类的组织亲和性高的肽，或者具有特别效果的肽，并含有该肽即可。
对于添加的肽的量没有特别限制，相对1重量份的透明质酸，优选添加0.0001～200重量份左右，更优选添加0.001～100重量份左右，进一步优选添加0.01-50重量份左右。其理由可以认为是如果透明质酸和肽的混合比例差别太大，肽就不会被有效地吸收。此外，根据不同的人，会发生过敏反应，在皮肤上会出现疹。
向含有透明质酸和硫酸皮肤素的本发明的保健食品中添加的透明质酸、硫酸皮肤素、硫酸软骨素A以及C可以分别源自不同的生物，经过合成得到也可以，但是，优选源自相同的哺乳类，其中，更优选起源于被认为与人类的组织相容性高的猪(Sus类)的动物。其理由是因为源自相同生物的透明质酸、硫酸皮肤素、硫酸软骨素A以及C的分子间的亲和性高，借助于透明质酸的硫酸皮肤素、硫酸软骨素A以及C的吸收率高。
向含有透明质酸和硫酸皮肤素的本发明的保健食品中，除了添加作为必需成分的透明质酸和硫酸皮肤素或者作为追加成分的硫酸软骨素A、硫酸软骨素C、胎之外，还可以添加通常在保健食品中加入的成分。作为可以添加的成分的粒子，可以列举各种维生素类、胶原、蜂胶、蜂乳、纤维、糖类、柠檬酸、植物提取物、香料、食品防腐剂等。
含有透明质酸和硫酸皮肤素的本发明的保健品的形式，没有特别地限制，例如，可以列举粉末、颗粒、胶囊、片剂、液体等。此外，还可以使上述保健成分包含在甜点、饼干、橡皮糖、糖果、面类、饮料等以增进健康为目的的食品中。
在含有透明质酸和硫酸皮肤素的本发明的保健食品总量中所占的透明质酸、硫酸皮肤素以及其他添加物的比例，没有特别的限制，但占保健食品总重量的0.0001～90重量％，优选为0.001～80重量％，更优选为0.01～70重量％。而且，在实际保健食品的总重量中所占的比例，根据食品的形式而不同，但如果含量低于0.0001重量％，不能获得本发明的效果，如果大于90重量％，以上那些效果不理想，因此，不优选。
以下，根据实验例，对含有透明质酸和硫酸皮肤素的保健食品所具有的效果进行解释。
含有透明质酸和硫酸皮肤素的保健食品的有用性评价实验在平成15年8月1日～平成15年10月1日的2个月期间(从夏天的湿润期到秋天的干燥期)，以40-50周岁的40名女性为对象，进行含有透明质酸和硫酸皮肤素的保健食品的服用实验。接受试验者不摄取其他保健食品，并以感觉到“肌肤发暗”、“出现小皱纹”、“皮肤干枯”、“脚后跟的角质层厚”等不适的人为对象。
实验用的保健食品是片剂，使受验者在每天睡觉之前服用3片300mg的片剂。而且，在300mg片剂中，分别包含5mg透明质酸内含物和5mg硫酸皮肤素内含物。
实验例1皮肤水份量以及皮肤柔软性评价使用株式会社タニタ生产的皮肤状态检查工具(商品名ピエラ)，测定受验者的面颊和嘴边缘部分的皮肤水份量。所谓皮肤水份量，通常是指表现出“润泽”的角质层中的水份含量，所谓皮肤柔软性，通常是指表现出“具有活力”的皮肤的柔韧度。
本实验中使用的皮肤状态检查工具事先将性别、年龄、是否化妆等数据记忆在检查工具内的存储器中，根据由上述信息和检查器具前端的触觉传感器获得的信息，显示出皮肤水份量、皮肤柔软性以及皮脂量的曲线图和肌肤年龄。而且，关于皮脂量，将其看作与本发明的保健食品无关的要素，从结果中将其排除。记录结果时，读取皮肤水份量和皮肤柔软性曲线图的高度和肌肤年龄，并记录数值。测定是在摄取含有透明质酸和硫酸皮肤素的保健食品前和开始摄取1个月后以及2个月后进行。
将摄取保健食品前的记录数值和开始摄取1个月后的记录数值进行比较，并将摄取保健食品前的记录数值和开始摄取2个月后的记录数值进行比较，关于肌肤年龄，将肌肤年龄比实际年龄年轻的人数作为“测定值得到改善的人数”、将大于实际年龄的人数作为“测定值变差的人数”、将与实际年龄相同的人作为“测定值没有变化的人数”，并将面颊的测定结果示于表1，将嘴边缘部位的测定结果示于表2。
关于皮肤柔软性和皮肤水份量，将数值增加的人数作为“测定值得到改善的人数”、将数值降低的人数作为“测定值变差的人数”、降数值没有变化的人数作为“测定值没有变化的人数”，并将面颊的测定结果示于表1，将嘴边缘部位的结果示于表2。
而且，当用于本实验的皮肤状态检查工具显示出皮肤水含量和/或皮肤柔软性为异常值时，由于不能进行测定，因此，在摄取保健食品前的测定中，存在不能记录测定值得情况。在摄取保健食品前的测定中不能进行测定，而在1个月后以及2个月后可以获得测定值的情况，可以看作皮肤状态得到了改善。
表1
表2
从表1以及表2所示的结果可以知道，关于面颊，在开始1个月后，在肌肤年龄、柔软性、水份含量中的任一测定值上，改善的人数占一半以上。在开始2个月后，95％的受验者的肌肤年龄的测定值得到改善，90％的受验者的柔软性测定值得到改善，97.5％的受验者的水份含量测定值获得改善。
同样，关于嘴边缘部位，在开始1个月后，在肌肤年龄、柔软性、水份含量中的任一测定值上，改善的人数占一半以上。在开始2个月后，92.5％的受验者的肌肤年龄的测定值得到改善，85％的受验者的柔软性测定值得到改善，97.5％的受验者的水份含量测定值获得改善。
像这样，当使透明质酸和硫酸皮肤素组合时，可以使肌肤年龄变年轻，可以提高皮肤的柔软性，可以提高皮肤的水份含量。此外，从这些数据可以知道，如果使透明质酸和硫酸皮肤素组合，还能发挥皮肤回春剂、皮肤组织柔软化剂和皮肤保湿剂的作用。
实验例2小鼠表皮细胞培养实验切下约1cm2出生后1天左右的昆明种小鼠的表皮组织，用蛋白质分解酶使细胞分离。使用无菌滴管，吸取过滤后的组织液，以1,000rpm的速度进行10分钟的离心分离。
除去上层清夜，收集沉淀物用MEM培养液(含有20％Fes)，使用1％胎盘液进行观察。从表皮细胞生长率达到98％开始，进行以下实验。
(实验)向培养瓶中加入0.2ml的细胞液，添加10ml的MEM培养液后，在5％CO2、37℃的条件下开始进行培养。向该培养瓶中，分别添加含有透明质酸和硫酸皮肤素的物质，并使该物质浓度为1.4mg/ml、0.8mg/ml、0.5mg/ml、0.25mg/ml、0.125mg/ml、0.0625mg/ml、0mg/ml，在7天期间内，观测细胞的生长状况。结果示于表3。
另外，拍摄经过7天培养后的表皮细胞的显微镜照片。图1表示添加1.4mg/ml含有透明质酸和硫酸皮肤素的物质的表皮细胞的显微镜照片，图2表示添加0.8mg/ml上述物质的表层细胞的显微镜照片、图3表示添加0.5mg/ml上述物质的表层细胞的显微镜照片、图4表示添加0.25mg/ml上述物质的表层细胞的显微镜照片、图5表示添加0.125mg/ml上述物质的表层细胞的显微镜照片、图6表示添加0.0625mg/ml上述物质的表层细胞的显微镜照片、图7表示添加0mg/ml上述物质的表层细胞的显微镜照片。
表3
从表3以及图1～7所示的结果可以知道，如果使透明质酸和硫酸皮肤素组合，存在细胞生长率提高的趋势。含有透明质酸和硫酸皮肤素的物质的浓度越高，细胞生长率就越好。从这些结果可以知道，如果使透明质酸和硫酸皮肤素组合，可以提高皮肤的新陈代谢，如果使透明质酸和硫酸皮肤素组合，还可以起到新陈代谢促进剂的功能。
实验例3紫外线照射实验剃去4只昆明种小鼠(2只雄，2只雌)的背部的毛，形成紫外线曝露表皮。每天照射30W的紫外线，一天照射7～17个小时，将小鼠分成雄、雌1对2组，向1对小鼠，每日、每1kg体重投入1920mg的含有透明质酸和硫酸皮肤素的物质。照射7天紫外线后，拍摄紫外线曝露表皮的剖面照片。结果示于图8～10。
图8是没有投入含有透明质酸和硫酸皮肤素的物质的1对小鼠的紫外线曝露表皮的剖面照片。该对小鼠的表皮增生，可以发现由基本物质不足而引起角质层脱落，毛的新生能力丧失，皮肤干燥。
图9是投入含有透明质酸和硫酸皮肤素的物质的1对小鼠的紫外线曝露表皮的剖面照片。投入了含有透明质酸和硫酸皮肤素的物质的1对小鼠，其真皮和皮下组织增加，基础物质被供应至新生毛囊，与没有照射紫外线的情况(图10)相近。
如上所述，含有透明质酸和硫酸皮肤素的本发明的保健食品，具有减轻紫外线对皮肤的损伤的效果。此外，可以知道，通过使透明质酸和硫酸皮肤素组合，还可以起到降低紫外线损害皮肤剂的作用。
关于含有透明质酸和硫酸皮肤素的健康食品的监控调查对20位男性、80名女性进行监控调查，结果汇总于表4。
表4
从表4可以知道，含有透明质酸和硫酸皮肤素的本发明的保健食品具有下列效果消除皮肤暗淡的效果、减少脸上斑点的效果、改良化妆品的附着性的效果、减少细小皱纹的效果、在眼睛周围展现神采的效果、消除疹的效果、展现全身润泽的效果、改善指甲颜色的效果、治疗干燥肌肤的效果、治疗嘴唇破裂的效果、改善红色脸庞的效果、改善肩酸的效果、减少产生宿醉的次数，即使产生宿醉，也可以提早恢复的效果、治疗怕冷症的效果、使伤口提前愈合的效果、使指甲坚硬的效果、改善腰痛的效果、减少健忘的效果、改善朦胧眼的效果、改善关节疼痛的效果、改善生殖器官衰老症的效果、改善生理疼痛的效果、使脚跟角蛋白柔软的效果、疲劳恢复的效果、恢复青春的效果、治疗便秘的效果、减少脱发的效果。此外，从这些结果可以知道，当使透明质酸和硫酸皮肤素组合物时，还可以起到便秘症改善剂或者脱发抑制剂的作用。
表5是对回答提问“是否具有美容效果”、“是否对健康有益”的人数进行汇总的表格。
表5
从表5可以知道，关于美容效果，76人对效果持肯定态度，作为用户的真实感觉，表明含有透明质酸和硫酸皮肤素的本发明的保健食品具有优异效果。
权利要求
1.一种保健食品，其特征在于，至少含有透明质酸和硫酸皮肤素。
2.一种美化肌肤和便秘症改善剂，其特征在于，至少含有透明质酸和硫酸皮肤素。
3.如权利要求2所述的美化肌肤和便秘症改善剂，其特征在于，上述透明质酸和上述硫酸皮肤素的混合比例为1∶0.001～200。
4.一种美化肌肤和脱发抑制剂，其特征在于，至少含有透明质酸和硫酸皮肤素。
5.如权利要求4所述的美化肌肤和脱发抑制剂，其特征在于，上述透明质酸和上述硫酸皮肤素的混合比例为1∶0.001～200。
6.一种保健食品，其特征在于，含有权利要求2或3所述的美化肌肤和便秘症改善剂。
7.一种保健食品，其特征在于，含有权利要求4或5所述的美化肌肤和脱发抑制剂。
8.如权利要求1、6或7中任意一项所述的保健食品，其特征在于，含有硫酸软骨素A和/或硫酸软骨素C。
9.如权利要求1、6至8中任意一项所述的保健食品，其特征在于，含有肽。
全文摘要
本发明的课题是提供含有透明质酸和硫酸皮肤素的保健食品、提供可同时食用透明质酸和硫酸皮肤素的保健食品。本发明所述保健食品，其含有透明质酸和硫酸皮肤素。在含有透明质酸和硫酸皮肤素的保健食品中所含的透明质酸可以加速硫酸皮肤素在小肠中的吸收，可以提高吸收效率。此外，具有使皮肤年龄变年轻的效果、提高皮肤柔软性的效果、提高皮肤保湿性的效果、提高皮肤新陈代谢的效果、降低紫外线对皮肤的损伤的效果等。
文档编号A61P25/28GK1608513SQ200410086930
公开日2005年4月27日 申请日期2004年10月20日 优先权日2003年10月20日
发明者新井义实 申请人:美莱丝株式会社