一种主治肝胆系统疾病的药用组合物及其制剂和用途的制作方法

专利名称：一种主治肝胆系统疾病的药用组合物及其制剂和用途的制作方法
技术领域：
本发明属于中药研制领域，涉及一种主治肝胆系统疾病的药用组合物及其制剂，具体涉及一种由中药材金钱草、龙胆和茵陈提取物组合而成的药用组合物及其制备方法和其制剂，还涉及了该药用组合物及其制剂在预防和治疗胆石症、胆囊炎、肝炎等肝胆系统疾病方面的医药用途。
背景技术：
胆石症、胆囊炎系胆道系统急、慢性炎症与胆结石病变之总称，胆石症与胆囊炎常同时并存，互为因果，互相影响。胆结石也称胆石病，系指因胆汁郁积、胆道感染及胆固醇代谢失调等多种因素作用而在胆道系统内形成结石的病变。胆石症的临床表现取决于胆石发生的部位，有原发于胆囊、胆总管和肝内胆管，也有同时发生在胆囊与胆管，或同时发生在胆总管和肝胆管。不同部位的胆石，其成分也不完全相同，例如因代谢失调而形成的结石多为胆固醇结石，其好发部位多在胆囊内；因胆道感染、寄生虫致胆道发生炎症而形成的结石多为胆色素结石，其好发部位多在肝胆管内。少数胆石症患者手术治疗后仍有症状如腹痛、腹泻、便秘、食欲不振、体重减轻、暖气、黄疸等，有人称之为“胆道术后综合征”，其病因主要是由于残留结石、复发结石、逆流性胆管炎、肠粘连或胆管狭窄等原因所致，此类病人约占胆道手术病人的20％～30％。急性胆囊炎是一种非特异性病症，多发生于有结石的胆囊，也可继发于胆管结石和胆道蛔虫等疾病。慢性胆囊炎多为急性胆囊炎的后遗症，也有人认为急性胆囊炎是慢性胆囊炎的急性发作，胆石是慢性胆囊炎最常见的病因，胆囊炎并发胆囊结石者占65～75％。胆石症是引起胆道炎症的主要原因之一，而胆道炎症时，炎性渗出物、胆汁化学成分的改变等因素，均可促使胆石的形成或增大，两者相互影响，互为因果。另外，胆石症还容易引起其他并发症，如阻塞性黄疸、急性胰腺炎等。胆石症在我国自然人群的发病率为1％～10％，故本病是我国常见多发病之一，本病极少发生于小儿，其发病年龄以20～45岁最为多见，男女皆可发病，女性多于男性，男女比例大约在1∶3～1∶4。
西医在治疗上主要运用抗生素类药物，并合用镇痛药(阿托品)及利胆药(硫酸镁、去胆酸片)，并认为胆囊切除术是急性胆囊炎最有效的根治方法。但目前有报告认为切除胆囊后，胆汁直接进入肠道，引起肠粘膜病理变化，从而导致肠癌的发病率增多。术后有可能发生肠粘连，胆道狭窄和消化机能障碍，这种潜在危险使得许多患者对手术治疗忧心忡忡。还有相当一部分患者，由于体质、年龄等原因无法进行手术治疗。在传统医学中，胆石症、胆囊炎属“胁痛、黄疸、肝胀、胆胀、腹痛”等范畴，临床治疗上以疏肝利胆，和降通腑为主要原则，调节人体内环境，改善患者代谢状况。中药治疗胆石症、胆囊炎，在改善其症状和治疗并发症方面有明显优势，而且无明显的毒副作用，不易产生耐药性，使患者避免了手术治疗带来的危险和痛苦。

发明内容
本发明提供了一种由中药材金钱草、龙胆和茵陈的提取物组合而成的药用组合物，该组合物具有保肝利胆、排石退黄、抗炎镇痛等药理作用，可以用于制备预防和治疗胆石症、胆囊炎、肝炎等肝胆系统疾病的药物或保健食品/保健食品添加剂中的应用。
本发明还提供了该药用组合物的制备方法及其药学上可以接受的各种制剂。
金钱草首载于《百草镜》，名“神仙对坐草”，为报春花科植物过路黄(Lysimachiachristinae Hance)的全草。金钱草是中医用于治疗结石类疾病的传统中药，味甘、苦，性凉，具有清热利湿、化砂石、理气通淋的作用，主治肝胆、泌尿系结石，热淋、湿热黄疸等疾病。《四川中药志》(1982年版)云“清热利尿，清肺止咳，消水肿。治肾结石，胆结石，膀胱结石，跌打损伤及疟疾。”本发明中使用的是过路黄的全草，并将其粉碎以便于提取。
龙胆首载于《本经》，列为上品，为龙胆科植物条叶龙胆、三花龙胆、龙胆和滇龙胆的根和根茎。味苦性寒，归肝、胆经，具有清热燥湿，泻肝定惊之功效，其主要成分为龙胆苦苷、当药苦苷和当药苷等在内的龙胆总苷，具有利胆、抗炎、抗过敏等多种作用。本发明中将龙胆粉碎，便于提取。
茵陈(Artemisia capillaris Thunb)，为菊科植物，首载于《本经》，列为上品。茵陈作为利胆之佳品，为临床所常用，性微寒，味苦、辛，有清热利湿，利胆的功效，主要用于黄疸尿少，湿疮瘙痒等，是临床上常用的保肝利胆中药。《衷中参西录》云“茵陈，善清肝胆之热，兼理肝胆之邪，热消郁开，胆汁入小肠之路毫无阻隔也。”《名医别录》谓其利小便，除头热，亦清肝胆之功效也。本发明中所用的是植物茵陈的地上部分，在使用时可以将其粉碎以便于提取。
金钱草提取物是指从金钱草原药材中提取获得以金钱草黄酮类物质为主的提取物，并且其中总黄酮含量在10～90％。金钱草总黄酮在内的药用活性成分能够明显促进胆汁分泌，胆管内胆汁增多，内压增高，奥狄氏括约肌松弛并排出胆汁。由于利胆作用，使胆管泥沙状结石易于排出，胆管堵塞和疼痛减轻，黄疸消退。
龙胆提取物是指从龙胆原药材中提取的以龙胆总苷为主要药用组份的提取物，其中含有龙胆苦苷、当药苦苷、当药苷等在内，总苷含量在10～90％。龙胆总苷具有明显的利胆、抗炎、镇痛、抗过敏作用。
茵陈提取物是指从茵陈原药材中提取获得的以香豆素类物质为主的提取物，主要包括6，7-二甲氧基香豆素、6-羟基-7-甲氧基香豆素以及茵陈色原酮等，其中香豆素类物质含量在10～90％。茵陈香豆素类物质在内的茵陈提取物能够明显增加胆酸、胆固醇等脂类成分的分泌量，使胆汁流量增加，扩张胆管，收缩胆囊，加速胆汁排泄。
药用组合物是指从金钱草、龙胆和茵陈三味原药材中提取的以金钱草总黄酮、龙胆总苷和茵陈香豆素类物质为主要药用组份的组合物；也可以是上述所含有效成分的盐、衍生物、衍生物的盐以及合成或半合成的具有药用活性的物质的组合物，该组合物具有保肝利胆、排石退黄、抗炎镇痛等药理作用，可以用于胆石症，急、慢性胆囊炎，胆管炎，胆道术后综合症，阻塞性黄疸，急、慢性肝炎、黄疸性肝炎等肝胆系统疾病的预防和治疗的药物中的应用。
本发明提供的具有保肝利胆、排石退黄、抗炎镇痛等功能的药用组合物是中药材金钱草、龙胆和茵陈提取物的组合物，其中金钱草提取物主要包括金钱草总黄酮，其含量在10～90％，龙胆提取物主要为龙胆总苷，含量在10～90％，茵陈提取物主要包括茵陈香豆素，其含量在10～90％；该药用组合物也可以是金钱草总黄酮、龙胆总苷、茵陈香豆素的有效成分的药学上可以接受的各种盐、衍生物、衍生物的盐以及人工合成或半合成产品的组合物。
本发明提供的药用组合物可以是通过对中药材金钱草、龙胆和茵陈进行清洗、粉碎、溶媒提取、萃取和/或上大孔吸附树脂柱分离、精制、干燥、合并等工艺制备而成的金钱草提取物、龙胆提取物和茵陈提取物组合而成，也可以是金钱草黄酮类物质、龙胆总苷、茵陈香豆素类物质所含的有效成分的药学上可以接受的各种盐、衍生物、盐的衍生物以及其合成、半合成活性成分的组合物。本发明的中所用药材的用量范围是金钱草30～100份，龙胆20～80份，茵陈20～80份；优选用量范围为金钱草40～80份，龙胆30～60份，茵陈30～60份。
本发明的药用组合物可以是通过对中药材金钱草、龙胆和茵陈按照下所述的制备工艺制备、合并组合而成(1)金钱草提取物的制备方法①金钱草全草清洗、烘干后粉碎，加入3～6倍量石油醚回流脱脂2～3次，每次回流时间1～2小时，脱脂后将药材挥干石油醚；②脱脂后的药材中加入4～10倍量65～90％乙醇回流提取2～3次，每次提取时间1～3小时，过滤，合并提取液，减压浓缩至膏状；③浓缩膏加水溶解，加入4～8倍量萃取剂萃取2～3次，静置，分离萃取液层，浓缩回收萃取剂，干燥提取物，研磨成粉即得。
(2)龙胆提取物的制备方法①将龙胆药材清洗，粉碎，加入4～10倍量60～90％乙醇回流提取2～3次，每次提取时间1～3小时，过滤，合并提取液，减压浓缩至膏状；②浓缩膏加水溶解，加入4～6倍量萃取剂萃取2～3次，静置，分离萃取液层，浓缩回收萃取剂，干燥提取物，研磨成粉即得。
(3)茵陈提取物的制备方法①将茵陈原药材清洗、烘干后粉碎，加入4～10倍量水煎煮提取2～3次，每次煎煮时间1～2小时，合并水提液，浓缩至相对密度1.05～1.25；②将浓缩物上大孔吸附树脂柱，用水洗脱至无色，然后以50％～90％的乙醇洗脱，合并洗脱液，浓缩，回收乙醇；
③将浓缩后的提取物放在真空下干燥，研磨成粉即得。
将(1)、(2)和(3)提取所得的药用组分合并即得药用组合物。
本发明优选使用的是以主要含有金钱草总黄酮、龙胆总苷和茵陈香豆素的提取物，其中活性成分的含量在10％～90％。
本发明的药用组合物可以和生理学上可以接受的药用赋形剂如填充剂、崩解剂、黏合剂等制备成适宜的药物制剂。药物剂型主要为口服制剂，包括片剂如普通片、缓释片、控释片、口腔崩解片等以及硬胶囊剂、软胶囊剂、颗粒剂、丸剂、口服液等，也可以制作成胃肠外给药用剂型，如注射剂、注射用冻干粉针剂或注射用粉针剂等。本发明的制剂每一单位所含药用成分为1mg～1000mg，可以按需给药。医生可以根据疾病的严重程度、接受治疗的患者的体重、给药频率、给药途径以及疗程和患者的个体差异性调整剂量，灵活改变。
本发明所用的药物制剂可以按照已知的方法、与一种或多种可药用的载体或稀释剂等一起配制。该制剂可以是口服、非肠道、直肠、鼻内给药的形式，也可以制成气雾剂、吸入剂等给药的形式。
口服给药的固体药物制剂可以是片剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、滴丸、颗粒剂、散剂、丸剂等。可以按照它们的常规制备方法制备而成，在制备的过程中使用可以药用的辅料。例如，在片剂或胶囊剂的制备过程中可以使用填充剂(例如淀粉、糊精、蔗糖、乳糖、硫酸钙、碳酸钙、微精纤维素等)、黏合剂(如甲基纤维素、乙基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基淀粉钠、明胶、玉米淀粉等)、崩解剂(如干燥淀粉、交联羧甲基淀粉钠、羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素等)、润滑剂(如硬脂酸镁、硬脂酸、微粉硅胶、聚乙二醇、滑石粉等)。片剂还可以按照目前已知的方法包衣。颗粒剂还需要选用相应的矫味剂(如蔗糖、枸橼糖浆等)。软胶囊剂的制备中所用的稀释剂包括但不限于植物油、矿物油、丙二醇、吐温、聚乙二醇(PEG)(200～8000)中的一种或几种。助悬剂包括但不限于纤维素类如羟甲基纤维素钠、羟乙纤维素、乙基纤维素、羟乙基甲基纤维素、羟丙纤维素、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素等；胶树类如阿拉伯胶等；其他如卡波姆、聚乙烯醇类等中的一种或几种。乳化剂包括但不限于硬脂酸钠、油酸钠、司盘类(20～80)、吐温类(20～80)、单硬脂酸甘油酯、羟化卵磷脂、二乙酰单甘油酯、二乙二醇硬脂酸酯、三羟基甲烷、乙二醇单硬脂酸酯、蜂蜡中的一种或几种。所用防腐剂包括但不限于山梨酸甲酯、苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸甲酯、尼泊尔金甲酯、尼泊尔金乙酯、苯甲醇中的一种或几种。滴丸剂的制备中，基质包括但不限于聚乙二醇(PEG)6000、聚乙二醇(PEG)4000、聚乙二醇(PEG)1000、聚乙二醇(PEG)1500、硬脂酸钠、甘油明胶、硬脂酸、泊洛沙姆等；冷凝液包括但不限于二甲基硅油、液体石蜡、植物油等。
口服液体制剂可以是合剂(口服液)、糖浆剂、乳剂、混悬剂、酏剂或悬浮液，还可以是在其使用前用水或者其他合适的载体冲调服用的干燥产品。这些液体制剂可以按照本身已知的方法制备，在制备的过程中可以使用药用添加剂，如悬浮剂(如纤维素衍生物、葡萄糖/蔗糖糖浆、山梨醇糖浆等)、乳化剂(如阿拉伯胶、大豆磷脂、卵磷脂、明胶、吐温类等)、助悬剂(如甘油、单糖浆、单硬脂酸铝植物油、胶体硫酸镁铝等)、防腐剂(如苯甲酸、羟基苯甲酸甲酯、羟基苯甲酸丙酯、山梨酸等)。根据需要还可以加入矫味物质、芬香成分、甜味剂等。
非肠道给药制剂可以制备成注射液、优选静脉内、皮下、肌内注射液。可以是以安瓿形式，也可以加入防腐剂制备成输液形式。该制剂可以是水性或油性载体中的溶液、悬浮液或者是乳液形式，还可以加入适宜的悬浮剂、稳定剂、分散剂或者是调节渗透压的试剂等。另外，活性成分可以制成固体无菌粉末，在使用之前用适宜的载体配制溶解。
本发明还可以制备成直肠给药制剂栓剂等。栓剂的基质可以选择WitepsolH、S和E，以及聚乙二醇、甘油明胶、吐温61、泊洛沙姆等。也可以制备成适宜的气雾剂、喷雾剂、滴剂等制剂。
本发明的组合物还可以用于制备保健食品添加剂和/或保健食品，可以制备成保健食品的各种剂型，例如片剂、胶囊剂、口服液、保健饮料、保健茶等；也可以作为食品添加剂，应用于食物(如面包、面条等)、保健茶、保健饮料等。
和现有技术相比，总体来说本发明具有以下特点第一，从药物配伍方面来说，本发明是在中医理论的指导下，对大量复方、临床经验方进行筛选、优化组合，最终确定由三味中药进行配伍，方中选用金钱草清热解毒、理气排石，龙胆清热利湿，茵陈利胆，所用药物既保留了传统中医药对胆结石、胆囊炎、肝炎等肝胆系统疾病的治疗特色，又避免了大复方入药昧数繁多的不足之处，充分体现了现代中药科学合理的配伍和作用相辅相成的特点；第二，本发明采用现代中药的提取工艺将三味中药材分别提取精制，除去了药材中无用的杂质，使得药用成分富集，含量较高，可以通过现代分析方法对药物的主要成分进行可靠的定性定量研究，控制其含量，从而更好的控制药物质量，避免了目前中药复方制剂科技含量较低，有效成分含量低或不明确，质量难以控制等不足；第三，本发明所用的三味中药材是从传统中药材中筛选、优选出来的功效显著的药材的优化组合，三味中药材互补互促、协同增效，充分发挥了其保肝利胆、排石退黄、抗炎镇痛等功效，既避免了单味药材入药疗效单一的不足，同时还保留了三味中药材自身所具有的治疗功效，能够有效的预防和治疗胆石症、胆囊炎及其并发症等胆道系统疾病，达到了标本兼治的目的。
本发明的组合物在保肝利胆、排石退黄、抗炎镇痛等方面有显著疗效，主要可以作为治疗和预防包括胆石症，急、慢性胆囊炎，胆管炎，胆道术后综合症，阻塞性黄疸，急、慢性肝炎，黄疸性肝炎等肝胆系统疾病的预防和治疗的药物中的应用；也可以用于制备具有预防和保健功能的保健食品中的应用，还可以根据需要和要求作为食品添加剂制作成胆石症、胆囊炎、肝炎患者的专用食品或代用食品。


图1是实施例1的提取工艺流程图；图2是实施例2的提取工艺流程图；图3是实施例3的提取工艺流程图；图4，5是治疗胆结石的药理实验结果；图6是对大鼠胆汁分泌的影响的实验结果；图7是对D-氨基半乳糖胺所致肝损伤大鼠SGPT的影响的实验结果；图8是对D-氨基半乳糖胺所致肝损伤大鼠SGOT的影响的实验结果；图9是对小鼠耳廓肿胀作用的药理实验结果；图10是对对醋酸所致小鼠毛细血管通透性增高的药理实验结果；图11是对小鼠的镇痛作用的药理实验结果；图12是对角叉菜胶致大鼠发热作用的药理实验结果。
以下通过实施例对本发明作进一步说明，但并不仅限于此。
具体实施例实施例1 金钱草提取物的制备工艺取40kg金钱草全草清洗、烘干后粉碎，加入5倍量石油醚回流脱脂3次，每次回流时间1.5小时，脱脂后将药材挥干石油醚；在脱脂后的药材中加入8倍量70％乙醇回流提取3次，每次提取时间为2小时，过滤，将三次乙醇提取液合并，浓缩至膏状，回收乙醇；在浓缩物加水溶解，加入6倍量乙酸乙酯进行萃取，反复萃取3次，然后将萃取液浓缩回收乙酸乙酯，将浓缩后的提取物在60℃下真空干燥，研磨成粉即得。其制备工艺流程详见说明书附图1。
实施例2 龙胆提取物的制备工艺取30kg龙胆清洗、烘干后粉碎，加入10倍量75％乙醇回流提取3次，每次提取时间为2小时，过滤，将三次乙醇提取液合并，浓缩至膏状，回收乙醇；在浓缩物加水溶解，加入6倍量乙酸乙酯进行萃取，反复萃取3次，然后将萃取液浓缩回收乙酸乙酯，将浓缩后的提取物在60℃下真空干燥，研磨成粉即得。其制备工艺流程详见说明书附图2。
实施例3 茵陈香豆素的提取工艺将20kg茵陈原药材清洗、烘干后粉碎，分别加入10、8、6倍量水煎煮3次，提取时间分别为2小时、1.5小时和1小时，合并三次水提液，减压浓缩至相对密度1.10，将浓缩液上大孔吸附树脂柱(D101型)，用水洗脱至无色，然后分别以50％、80％、90％浓度的乙醇洗脱，合并洗脱液，浓缩，回收乙醇， 将浓缩后的提取物放在60℃下真空干燥，研磨成粉即得。
其制备工艺流程详见说明书附图3。
实施例4 口服片剂药用组合物 0.05～0.40克/片硬脂酸镁 0.1～0.3毫克/片羧甲基淀粉钠 4～12毫克/片微晶纤维素 50～100毫克/片将药用组合物与羧甲基淀粉钠、微晶纤维素混合，过筛，使其混匀，加入适量的水或适宜浓度的乙醇制粒，干燥后，整粒，加入适量的硬脂酸镁，然后用适当直径的冲压装置将颗粒压片。
实施例5 硬胶囊剂药用组合物 0.05～0.40克/粒羧甲基淀粉钠4～12毫克/粒硬脂酸镁0.1～0.3毫克/粒淀粉50～100毫克/粒将药用组合物过筛，与羧甲基淀粉钠、淀粉混合，过筛，加入适量的水或适宜浓度的乙醇制粒，干燥后，整粒，加入适量的硬脂酸镁，用合适的装置将该混合物装入硬明胶胶囊中。通过改变净重，以及按照需要改变胶囊的大小可以制备不同的胶囊。
实施例6 颗粒剂药用组合物 2～20克/袋糊精2～10克蔗糖2～15克矫味剂 适量甜味剂 适量将药用组合物和蔗糖、糊精、矫味剂、甜味剂混合均匀，加入适量的水或适宜浓度的乙醇制粒，干燥后，整粒，分装。
实施例7 软胶囊剂药用组合物 0.05～0.40克/粒稀释剂 300～450毫克/粒助悬剂 5～7.5毫克/粒乳化剂 5～7.5毫克/粒水 60～90毫克/粒每粒囊壳的组份和含量如下明胶100～150毫克甘油30～50毫克水 100～150毫克防腐剂 适量将明胶置于胶罐中，加入可溶解明胶量的纯化水，胶罐温度适宜，溶化后，加入甘油、防腐剂，搅拌均匀，抽真空脱气后保温静置；按比例将药用组合物与稀释剂、乳化剂、助悬剂混合均匀，将内容物和制备好的明胶置旋转压囊机，压制成软胶囊，定型、干燥即可。可以按照不同需要，改变内容物制备成不同规格的软胶囊。
实施例8 滴丸药用组合物 2～20毫克/粒基质 40～80毫克冷凝液 甲基硅油(适量)在药用组合物中加水制成均匀糊状，再加入熔融的基质液，加热熔融成澄清液体，倒入已预热的滴丸器中，控制滴制温度和滴速，滴入冷凝液中，成丸后吸干冷凝液，收集滴丸，置干燥器内即得。
实施例9 糖浆剂药用组合物 20～100毫克羟丙基甲基纤维素 适量缓冲剂 适量防腐剂 适量甜味剂 适量着色剂 适量纯化水至 10～100毫升将羟丙基甲基纤维素分散在热水中，冷却，然后与药用组合物和制剂中其他成分的含水悬浮液混合。将所得溶液调制需要体积并混合均匀，灭菌后分装。
实施例10 注射剂药用组合物 5～100毫克/单位注射用0.9％氯化钠溶液至5～10毫升将药用组合物溶解于注射用氯化钠溶液中，将溶液调至所需要的体积，调节pH值，灌装后在高温下加热灭菌。
实施例11 舌下片药用组合物 0.05～0.40克/片可压蔗糖 40～80毫克/片硬脂酸镁 0.1～0.3毫克/片将药用组合物经合适的筛过筛后与其他成分混合均匀，并用适当的冲压装置压片。可以通过改变活性成分与载体的比例或者通过改变压缩重量而制备成不同强度的片剂。
实施例12 直肠给药的栓剂药用组合物 0.05～0.40克/片Witepsol H15 0.5～2克制备药用组合物在熔融Witepsol H15中的悬浮液，并且适当的装置将其装入1克栓剂模中。
下面用药理实验结果阐明其药效作用一、对胆石症的治疗作用实验方法选用健康豚鼠60只，雌雄各半，体重300～400g，随机分成4组正常对照组，模型对照组，给药I组，给药II组，每组15只。除正常对照组外，其余各组豚鼠均皮下注射盐酸洁霉素60mg/(kg×d)，连续7d。在注射当日同时灌胃给药。喂养6周后，禁食24h(不禁水)，处死，迅速剖开胸腹，用血管钳阻断胆囊管，取下胆囊，肉眼观察胆囊外形、成石情况，并用注射器吸出全部胆汁，收集各组动物胆石，进行检测。
检测指标成石情况肉眼观察各组豚鼠的胆囊及肝外胆管内有结石颗粒或色素沉淀物，即可判定成石，记录成石数量，计算成石率。
胆汁分析测量胆汁中游离的胆红素(DBil)，胆汁酸(TBA)，钙(Ca)，总胆固醇(TC)含量。
实验结果豚鼠一般情况模型对照组造模后形体消瘦，营养状况较差，实验过程中死亡2只，给药组豚鼠状态明显好于模型组。各组成石情况空白对照组无一只成石，模型对照组成石率为84.6％(11/13)，提示采用皮下注射盐酸洁霉素可以诱发豚鼠胆囊结石。本品两个剂量组的成石率分别为46.7％(7/15)和33.3％(5/15)，两组与模型对照组成石率相比均有显著性差异(P＜0.05)。胆汁测定结果模型对照组的总胆汁酸明显低于正常组，而总胆固醇、胆红素和钙离子的含量均高于正常组。给药组各项指标与模型组比较有明显的差异。本品高剂量组的各项指标水平已接近正常组。
上述结果表明本品通过改善胆汁生化成分，促进胆固醇溶解，降低胆红素和钙离子含量，从而减少了结石形成的机率。提示本品能防止胆石症的发生，预防和治疗胆结石。(实验数据详见说明书附图4，5)注*P＜0.05，**P＜0.01与模型对照组比较；ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01与正常组对照组比较。
二、对大鼠胆汁分泌的影响实验方法取雄性Wistar大鼠40只，按体重随机分为4组(生理盐水组、给药I组、给药II组、去氢胆酸组)，实验时以戊巴比妥钠60mg/kg腹腔注射麻醉后，仰位固定于大鼠鼠板上，沿腹正中线切开约2cm，打开腹腔，翻转十二指肠，在胆管下穿两根丝线，结扎乳头部，向肝脏方向作一“V”形切口，插入塑料管，结扎固定塑料管，以小烧杯收集胆汁，手术后用止血钳夹闭腹壁，盐水纱布覆盖。稳定25min后，先收集30min的胆汁，然后给药组大鼠通过十二指肠给予药液，阴性对照组给以等容量的生理盐水，给药后每隔30min收集一次，共三次，记录胆汁流量，计算给药后胆汁流量增加百分率。实验结果以x±sd表示。
实验结果与生理盐水组相比，本品可显著增加胆汁流量，提示本品有很好的利胆作用。
实验结果详见图6，注与生理盐水组比较**P＜0.01。
三、对D-氨基半乳糖胺所致肝损伤大鼠SGPT及SGOT的影响实验方法取体重在250～300g的Wistar近交系大鼠80只，雌雄兼用，随机分为4组(阴性对照组、给药I组、给药II组、护肝片组)，给药组一天一次连续给药3天，阴性对照组给以等容积生理盐水，实验前禁食，第四天腹腔注射GalN600mg/kg，于注射GalN后的48小时、120小时、672小时，分别随机抽取各组1/3动物，心脏取血，分离血清在自动生化分析仪上测定SGPT和SGOT。实验结果以x±sd表不。
实验结果本品可显著降低D-氨基半乳糖胺所致肝损伤大鼠模型的SGPT、SGOT水平，提示本品有较明显的保肝、降酶的作用。
对肝损伤大鼠SGPT活性(u/100ml)的影响的实验结果详见图7，注与生理盐水组比较*P＜0.05，**P＜0.01。
对肝损伤大鼠SGOT活性(u/100ml)的影响的实验结果详见图8，注与生理盐水组比较*P＜0.05，**P＜0.01。
四、抗炎作用1、对小鼠耳廓肿胀的影响实验方法取昆明种小鼠40只，随机分为4组，包括空白对照组(等量生理盐水)、给药I组(0.1g/kg)、给药II组(0.2g/kg)、阿司匹林组(0.2g/kg)。各组均灌胃给药，灌胃容量20mg/kg。给药1h后，各组小鼠分别于左侧耳壳正反面均匀涂二甲苯50ul/只，1h后处死动物，沿耳廓基线剪下两耳，于同一部位用打孔器冲下耳片称重，以两片耳重量之差为肿胀度，计算肿胀抑制率，进行组间比较。
实验结果本品能够明显抑制二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀，肿胀抑制率分别为22.2％和43.8％。提示本品具有显著的抗炎效果。实验数据详见说明书附图9。
2、对醋酸(HAc)所致小鼠毛细血管通透性增高的影响实验方法取昆明种小鼠40只，随机分为4组，包括空白对照组(等量生理盐水)，给药I组(0.1g/kg)，给药II组(0.2g/kg)，阿司匹林组(0.2g/kg)。各组均灌胃给药，灌胃容量20mg/kg。给药1h后，各组小鼠均iv0.5％伊文思蓝生理盐水溶液，0.1ml/10g体重，随即ip0.6％的HAc0.2ml/只，20min后脱颈椎处死，剪开腹部皮肤肌肉，用6mlNS洗涤腹腔，吸出洗涤液，加NS至10ml，3000r/min×15min离心，取上清液于590nm处测定吸收度值(OD)，进行组间比较。
实验结果本品能显著抑制醋酸引起的小鼠毛细血管通透性增高，与空白对照组比较有显著性差异(P＜0.05，P＜0.01)。提示本品对于急性炎症期血管通透性增高有一定的抑制作用。实验数据详见说明书附图10。
五、镇痛作用(热板法)实验方法取昆明种小鼠，雌性，18～22g。每次一只放在热板上(55±0.5℃)，记录各小鼠的痛阈值(自放在热板上至出现舔后足所需的时间)，凡舔后足时间＜5s或＞30s或跳跃者弃去。选取筛选合格的小鼠40只，随机分为4组，包括空白对照组(等量生理盐水)，给药I组(0.1g/kg)，给药II组(0.2g/kg)，阿司匹林组(0.2g/kg)。重复测各鼠的痛阈值，取两次痛阈平均值为该小鼠给药前痛阈值。各组小鼠均灌胃(20ml/kg)，于给药后15、30、60、90分钟分别测小鼠痛阈值，如60s无反应，取出以60s计，观察镇痛效果，并进行给药前后比较。
实验结果本品两个剂量组分别与给药前比较，均能延长小鼠的痛阈，提示本品具有良好的镇痛效果。实验数据详见说明书附图11，注*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001与空白组比较。
六、解热作用(对角叉菜胶致大鼠发热的影响)实验方法取Wistar大鼠40只，雌雄各半，测正常肛温2次，取平均值为正常体温，将大鼠随机分为4组，包括空白对照组(等量生理盐水)，给药I组(0.05g/kg)，给药II组(0.1g/kg)，阿司匹林组(0.1g/kg)。各组大鼠灌胃给药(10ml/kg)同时于大鼠后脚两足趾皮下各注射1％角叉菜胶悬液0.1ml。于致热后每隔1h测肛温一次，共测6次，观察体温变化情况。
实验结果本品可显著降低角叉菜胶致大鼠发热，显示具有较好的解热作用。实验数据详见说明书附图12，注*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001与空白组比较。
权利要求
1.一种主治肝胆系统疾病的药用组合物，其特征在于该药用组合物是通过对中药材金钱草、龙胆和茵陈进行清洗、粉碎、溶媒提取、萃取和/或上大孔吸附树脂柱分离、精制、干燥、合并等工艺制备而成的药用提取物组合而成的，其中所用药材的用量比例范围是金钱草30～100份龙胆 20～80份茵陈 20～80份。
2.根据权利要求1所述的药用组合物，其特征在于所述的药用组合物是按照以下的制备方法制备而成的(1)金钱草提取物的制备方法金钱草全草清洗、烘干后粉碎，加入3～6倍量石油醚回流脱脂后，加入4～10倍量65～90％乙醇回流提取2～3次，每次提取时间1～3小时，过滤，合并提取液，浓缩至膏状；加水溶解后，加入4～8倍量萃取剂萃取2～3次，静置，分离萃取液层，浓缩回收萃取剂，干燥，研磨成粉即得提取物。(2)龙胆提取物的制备方法将龙胆药材清洗，粉碎，加入4～10倍量60～90％乙醇回流提取2～3次，每次提取时间1～3小时，过滤，合并提取液，减压浓缩至膏状；浓缩膏加水溶解，加入4～6倍量萃取剂萃取2～3次，静置，分离萃取液层，浓缩回收萃取剂，干燥提取物，研磨成粉即得。(3)茵陈提取物的制备方法将茵陈原药材清洗、烘干后粉碎，加入4～10倍量水煎煮提取2～3次，每次煎煮时间1～2小时，合并水提液，浓缩至相对密度1.05～1.25；将浓缩物上大孔吸附树脂柱，洗脱精制，浓缩洗脱液，提取物干燥，研磨成粉即得。将(1)、(2)和(3)提取所得的药用组分合并即得药用组合物。
3.根据权利要求1或2所述的药用组合物，其特征在于所述的金钱草提取物中金钱草总黄酮的含量在10％～90％，龙胆提取物中龙胆总苷的含量在10％～90％，茵陈提取物中茵陈香豆素的含量在10％～90％。
4.一种含有权利要求1所述的药用组合物，其特征在于该药用组合物还可以是金钱草总黄酮、龙胆总苷、茵陈香豆素中所含的有效成分的各种盐、衍生物、衍生物的盐以及人工合成或半合成产品的组合物。
5.一种含有权利要求1所述的药用组合物的制剂，其特征在于所述的制剂可以是口服制剂，包括片剂如普通片、控释片、缓释片、口腔崩解片等以及硬胶囊剂、软胶囊剂、滴丸、丸剂、颗粒剂、口服液等，也可以是胃肠外给药用剂型如注射剂、粉针剂、冻干粉针剂等，还可以是吸入剂、气雾剂或栓剂形式。
6.根据权利要求5所述的药用组合物的制剂，其特征在于所述的制剂优选各种片剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、滴丸、颗粒剂、丸剂、口服液等在内的口服制剂。
7.根据权利要求5或6所述的药用组合物的制剂，其特征在于，所述的药物制剂中还含有药学上可以接受的药用辅料，所述的药用组合物在药物制剂中的单位含量在0.1mg～1000mg。
8.一种含有权利要求1所述的药用组合物及其制剂的用途，其特征在于在该药用组合物具有保肝利胆、排石退黄、抗炎镇痛等功能，可以用于制备预防和治疗肝胆系统疾病的药物或保健食品/食品添加剂中的用途。
9.根据权利要求8所述的药用组合物及其制剂用途，其特征在于用于制备预防和治疗胆石症，急、慢性胆囊炎，胆管炎，胆道术后综合症，阻塞性黄疸，急、慢性肝炎等肝胆系统疾病的药物中的应用。
全文摘要
本发明提供了一种主治胆石症、胆囊炎等症的药用组合物，它是由金钱草、龙胆和茵陈三味药材的提取物组成，方中金钱草清热解毒、理气排石，龙胆清热利湿，茵陈利胆退黄，三药配伍具有保肝利胆、排石退黄、抗炎镇痛等多种功效，可期待用于制备治疗胆石症、胆囊炎等胆道系统疾病的药物中的应用。同时本发明还提供了该药用组合物的制备方法和其药学上可以接受的药物制剂。
文档编号A61P1/16GK1951422SQ20051009490
公开日2007年4月25日 申请日期2005年10月20日 优先权日2005年10月20日
发明者史美耿, 阮锦满, 姚小燕, 石海云, 彭青 申请人:南京宇道科技开发有限公司