专利名称：：波棱酮的医药用途的制作方法
技术领域：
：本发明涉及化合物波棱酮的医药用途，属于化学药物领域。
背景技术：
：波棱瓜子系葫芦科植物波棱瓜丑e/pW仍;;eivw"/Mcflrf/germWall.的干燥成熟种子，是一种常用藏药，已被《中华人民共和国卫生部药品标准》藏药(第一册)收载。波棱瓜子味苦，性寒，能清腑热，胆热，具有清热解毒、去火降热、助消化作用，用于治疗肝热、黄疸型传染型肝炎等。对波棱瓜子化学成分的研究有，国外KaouadjiMourad等人研究报道其中含有苯呋喃类化合物波棱醛(Herpetal)，波棱醇(Herpetoriol);木脂素类化合物木脂素二聚物(Herpetol)，木脂素三聚物(Herpetrione),木脂素四聚物(Herpetetradione，Herpetetrone)，木脂素五聚物(Herpepentol)等。国内袁海龙等从波棱瓜子中分离得波棱素，张梅等从波棱瓜子中分离得波棱酮，去氢双松柏醇藏药波棱瓜子中一个新的倍半降木脂素.药学学报(ActaPha腦ceuticaSinica).2006，41(7):659-661。目前尚未见波棱酮的医药用途的报道。
发明内容本发明的目的在于提供波棱酮在制备抗肝损伤、抗肝癌等药物中的用途。尤其是在制备治疗化学物质导致的肝损伤药物中的用途。本发明还提供了一种抗肝损伤或抗肝癌的药物，其特征在于它是由波棱酮为活性成分加上药学上可接受的辅料制备而成的制剂。本发明从波棱瓜子的乙酸乙酯提取物中分离得到了波棱酮，根据化合物的理化性质和光谱数据进行结构鉴定。通过体外细胞试验，研究波棱酮对二甲基亚砜(DMSO)和四氯化碳(CCl4)引起的肝细胞损伤的保护作用。结果显示，受试药物波棱酮对DMSO和CCl4所造成的肝损伤有细胞保护作用，细胞存活率和造模空白组有显著性差异。具体实施例方式实施例1波棱酮的制备取波棱瓜子干燥粉碎样品10kg，用石油醚脱脂后，再用95V。乙醇于水浴中加热回流提取(3xlOL)，每次2小时，减压蒸馏除去乙醇得流浸膏约614g。将此流浸膏加适量石英沙拌匀后，置于索氏提取器中，依次用石油醚(沸程609(TC)、氯仿、乙酸乙酯、95。/。乙醇加热提取，提取液减压回收后得氯仿提取物27g，乙酸乙酯提取物32g,乙醇提取物195g。取乙酸乙酯提取物20g经硅胶柱层析，氯仿-甲醇梯度洗脱。氯仿-甲醇(99:1)洗脱部分再经硅胶柱层析，石油醚-丙酮(1:1)洗脱部分经过重结晶得波棱酮。分子式C29H3()09，分子量为522;淡黄色针晶，紫外光下观察无荧光，mpl36.5138°C;EI-MSm/z:522(6.8)，504(2.4)，151(100)，137(5.8)，28(33.5);高分辨质i普(HRESI-MS)m/z:545.1794(M+Na+，计算值545.1782);UV(CH3OH)lmaxnm:226，278，308;IR(KBr)vcm3367(OH)，1669(C=0),1601-1428(ArC=C)，1277(Ar-OH),1027-1335(C-O)，872-708(Ar-C);^NMR(600MHz,DMSO)Sppm:9.98(IH，s,4-OH),8.93(IH，s,4'隱OH)，8,69(1H，s，4'-OH)，7.59(1H，dd，J=8.2，1.8Hz，H-6)，7.51(IH，d，J=1.8Hz，H2)，6.88(1H，d，J=1.6Hz，H-2〃)，6.85(IH，d，J=8.2Hz，H-5)，6.82(IH，d,J=1.5Hz，H-2')，6.75(IH，dd，J=8.2，1.6Hz，H-6')，6.72(1H，d，J=8.2，H-5〃)，6.71(1H，d，J=1.6Hz，H-6')，4.60(IH，d，J=4.4Hz，H扁7')，4.58(1H，d,J=4.4Hz，H-7')，4.16(2H,s，H-8)，4.10(2H,m,H-9'aandH-9'a)，3.81and3.80(each3H，s，3-OCH3and3'-OCH3),3.76(3H，s，3-OCH3)，3.70(2H,m，H-9'bandH-9'b)，3.02(2H，m，H-8'andH-8');l3CNMR(150MHz,DMSO)Sppm:196.1(C-7)，152.0(C-4),147.98(C-3〃)，147.87(C-3),147.79(C-3),146.4(C-4')，143.8(C-4')，132.7(C-l')，131.9(C-l')，128.8(C-l)，123.5(C-6)，122.8(C-5),121.0(C-6')，119.0(C-6')，115.6(C-5〃)，115.4(C-5)，112.0(C-2)，110.9(C-2)，108.8(C-2')，85.65and85.60(C-7'andC-7〃)，71.40and71.33(C-9'andC-9'),56,3(3-OCH3)，56.1(3-OCH3and3〃-OCH3),54.1(C-8'andC-8〃)，39.9(C同8)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>实施例2波棱酮对DMS0损伤大鼠肝细胞的保护作用采用体外培养法得到肝实质细胞。将肝实质细胞用DMEM分散，细胞计数不得少于2xl0S个/ml，细胞活力大于90%。将分散的细胞加入96孔板，每空80|li1。实验共设置3组，除空白对照组外，包括造模组和给药组每空加入终浓度为8mmol/L的DMSO，造肝细胞损伤模型；给药组加入波棱酮，浓度为0.6mg/ml，放入二氧化碳孵箱中孵化24h。将细胞于37°C，5%C02孵箱培养24小时后，加入MTT50nK0.25毫克/ml),37°C，5%002孵箱培养分别于4小时，吸净培养液后再加入DMSO150ftl中止反应，充分震荡后用酶标仪测定OD值。并根据OD值计算细胞存活率。细胞存活率=药物处理细胞ODl/药物未处理细胞[ODxl00y。。表1波棱酮对DMSO损伤肝细胞存活率的影响组别均值±标准差P值存活率(100%)空白对照组0.203±0.01▲100造模空白组0.006±0.01★3.0波棱酮0.189±0.07★▲93.1与空白对照组比较，"女"表示p〈0.01;和造模空白组比较，"A"表示p《0.01。实验结果表明，波棱酮能明显提高DMSO损伤肝细胞存活率。实施例3波棱酮对CCL损伤大鼠肝细胞的保护作用采用体外培养法得到肝实质细胞。将肝实质细胞用DMEM分散，细胞计数不得少于2xl()s个/ml，细胞活力大于卯％。将分散的细胞加入96孔板，每空80^1。实验共设置6组，除空白对照组外，包括造模组和给药组每空加入终浓度为8mmol/L的CC14，造肝细胞损伤模型；给药组加入波棱酮，浓度为0.5mg/ml、0.25mg/ml、0.125mg/ml、0.0625mg/ml，放入二氧化碳孵箱中孵化24h。将细胞于37°C，5。/oC02孵箱培养24小时后，加入MTT50jiK0.25毫克/ml)，37°C，5。/。C02孵箱培养分别于4小时，吸净培养液后再加入DMSO中止反应，充分震荡后用酶标仪测定OD值。并根据OD值计算细胞存活率。细胞存活率=药物处理细胞[ODj/药物未处理细胞[OD]xi00。/。。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>与空白对照组比较，"女"表示pO.01;和造模空白组比较，"A"表示p〈0.01.实验结果表明，波棱酮能明显提高CCl4损伤肝细胞存活率。总之，本发明首次报道波棱酮在制备抗肝损伤、抗肝癌等药物中的用途，尤其是在制备治疗化学物质导致的肝损伤药物中的用途。为临床治疗肝损伤、肝癌提供了一种新的选择。权利要求1、波棱酮在制备抗肝损伤或抗肝癌的药物中的用途。2、根据权利要求1所述的用途，其特征在于所述用途是波棱酮在制备治疗化学物质导致的肝损伤药物中的用途。3、抗肝损伤或抗肝癌的药物，其特征在于它是由波棱酮为活性成分加上药学上可接受的辅料制备而成的制剂。全文摘要本发明涉及化合物波棱酮的医药用途，首次公开了波棱酮在制备抗肝损伤、抗肝癌等药物中的用途，尤其是在制备治疗化学物质导致的肝损伤药物中的用途。本发明还提供了以波棱酮为活性成分的治疗肝损伤、抗肝癌的药物。为临床治疗肝损伤、肝癌提供了一种新的选择。文档编号A61P1/00GK101313901SQ20071004920公开日2008年12月3日申请日期2007年5月29日优先权日2007年5月29日发明者梅张,张洪彬,董小萍,陈思敏,陈胡兰申请人:成都中医药大学