专利名称：一种含薤白的治疗血管内皮功能障碍的药物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及到一种含薤白的治疗血管内皮功能障碍的药物及其制备方 法，属于中草药制剂技术领域。
背景技术：
内皮功能障碍是动脉粥样硬化的始动因素并贯穿病变全过程，高同型半 胱氨酸血症是内皮功能障碍的独立危险因素[梁俊清，吴以岭，赵韶华，等. 通心络超微粉对同型半胱氨酸致血管损伤的干预作用.络病学基础与临床研
究(2),中国科学技术出版社，202 205]。
内皮依赖性舒张反应的降低或消失是国际公认的评价血管内皮功能障 碍白勺金标准[Verdejo Paris丄Endothelial function[J]. Arch Cardiol Mex, 2006,76(Suppl 2):S164-9]， NO是血管内皮所合成分泌的最重要的血管活性物 质。NO具有扩张血管，抗血小板粘附聚集，抗血管平滑肌细胞增生等作用 [Moncade S. Nitric Oxide: physiology, pathophysiology and pharmacology[J]. Pharmacol Rev, 1997,43:109-114]，血浆NO水平可作为血管内皮损伤程度的评 价标准。 一氧化氮和内皮素一1(ET-1)是血管内皮合成、分泌的2种重要物质。 NO是一种小分子血管活性物质，是重要的内源性血管舒张因子，在血管内皮 中由NO合成酶催化L-精氨酸而生成，并向血管中膜的平滑肌细胞迅速弥散， 激活鸟苷酸环化酶，生成cGMP，并激活cGMP依赖性蛋白，影响Na+-Ca2+交 换，使平滑肌松弛，血管舒张。近年研究表明，当患者存在高血压及高血脂 等代谢指标异常时，内皮功能受损，NO的生成与分泌下降[吴以岭.络病学. 北京中国中医药出版社，2006.]。内皮素(ET—1)被认为是目前所知的 最强烈的縮血管物质，在与血管平滑肌有关的血管张力和结构的长期调节中 起作用。ET—1不仅本身具有强有力的縮血管作用，而且还增强5-羟色胺 (5-HT)、去甲肾上腺素的縮血管作用，刺激血管内皮的血管紧张素转化酶活 性及肾上腺素和醛固酮的释放，刺激单核细胞产生细胞因子，刺激血管平滑肌细胞的移行和增生，从而促进AS的进程[张清德，魏宗德.通心络胶囊对
冠心病患者血脂及内皮素的影响[J].中国心血管杂志，2006,11(1): 20-23〗。
E丁是心脏的高度"毒性肽"，其浓度升高是病情恶化标志之一，临床上可用ET 升高的幅度判断病情，估计预后[黄宗明，陈清枝，李东野.冠心病患者内 皮细胞的损伤及其机制[J].徐州医学院学报，1999,19(1): 19-21]。其引起 的血管收縮、心肌缺血、代谢紊乱和细胞增殖是与血管损伤有关疾病的共同 致病因素。
发明内容
本发明目的是提供一种含薤白的治疗血管内皮功能障碍的药物及其制 备方法。
本发明药物是由如下重量份比例的原料药制成的
人参100-140重量份薤白100-140重量份蜈蚣50-80重量份每 100克其它原料药总重加水蛭素180-240ATU抗凝比活性单位。 优选为
人参120重量份薤白120重量份蜈蚣67重 料药总重加水蛭素210ATU抗凝比活性单位。
〔份
每100克其它原
人参100重量份薤白105重量份蜈蚣53重] 料药总重加水蛭素180ATU抗凝比活性单位。
难
每100克其它原
人参140重量份薤白135重量份蜈蚣80重量份每100克其它原 料药总重加水蛭素240ATU抗凝比活性单位。
人参125重量份薤白119重量份蜈蚣63重量份每100克其它原 料药总重加水蛭素225ATU抗凝比活性单位。
本发明中水蛭素的用量单位ATU，是指水蛭素的抗凝活性的效价单位， 其测定方法为将4u 1凝血酶(8mU/y l)和10 20" 1待测水蛭素样品加入 到lml缓冲液中(0.1MTris-HCl -0.2MNaCl，pH 8.3和0.01%牛血清白蛋白)，室温5min，再加入生色底物(Chromozym TH, 2mM)40 ti 1，继续在室温下放 置5min。加入33y。醋酸0.5ml终止反应，405nm波长处测定光吸收，査标 准曲线，计算水蛭素的活性。
为便于临床应用，本发明药物可以制成胶囊剂、片剂、散剂、口服液、 软胶囊、丸剂、酊剂、糖浆剂、栓剂、凝胶剂、喷雾剂或注射剂。
本发明药物还可以由所述各原料药的提取物制成。
本发明药物的活性成份由以下步骤制成
1) 取组方量人参药材，用60-90%乙醇提取1-3次，第1次加药材8-12 倍量溶剂提取l-2小时，第2次加6-10倍量溶剂提取l-2小时，第3次加 6-10倍量溶剂提取0.5-1小时；合并上述提取液，趁热滤过，减压回收乙醇， 并浓缩，放入不锈钢桶内，加纯水搅拌均匀，冷藏24-36h;将冷藏液取出， 放至常温，板框过滤器过滤，用少量水洗涤板框，滤液加纯水稀释，备用； 取人参浓缩药液通过处理好的AB-8型大孔吸附树脂柱，并分别用pH值8-9 的氨水、20%乙醇、80%乙醇洗脱，收集80%乙醇洗脱液；将80%洗脱液 加入纯水，配成50%醇溶液，通过中性氧化铝柱，收集洗脱液，再用少量 50%乙醇洗涤柱子，合并洗脱液备用；取药液加入活性炭，回流加热，煮 沸20min，趁热板框抽滤，收集滤液，浓缩，冷藏过夜；澄清板过滤，减 压干燥，即得人参提取物；
2) 取组方量薤白药材，8-12倍水温浸，滤过，低温浓縮得薤白提取物， 薤白提取物与药用大孔树脂HPD-400按照1:5—1:15重量比例装柱，使用 水与乙醇的比例按照5:95—95:5梯度变化进行梯度洗脱，每个浓度洗脱4 一6倍柱体积，收集60-80%乙醇洗脱液，减压回收乙醇至无醇味后，减压 浓縮为相对密度1.1一1.5的稠膏，冷冻干燥即得薤白中间体；
3) 取组方量蜈蚣粗粉，用4-6倍量的生理盐水于60。C温浸提取2-3次， 每次2-3小时；澄清板过滤温浸液，滤液合并浓縮；加入硫酸铵盐，使溶 液至40-60%饱和度，放置过夜；沉淀用澄清板过滤，滤液加入硫酸铵盐， 使溶液至80-90%饱和度，放置过夜后离心；除去上清液后的沉淀用水溶解， 透析脱盐；透析后溶液用PEG-6000脱水浓縮至原体积的1 /2-2/3后冷冻干 燥即得蜈蚣提取物；4)将步骤l)所的人参提取物、步骤2)所得薤白中间体、步骤3)所得蜈 蚣提取物加入组方量水蛭素混匀。
本发明药物的制备方法，其特征在于该药物由以下歩骤制成
1) 取组方量人参药材，用60-90%乙醇提取1-3次，第1次加药材8-12 倍量溶剂提取l-2小时，第2次加6-10倍量溶剂提取l-2小时，第3次加 6-10倍量溶剂提取0.5-1小时；合并上述提取液，趁热滤过，减压回收乙醇， 并浓縮，放入不锈钢桶内，加纯水搅拌均匀,冷藏24-36h;将冷藏液取出， 放至常温，板框过滤器过滤，用少量水洗涤板框，滤液加纯水稀释，备用； 取人参浓縮药液通过处理好的AB-8型大孔吸附树脂柱，并分别用pH值8-9 的氨水、20%乙醇、80%乙醇洗脱，收集80%乙醇洗脱液；将80%洗脱液 加入纯水，配成50%醇溶液，通过中性氧化铝柱，收集洗脱液，再用少量 50%乙醇洗涤柱子，合并洗脱液备用；取药液加入活性炭，回流加热，煮 沸20min，趁热板框抽滤，收集滤液，浓縮，冷藏过夜；澄清板过滤，减 压干燥，即得人参提取物；
2) 取组方量薤白药材，8-12倍水温浸，滤过，低温浓縮得薤白提取物， 薤白提取物与药用大孔树脂HPD-400按照1:5—1:15重量比例装柱，使用 水与乙醇的比例按照5:95—95:5梯度变化进行梯度洗脱，每个浓度洗脱4 一6倍柱体积，收集60-80%乙醇洗脱液，减压回收乙醇至无醇味后，减压 浓縮为相对密度1.1一1.5的稠膏，冷冻干燥即得薤白中间体；
3) 取组方量蜈蚣粗粉，用4-6倍量的生理盐水于6(TC温浸提取2-3次， 每次2-3小时；澄清板过滤温浸液，滤液合并浓縮；加入硫酸铵盐，使溶 液至40-60%饱和度，放置过夜；沉淀用澄清板过滤，滤液加入硫酸铵盐， 使溶液至80-90%饱和度，放置过夜后离心；除去上清液后的沉淀用水溶解， 透析脱盐；透析后溶液用PEG-6000脱水浓縮至原体积的1 /2-2/3后冷冻干 燥即得蜈蚣提取物；
4) 将步骤l)所得人参提取物、步骤2)所得薤白中间体、步骤3)所得蜈 蚣提取物加入组方量水蛭素混匀。
5) 将步骤4)所得混合物按照常规制剂方法制成胶囊剂、片剂、散剂、 口服液、软胶囊、丸剂、酊剂、糖浆剂、栓剂、凝胶剂、喷雾剂或注射剂。
7本发明药物可升高血清NO水平，降低血浆ET水平。
本发明药物可以由常规的提取工艺[如范碧亭《中药药剂学》(上海科
学出版社1997年12月第1版)]制得。
本发明中的药物，作为原料药的中药名称及其加工方法来自《中药大辞 典》(1977年7月，第一版，上海科学技术出版社)禾B《中国药典》(2005 年版，化学工业出版社)。
本发明中药组合物还可以按常规的制剂工艺，例如，范碧亭《中药药剂 学》(上海科学出版社1997年12月第1版)记载的制备工艺，制成药剂学可 接受的任意常规剂型。
本发明的应用中，所述中药组合物的制剂剂型为胶囊剂、片剂、散剂、 口服液、软胶囊、丸剂、酊剂、糖浆剂、栓剂、凝胶剂、喷雾剂或注射剂等， 为使上述剂型能够实现，需在制备这些剂型时加入药学可接受的辅料，例如 填充剂、崩解剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、甜味剂、矫味剂、防腐剂、基
质等。填充剂包括淀粉、预胶化淀粉、乳糖、甘露醇、甲壳素、微晶纤维 素、蔗糖等；崩解剂包括淀粉、预胶化淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、 交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠等；润滑剂 包括硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、滑石粉、二氧化硅等；助悬剂包括聚 乙烯吡咯垸酮、微晶纤维素、蔗糖、琼脂、羟丙基甲基纤维素等；粘合剂包 括，淀粉浆、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素等；甜味剂包括糖精钠、 阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矫味剂包括甜味剂及各种香精； 防腐剂包括尼泊金类、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸及其盐类、苯扎溴铵、
醋酸氯乙定、桉叶油等；基质包括PEG6000， PEG4000，虫蜡等。为使上 述剂型能够实现中药药剂学，需在制备这些剂型时加入药学可接受的其它辅 料(范碧亭《中药药剂学》，上海科学出版社1997年12月第1版中各剂型记 载的辅料)。
为阐明本发明中药组合物治疗血管内皮功能障碍的活性，用按实施例l 方法制得的提取物(以下称本发明药物)进行了下列临床试验。1资料与方法
l.l动物及分组健康Wistar雄性大鼠60只，体重220 240g，购于北京维 通利华实验动物中心，将大鼠按体重随机分为下列6组，(l)正常对照组(正 常饲料饮食)。(2)模型组。(3)人参组模型组+人参水煎液。(4)水蛭
组模型组+水蛭微粉煎液。(5)蜈蚣组模型组+蜈蚣煎液。(6)本发明 药物组模型组+本发明药物。
1.2药物
人参水煎液由河北以岭医药研究院提供，配制成0.12g生药/ml，给药 浓度为1.2g生药/Kg，按lml/100g灌胃。每周6天。
水蛭微粉水煎剂由河北以岭医药研究院提供，水蛭微粉300目筛通过
率〉95%，水煎30min，滤过)水煎成0.1g生药/ml，给药浓度为lg生药/Kg， 按lml/100g灌胃。每周6天。
蜈蚣水煎剂由河北以岭医药研究院提供，配制成0.067g生药/ml，给药 浓度为0.67g生药/Kg，按lml/100g灌胃。每周6天。
本发明药物由河北以岭医药研究院提供，配制成0.347g生药/ml，给药 浓度为3.47g生药/Kg;按lml/100g灌胃。每周6天。
以上药物均在使用前用0.5XCMC-Na制成混悬液，4t:保存备用。用药 组在灌胃药物的同时，作为对照的正常组和模型组按体重，用0.5XCMC-Na 液以lml/100g灌胃。
1.3造模方法
参照文献[梁俊清，吴以岭，赵韶华，等.通心络超微粉对同型半胱氨酸 致血管损伤的干预作用.络病学基础与临床研究(2),中国科学技术出版社， 202~205]采用3%蛋氨酸饮食(不限食)，4周，建立内皮功能障碍大鼠动物模 型。蛋氨酸25kg/袋，纯度99.9%，河北省农科院提供。3%高蛋氨酸(Met) 饲料由河北省实验动物中心制作。
1.4检测指标
1.4.1 NO含量采用硝酸还原酶法检测于实验结束后，10%水合氯醛麻 醉(0.35ml/100g)，颈动脉插管取血，4°C， 3500转/分离心10分钟，常规分
离留取血清，-701:保存，严格按照试剂盒说明书要求进行检测。1.4.2血浆ET含量的测定采用放免法。实验结束后，颈动脉取血2ml注 入含有10。/。的EDTA-Na230)il和抑肽酶40iil的无菌抗凝试管中，混匀，4°C， 3000r/min，离心10min，分离血浆，-7(TC保存，严格按照试剂盒说明书要求
1.5主动脉组织光镜及电镜观察
1.5.1光镜观察 各组于实验结束后，10%水合氯醛腹腔注射麻醉，仔 细分离并截取胸主动脉，用4%多聚甲醛溶液固定，脱水，石蜡包埋，切片， 行HE染色，于光学显微镜下观察各组实验动物胸主动脉的大体形态学改变。
1.5.2透射电镜观察各组于实验结束后，10%水合氯醛腹腔注射麻醉， 仔细分离并截取一小段动脉，迅速浸入电镜液中，修成lmmxlmmxlmm大小 组织块，置电镜液中fC保存(由河北医科大学基础医学院电镜室协助完成)。
1.6统计学方法
所有数据用均数士标准差(S土s)表示。采用SPSS-11.5统计软件包，多 个样本均数比较用单因素方差分析(One-WayANOVA)，多个样本均数间的 两两比较用最小显著差法(least significant difference, LSD)，若方差不齐则 采用Satterthwaite-t，检验行两两比较，以P < 0.05作为判断差异显著性的标准。
2结果
2.1内皮功能的变化
模型组大鼠较正常组ET明显增高，NO明显下降，具有显著性差异 (P〈0.01);各治疗组可明显降低模型大鼠的ET水平(PO.05或PO.01);各 治疗组可增加模型大鼠的NO水平(PO.05或PO.01);本发明药物组分别较 人参组、水蛭组、蜈蚣组具有明显作用(PO.05或PO.01)。人参、水蛭、蜈 蚣三组之间无明显差异(P>0.05)。见表l。
表l各组之间内皮素(ET)、 NO变化比较(^±、 n=10)
组别 _ET(pg/ml)_NO(画ol/L)
正常 140.32±9.81 44.36± 5.43
模型组 171.23 ±10.56" 24.81 ± 7.32
人参组 162.54±8.78# 35.89± 4.75;
水蛭组 159.38 ±9.45# 32.76 ±8.52#蜈蚣组 154.91±8.67## 34.73±6.74#
本发明药物组145.69 ± 7.86#M A@@& 46.3 5 ± 9.64舰 与正常组比较"PO.01;与模型组比较"P0.05， ##P<0.01;与人参组比 较，<0.05， PO.01;与水蛭组比较,<0.05， @@P<0.01;与蜈虫公组比较& <0.05，
2.2主动脉病理检査
正常组主动脉血管形态正常，内皮细胞结构完整,中膜弹力纤维正常。外 膜形态基本正常。模型组内皮细胞肿胀、分布不均匀、密度增加，内膜有多 量淋巴细胞附壁、内膜内有炎细胞浸润、内弹力板有断裂；平滑肌细胞水肿。 各用药组可改善模型大鼠的主动脉大体结构，尤以本发明药物组更加明显。 见图l。
2.3各组大鼠主动脉组织内皮细胞超微结构的变化
模型组内皮细胞线粒体大部分嵴和少部分膜融合或消失，几乎见不到粗 面内质网和吞饮小泡。人参组、水蛭组、蜈蚣组、本发明药物组内皮细胞 超微结构变化较模型组减轻，本发明药物组作用较人参组、水蛭组、蜈蚣组 更加明显。见图2。
3结论
本实验结果显示,内皮功能障碍时,NO合成减少，ET明显增加，病理学检 査可见血管内皮细胞严重受损，通络药物治疗可明显升高血清NO水平，明显 降低血浆ET水平，显示了通络药物具有改善内皮功能障碍的作用，而本发明 药物较单味药人参、水蛭、蜈蚣效果更明显，主动脉组织光镜及电镜检查也 证实了这一点，显示了复方药物的系统效应。
图l:各组大鼠主动脉组织HE染色(400>0
图2:各组大鼠主动脉组织内皮细胞超微结构变化(20000x)
具体实施例方式
本发明以下实施列中所用水蛭素购自广西科康水蛭素股份有限公司，其他中药材购自安国药材市场。但其不对本发明的范围构成任何限制。 实施例l:本发明药物提取物的制备
人参120克薤白120克蜈虫公67克水蛭素640ATU 制法
1) 取组方量人参药材，用75%乙醇提取2次，第1次加药材8倍量溶 剂提取2.小时，第2次加10倍量溶剂提取2小时；合并上述提取液，趁热 滤过，减压回收乙醇，并浓縮，放入不锈钢桶内，加纯水搅拌均匀,冷藏36h; 将冷藏液取出，放至常温，板框过滤器过滤，用少量水洗漆板框，滤液加 纯水稀释，备用；取人参浓縮药液通过处理好的AB-8型大孔吸附树脂柱， 并分别用pH值8.5的氨水、20%乙醇、80%乙醇洗脱，收集80%乙醇洗脱 液；将80%洗脱液加入纯水，配成50%醇溶液，通过中性氧化铝柱，收集 洗脱液，再用少量50%乙醇洗涤柱子，合并洗脱液备用；取药液加入活性 炭，回流加热，煮沸20min，趁热板框抽滤，收集滤液，浓縮，冷藏过夜； 澄清板过滤，减压干燥，即得人参提取物；
2) 取组方量薤白药材，IO倍水温浸，滤过，低温浓縮得薤白提取物， 薤白提取物与药用大孔树脂HPD-400按照1:12重量比例装柱，使用水与乙 醇的比例按照5:95-15:85-30:70-50:50-70:30-85:15-95:5梯度变化进行梯度洗 脱，每个浓度洗脱5倍柱体积，收集75%乙醇洗脱液，减压回收乙醇至无 醇味后，减压浓縮为相对密度1.3的稠膏，冷冻干燥即得薤白中间体；
3) 取组方量蜈蚣粗粉，用6倍量的生理盐水于6(TC温浸提取2次，每 次2小时；澄清板过滤温浸液，滤液合并浓縮；加入硫酸铵盐，使溶液至 50%饱和度，放置过夜；沉淀用澄清板过滤，滤液加入硫酸铵盐，使溶液 至70%饱和度，放置过夜后离心；除去上清液后的沉淀用水溶解，透析脱 盐；透析后溶液用PEG-6000脱水浓縮至原体积的3/5后冷冻干燥即得蜈蚣 提取物；
4) 将步骤l)所的人参提取物、步骤2)所得薤白中间体、步骤3)所得蜈蚣 提取物加入组方量水蛭素混匀。
实施例2:本发明药物胶囊的制备
人参100克薤白100克蜈蛇53克水蛭素450ATU
12制法
1) 取组方量人参药材，用60%乙醇提取3次，第1次加药材8倍量溶
剂提取2小时，第2次加6倍量溶剂提取2小时，第3次加6倍量溶剂提
取0.5小时；合并上述提取液，趁热滤过，减压回收乙醇，并浓縮，放入不 锈钢桶内，加纯水搅拌均匀,冷藏24h;将冷藏液取出，放至常温，板框过 滤器过滤，用少量水洗涤板框，滤液加纯水稀释，备用；取人参浓縮药液 通过处理好的AB-8型大孔吸附树脂柱，并分别用pH值8.7的氨水、20% 乙醇、80%乙醇洗脱，收集80%乙醇洗脱液；将80。/。洗脱液加入纯水，配 成50%醇溶液，通过中性氧化铝柱，收集洗脱液，再用少量50%乙醇洗涤 柱子，合并洗脱液备用；取药液加入活性炭，回流加热，煮沸20min，趁 热板框抽滤，收集滤液，浓縮，冷藏过夜；澄清板过滤，减压干燥，即得 人参提取物；
2) 取组方量薤白药材，12倍水温浸，滤过，低温浓縮得薤白提取物， 薤白提取物与药用大孔树脂HPD-400按照1:7.5重量比例装柱，使用水与 乙醇的比例按照10:90-20:80-35:65-50:50-65:35-80:20-90:10梯度变化进行梯 度洗脱，每个浓度洗脱6倍柱体积，收集60-80%乙醇洗脱液，减压回收乙 醇至无醇味后，减压浓縮为相对密度1.25的稠膏，冷冻干燥即得薤白中间 体；
3) 取组方量蜈蚣粗粉，用6倍量的生理盐水于6(TC温浸提取2次，每 次2小时；澄清板过滤温浸液，滤液合并浓縮；加入硫酸铵盐，使溶液至 55%饱和度，放置过夜；沉淀用澄清板过滤，滤液加入硫酸铵盐，使溶液 至85%饱和度，放置过夜后离心；除去上清液后的沉淀用水溶解，透析脱 盐；透析后溶液用PEG-6000脱水浓縮至原体积的1/2后冷冻干燥即得蜈蚣 提取物；
4) 将步骤l)所的人参提取物、步骤2)所得薤白中间体、步骤3)所得蜈蚣 提取物加入组方量水蛭素混匀 ，
5) 按常规制剂工艺制成胶囊剂。 实施例3:本发明药物片剂的制备
人参125克薤白119克蜈蚣63克水蛭素690.75ATU制法
1) 取组方量人参药材，用90%乙醇提取2次，第1次加药材12倍量 溶剂提取1小时，第2次加6倍量溶剂提取1小时；合并上述提取液，趁 热滤过，减压回收乙醇，并浓缩，放入不锈钢桶内，加纯水搅拌均匀,冷藏 24h;将冷藏液取出，放至常温，板框过滤器过滤，用少量水洗涤板框，滤
液加纯水稀释，备用；取人参浓縮药液通过处理好的AB-8型大孔吸附树脂 柱，并分别用pH值8.5的氨水、20%乙醇、80%乙醇洗脱，收集80%乙醇 洗脱液；将80%洗脱液加入纯水，配成50%醇溶液，通过中性氧化铝柱， 收集洗脱液，再用少量50%乙醇洗涤柱子，合并洗脱液备用；取药液加入 活性炭，回流加热，煮沸20min，趁热板框抽滤，收集滤液，浓縮，冷藏 过夜；澄清板过滤，减压干燥，即得人参提取物；
2) 取组方量薤白药材，12倍水温浸，滤过，低温浓缩得薤白提取物， 薤白提取物与药用大孔树脂HPD-400按照1:10重量比例装柱，使用水与乙 醇的比例按照10:90-20:80-35:65-50:50-65:35-80:20-卯:10梯度变化进行梯度 洗脱，每个浓度洗脱5倍柱体积，收集75%乙醇洗脱液，减压回收乙醇至 无醇味后，减压浓缩为相对密度1.20的稠膏，冷冻干燥即得薤白中间体；
3) 取组方量蜈蚣粗粉，用5倍量的生理盐水于6(TC温浸提取2次，每 次3小时；澄清板过滤温浸液，滤液合并浓縮；加入硫酸铵盐，使溶液至 55%饱和度，放置过夜；沉淀用澄清板过滤，滤液加入硫酸铵盐，使溶液 至87%饱和度，放置过夜后离心；除去上清液后的沉淀用水溶解，透析脱 盐；透析后溶液用PEG-6000脱水浓縮至原体积的3/5后冷冻干燥即得蜈蚣 提取物；
4) 将步骤l)所的人参提取物、步骤2)所得薤白中间体、步骤3)所得蜈蚣 提取物加入组方量水蛭素混匀。
5) 按常规制剂工艺制成片剂。 实施例4:本发明药物口服液的制备
人参140克薤白135克蜈蚣80克水蛭素852ATU 制法
1)取组方量人参药材，用65%乙醇提取2次，第1次加药材8倍量溶
14剂提取1小时，第2次加10倍量溶剂提取2小时；合并上述提取液，趁热 滤过，减压回收乙醇，并浓縮，放入不锈钢桶内，加纯水搅拌均匀,冷藏30h; 将冷藏液取出，放至常温，板框过滤器过滤，用少量水洗涤板框，滤液加 纯水稀释，备用；取人参浓縮药液通过处理好的AB-8型大孔吸附树脂柱，
并分别用pH值8.5的氨水、20%乙醇、80%乙醇洗脱，收集80%乙醇洗脱 液；将80%洗脱液加入纯水，配成50%醇溶液，通过中性氧化铝柱，收集 洗脱液，再用少量50%乙醇洗涤柱子，合并洗脱液备用；取药液加入活性 炭，回流加热，煮沸20min，趁热板框抽滤，收集滤液，浓缩，冷藏过夜； 澄清板过滤，减压干燥，即得人参提取物；
2) 取组方量薤白药材，12倍水温浸，滤过，低温浓縮得薤白提取物， 薤白提取物与药用大孔树脂HPD-400按照1:13重量比例装柱，使用水与乙 醇的比例按照5:95-15:85-30:70-50:50-70:30-85:15-95:5梯度变化进行梯度洗 脱，每个浓度洗脱5.5倍柱体积，收集70-76%乙醇洗脱液，减压回收乙醇 至无醇味后，减压浓缩为相对密度1.35的稠膏，冷冻干燥即得薤白中间体；
3) 取组方量蜈蚣粗粉，用4-6倍量的生理盐水于6(TC温浸提取2次， 每次3小时；澄清板过滤温浸液，滤液合并浓縮；加入硫酸铵盐，使溶液 至55%饱和度，放置过夜；沉淀用澄清板过滤，滤液加入硫酸铵盐，使溶
液至85%饱和度，放置过夜后离心；除去上清液后的沉淀用水溶解，透析 脱盐；透析后溶液用PEG-6000脱水浓縮至原体积的2/3后冷冻干燥即得蜈 蚣提取物；
4) 将步骤l)所的人参提取物、步骤2)所得薤白中间体、步骤3)所得蜈蚣 提取物加入组方量水蛭素混匀。
5) 按常规制剂工艺制成口服液。 实施例5:本发明药物凝胶剂的制备
按照实施例1的处方和制法制得活性提取物，按常规方法制成凝胶剂。 实施例6:本发明药物注射剂的制备
按照实施例l的处方和制法制得活性提取物，按常规方法制成注射剂。 实施例7:本发明药物酊剂的制备
按照实施例l的处方和制法制得活性提取物，按常规方法制成酊剂。实施例8:本发明药物丸剂的制备
按照实施例l的处方和制法制得活性提取物，按常规方法制成丸剂。 实施例9:本发明药物糖浆剂的制备
按照实施例l的处方和制法制得活性提取物，按常规方法制成糖浆剂。 实施例10:本发明药物散剂的制备
按照实施例l的处方和制法制得活性提取物，按常规方法制成散剂。 实施例ll:本发明药物栓剂的制备
按照实施例l的处方和制法制得活性提取物，按常规方法制成栓剂。 实施例12:本发明药物喷雾剂的制备
按照实施例l的处方和制法制得活性提取物，按常规方法制成喷雾剂。
权利要求
1、一种含薤白的治疗血管内皮功能障碍的药物，其特征在于是由如下比例的原料药制成的人参100-140重量份 薤白100-140重量份 蜈蚣50-80重量份 每100克其它原料药总重加水蛭素180-240ATU抗凝比活性单位。
2、 根据权利要求l所述的药物，其原料药的比例为 人参120重量份薤白120重量份蜈蚣67重量份每100克其它原料药总重加水蛭素210ATU抗凝比活性单位。
3、 根据权利要求1所述的药物，其原料药的比例为 人参100重量份薤白105重量份蜈蚣53重量份每100克其它原料药总重加水蛭素180ATU抗凝比活性单位。
4、 根据权利要求1所述的药物，其原料药的比例为 人参140重量份薤白135重量份蜈蚣80重量份每100克其它原料药总重加水蛭素240ATU抗凝比活性单位。
5、 根据权利要求1所述的药物，其原料药的重量份比例为 人参125重量份薤白119重量份蜈蛇63重量份每100克其它原料药总重加水蛭素225ATU抗凝比活性单位。
6、 根据权利要求1-5任-一所述的药物，其特征在于该药物为胶囊剂、 片剂、散剂、口服液、软胶囊、丸剂、酊剂、糖浆剂、栓剂、凝胶剂、喷 雾剂或注射剂。
7、 如权利要求6所述的药物，其特征在于该药物的活性成份由以下步 骤制成1)取组方量人参药材，用60-90%乙醇提取1-3次，第1次加药材8-12 倍量溶剂提取l-2小时，第2次加6-10倍量溶剂提取l-2小时，第3次加 6-10倍量溶剂提取0.5-1小时；合并上述提取液，趁热滤过，减压回收乙醇， 并浓縮，放入不锈钢桶内，加纯水搅拌均匀,冷藏24-36h;将冷藏液取出， 放至常温，板框过滤器过滤，用少量水洗涤板框，滤液加纯水稀释，备用；取人参浓縮药液通过处理好的AB-8型大孔吸附树脂柱，并分别用pH值8-9 的氨水、20%乙醇、80°/。乙醇洗脱，收集80%乙醇洗脱液；将80%洗脱液 加入纯水，配成50%醇溶液，通过中性氧化铝柱，收集洗脱液，再用少量 50%乙醇洗漆柱子，合并洗脱液备用；取药液加入活性炭，回流加热，煮 沸20min，趁热板框抽滤，收集滤液，浓縮，冷藏过夜；澄清板过滤，减 压干燥，即得人参提取物；2) 取组方量薤白药材，8-12倍水温浸，滤过，低温浓缩得薤白提取物， 薤白提取物与药用大孔树脂HPD-400按照1:5—1:15重量比例装柱，使用 水与乙醇的比例按照5:95—95:5梯度变化进行梯度洗脱，每个浓度洗脱4 一6倍柱体积，收集60-80%乙醇洗脱液，减压回收乙醇至无醇味后，减压 浓縮为相对密度1.1一1.5的稠膏，冷冻干燥即得薤白中间体；3) 取组方量蜈蚣粗粉，用4-6倍量的生理盐水于6(TC温浸提取2-3次， 每次2-3小时；澄清板过滤温浸液，滤液合并浓缩；加入硫酸铵盐，使溶 液至40-60%饱和度，放置过夜；沉淀用澄清板过滤，滤液加入硫酸铰盐， 使溶液至80-90%饱和度，放置过夜后离心；除去上清液后的沉淀用水溶解， 透析脱盐；透析后溶液用PEG-6000脱水浓縮至原体积的1/2-2/3后冷冻干 燥即得蜈蚣提取物；4) 将步骤l)所的人参提取物、步骤2)所得薤白中间体、步骤3)所得蜈 蚣提取物加入组方量水蛭素混匀。
8、 如权利要求6所述的药物，其特征在于该药物由按照权利要求7制 得的活性成分按照常规方法制成胶囊剂、片剂、散剂、口服液、软胶囊、 丸剂、酊剂、糖浆剂、栓剂、凝胶剂、喷雾剂或注射剂。
9、 如权利要求6所述的药物，其特征在于所述药物可升高血清NO水 平，降低血浆ET水平。
全文摘要
本发明公开了一种含薤白的治疗血管内皮功能障碍的药物及其制备方法。研究证实本发明药物能有效升高血清NO水平，降低血浆ET水平，显示了本发明药物具有改善内皮功能障碍的作用。
文档编号A61K9/02GK101439140SQ20071018805
公开日2009年5月27日 申请日期2007年11月23日 优先权日2007年11月23日
发明者吴以岭 申请人:河北以岭医药研究院有限公司