环木脂体用于治疗Ⅱ型糖尿病和作为避孕药的应用的制作方法

专利名称：：环木脂体用于治疗Ⅱ型糖尿病和作为避孕药的应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及某些环木脂体(cyclolignans)的以下应用预防或治疗II型糖尿病及其相关疾病视网膜病和肾病；预防或治疗黄斑变性和类似眼病如早产儿视网膜病，视网膜中央静脉闭塞，视网膜分支静脉闭塞，新生血管性(rubeotic)青光眼，甲状腺眼病，角膜移植排斥和角膜化学灼伤。另外，本发明涉及某些环木脂体用于避孕的应用。本发明进一步涉及眼病的治疗方法。
背景技术：
：由胰岛素抵抗力增加导致的II型糖尿病的发病率在全世界范围内逐年增加，但是其发病机理不清楚。尽管升高的血糖水平可进行药理学相对充分的治疗，但是与其相关的一些疾病或并发症如肾病和视网膜病(导致视力丧失的眼病)缺乏有效的防治手段。在许多方面类似后者的眼病是黄斑变性。该病通常与年龄相关。黄斑变性实际上是导致失明的主要原因，因为其经常损伤视网膜。迄今为止还没有有效预防或降低该疾病发展的治疗策略。其它类似的眼病是早产儿视网膜病(ROP)，其是可能发生在体重低于1.3千克并在妊娠31周前出生的早产儿的致盲眼病；视网膜中央或分支静脉闭塞(CRVO和BRVO)，其由视网膜中央或分支静脉中的使得从视网膜的血液流动减少或停止的血块导致；新生血管性青光眼，其是糖尿病或CRVO之后继发的；和甲状腺眼病(TED),其是格雷夫斯病的并发症并且以眼窝软组织、角膜和视神经的炎症为特征。另外，角膜移植排斥是角膜移植术的常见并发症，并且角膜化学灼伤是其中角膜受到酸或碱的损伤的病况。迄今为止还没有有效预防或降低这些疾病和病况发展的治疗策略。计划外的和不想要的怀孕从医学和社会观点来考虑与严重的风险有关，一直在不断地寻求具有最少副作用的可供选择的安全避孕技术。生长因子属于一类生物学强力物质，其通常促进细胞生长。这些化合物可以复杂的方式彼此相互作用并且被怀疑参与许多疾病和生理过程的发展。一个这种生长因子是胰岛素样生长因子-l(IGF-I)，其已经在癌发展中和在某些内分泌疾病如肢端肥大症中表现出显著的作用。许多环木脂体已经表现出通过干扰生长因子的受体而抑制生长因子的细胞信号过程。现有技术II型糖尿病是常见病。全世界在2000年罹患糖尿病的成人患者的数目为约一亿七千万，并且正在逐步增加。II型糖尿病的发病机理是复合的，包括胰岛素抵抗力的逐渐发展和胰岛素分泌的相对缺乏，导致明显的高血糖。现行的II型糖尿病的治疗手段包括胰岛素和各种口服药剂，诸如磺酰脲类，二甲双胍和a-葡糖苷酶抑制剂。这些药剂在新被诊断的患者中作为单一疗法。在疾病呈晚期的患者中，这种药剂通常组合使用以实现更高的血糖控制(DeFronzoRA，AnnInternMed1999;131(4):281-303)。上述的大部分口服药剂作为单一疗法不具有足够的长效性，并且还具有许多副作用。因此，非常需要新型的口服抗糖尿病药(SchernthanerGH等人，ScandJClinLabInvestSuppl2005;240:30-40)。晚期糖尿病通常导致令人畏惧的并发症诸如肾病和糖尿病性视网膜病(CordainL等人，CompBiochemPhysiolAMolIntegrPhysiol.2003;Sep,136(1):95-112;FrystykJ,HormMetabRes"2005Apr,37Suppl1:44-8)。后一种并发症特别令人畏惧，因为其通常导致失明。相关眼病是黄斑变性，特别是渗出性年龄相关黄斑变性(和相关的脉络膜病)，其也可导致视网膜病变。渗出性年龄相关黄斑变性的特征在于异常血管生长进入视网膜下空间，通常导致渗出和出血。这将导致光感受器损伤和中心视力丧失，并且在数月后，血管大量地被维管瘢痕组织所代替。尽管黄斑变性的发病机理不清楚，但是据信许多生长因子至少部分地参与该疾病的进展。在发展中国家，年龄相关黄斑变性是年龄超过55岁人群中失明的主要病因，并且目前没有有效的治疗手段。预计在美国在随后5年内几乎100万人发病，使得其成为主要的公共卫生问题(KimRW等人，OphthalmolClin.2004;Fall;44(4):41-50)。早产儿视网膜病(ROP)当异常血管遍布视网膜时发生，导致出血和疤痕，引起视网膜脱离和视觉缺陷以及失明。这种严重的眼病在美国每年使约15,000个新生儿患病。类似眼病是视网膜中央和分支静脉闭塞(CRVO和BRVO)，其影响年龄超过45岁的人群的视网膜。主要危险因素是高血压、高胆固醇血症和糖尿病。最严重的并发症是视网膜血管病变，黄斑水肿和继发性青光眼，其可导致失明，在工业化世界中在老年人群中是第二大治病病因(HattenbachLO等人，Ophthalmologica1999;213(6):360-6)。新生血管性青光眼通常与增殖性糖尿病性视网膜病和视网膜中央静脉闭塞有关。其发病机理不清楚，但是眼角内的血管引起液体流经作为眼内主要流出途径的小梁网状结构的排出被阻塞(Sivak-CallcottJA等人，Ophthalmology2001;Oct;108(10):1767-76)。甲状腺眼病(TED)是自身免疫性疾病，其以眼球外肌膨大和眼球后脂肪/结缔组织间隔膨胀为特征。这些变化导致眼球突出，眶周肿胀和静脉淤血，还可牵涉角膜和视神经。TED的发病机理几乎无疑是多因素的，也包括细胞因子和生长因子(HeufelderAE,JEndocrinolInvest1997;20(Suppl7):50-52)。在美国和加拿大在九十年代进行超过40,000个角膜移植，但是手术后5年失败率为约1/3，主要是由于角膜移植排斥。这由宿主对供体角膜组织的特异性免疫应答引起。现有的和长出的角膜基质血管是该免疫排斥的强烈危险因素(CursiefenC等人，Cornea2003;22:273-281)。化学角膜灼伤可由酸和碱导致，占所有眼损伤的10%。该疾病可导致失明，主要由角膜内的异常血管发育导致(ChangJH等人，CurrOpinOphthalmol2001;12:所述眼病的发病机理(和/或发展)在很大程度是未知的，但是据信许多生长因子至少部分地牵涉所述眼病的发展。全世界每天受孕约一百万女性。这些怀孕事件中的一半被认为是计划外怀孕，并且计划外怀孕中的一半是不想要的。每天进行约150,000次流产。不想要的怀孕从医学和社会观点考虑与有害的影响或风险有关。与治疗性流产有关的发病率和死亡的风险大于与激素避孕药使用有关的风险。尚未开发出理想的避孕方法。因此一直在寻求具有最小副作用的可供选择的安全避孕技术。许多生长因子被认为与生殖过程有关，例如促进卵泡发育、胚胎发育、着床，和维持妊娠(PintoAB等人，HumReprod2002;Feb;17(2):457-62)。生长因子属于一类生物学强力物质，其通常促进细胞生长。这些化合物可以复杂的方式彼此相互作用并且被怀疑参与许多疾病和生理学过程的发展。一个这种生长因子是IGF-1，其受体是酪氨酸激酶受体家族的成员。该家族还包括胰岛素、表皮生长因子(EGF)、神经生长因子(NGF)和(PDGF)的受体。在刺激后通过这些受体介导的信号可受到干扰例如它们的酪氨酸激酶活性的物质的影响，因此所述物质是吸引人药理学目标(LevizkiA等人，Science,1995;267:1782-1788).在PCT/WO02/102804/A1禾口PCT/WO2004/055022(AGirnita,LGimita,FdPrete，ABartolazzi,OLarsson禾卩MAxelson:Cyclolignansasinhibitorsoftheinsulin-likegrowthfactor-1receptorandmalignantcellgrowth.CancerResearch,64，236-242，2004)中，公开了使用特定的环木脂体抑制IGF-1受体而不影响胰岛素受体。该化合物可用于治疗IGF-1R依赖性疾病，特别是癌。这些环木脂体之一是鬼桕苦素(picropod叩hyllin)，其先前被认为是具有很少生物活性或不具有生物活性，如YDamayanthi禾卩JWLown在CurrentMedicinalChemistry中所述的(1998;5:205-252)。发明目的本发明的目的是提供新方法，所述方法用于预防或治疗2型糖尿病及其相关疾病如视网膜病和肾病，和用于预防或治疗黄斑变性和类似眼病如早产儿视网膜病，视网膜中央静脉闭塞，视网膜分支静脉闭塞，新生血管性青光眼，甲状腺眼病，角膜移植排斥和角膜化学灼伤。本发明的另一个目的是提供避孕方法。图1表示化合物鬼桕苦素和脱水鬼桕苦醇(anhydropicropodophyllol)的结构式。图2表示化合物脱氧鬼桕苦素(deoxypicropodophyllin)和脱氧脱水鬼桕苦醇(deoxyanhydropicropodophyllol)的结构式。发明详述当用某些环木脂体治疗小鼠时，发现葡萄糖血液水平降低。这种结果是意想不到的，因为据说IGF-l的作用摹拟胰岛素的作用。实际上，甚至还建议使用IGF-l本身来治疗糖尿病。值得注意的是，环木脂体在长期治疗过程中的抗糖尿病作用仅仅导致血糖水平正常化，并且不引起令人畏惧的低血糖症。这些结果表明环木脂体可用于降低血糖水平，从而预防或治疗由胰岛素抵抗力增加引起的II型糖尿病。因此环木脂体还可能对这种疾病的并发症如肾病和视网膜病具有一些有益影响，这些并发症在处于疾病晚期的治疗不充分患者中特别地发展。为了阐明这可能是事实，在与视网膜病部分类似的眼病(在这种情况下为黄斑变性)中，试验了环木脂体的作用。认为黄斑变性由于许多生长因子牵涉其中而发展。结果第一次表明了，使用小鼠模型，环木脂体治疗保护眼睛避免了黄斑变性的发展。环木脂体的制得注意的作用对于发病机理与黄斑变性类似的眼病也是有效的。其中已暗示许多生长因子起重要作用的其它生理病况处在不同生殖过程中，诸如卵泡和胚胎发育，着床和妊娠(PintoAB等人，HumReprod2002;Feb;17(2):457-62)。为了验证环木脂体是否可预防排卵和胚胎着床并从而可用作避孕药，在小鼠模型中研究了鬼桕苦素的作用。结果表明该化合物防止排卵并对着床具有消极作用。在本发明的一个方面，提供了式I的化合物及其可药用盐在制备用于预防或治疗至少一种选自以下的疾病的药物中的应用II型糖尿病，肾病，视网膜病，黄斑变性，早产儿视网膜病，视网膜中央静脉闭塞，视网膜分支静脉闭塞，新生血管性青光眼，甲状腺眼病，角膜移植排斥和角膜化学灼伤，其中R!选自H、OH和酯基，并且R2选自0和两个H。在本发明的另一个方面提供了式I的化合物及其可药用盐用于避孕的应用，其中P4选自H、OH和酯基，并且R2选自0和两个H。在本发明的一个实施方案中提供了式II的化合物及其可药用盐在制备用于预防或治疗至少一种选自以下的疾病的药物中的应用II型糖尿病，肾病，视网膜病，黄斑变性，早产儿视网膜病，视网膜中央静脉闭塞，视网膜分支静脉闭塞，新生血管性青光眼，甲状腺眼病，角膜移植排斥和角膜化学灼伤，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>其中Ri选自H、OH和酯基，其中内酯环具有含两个(3键的顺式构型，并且其中&和三甲氧基苯基处在a位。值得注意的是，式II的化合物具有的内酯环为顺式构型，即含两个P键，如实线所述。^和三甲氧基苯基优选处在a位，如虚线所示。优选的化合物是鬼桕苦素(图l)和脱氧鬼桕苦素(图2)。本发明还提供了式III的化合物及其可药用盐在制备用于预防或治疗至少一种选自以下的疾病的药物中的应用n型糖尿病，肾病，视网膜病，黄斑变性，早产儿视网膜病，视网膜中央静脉闭塞，视网膜分支静脉闭塞，新生血管性青光眼，甲状腺眼病，角膜移植排斥和角膜化学灼伤，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>其中Ri选自H、OH和酯基，其中环醚环具有含两个P键的顺式构型，并且其中Ri和三甲氧基苯基位于a位。值得注意的是，式III的化合物具有的环醚环具有顺式构型，艮P，含两个P键，如实线所示。Ri和三甲氧基苯基优选处在a位，如虚线所示。优选的化合物是脱水鬼桕苦醇(图l)和脱氧脱水鬼桕苦醇(图2)。特别地，！^可为酯基。可使用任何可药用的酯基。酯基的非限制性例子选自OCOH，OCO(CH2)Q_18CH3，OCOCH(CH3)2，OCO(CH2)2COOH，OCOCH2N(CH3)2，OCONHCH2CH3，OCOC5NH4和OP03H2。在一个具体方案中，&是OCOCH2N(CH3)2。在一个方案中，酯包括羧基或其它酸基。在这些情况下，本发明的任何化合物可作为可药用盐提供。本领域的技术人员能够选择适当的可药用盐。提供了上述的任何化合物在制备用于预防或治疗II型糖尿病的药物中的应用。提供了上述的任何化合物与其它的选自胰岛素、磺酰脲类、二甲双胍和a-葡糖苷酶抑制剂的药物的组合使用。提供了上述的任何化合物在制备用于预防或治疗肾病的药物中的应用。提供了上述的任何化合物在制备用于预防或治疗糖尿病性视网膜病的药物中的应用。提供了上述的任何化合物在制备用于预防或治疗黄斑变性的药物中的应用。提供了上述的任何化合物在制备用于预防或治疗早产儿视网膜病的药物中的应用。提供了上述的任何化合物在制备用于预防或治疗视网膜中央或分支静脉闭塞(CRVO或BRVO)的药物中的应用。提供了上述的任何化合物在制备用于预防或治疗新生血管性青光眼的药物中的应用。提供了上述的任何化合物在制备用于预防或治疗甲状腺眼病的药物中的应用。提供了上述的任何化合物在制备用于预防或治疗角膜移植排斥的药物中的应用。提供了上述的任何化合物在制备用于预防或治疗角膜化学灼伤的药物中的应用。提供了上述的任何化合物用于避孕的应用。提供了上述的化合物与至少一种选自雌激素、孕激素和前列腺素的其它药物的组合使用。提供了上述的任何化合物与米非司酮的组合使用。在另一个方面提供了治疗眼病的方法，包括给药药物组合物，该药物组合物包括式i-ni中任一式表示的化合物以及生理学可接受的载体。在一个实施方案中，提供了一种方法，其中药物组合物在眼内局部给药。在另一个实施方案中，提供了一种方法，其中药物组合物在眼附近给药。鬼臼霉素和脱氧鬼臼霉素，作为用于合成所述的鬼臼霉素类(picro)衍生物即在其内酯环或内醚环内具有顺式构型的环木脂体的起始材料，天然存在于植物中。为了制备所述物质的纯形式，将例如鬼臼根或鬼臼块状茎的经干燥的和磨得很细的根茎用有机溶剂提取。然后过滤提取物并在硅胶上浓縮。收集包含所述物质的级份，并将级份进一步通过酸性氧化铝和硅胶等进行色谱法纯化，并最后重结晶。然后使用基本上相同的过程，分别从经纯化的鬼臼霉素和脱氧鬼臼霉素制备鬼桕苦素和脱氧鬼桕苦素。将鬼桕苦素溶于70%的含水乙醇中，向该溶液中加入乙酸钠，然后将混合物回流并搅拌12小时。将混合物冷却和过滤。产物(沉淀物)用乙酸乙酯洗涤，然后基本上如0Buchardt等人所述(JPharmaceutSci1986;75:1076-1080)从绝对乙醇重结晶进行纯化或通过硅胶色谱法纯化(流动相己垸-乙酸乙酯混合物，和/或十八垸基硅垸结合型硅胶，流动相含水甲醇)。鬼桕苦素的全合成如JWGensler等人所述(JAmChemSoc1960;82:1714-1727)。分别从鬼桕苦素和脱氧鬼桕苦素制备脱水鬼桕苦醇(鬼桕苦素环醚)和脱氧脱水鬼桕苦醇(脱氧鬼桕苦素环醚)(参见GenslerWJ等人，JMedChem1977;20:635-644)。简要地讲，首先将鬼桕苦素转化成四氢吡喃基鬼桕苦素。将鬼桕苦素溶于试剂二氢吡喃中，加入一些对甲苯磺酸一水合物的小晶体，并搅拌混合物l小时。然后加入3%的碳酸氢盐水溶液，真空除去挥发物，然后将残余物(含四氢吡喃基鬼桕苦素)用乙醚提取并洗涤。然后将回收的四氢吡喃基鬼桕苦素还原为四氢吡喃基鬼桕苦醇。将四氢吡喃基鬼桕苦素溶于无水乙醚中，并加入氢化锂铝。在室温下搅拌3.5小时后，将混合物冷却到o'c，然后用水小心地处理。生成的四氢吡喃基鬼桕苦醇然后用乙酸乙酯提取，用水洗涤，并干燥。然后将回收的四氢吡喃基鬼桕苦醇溶于吡啶中并然后添加在吡啶中的对甲苯磺酰氯将回收的四氢吡喃基鬼桕苦醇转化成四氢吡喃基脱水鬼桕苦醇。混合物反应4.5小时，不接触空气，然后加入一些额外的对甲苯磺酰氯，反应继续进行4.5小时。产物四氢吡喃基脱水鬼桕苦醇然后用乙酸乙酯从水相中提取出，并干燥。通过将四氢吡喃基脱水鬼桕苦醇溶解在用浓HC1酸化的乙醇中使四氢吡喃基脱水鬼桕苦醇水解得到脱水鬼桕苦醇，并使混合物在室温放置1小时。用碳酸氢钠水溶液中和后，用乙酸乙酯提取脱水鬼桕苦醇并干燥。还试验了可供选择的用于合成脱水鬼桕苦醇的方法，并且该方法比上述方法提供了更高的收率。简要地讲，首先通过在氮气下向鬼桕苦素和咪唑在二甲基甲酰胺中的混合物中添加叔丁基二甲基甲硅烷基(t-BDMS)氯化物制备鬼桕苦素的叔丁基二甲基甲硅垸基醚。该黄色溶液在室温下搅拌过夜并被倾入到水中。在用氢化锂铝在四氢呋喃中还原内酯基之前将该衍生物纯化。然后混合物在室温下搅拌3小时，得到鬼桕苦醇的t-BDMS衍生物(含两个游离的羟基)。向该化合物在二氯甲垸中的溶液中加入三苯基膦和二乙基偶氮二羧酸酯，然后将混合物在室温下搅拌3小时。蒸发溶剂，然后纯化脱水鬼桕苦醇的t-BDMS醚粗品。通过向衍生物在四氢呋喃中的溶液中添加四丁基氟化铵获得未衍生化的脱水鬼桕苦醇，然后将混合物在室温下搅拌过夜。纯化后，获得游离的和纯的脱水鬼桕苦醇，为白色固体。可以类似的但更简单的方式从脱氧鬼桕苦素合成脱氧脱水鬼桕苦醇。简要地讲，使用氢化锂铝在四氢呋喃中将脱氧鬼桕苦素的内酯基还原。混合物在室温下搅拌3小时，得到脱氧鬼桕苦醇(含两个游离的羟基)。向该化合物在二氯甲烷中的溶液中加入三苯基膦和二乙基偶氮二羧酸酯，然后将混合物在室温下搅拌3小时。纯化后获得产品脱氧脱水鬼桕苦醇。式n和in的化合物的其它例子可以是鬼桕苦素和脱水鬼桕苦醇的各种酯，及其可药用盐，其可通过常规方法制备。在需要其它治疗的疾病/病况中，使用本发明化合物的治疗可与其它疗法组合使用。例如，该化合物可用于使细胞增敏并加强其它疗法的效果。因此本发明还涉及式I的化合物与其它疗法如药物、手术等的组合使用。可与本发明的化合物一起使用用于治疗II型糖尿病的药物或疗法的例子可以是胰岛素和各种口服药剂，诸如磺酰脲类、二甲双胍、a-葡糖苷酶抑制剂，并且可与本发明的化合物一起使用用于避孕的例子是包含雌激素和孕激素、前列腺素和米非司酮的制剂/药物。环木脂体可用于预防或治疗许多疾病，诸如n型糖尿病，肾病和视网膜病，用于预防或治疗黄斑变性，早产儿视网膜病，视网膜中央静脉闭塞，视网膜分支静脉闭塞，新生血管性青光眼，甲状腺眼病，角膜移植排斥和角膜化学灼伤；和通过干扰在雌性生殖过程中从排卵开始的不同步骤而用于避孕。本发明的一个方面涉及式I的化合物在制备用于治疗II型的糖尿病的药物中的应用(NamSY等人，IntJObesRelatMetabDisord1997;21:355-359;AttiaN等人，JClinEndocrinolMetab1998;83:1467-1471)。与该病况有关的是诸如肾病和视网膜病的并发症(ThierryvanDesselHJ等人，JClinEndocrinolMetab1993;77:776-779)。本发明的另一方面涉及式I的化合物的制药应用，所述药物用于预防和治疗黄斑变性，特别是渗出性年龄相关黄斑变性和类似的眼病，诸如早产儿视网膜病，视网膜中央静脉闭塞，视网膜分支静脉闭塞，新生血管性青光眼，甲状腺眼病，角膜移植排斥和角膜化学灼伤。值得注意的是，年龄相关黄斑变性是导致失明的主要原因，并且目前没有有效的治疗手段。本发明的又一方面涉及式I的化合物通过干扰生殖过程中的不同步骤，例如排卵或胚胎在子宫内膜的着床而用于避孕的应用。着床是妊娠开始期间最重要的生物学过程。胚胎着床通过滋养层介导，滋养层附着并侵入子宫内膜，最终导致胎盘成熟和存活。不同的生长因子可在附着和迁移事件中发挥作用，所述事件认为在着床过程中起到关键作用(Kabir-SalmaniM等人，JClinEndocrinolMetab2002;87:5751-5759;KorgunET,Reproduction2003;125:75-84)。对于口服给药，可将化合物配制成固体或液体制剂，诸如胶囊，丸剂，片剂，锭剂，粉末剂，溶液剂，悬浮剂和乳剂。对于局部施用，化合物可以软膏剂，霜剂，膏剂，洗液，溶液剂和贴片的形式给药。对于非肠道给药，化合物可以化合物在作为药物载体的生理学可接受的稀释剂中的溶液剂、悬浮剂或乳剂剂型，以可注射剂型给药或通过连续静脉内输注给药，所述载体可为无菌的液体，如水、醇、油、乳液，和其它可接受的有机溶剂，添加或不添加表面活性剂和其它可药用助剂。化合物还可以储库型注射剂或植入剂的形式给药，其可被配制为使得允许持续释放活性成分。本发明还涉及治疗上述眼病(糖尿病性视网膜病，黄斑变性，早产儿视网膜病，视网膜中央静脉闭塞，视网膜分支静脉闭塞，新生血管性青光眼，甲状腺眼病，角膜移植排斥和角膜化学灼伤)的方法，包括给用药物组合物的步骤，该药物组合物包含式I的化合物以及生理学可接受的载体，通过在眼内或眼附近的局部治疗，例如滴眼剂或眼用霜剂形式。实验材料化学品分别从鬼臼霉素(得自Sigma和其它商业来源)和脱氧鬼臼霉素(得自AnalyteconSA，PreJorat，Switzerland)合成鬼桕苦素(99%纯)和脱氧鬼桕苦素(99%纯)。从鬼桕苦素合成脱水鬼桕苦醇(99%纯)。方法血糖试验将10周龄的SCID小鼠用PPP(20mg/kg/12h)腹膜内处理，使用二甲亚砜作为媒介物。对照小鼠仅仅用媒介物处理。每组处理三只小鼠。处理7天后，在最后一次注射之后的4小时处死小鼠。采集血样，使用Vitros950化学系统通过dryslide技术测定血清中葡萄糖浓度。所有的实验根据实验动物应用的伦理指南进行，并通过学会伦理委员会的批准。激光诱导黄斑变性病灶为了诱导黄斑变性病灶，将成年C57Bl/6小鼠麻醉，将三个激光点置于脉络膜的基底黄素斑处，使用氪红光激光器(614nm，50mm,0.05秒，200mW)。然后用PPP(20mg/kg/12h)腹膜内处理小鼠2周，使用DMSO作为媒介物。对照小鼠仅仅用媒介物处理。每组处理20只小鼠。激光处理后2周，对动物灌注3%的FITC结合型高分子量右旋糖酐，处死并制备脉络膜平载片。使用荧光显微术Axioskop显微镜检查平载片。将黄斑变性病灶确定为FITC灌注血管。使用Image-ProPlus软件测量每个CNV病灶的面积。数据记录为黄斑变性病灶的面积(pm2)。与医生A.Kvanta合作，在S:tEriksEyeHospital,(Stockholm,Sweden)进行了如下的黄斑变性实验，与K.Gemzell-Danielsson医生，KarolinskaInstitutet,Stockholm,Sweden合作，使用排卵和胚胎着床模型进行避孕实验。实验l.鬼桕苦素对小鼠血糖水平的作用。在本实验中，通过腹膜内注射，每天两次用鬼桕苦素处理健康的SCID小鼠，剂量为20mg/kg/12h。对照组仅仅用媒介物处理(每天都进行20pLDMSO)。每组包括3只小鼠。结果如表l所示。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>结果表明鬼桕苦素降低小鼠中的血糖水平，暗示了在用鬼桕苦素处理的小鼠中与对照组相比胰岛素/胰岛素受体的活性被剌激。实验2.鬼桕苦素对黄斑变性动物模型的作用黄斑变性是导致视力丧失的主要原因。通过激光在40只成年C57Bl/6小鼠中诱导黄斑变性病灶。二十只动物接受腹膜内(i.p.)注射鬼桕苦素(PPP;20mg/kg/12h)持续2周。对照组接受i.p.注射媒介物。激光处理后2周，处死动物并制备脉络膜平载片。使用荧光显微镜检查平载片。使用Image-ProPlus软件测量每个CNV病灶的面积。结果如表2所示。表2.使用鬼桕苦素(PPP)处理2周对小鼠中黄斑变性病灶面积的作用。<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>结果表明在用鬼桕苦素处理的组中黄斑变性病灶面积縮小32%，具有统计显著性。因此，鬼桕苦素减弱黄斑变性。实验3.鬼桕苦素对小鼠模型的排卵的作用在交配的前一天和当天用鬼桕苦素处理雌性小鼠(PPP;20mg/kg/12h，腹膜内给药)。次日早晨检查阴栓。在交配后4天处死每组中的6只小鼠。收集的器官是卵巢，子宫，肝脏和脾，用于生化分析。结果如表3所示。表3.鬼桕苦素(PPP)对排卵的作用<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>结果表明用鬼桕苦素处理的雌性小鼠根本不排卵，而用媒介物处理的小鼠的50%排卵。通过鬼桕苦素的排卵抑制具有完全的和强烈的显著性(P-0.005919;Fishers精确检验)。实验4.鬼桕苦素对小鼠模型的着床的作用使动物交配并在次日早晨检查阴栓。对阴栓呈阳性的六只雌性小鼠用鬼桕苦素(20mg/kg/12h,腹膜内给药)处理，和在阴栓后第3-6天用媒介物处理六只小鼠(对照组)。排卵后第9天处死小鼠。收集的器官是卵巢，子宫，肝脏和脾，用于生化分析。结果如表4所示。表4.鬼桕苦素对着床的作用<formula>formulaseeoriginaldocumentpage22</formula>*无统计显著性结果强烈地暗示了鬼桕苦素消极地干扰胚胎在子宫中的着床，但是动物数太低，不能获得统计显著性。权利要求1.式I的化合物及其可药用盐在制备用于预防或治疗至少一种选自以下的疾病的药物中的应用II型糖尿病，肾病，视网膜病，黄斑变性，早产儿视网膜病，视网膜中央静脉闭塞，视网膜分支静脉闭塞，新生血管性青光眼，甲状腺眼病，角膜移植排斥和角膜化学灼伤，其中R1选自H、OH和酯基，并且R2选自O和两个H。2.式I的化合物及其可药用盐用于避孕的应用，其中&选自H、OH和酯基，并且R2选自0和两个H。3.式II的化合物及其可药用盐在制备用于预防或治疗至少一种选自以下的疾病的药物中的应用II型糖尿病，肾病，视网膜病，黄斑变性，早产儿视网膜病，视网膜中央静脉闭塞，视网膜分支静脉闭塞，新生血管性青光眼，甲状腺眼病，角膜移植排斥和角膜化学灼伤，其中R,选自H、OH和酯基，其中内酯环具有含两个p键的顺式构型，并且其中Ri和三甲氧基苯基处在a位。4.权利要求1、2或3的应用，其中所述化合物选自鬼桕苦素和脱氧鬼桕苦素。5.权利要求1所述的具有式III结构的化合物及其可药用盐在制备用于预防或治疗至少一种选自以下的疾病的药物中的应用II型糖尿病，肾病，视网膜病，黄斑变性，早产儿视网膜病，视网膜中央静脉闭塞，视网膜分支静脉闭塞，新生血管性青光眼，甲状腺眼病，角膜移植排斥和角膜化学灼伤，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>其中Rt选自H、OH和酯基，其中内醚环具有含两个(3键的顺式构型，并且其中Ri和三甲氧基苯基处在a位。6.权利要求1、2或5的应用，其中所述化合物选自脱水鬼桕苦醇和脱氧脱水鬼桕苦醇。7.权利要求1-6中任一项的应用，其中选自OCOH，OCO(CH2)0-18CH3，OCOCH(CH3)2，OCO(CH2)2COOH，OCOCH2N(CH3)2，OCONHCH2CH3，OCOC5丽4和OP03H2。8.权利要求1或3-7中任一项的化合物在制备用于预防或治疗II型糖尿病的药物中的应用。9.权利要求1或3-7中任一项的化合物与其它的选自胰岛素、磺酰脲类、二甲双胍和a-葡糖苷酶抑制剂的药物的组合使用。10.权利要求1或3-7中任一项的化合物在制备用于预防或治疗肾病的药物中的应用。11.权利要求1或3-7中任一项的化合物在制备用于预防或治疗糖尿病性视网膜病的药物中的应用。12.权利要求1或3-7中任一项的化合物在制备用于预防或治疗黄斑变性的药物中的应用。13.权利要求l或3-7中任一项的化合物在制备用于预防或治疗早产儿视网膜病的药物中的应用。14.权利要求1或3-7中任一项的化合物在制备用于预防或治疗视网膜中央静脉闭塞(CRVO)的药物中的应用。15.权利要求l或3-7中任一项的化合物在制备用于预防或治疗视网膜分支静脉闭塞(BRVO)的药物中的应用。16.权利要求1或3-7中任一项的化合物在制备用于预防或治疗新生血管性青光眼的药物中的应用。17.权利要求l或3-7中任一项的化合物在制备用于预防或治疗甲状腺眼病的药物中的应用。18.权利要求1或3-7中任一项的化合物在制备用于预防或治疗角膜移植排斥的药物中的应用。19.权利要求1或3-7中任一项的化合物在制备用于预防或治疗角膜化学灼伤的药物中的应用。20.权利要求2、4、6或7中任一项的化合物用于避孕的应用。21.权利要求2、4、6或7中任一项的化合物与至少一种选自雌激素、孕激素和前列腺素的药物的组合使用。22.权利要求2、4、6或7中任一项的化合物与米非司酮的组合使用。23.治疗眼病的方法，包括给药药物组合物，该药物组合物包括式I-III中任一式表示的化合物以及生理学可接受的载体。24.权利要求23的方法，其中药物组合物在眼内周部给药。25.权利要求23的方法，其中药物组合物在眼附近给药。全文摘要本发明公开了某些环木脂体的以下应用用于预防或治疗II型糖尿病，肾病，视网膜病，黄斑变性，早产儿视网膜病，视网膜中央静脉闭塞，视网膜分支静脉闭塞，新生血管性青光眼，甲状腺眼病，角膜移植排斥；和用于避孕，优选的化合物是鬼桕苦素、脱氧鬼桕苦素和脱水鬼桕苦醇。还描述了治疗眼病的方法。文档编号A61P15/00GK101389326SQ200780006371公开日2009年3月18日申请日期2007年2月23日优先权日2006年2月24日发明者奥勒·拉松,欧洛夫·丹尼尔松,马格努斯·阿克塞尔松,马里奥-亚历山大·埃科诺穆申请人:阿克塞拉公司