专利名称：：灵芝孢子油在制备美白祛斑化妆品或药物中的应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种灵芝孢子油的应用，具体涉及一种灵芝孢子油在制备美白祛斑化妆品或药物中的应用。
背景技术：
：人类皮肤的颜色取决于黑色素的含量与分布，而黑色素细胞的结构功能和数量直接影响皮肤中黑色素的含量，也是产生黑色素的决定因素。在皮肤代谢循环过程中，存在于黑色素细胞组织中的酪氨酸在酪氨酸酶、多巴色素互变酶、二羟基吲哚酸(DHICA)氧化酶作用下经过多巴、多巴醌、多巴色素、二羟基吲哚酸等中间体逐步转化为真黑色素。当黑色素过速增长和分布不均时，就会造成局部皮肤过黑及色素沉着。另外，黑色素细胞接受到存在于细胞外部一种称之为"内皮素"的物质，就得到了加速制造黑色素的信息，而且酪氨酸酶也被激活，皮肤就变黑了。皮肤不同区域产生的内皮素多少不同，皮肤就会产生深浅不一，从而产生色斑。按照《化妆品卫生规范》中的定义，化妆品是以涂抹、喷洒或其他类似的方法，施于人体表明任何部位(皮肤、毛发、指甲、口唇、口腔黏膜等)，以达到清洁、消除不良气味、护肤、美容和修饰目的的产品。美白化妆品可以增进肌肤白皙，淡化色素、色斑。美白化妆品正在为改善、提高人们的生活起着不可忽视的作用，也越来越受到消费者的青睐，作为美容事业中的一大产业，随着美白化妆品需求量的增加，其市场前景广阔。在筛选美白剂有效成分时，在考虑其美白效果的同时，也应关注其卫生安全性，开发出高效、低毒的美白化妆品才是真正服务大众。实践证明，一些天然中草药成分具有很好的美白、祛斑效果，并得到一定的临床肯定，而我国中药药源丰富、无不良反应，因此筛选有效的中草药并结合现代医学的新型制剂组成新的低毒或无毒但有效美白的剂型将有着广阔的研究应用前景。灵芝，别名赤芝、红芝、木灵芝、菌灵芝、灵芝草。来源于多孔科真菌灵芝/"c^wm(Z^饥e;c的子实体。菌柄侧生，极少偏生，长于菌盖直径，紫褐色至黑色，有漆样光泽，坚硬。灵芝是我国中医药宝库中的珍品，素有"仙草"之美誉。古今药理与临床研究均列为可"养生、无毒、长期服用无副作用，能使身子轻盈、防老化、益元气、延年益寿的上药"，明代著名医药学家李时珍的《本草纲目》记载，灵芝主治胸中结，益心气，补中，增智慧，不忘；久食，轻身不老，延年神仙。现代药理学与临床实践进一步证实了灵芝的药理作用，现在，灵芝作为药物已经正式被国家药典收载，同时它又是国家批准的新资源食品，无毒副作用，可以药食两用。科学研究表明，灵芝的药理成分非常丰富，其中有效成分可分为十大类，包括灵芝多糖、灵芝多肽、三萜类、16种氨基酸(其中含有七种人体必需氨基酸)、蛋白质、甾类、甘露醇、香豆精苷、生物碱、有机酸(主要含有延胡索酸)，以及微量元素Ge、P、Fe、Ca、Mn、Zn等。灵芝对人体具有双向调节作用，所治病种，涉及心脑血管、消化、神经、内分泌、呼吸、运动等各个系统，尤其对肿瘤、肝脏病变、失眠及衰老的防治作用十分显著。灵芝孢子粉是灵芝发育后期弹射释放出来的种子，生物学上称为担孢子，集中起来后成粉末状，通称灵芝孢子粉。灵芝孢子粉富含多糖肽、三萜类灵芝酸、天然有机锗、酶类、硒元素等活性物质。灵芝孢子粉经破壁后进行二氧化碳超临界萃取，即得灵芝孢子油，为灵芝孢子中的活性物质，主要成分为灵芝酸，不饱和脂肪酸等，为清凉黄色透明液体。经药理实验证明具有如下功效1、双向调节人体免疫力；2、抑制肿瘤细胞的生理活性，预防癌细胞的再生和转移；3、创造治疗机会，使只能保守治疗的患者能够有机会接受手术及放、化疗。4、减轻患者因放化疗引起的毒副作用，尤其是白细胞减少症，提高患者对放化疗的耐受性。但是，至今还未见灵芝孢子油外用的报道，特别是在具有美白祛斑效果的化妆品或药物中的应用。
发明内容本发明的目的是提供灵芝孢子油的新用途，即灵芝孢子油在制备美白祛斑的化妆品或药物中应用。灵芝孢子油可单独使用直接涂抹于皮肤用于美白祛斑；或加入用于化妆品领域的普通添加剂，如防腐剂、抗氧化剂、稳定剂、臭味吸收剂、螯合剂、颜料、表面活性剂、香料、溶剂等按照制备化妆品的常规工艺制备面霜、面膜、护肤水等；或加入药学上可接受的辅料按照制备外用药物的常规工艺制备美白祛斑的外用药物。采用灵芝孢子油制备的具有美白祛斑效果的化妆品或药物存在形态及采用的剂型可以不限于任何形式。本发明经过大量实验证实灵芝孢子油无毒、无刺激性、并可以增进肌肤白皙，淡化色素、色斑，适于在制备美白祛斑的化妆品或药物中应用。其中，所述的斑点不限于任何形式的色素沉着的斑点；所述的药物为具有美白祛斑效果的外用药物。皮肤毒性、刺激性试验和美白效果试验-受试物灵芝孢子油，按实施例2方法制备得到。1、大鼠急性经皮性试验大鼠急性经皮毒性试验采用最大限量法。设10000mg/kg—个剂量组，20只SD大鼠，雌雄各半。备皮剪去大鼠脊椎两侧的被毛，去毛面积为4x5cm2。24h后确认无皮肤损伤，以lml/100g.bw将该剂量组溶液滴于6层纱布上，贴敷于已去毛的皮肤上，覆盖称量纸，胶布固定。4h后，取下纱布，洗去残留物，观察其中毒症状、体征，连续观察二周，判定其毒性分类。灵芝孢子油lOgZkg.bw剂量经皮染毒后，两周内未见动物死亡，亦无明显的中毒症状或不良反应，结果见表5。两周实验结束后剖杀全部动物，内脏器官未见明显异常改变。即灵芝孢子油对雌、雄性SD大鼠的急性经皮MTD大于10g/kg.bw，属实际无毒类。表l灵芝孢子油对SD大鼠的急性经皮毒性试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>2、皮肤刺激性试验家兔急性皮肤刺激试验白色家兔4只，剪去脊柱两侧的被毛，去毛面积两侧各为2x3cm2，24h后确认无皮肤损伤，将l.Omg灵芝孢子油涂布在已去毛的兔背右侧皮肤上，左侧用蒸馏水作对照，覆盖2层级纱布和称量纸，胶布固定。持续4h后，取下纱布，洗去残留物，观察去除受试物后的l、24、48及72h的皮肤刺激反应和恢复情况，计算刺激反应的平均分值，作出评价。多次皮肤刺激性试验白色家兔4只，剪去脊柱两侧的被毛，去毛面积两侧各为2x3cm2，24h后确认无皮肤损伤，将l.Omg灵芝孢子油涂布在已去毛的兔背右侧皮肤上，左侧用蒸馏水作对照，每天涂抹1次，连续涂抹14d。从第二天开始，每次涂抹前应剪毛,用水清除残留受试物。一小时后观察结果，计算剌激反应的平均分值，作出评价。灵芝孢子油对四只家兔急性皮肤刺激反应和多次皮肤刺激反应的红斑、水肿形成评分之和的均值最高为0，见表2，表3。根据评判标准，表明灵芝孢子油对家兔皮肤无刺激性。_表2灵芝孢子油对家兔皮肤刺激试验结果_^1小时24小时48小时72小时刺激温度无刺激无刺激无刺激无刺激无刺激无刺激无刺激无刺激表3灵芝孢子油对家兔多次皮肤刺激性试验结果刺激反应积分动物数(只)受试物对照红斑水肿总分红斑水肿总分14000000240000003400000044000000540000006400000074000000840000009400000010400000011400000012400000013400000014400000014天每只动物积分均值000000每天每只动物积分均值0000003、家兔眼刺激试验白色家兔4只，确认无眼疾病后，在一侧眼结膜囊中滴入0.2mg的灵芝孢子油，另一侧眼作空白对照。观察滴眼后1、24、48、72h及4、7d的眼结膜、虹膜、角膜的刺激反物性编别号1雄2雄3雌4雌积分均值对照红水斑肿0000000000受试物红水斑肿0000000000对照红水斑肿0000000000对照红水斑肿0000000000物水肿ooooo试受红斑coooo物水肿ooooo试受红斑coooo水肿oooo对红斑ooo物水肿oooo试受，y斑oooo应和恢复情况，计算眼刺激积分指数，作出评价。灵芝孢子油对四只家兔眼睛急性剌激反应的最高刺激指数均值为0.25，见表4，24h后为0，根据评判标准，表明灵芝孢子家兔眼睛无刺激性。表4灵芝孢子油对家兔眼睛刺激性试验结果平均刺激指数000000004、皮肤美白试验40只成年黑色或褪色豚鼠，随机分为2个组，即受试物组和阴性对照组，每组20只，雌雄各半。试验方法如下，试验前24h剪去豚鼠背部左侧的被毛，面积为3x3cm2。24h后确定无皮肤损伤，将受试药物组涂抹0.1mg的灵芝孢子油，封闭固定，持6h后，洗去残留物。第3天，第5天，第7天，第9天，同样方法重复一次。第十天将受试物与阴性对照组豚鼠皮肤进行比较受试组皮肤颜色明显变浅，更有弹性且饱满度与紧致度更好。眼刺激反应积分<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>位膜膜膜分膜膜膜分膜膜膜分膜膜膜分部结虹角积结虹角积结虹角积结虹角积分物号1总5、人体试用试验以灵芝孢子油乳液为供试品，选有日晒引起脸部皮肤变黑、有严重色斑的自愿者40人试用，年龄为4160岁。40位受试者每天睡前清洁皮肤后，涂抹按实施例l方法制备得到灵芝孢子油乳液约3~5g至脸上。30天后，统计结果表明涂抹灵芝孢子油乳液有明显效果(皮肤明显变白，更加光滑细腻，色斑明显淡化)的32人，占80%;显效(皮肤变白，光滑，色斑淡化)的为7人，占17.5%;无效果的为l人，占2.5%。以灵芝孢子油面膜为供试品，选有日晒引起脸部皮肤变黑变粗现象的自愿者40人试用，年龄为2546岁。40位受试者每天下午清洁皮肤后，按实施例5方法，将23g灵芝孢子油渗于面膜纸，每天做面膜30分钟。20天后，统计结果表明有明显效果的34人，占85%;显效的为6人，占15%。灵芝孢子油面膜敷面后，面部皮肤弹性有光泽、饱满度、白皙度、紧致度更好。具体实施例方式下面结合实施例对本发明做进一步说明。实施例l取灵芝孢子油10g，纯净水100g，混合后通过胶体磨乳化得乳液，用巴氏消毒法消毒后冷却、过滤、装瓶，装瓶后04'C冷藏。使用时，开瓶后直接涂抹皮肤。实施例2取灵芝孢子油ioog，用巴氏消毒法消毒后冷却、过滤、装瓶，装瓶后o4t:冷藏。使用时，开瓶后直接涂抹皮肤。实施例3将10g灵芝孢子油，24g硬脂酸，7g单硬脂酸甘油酯，12g液状石蜡，2g白凡士林，10g羊毛脂加热至80。C左右混合熔化，另将lg三乙醇胺和135g水亦加热至8(TC左右，在等温下将水相缓缓倒入油相中，并于80。C左右不断搅拌至呈乳白色半固体状，再在室温下搅拌至近凝，装瓶后04'C冷藏。使用时，开瓶后直接涂抹皮肤。实施例4取灵芝孢子油约23g，用蜂蜜或蛋清调和成浆。将面洗净后，敷于面部，30min后洗去。实施例5将23g灵芝孢子油渗于面膜纸即可，每天做面膜30min。灵芝孢子油可以通过如下方法进行提取分离可按照申请号为99123952.0的专利文献公开的方法制备得到，具体步骤为选取饱满灵芝孢子进行破壁处理，再用纯化水做粘合剂制成大小一致的粗颗粒，加水量使所述灵芝孢子粉粘结成型为准，自然干燥；然后进行二氧化碳超临界萃取将干燥后的灵芝孢子粗颗粒装入萃取器中，从萃取器底部通入C02气，控制温度为35-65°C，压力20-35MPa，萃取135小时后，从萃取器上部流出含有灵芝孢子油的C02进入减压分离器，灵芝孢子油从减压分离器底部放出，C02从减压分离器的顶部流出；将灵芝孢子油的水及胶状物分离除去后得到纯化的灵芝孢子油，从萃取器回收脱脂的灵芝孢子份。灵芝孢子油得率为10~20%。权利要求1.灵芝孢子油在制备美白祛斑化妆品或药物中的应用。2、根据权利要求1所述的药物为外用药物。全文摘要本发明公开了灵芝孢子油在制备美白祛斑化妆品或药物中的应用。灵芝孢子油制备的美白祛斑化妆品或药物具有增进肌肤白皙，淡化色素、色斑的作用，具有良好的应用前景。文档编号A61P17/00GK101366691SQ200810021958公开日2009年2月18日申请日期2008年8月20日优先权日2008年8月20日发明者敏冯,鹏冯,诚刘,华克伟,张文萍,洁曹,朱韵韵,王连安,钱一帆,陈素玲申请人:南京中科集团股份有限公司