专利名称：：川芎当归总提取物及制剂和用途的制作方法
技术领域：
：本发明属于现代中药领域，具体而言，本发明涉及系列用于制备治疗妇科疾病以及头痛、痹痛等疾病的现代中药。
背景技术：
：复方芎归由著名中药川芎、当归组成，又名佛手散，是经典中药药对。本方最初出自《普济本事方》主治妊娠伤胎、难产，胞衣不下等妇科疾病，《医宗金鉴》对其治病机理作了较详尽的辨证分析'命名曰佛手者，谓妇人经前、产后诸症，如佛手之神妙也。川芎、当归为血分之主药，性温而味甘、辛，以温能和血，甘能补血，辛散血出也。"在以后的临床应用中该方剂被广泛地应用于与之辨证相关连的病症，如月经不调、经行腹痛、妇人难产、产后瘀血腹痛；疮疡肿痛；风湿痹痛；血虚、血瘀头痛等症。对复方芎归的研究除了传统的煎、煮、熬给药工艺外，现代的研究方法包括乙醚提取和乙醇渗滤后乙醚提取等，而这些方法存在着工艺周期长、大量使用有机溶剂等缺陷。例如，乙醇渗滤需要12小时左右；大量使用有机溶剂，操作上容易出危险，工业化生产有一定难度；提取过程中有机溶剂有可能清除不净，药品中有残留物；使用试剂量大，成本较高；工艺过程长，可变因素多，不利于产品的监测等缺陷。超临界萃取技术是一种新型的提取技术，在多个领域具有广阔的应用。超临界流体(SCF)指热力学状态处于临界点(Pc，Tc)之上的流体，此时流体处于气态与液态之间的一种特殊状态，具有十分独特的物理化学性质。SCF的粘度接近于气体，密度接近于液体，扩散系数介于气体和液体之间，兼有气体和液体的优点，既象气体一样容易扩散，又象液体一样有很强的溶解能力。因而SCF具有高扩散性和高溶解性。在其它条件完全相同的情况下，液体的密度在相当程度上反应了它的溶解能力，而SCF的密度与压力和温度有关，随着压力的增大，介电常数和密度增大，SCF对物质的溶解能力增大。超临界萃取就是利用SCF在临界点附近体系温度和压力的微小变化，使物质溶解度发生几个数量级的突变性质来实现其对某些组分的提取和分离。通过改变压力或温度来改变SCF的性质，达到选择性地提取各种类型的化合物的目的。超临界萃取技术主要有两类萃取过程恒温降压过程和恒压升温过程。不同点在于前者是把SCF经减压后与溶质分离，3后者是SCF经加热实现溶质与溶剂分离。溶剂都可以反复循环使用。常用作SCF的溶剂有(202、NH3、甲苯等。其中C02是工业上最常用萃取剂，其特点是a)临界温度低(31.06°C)，萃取可以在室温附近的温和条件下进行，对易挥发组分或生理活性物质极少破坏，适合于天然活性成分的提取；b)临界压力适中(7.14MPa)，操作条件易于达到，在室温下液化压力为4Mpa—6MPa，便于储运；c)安全无毒，尤其适合制药、食品工业，且萃取分离一次完成，无溶剂残留；d)具有化学惰性不可燃，操作安全，价廉易得；e)C0二,可循环使用。超临界萃取在中药现代化领域已经显现强大的生命力，部分中药己经借此实现产业化。在不同的压力、温度区间，二氧化碳对物质的选择具有不同的针对性，可使中药提取纯度更高、生产更为高效。此外，采用超临界技术萃取有效成分，提取物中的耗氧微生物将被完全杀死，而生物活性物质不会被破坏。我们在充分研究的基础上，采用超临界萃取技术从复方川芎当归中提取了一种总提取物，对川芎和当归的有效成分进行提取。同时对提取物丌展了深入细致的药理研究，发现本提取物具有相同适应症其他治疗药物无法企及的优点，可以丌发用于制备治疗妇科疾病以及头痛、痹痛等疾病的现代中药。发明概述本发明的目的是提供一种复方芎归总提取物，其中含苯酞类成分20-95%，不饱和脂肪酸成分5-40%。本发明的另一目的是提供一种制备本发明复方芎归总提取物的方法。本发明的另一目的是提供含有本发明复方芎归总提取物的药物制剂。本发明的另一目的是提供了本发明复方芎归总提取物用于制备治疗头痛、风湿痹痛及妇科痛经、月经不调等症的中药复方药物。发明详述本发明提供的复方芎归总提取物，其中含苯酞类成分20-95%，不饱和脂肪酸成分5-40%。在苯酞类成分中，藁苯内酯含量为10-90%，优选20-80%，更优选30-70%，最优选优选40-60%;不饱和脂肪酸成分包括亚油酸，油酸或亚麻酸等。本发明提供的复方芎归总提取物的具体方法包括如下歩骤a.分别将当归和芎归粉碎，过20F!筛；b.将重量比为20-80%，优选30-70%，更优选40-60%的当归和重量比为20-80%,优选30-70%，更优选40-60%的芎归粉末置超临界C02提取仪萃取，萃取条件是压力10-100Mpa，优选20-50Mpa;温度0-l(XTC，优选室温-80。C;取物分离条件第一分离釜压力5-50Mpa，优选8-15Mpa,温度0-IOO'C，优选，20-80'C;第二分离釜压力l-20Mpa，优选4-6Mpa，温度0-100。C，优选20-80。C;C.收取第二分离釜萃取物，过滤、离心，取油层得总提取物。与现有技术相比，本发明的总提取物的制备方法具有诸多优点1.工艺技术先进，生产成本低，适合现代化工业生产；2.得到的总提取物及其制剂起效迅速、疗效好，无明显毒副作用；3.使用超临界C02;萃取技术提取药物，不使用乙醚及乙醇等有机溶剂，产品安全、天然；4.本发明的萃取技术速度快，一个工作日内可完成一批次产品，大大縮短生产周期；5.由于川芎、当归中的活性成分藁本内酯高温下易发生反应，而超临界C02萃取技术萃取温度低，适于对该活性成分的萃取；6.超临界C02;萃取技术得率高，萃取介质可循环使用，可降低生产成本和药材用量o本发明人将总提取物进行了进一步研究，将提取物制成各种药物组合物，包括片剂、丸剂、滴丸剂、粉术剂、锭剂、胶囊、软胶囊剂、凝胶剂、糖浆剂、膏剂、悬浮液、扁囊剂和栓剂等，特别是滴丸剂和胶囊剂等。具体制备工艺如下滴丸制备工艺如下a.取上述芎归总提取物，与常规重量比例的聚乙二醇等辅料加热熔融，加热温度为60-90°C，其中聚乙二醇可以使用聚乙二醇4000-聚乙二醇20000系列中的一种或它们的混合物；b.置滴丸机中，60-90。C恒温，控制流速，滴入二甲基硅油冷凝液中，条件滴口直径2咖-5mm;滴距2-5cm;滴速30-60滴/分钟；冷凝液温度0°C-30°C;冷凝液高度30-60cm;C.取滴丸，拭去表面冷凝液，即得滴丸。软胶囊制备工艺如下a.胶液的配置按常规比例称取明胶、甘油、水，置于胶桶中，40-8(TC水浴化胶，呈熔融态后，搅拌下加入遮光剂二氧化钛，调色剂可可棉等，混合均匀；b.将处理好的胶液抽真空除气泡；C.将处理好的胶液与本发明的总提取物分别加入胶囊机胶桶与料斗中，压制。胶丸放至高燥室中干燥24小时，取合格胶九即得。本发明方法得到的总提取物以苯酞类成分及不饱和脂肪酸类成分为主要活性成分，其中苯酞类成分含量可达10-90%，其中苯酞类成分中藁本内酯含量为10-90%，不饱和脂肪酸成分可达1-40%，优选5-40%，其中不饱和脂肪酸包括亚油酸、油酸，亚麻酸等。本发明的提取工艺可以使芎归总提取物中苯酞类成分和不饱和脂肪酸类成分保持一定的比例关系，而这两者的比例关系对总提取物的药用效果是至关重要的。这是因为1.苯酞类成分具有明显的活血化瘀、抗炎镇痛的功效，但也有较明显的副作用，可能对胃肠道、肾以及中枢神经有一定的损害；因此应注意适当降低该类成分在药物中的比例；以及进行配伍降低毒性；2.不饱和脂肪酸具有一定的细胞保护作用，特别是在胃肠道中，可以预防或减少其它类成分引起的不良反应，另外不饱和脂肪酸也有一定的抗炎和改善血流变的作用。因此，我们通过长期研究，摸索出上述制备总提取物的工艺将以上两类成分结合在一起，起到增效、减毒的作用，这一特点在我们所进行的试验中得到了进一歩的证明。本发明人将总提取物进行了进一歩药效学、药理学及毒理学研究，包括对大鼠和家兔在体子宫的影响试验、对抗缩宫素的影响试验、抗凝血作用试验、抗血小板聚集作用试验、抗炎试验、镇痛试验、大鼠和犬的长毒试验、大鼠和小鼠的急毒试验，小鼠和犬的一般药理试验等。从以上试验中发现芎归总提取具有解痉、镇痛、活血、抗炎等药理活性作用，对正常生理指标无影响，毒性低，安全性高等特点，具备开发成为中药新药的条件。将总提取物制成滴丸剂及软胶囊，该剂型有利于该有效成分在人体内完全、快速的吸收，充分发挥其药效作用，临床上可用于治疗头痛、风湿痹痛及妇科痛经、月经不调等症。本发明合并该复方中川芎、当归的有效成分，在所进行的有关痛经药理试验中证明合并提取物的药效作用优于当归的单独提取物，芎归总提取物起效时间较快、药效作用强，有效剂量小；在抗凝血实验中发现当归提取物凝血速率和强度虽有一定药效作用，但并不明显，而芎归总提取物有明显的抗凝血作用；在抗血小板聚集实验中芎归总提取物有明显的抗血小板聚集作用，而当归提取物未表现出这一作用。下面通过实施例进一歩说明本发明。应该理解的是，本发明的实施例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。根据本发明的实质对本发明进行的简单改进都属于本发明要求保护的范围。除非另有说明，本发明中的百分数是重量百分数。实施例1芎归总提取物的制备取川芎、当归药材，将占药材重量30%的川芎和占药材重量70%当归药材或饮片粉碎至20目，置超临界萃取器中，萃取3小时，萃取压力30Mpa，温度40。C，第一分离釜压力12Mpa，温度4(TC，第二分离釜压力5Mpa，温度4(TC。取第二分离釜液体，抽滤，离心，取油层即得。实验结果样品得率2.87，苯酞类含量38.4%，藁本内酯含量16.9%，亚油酸含量3.21%。实施例2芎归滴丸的制备取实施例l的总提取物，与聚乙二醇4000加热熔融，搅拌均匀，倾入滴丸机中，80。C恒温下滴入5-8。C甲基硅油50冷凝液中，滴速30-40滴/分钟，滴距4cm，滤出滴丸，擦净硅油，分装制成滴丸即得。结果表明滴丸圆整、工业易操作，理化指标合格。实施例3芎归软胶囊的制备取实施例1的总提取物，按比例称取明胶、甘油、水置化胶罐中，65'C水浴化胶，呈熔融态后，搅拌下加入调色剂可可棕。待混合均匀后，抽真空除气泡。将处理好的胶液与药液分别加入胶囊机胶桶与料斗中，压制。胶丸放至干燥室中干燥24小时，取合格胶丸，即得。实施例4芎归总提取物对縮宫素所致小鼠痛经的影响研究试验实验目的观察芎归总提取物对縮宫素所致小鼠痛经的影响作用，以及比较芎归总提取物和单味当归提取物二者的药效作用及各自作用特点。实验材料1.受试动物ICR小鼠，雌性，体重20土2g,由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，合格证号SCXK11-00-0008。2.受试药物芎归总提取物由北京瑞康医药技术有限公司提供，批号020112，用蒸馏水和吐温一80配成乳悬液供动物灌胃给药。当归提取物由北京瑞康医药技术有限公司提供，用蒸馏水、吐温配成乳悬液供动物灌胃给药。3.试剂及仪器縮宫素注射液10u/ml，南京新天生物化学制药有限公司生产，批号020301。乙烯雌酚注射液2mg/ml，广州明兴制药厂生产，批号001001。实验结果和方法1.分组小鼠96只随机分为八组，即对照组，芎归总提取物60mg/kg、30mg/kg、15mg/kg组，当归提取物60mg/kg、30mg/kg、15mg/kg组。2.给药途径和给药时间灌胃给予受试药物，模型组给予等量的吐温一80水溶液，给药五次，每天一次，末次给药后一小时正式实验。给药后第三天丌始腹腔注射乙烯雌酚注射液0.2ml/只，连续三次，每天一次。'3.实验方法末次给药后一小时，小鼠腹腔注射縮宫素注射液2u/只，记录小鼠在IO分钟内扭体的次数。4.统计方法各给药组均与对照组比较，计算出各项指标进行组间t检验，PO.05被认为有显著性差异。5.结果结果见表l。8表l二药对缩宫素所致小鼠通经的影响作用<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>注林与模型组相比P<0.016.结论以上结果显示，芎归总提取物60mg/kg，30mg/kg和当归提取物60mg/kg，均可明显减轻小鼠扭体次数，统计学处理提示两药可对抗縮宫素引起的子宫痉挛性疼痛。比较两药，芎归总提取物作用强度，作用剂量也较优于当归提取物。实施例5芎归总提取物抗凝血作用研究实验目的观察芎归总提取物对大鼠的抗凝血作用，以及比较复方粤归总提取物和单味当归提取物二者的药效作用。实验材料1.受试动物Wistar大鼠，体重190土20g，购于北京医科大学动物中心，动物证号医动字01-3056，饲养处为本所动物词养中心。2.受试药物芎归总提取物由北京瑞康医药技术有限公司提供，批号020108，用蒸馏水和土温-80配成乳悬液供动物灌胃给药。当归提取物由北京瑞康医药技术有限公司提供，用蒸馏水和土温-80配成乳悬液供动物灌胃给药。3.试剂及仪器HAAKE-CV100/RV旋转式流变仪德国、LXT-II离心机、KH-120A高速血球压积微量离心机闩本、LXT-2离心机上海医用仪器分析厂实验方法和结果1.分组将大鼠70只随机分为空白对照组、芎归总提取物大(36mg/kg)、中(18mg/kg)、小(9mg/kg)剂量组，当归提取物大(36mg/kg)、小(18mg/kg)剂量组，每组动物10只。2.给药途径和给药时间每日口服给药1次，容积为10ml/kg。连续灌胃7天，对照组给等容积的土温-80水溶液。3.实验方法连续给药7天后，使用3%戊巴比妥钠将大鼠麻醉，山动物腹主动脉处取血。对所取血液用枸櫞酸钠抗凝血(二者体积比为1:9)，以500ml全血37。C温浴lmin，加入1.29%氯化钙iocmi进行复钙，并测定凝血复钙指标，并可同时得到以下三个参数凝血时间(tr)，动态凝血速率(di/dt)，凝血强度(THl)。4.统计方法各给药组均与对照组比较，计算出各项指标进行组间t检验，P〈0.05被认为有显著性差异。5.结果结果见表.l。表2芎归总提取物对大鼠抗凝血的作用研究组别动物剂量TrDt/dtTm只mg/kg(min)(pa/min)(pa)空白对照100.921±0.106735.9±91.99104.47±25.20芎归36mg/kg10361.027±0.086*563.3±183.90*82.60±17.58*芎归18mg/kg10181.056±0.150*573.7±193.76*90.57±21.81芎归9mg/kg1090.986±0.106687.7±147.70101.39±22.31当归36mg/kg10361.035±0.129*633.3±189,2298.75±15.59当归9mg/kg)0180.996±0.091704.2±200.68106.80±19.40*与空白对照组t检验P〈O.OS6.结论以上结果表明，芎归总提取物大、中剂量组对于凝血时间、速率两方面指标都表现出明显的抑制作用，大剂量组同时还对凝血强度也有明显降低作用，中剂量组虽使平均值下降，但未达到显著限。当归提取物大剂量组对凝血时间有明显的抑制作用，对速率和强度虽有一定药效作用，但并不明显。综上所述，芎归总提取物有明显的抗凝血作用，10并优于当归单独使用。实施例6芎归总提取物抗血小板聚集作用研究实验目的观察芎归总提取物对大鼠血小板聚集及全血粘度、血浆粘度的影响作用，以及比较芎归总提取物和(相同工艺提取)当归提取物的抗聚集作用。实验材料1.受试动物Wistar大鼠，体重190土20g，购于北京医科大学动物中心，动物证号医动字01-3056，饲养处为本所动物饲养中心。2.受试药物芎归总提取物由北京瑞康医药技术有限公司提供，批号020108，用蒸馏水和土温-80配成乳悬液供动物灌胃给药。当归提取物由北京瑞康医药技术有限公司提供，用蒸馏水和土温-80配成乳悬液供动物灌胃给药。3.试剂及仪器HAAKE-CV100/RV旋转式流变仪德国DIC-3210四道血小板聚集仪闩本LXT-II离心机KH-120A高速血球压积微量离心机闩本LBY-N6A自动清洗式旋转粘度计北京普利生公司LBY-NW1自动清洗式毛细管粘度计北京普利生公司实验结果和方法1.分组将大鼠60只随机分为空白对照组、芎归总提取物大G6mg/kg)、中(18mg/kg)、小(9mg/kg)剂量组，当归提取物大(36mg/kg)，每组动物10只。2.给药途径和给药时间每闩口服给药1次，容积为10mL/kg。连续灌胃7天，对照组给等容积的吐温-80水溶液。3.实验方法3.1连续给药7天后，使用3%戊巴比妥钠将大鼠麻醉，由动物腹主动脉处取血。对所取血液用枸橼酸抗凝血(二者体积比为1:9)，以1000转/分离心IO分钟，制备成为富血小板血浆(PRP);再以3000转/分离心15分钟，制备为贫血小板血浆(PPP)。将制备好的PRP与PPP按比例混合。用血小板聚集仪调透光度在4000左右，即血小板浓度为3.0Xl(fml，36。C温浴2分钟，测定由ADP诱导的血小板最大聚集百分率。3.2另取lraL全血，置于旋转粘度计测定杯中，于37。C温浴lmin，随即测定不同切变率下的全血粘度。3.3用测定血小板时制备的贫血小板血浆(PPP)200W吸入毛细管粘度计中，测定37"下的血浆粘度。4.统计方法芎归总提取物各给药组均与对照组比较，进行t检验，P〈0.05被认为有显著性差异。5.结果表l芎归总提取物对大鼠血小板聚集的作用研究(动物数『10)组别剂]血小板聚压积Al&l米占iS(mpas)血浆粘度mg/Kg(%)10s-(mpas)空白对照芎归36mg/kg芎归18mg/kg芎归9mg/kg当归36mg/kg36183649.32±16.7629.29±17.53*31.27±15.02*35.00±17.2842.96±22.3738.55±1.7338.20±1.6439.57±1.3239.13±2.2938.39±2.3011.66±2.7811.41±3.1610.03±1.6910.37±2.5611.81±2.335.83±1.106.12±1.235.89±1.015.81±0.866.27±0.965.34±0.865.53±1.035.39±0.71、29±0.65;.55±0.721.09±0.0241.09±0.0171.10±0.0481.08±0.0391.08±0.036*与空白对照组t检验P<0.056.结论以上结果表明，三个剂量组的芎归总提取物以及当归提取物5天给药对正常大鼠的血液流变学指标均没有影响，即对于^常血流变参数不产生干扰，使之继续保持正常。大、中剂量组的芎归总提取物对于血小板聚集均表现出明显的抑制作用，聚集平均值降低在20%左右，从降幅而言其抑制作用比较温和；当归提取物未表现出抗血小板聚集的作用，表明就抗血小板聚集芎归复方药效要略强于当归单位药。1权利要求1.一种复方芎归总提取物，其中含苯酞类成分20-95％，不饱和脂肪酸成分5-40％。2.权利要求所述总提取物，其中在苯酞类成分中，藁本内酯含量为10-90%。3.权利要求所述总提取物，其中在苯酞类成分中，藁本内酯含量为20-80%。4.权利要求所述总提取物，其中在苯酞类成分中，藁本内酯含量为30-70%。5.权利要求所述总提取物，其中在苯酞类成分中，藁本内酯含量为40-60%。6.—种制备权利要求1-5的提取物的方法，包括a.分别将当归和芎归粉碎，过20目筛；b.将重量比为20_80%当归和重量比为20-80%的芎归粉末置超临界〔02提取仪萃取，萃取条件是压力10-100Mpa;温度0-IO(TC;取物分离条件第一分离釜压力5-50Mpa，温度0-IOO'C;第二分离釜压力1-20Mpa，温度0-IO(TC;'c.收取第二分离釜萃取物，过滤、离心，取油层得总提取物。7.—种药物组合物，包括权利要求l-5任一项权利要求所述的芎归总提取物及辅料。8.权利要求7的组合物，制备为片剂、丸剂、滴丸剂、粉末剂、锭剂、胶囊、软胶囊剂、凝胶剂、糖浆剂、膏剂、悬浮液、扁囊剂和栓剂。9.权利要求7-8的组合物，制备为滴丸剂及软胶囊剂。10.权利要求1-5及7-9任一项权利要求所述的芎归总提取物或组合物用于制备治疗头痛、风湿痹痛及妇科痛经、月经不调等症的中药复方药物。全文摘要本发明涉及一种从复方川芎当归中提取了一种总提取物，其中包括10-90％的含苯酞类成分及不饱和5-40％的脂肪酸成分，还涉及其提取方法、包含其的组合物、制剂的制备及其用于制备治疗妇科疾病以及头痛、痹痛等疾病的药物。文档编号A61P15/00GK101513436SQ20081005788公开日2009年8月26日申请日期2008年2月20日优先权日2008年2月20日发明者付俊昌,王海勇申请人:北京瑞康医药技术有限公司