专利名称：提取自棕榈油榨油废液的用于癌症治疗的化合物、其混合物及方法
技术领域：
本发明涉及利用酚类预防和治疗癌症的混合物和方法,所述酚类包括但不限于源于植物材料的酚酸和类黄酮。更具体地说，本发明涉及包含提取自棕榈油榨油废液(palm oil mill effluent)的化合物的混合物。
背景技术：
现有技术中，在某些情况下，癌症的治疗一般求助于通常在杀死或破坏恶性肿瘤 细胞方面很有效的化疗。目前，人们利用多种方法对抗癌症,其中多数方法涉及保守疗法、放射疗法或手术 疗法。然而,这些疗法也损伤了正常细胞。认识到前段中提到的重大缺陷后，有关领域的科学家和发明家开发出了用于癌症 预防和治疗的低损技术或方法，包括利用来源于植物的化合物,所述化合物可通过它们作 为抗氧剂的能力给出积极的药理学作用。一般地,抗氧剂具有多种有益的药学应用,包括对 抗癌细胞。酚类是功效强大的抗氧剂,其能提供对抗自由基的有效防御机制。维生素E用 作抗氧剂通过破坏或“中和”被称为自由基的具有潜在破坏性的氧分子来保护细胞。自由 基是细胞正常活动的副产物。粗制棕榈油含有的组分包括类胡萝卜素、生育酚、生育三烯酚、留醇、三萜烯醇、 醇、磷脂、糖脂、萜烯和饱和链烷烃。生育酚和生育三烯酚是属于维生素E的重要营养成分， 在为细胞成分提供免受氧化破坏的保护中发挥了主要作用。这些混合物的一个例子如US20040023894-炎症、癌症和血栓症的治疗 (EL-Naggar等)公开的，其中公开了用于癌症治疗的混合物由生育三烯酚组成，生育三烯 酚是维生素E家族的抗氧剂,是棕榈油和柑橘的富含成分。在此文件中,本发明涉及治疗炎 症、癌症和血栓症的混合物，更具体地说，是C0X-2抑制剂、低剂量阿斯匹林和抗氧剂或异 黄酮(isoflavones)的组合物，所述组合物提供抗癌疗效。然而，这个发明优选主要包含 C0X-2抑制剂和低剂量阿斯匹林的组合物,其中，所述阿斯匹林可能作为抗炎剂起作用。本 发明与US20040023894中所描述的不同是因为，本发明提供--种预防和治疗癌症的方法， 涉及使用添加/不添加维生素E的有效剂量的酚类的混合物，所述酚类包括提取自棕榈油 榨油废液的酚酸和类黄酮，同时辅以/不辅以保守疗法、放射疗法或手术疗法。富含酚类和 类黄酮的抗氧剂复合物的主要成分在提供强抗癌效果中发挥重要作用。因此,本发明的目的在于提供含有酚类的混合物,所述酚类包括提取自棕榈油榨 油废液的酚酸和类黄酮，所述混合物包含酚酸和类黄酮中的至少一种或所述酚酸和类黄酮 中的至少一种与维生素E的组合，所述混合物用于预防和治疗癌细胞。本发明的另一个目的在于,提供给需要的哺乳动物用药所述混合物的方法。进--步地,本发明的目的在于,提供一种天然源混合物,所述天然源混合物在给需 要的哺乳动物准备用药方面具有性价比高、操作简单的特点。
发明内容
本发明涉及含有添加/不添加维生素E的酚类的混合物，用于制备预防或抑制癌症恶化的药物,其中,所述酚类从棕榈油榨油废液得到。本发明进--步地提供添加/不添加维生素E的治疗有效量的所述混合物在制备药 物中的应用，通过将所述药物用药给需要的个体来预防或抑制个体的癌症恶化。龄趣描货本发明涉及含有酚类的混合物,及所述混合物在预防和治疗癌症的药物中的应 用,所述酚类包括酚酸和类黄酮。所述术语“酚类”是指一类由植物产生的化合物，因其化学结构归类到一起。相应地,本发明的方法涉及将添加/不添加维生素E的有效剂量的酚类用药给确 认易患癌症和/或已患癌症的个体，以便预防和/或治疗癌症。由于榨油过程中多酚氧化 酶的热失活,包括酚酸和类黄酮在内的酚类残留在棕榈油榨油废液中。维生素E包括生育 三烯酚和生育酚，其中，所述生育三烯酚和生育酚可以是α、β、γ或δ-异构体。
具体实施例方式接下来的具体实施例将为依据本发明的生产药物和相关药学制剂的方法提供详 细的说明。油棕酚类的用药能预防皮肤黑色素瘤。可能的用药包括油棕酚类的口服吸收、药 学制剂形式或其局部应用。大体上,酚类的纯提取物可以任何适于口服吸收、药学制剂形式或局部应用的形 式生产。这些形式包括溶液、胶体分散系、水包油或油包水悬浮液、乳霜、凝胶、搽剂、粉末 等。不同载体类型的配制方法是本领域公知的，可在任何相关的标准文献中找到。油棕酚类预防人乳腺癌人乳腺癌细胞在多种剂量(重量百分比)的油棕酚类存在或缺失的情况下进行体 外培养。油棕酚类以剂量依赖方式抑制人乳腺癌细胞的生长，然而，没有添加油棕酚类的乳 腺癌细胞持续增生。油棕酚类预防人前列腺癌人前列腺癌细胞在多种剂量(重量百分比)的油棕酚类存在或缺失的情况下进行 体外培养。油棕酚类以剂量依赖方式抑制人前列腺癌细胞的生长，然而，没有添加油棕酚类 的前列腺癌细胞持续增生。油棕酚类预防结肠癌使用大鼠作为动物模型,并使用二甲基胼(DMH)作为化学致癌剂,通过多剂量DMH 灌胃法在大鼠中诱导结肠癌的发病。实验动物组在饮用水中补充油棕酚类，而对照动物组 只提供水，不补充油棕酚类。在整个实验过程中，所有的大鼠均随意以普通大鼠食物喂养维 持。与没有补充这些油棕酚类的对照组相比,补充油棕酚类的大鼠显示出了明显更少的结 肠息肉和肿瘤。对补充油棕酚类的肿瘤小鼠的微阵列研究表明抑制癌细胞生长效应大约6周龄的雄性近交系balb/c小鼠适应性饲养一周后在颈部背侧皮下注射200 μ 1的J558骨髓瘤细胞(2 3 X IO6个/200 μ 1),然后将小鼠分成两组,一组提供蒸馏 水(η = 6)，另外一组提供油棕酚类(1500ppm没食子酸当量)(η = 6)。待4周后杀死小 鼠，当通过颈部触诊观察到肿瘤存在时，切下肿瘤，放入液氮迅速冷冻并且在整个RNA离析 处理过程中一直贮存于 80°C。待确定离析获得的RNA的产量、纯度和完整性后,选出4个 在各种条件下具有最高完整性的总RNA样品进行微阵列研究,研究采用Illumina小鼠全基 因组表达谱微珠芯片MouseRef-8 (Illumina, Inc.，圣迭戈，加利福尼亚)，按照制造商的说 明书进行。采用I ！lumina BeadStudio软件(11 luraina, Inc.，圣迭戈，加利福尼亚)进行杂 交质量控制、微阵列数据提取和初始分析。离群样本通过Illumina BeadStudio软件提供 的聚类分析移除，同时也利用TIGR MeV软件[1]通过不同长度测量移除。每种情况F的 至少3个样本(移除离群样本后)用作进一步分析。基因表达值利用恒量分组方法(rank invariant method)标准化，不管是对照样本还是治疗样本,检测水平高于0. 99的基因均 认为是显著性检测。为了滤去统计学上差异显著的基因数据,使用了 Illumina的惯用错 误模型(Custom errormodel)，当微分值(Differential Score)大于13，相当于P值小于 0. 05时，基因被认为具有显著性差异。基因及其对应数据输出到微软Excel软件作进一步的分析。为了计算倍数变化 (fold change),表达值小于任意值10的使之为10,然后，如果基因是上调，则倍数变化均 通过信号Y的平均值(治疗)除以信号X的平均值(对照)进行计算，如果基因是下调，则 反之亦然。利用TIGR MeV[l]软件进行有意义的基因的双向(基因和样本)聚类分析，以 保证每种情况下的样本彼此聚类。欧氏距离度量法(Euclidean distance metric)和均连 法(average linkage method)用来进行聚类分析。生物通路和基因本体的变化可利用GenMAPP软件[2]和MAPPFinder软件[3]通 过功能分析的方法评估。MAPPFinder软件基于超几何分布对GenMAPPs (通路)和基因本 体(gene ontologies)进行分级。关于MAPPFinder中使用的术语的进一步的解释,读者 可向[3]中查找。调整P值(Permuted P Value)小于0. 05、基因改变数大于或等于2和 Z值大于2的GenMAPPs和基因本体认为是显著的。黄色方框表示上调基因，天蓝色方框表 示下调基因。内有不同阴影的方框表示一个基因上存在多个探针(拼接转录产物(splice transcripts))0使用小于0. 05的P值,我们发现添加油棕酚类的小鼠肿瘤中有815个基因差异表 达，其中391个被上调，424个被下调。对这些基因的功能分析表明，与细胞周期有关(
图1) 的基因差异表达。Ccnd2、Ccne2、Cdk4、Cdk2 等基因被上调，而 Ccna2、Ccnb 1、Plkl、Mad211、 Cdc20、HdaC6、Mcm6等基因被下调。这些基因调节表明油棕酚类可通过诱导细胞周期中的 G1/S阶段阻滞来抑制肿瘤生长。<image>image see original document page 6</image>图1 肿瘤细胞周期途径中的显著差异基因制剂和配制除了直接使用提取物外，使用油棕酚类化合物的不同部分也是可行的。构成提取 物的有效量或有效成分取决于提取物的纯度。例如,如果使用纯度约为10%的含有酚类的 粗提取物，通常就需要使用更多的量。纯度越高，达到相同的效果需要的量越少。依据本发明，所述酚类或维生素E可以制成用于哺乳动物用药的制药学和/或营 养学混合物。同样地,它们也以带有制药学可接受载体的化合物形式提供。制药学和/或 营养混合物中的治疗性化合物可以口服用药,或者也可以作为食品添加剂用药。这时,使用 量优选在不影响食品原味的前提下可产生最大效果。适于口服用药的制剂包括汤剂，该汤剂是将活性化合物溶于合适的溶剂，如盐溶 液、水；胶囊或片剂,其中含有预定量的固体颗粒或胶质的活性成分；合适基质和乳液中的 悬浮剂。酚类口服用药的患者用量一般为15 1000nig/d，一般为200mg/d。按照患者体重 说，是平均体重60kg的成年人的常规剂量，平均值为3. 4mg/kg/d。类黄酮口服用药的患者用量一般为15 100()mg/d,典型地200mg/d。按照患者体重说，是平均体重60kg的成年人的常规剂量,平均值为3. 4 6. 7mg/kg/d。生育三烯酚口服用药的患者用量一般为20 1000mg/d,典型地200 400mg/d。按照患者体重说，是平均体重60kg的成年人的常规剂量，平均值为3. 4 6. 7mg/kg/d。本发明的化合物可以按照上述制剂形式单独制备,也可以以组合化合物的形式制 备。 在此所用的所述术语“药学和/或营养可接受制剂形式，，包括任何药学和/或营 养行业所熟知的用于药物用药的合适载体，通过不同药物浓度的如胶囊、片剂、糖浆、甘香 酒剂和用于非肠道注射的汤剂的形式。 在此所用的“有效量”包括足以破坏、减缓、控制或去除初生、区域或转移癌细胞或 组织的药学可接受量；足以延缓或最小化癌扩散的药学可接受量；足以在癌症治疗或控制 中提供治疗效果的药学可接受量。但是,这些实施例并不是为了以任何方式限制或约束本 发明的范围，也不应理解成，为了实施本发明而提供的排它性使用的条件、参数、试剂或起 始原料。
权利要求
一种用于制备预防或抑制癌症恶化的药物的包含酚类的混合物，其特征在于，所述酚类包括酚酸和类黄酮，其中，所述酚类从棕榈油榨油废液得到。
2.如权利要求1所述的混合物，其特征在于，所述混合物还包含维生素E。
3.如权利要求1所述的混合物，其特征在于,所述混合物以带有药学可接受载体的化 合物的形式提供。
4.治疗有效量的如权利要求1所述的混合物与维生素E—起或单独在制备预防或抑制 癌症恶化的药物中的应用，所述药物通过用药提供给单个个体。
5.如权利要求4所述的应用，其特征在于,所述混合物辅以或不辅以常规化学疗法、放 射疗法或手术疗法。
6.如权利要求4所述的应用，其特征在于,所述混合物可口服用药或作为食品添加剂 用药。
7.用于皮肤癌的如权利要求4所述的应用。
8.用于乳腺癌的如权利要求4所述的应用。
9.用于前列腺癌的如权利要求4所述的应用。
10.用于结肠癌的如权利要求4所述的应用。
全文摘要
本发明描述了使用提取自棕榈油榨油废液的化合物的预防和治疗癌症的混合物和方法。本发明还描述了所述化合物及其组合物的治疗有效量的制剂方法。本发明可单独制备或作为组合物产品制备。
文档编号A61K31/704GK101808654SQ200880019239
公开日2010年8月18日 申请日期2008年4月23日 优先权日2007年4月23日
发明者卡里亚纳卡里亚纳·桑德拉姆·P·马尼卡姆, 廖顺森, 拉维加德维·沙姆巴沙穆提, 莫哈末·巴斯利·瓦西德, 谭友爱 申请人:马来西亚棕榈油协会