专利名称：：一种用于泌尿系疾病的中药组合物及其制备方法
技术领域：
：本发明涉及一种用于泌尿系疾病的中药组合物及其制备方法，属于中药制药
技术领域：
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背景技术：
：泌尿系疾病是一种常见病和多发病，严重的影响了人们的日常生活；常见为尿路感染，西医主要使用较大剂量的抗生素及抗菌药物，此类药物长期使用，易引起细菌的赖药性和体内菌群失调，副作用大。现有治疗此病的中成药很多，但大多疗效和治疗都不够理想。现有技术复方石韦片(部颁《中药成方制剂》十五册WS3-B-2940-98项下复方石韦片)是一种纯中药制剂，该药经多年临床应用，在治疗泌尿系疾病方面取得了一定的疗效。专利检索1、中国专利公报2004年12月29日公开了名称为“复方石韦胶囊及其制备方法”，公开号为1557434的专利申请；2、2006年5月24日中国专利公报公开了名称为“一种复方石韦颗粒的制备方法及其质量控制技术”，公开号为1775234的专利申请；3、2006年10月25日中国专利公报公开了名称为“一种复方石韦胶囊的制备方法及其质量控制技术”，公开号为1850170的专利申请；4、2006年12月27日中国专利公报公开了名称为“复方石韦胶囊的制备方法”，公开号为1883570的专利申请；以上四项专利中的1、2、4都是在原复方石韦片工艺的基础上对加水量和真空度做了细化，其药品疗效和复方石韦片没有什麽差别。第3项对原复方石韦片工艺中药材的提取，做了实质性的改变，其疗效和质量无法保障；以上四项专利的和复方石韦片处方的各味药物原料重量配比都为石韦740g、黄芪740g、苦参740g、篇蓄740g；在实际应用过程中我们发现以这种组方配比的中成药的效果不够理想。在近几年的时间里，我们在原来复方石韦片的基础上，通过大量的实验摸索，意外的发现将其中的篇蓄换成车前子和川木通后，其临床药效学实验效果显著提高，且无任何毒副作用；我们按常规工艺制成的最佳剂型为胶囊剂和颗粒剂。
发明内容本发明的目的在于提供一种疗效更为显著的治疗泌尿系疾病的中药组合物。本发明是这样实现的按照重量组分计算，本发明中药组合物是由如下重量配比的原料按常规工艺制备而成石韦925g、黄芪925g、苦参925g、车前子860g、川木通860g制备而成。所述剂型为胶囊剂和颗粒剂。以本发明的胶囊剂为例，主要药效学试验结果证明本发明原料重量配比石韦925g、黄芪925g、苦参925g、车前子860g、川木通860g同原发明(复方石韦片)重量配比石韦740g、黄芪740g、苦参740g、篇蓄740g相比，药效学试验结果有显著提高。主要药效学试验实验目的通过对本发明胶囊剂和复方石韦片的抗炎、利尿、提高机体免疫力、治疗肾小球肾炎等作用的药理实验研究，将本发明胶囊剂和复方石韦片进行对比，观察其药理作用的强弱。试验方法本发明胶囊剂和复方石韦片对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响；对大鼠棉球肉芽肿的影响；对大鼠尿量的影响；对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能和免疫器官的影响；对阳离子化小牛血清白蛋白肾小球肾炎大鼠模型的作用。一、试验药物A、原料a、本发明胶囊剂组由石韦925g、黄芪925g、苦参925g、车前子860g、川木通860g制备而成。b、复方石韦片组由石韦740g、黄芪740g、苦参740g、篇蓄740g制备而成。B、制法本发明胶囊剂和复方石韦片组的制法相同。a、本发明胶囊剂组的制法以上五味，取苦参、石韦893.75g、黄芪862.5g、车前子860g及川木通830g，加水煎煮二次，第一次加10倍量水，煎煮2小时，第二次加8倍量水煎煮1小时，滤过，滤液减压(-0.08Mpa,70°C)浓缩至相对密度为1.30-1.35(60°C)的稠膏，备用；另取石韦31.25g、黄芪62.5g、川木通30g粉碎成细粉，与上述稠膏，混勻，烘干，粉碎，制粒，装胶囊，制成1000粒，即得本发明胶囊剂。b、复方石韦片组的制法以上四味，取苦参、石韦715g、黄芪690g及扁蓄715g，加水煎煮二次，第一次2小时，第二次1小时，滤过，滤液减压浓缩至稠膏状；另取石韦25g、黄芪50g、扁蓄25g粉碎成细粉，与上述稠膏混勻，烘干，粉碎，制成颗粒，压制成1000片，包糖衣，即得。二、试验及结果(一)对角叉菜胶所致大鼠足肿胀的影响实验材料1、动物Wister种雌性大鼠，体重160180g。2、药物复方石韦片2.96g生药/片；本发明胶囊剂大、中、小三个剂量组4.5g生药/粒；0.5%羧甲基纤维素纳(CMC-NA)混悬液；角叉菜胶。药物在实验前用蒸馏水配置，灌胃给药。实验方法Wister种雌性大鼠50只，体重160180g，随机分成5组，每组10只。对照组灌胃同体积的0.5%羧甲基纤维素纳(CMC-NA)混悬液；本发明胶囊剂组分别灌胃给药1.5、3.0,6.Og生药/kg；复方石韦片组灌胃给药6.Og生药/kg。每天1次，连续给药4d，末次给药后lh，每鼠右后足跖皮下注射角叉菜胶溶液0.1ml。分别于致炎前和致炎后lh，2h，4h，6h时用测微尺测量足跖周长(mm)，记录结果。并计算肿胀率％(肿胀率=致炎后足跖周长一致炎前足跖周长/致炎前足跖周长)。进行各组间显著性试验。实验结果见表1表1对角叉菜胶所致大鼠足肿胀的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>与对照组相比*P<0.05，**P<0.01；与复方石韦片组比ΔΡ<0.05。结果表明本发明胶囊剂组和复方石韦片组对角叉菜胶所致大鼠足肿胀有明显抑制作用且有一定量效关系，剂量越大，作用越明显。本发明胶囊剂大、中剂量组和复方石韦片组在致炎后4h，6h得肿胀率明显低于对照组(P<0.01)，小剂量组(1.5g/kg)在致炎后4h，6h也有显著抑制作用(P<0.05)，6h时本发明胶囊剂大剂量组和复方石韦片组相比较有显著性差异(P<0.05)。本发明胶囊剂组比复方石韦片组的抗急性炎症作用强。(二)对大鼠棉球肉芽肿的影响实验材料1、动物Wister种雌性大鼠，体重120150g。2、药物复方石韦片2.96g生药/片；本发明胶囊剂大、中、小三个剂量组4.5g生药/粒；庆大霉素。药物在实验前用蒸馏水配置，灌胃给药。实验方法Wister种雌性大鼠50只，体重120150g，随机分成5组，每组10只。试验时，乙醚浅麻醉，剪除大鼠胸毛，碘酒消毒，切开胸部皮肤，从切口向两前肢腋下分别塞入50mg无菌棉球各一个，缝合皮肤，肌注庆大霉素抗感染。术后Ih灌胃给药，对照组灌胃同体积的蒸馏水；本发明胶囊剂组分别灌胃给药1.5,3.0,6.Og生药/kg；复方石韦片组灌胃给药6.Og生药/kg。每天1次，连续给药14d，末次给药Ih后，颈椎脱臼处死大鼠，取出棉球，剔除脂肪，称重，于60°C烘箱中干燥lh，再称重，减去原棉球重量，计算肉芽肿重量，即得肉芽肿湿重和干重。进行组间显著性检验。实验结果见表2表2对大鼠棉球肉芽肿的影响分组动物数(只剂量(g/kg)肉芽湿重(g)肉芽干重(g)<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>与对照组相比*P<0.05，**P<0.01；与复方石韦片组比ΔΡ<0.05。结果表明本发明胶囊剂组和复方石韦片组对棉球引起的肉芽肿有明显的抑制作用。本发明胶囊剂大、中剂量组及复方石韦片组的肉芽干重，与对照组相比有极显著性差异(P<0.01)，小剂量组的肉芽干重，与对照组相比有显著性差异(P<0.05)；本发明胶囊剂大剂量组的肉芽湿重，与对照组相比有极显著性差异(P<0.01)，中、小剂量组及复方石韦片组的肉芽湿重，与对照组相比有显著性差异(P<0.05)，大剂量组与复方石韦片组的肉芽湿重相比较有显著性差异(P<0.05)。本发明胶囊剂组比复方石韦片组的抗慢性炎症作用强。(三)对大鼠尿量的影响实验材料1、动物SD大鼠雌雄各半，体重170190g。2、药物复方石韦片2.96g生药/片；本发明胶囊剂大、中、小三个剂量组4.5g生药/粒；生理盐水。药物在实验前用蒸馏水配置，灌胃给药。实验方法SD大鼠50只，雌雄各半，体重170190g，随机分成5组，每组10只。实验前大鼠禁食不禁水12h。各组按2ml/100g体重剂量腹腔注射生理盐水，同时灌胃给药，对照组灌胃同体积的蒸馏水；本发明胶囊剂组分别灌胃给药1.5,3.0,6.Og生药/kg；复方石韦片组灌胃给药6.Og生药/kg。给药容积2ml/100g，6h再次灌胃给药，给药后立即将大鼠放人代谢笼中接尿24h，测总尿量。进行组间显著性检验。实验结果见表3表3对大鼠尿量的影响&±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>与对照组相比*P<0.05，**P<0.01；与复方石韦片组比AP<0.05。结果表明本发明胶囊剂组和复方石韦片组对大鼠在给药后24h内尿量明显增力口，对水负荷大鼠有显著的利尿作用。本发明胶囊剂大、中剂量组和复方石韦片组与对照组相比有极显著性差异(P<0.01)；本发明胶囊剂小剂量组与对照组相比有显著性差异(P<0.05)，本发明胶囊剂大剂量组与复方石韦片组相比较有显著性差异(P<0.05)。本发明胶囊剂组比复方石韦片组对大鼠的利尿作用强。(四)对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能和免疫器官的影响实验材料1、动物SD雌性小鼠，体重1820g。2、药物复方石韦片2.96g生药/片；本发明胶囊剂大、中、小三个剂量组4.5g生药/粒。药物在实验前用蒸馏水配置，灌胃给药。实验方法SD雌性小鼠，体重1820g，随机分成5组，每组10只。对照组灌胃同体积的蒸馏水；本发明胶囊剂组分别灌胃给药3、6、12g生药/kg；复方石韦片组灌胃给药12g生药/kg。每天1次，连续给药5d，末次给药Ih后，小鼠分别称取体重，腹腔注射10%硫乙醇酸盐培养基0.8ml/只诱导腹腔巨噬细胞，眼球放血后，脱颈椎处死，摘取胸腺、脾脏称重(mg)，计算胸腺指数和脾指数(mg/g体重)。用灭菌含肝素的Hank's液洗出腹腔巨噬细胞，调巨噬细胞为5X106/ml，加96孔板，每孔100μ1，置37°C、5%、C02孵箱内培养2h，用温生理盐水洗培养板，除去末贴壁细胞，加0.中性红200μ1/孔，置37°C再孵育30min，用生理盐水洗去未吞噬的细胞外的中性红，再向每孔加入细胞溶解液200μ1，4°C冰箱过夜，用酶标仪于波长492nm处测光密度(OD)值。实验结果见表4、5表4对小鼠免疫器官的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>与对照组相比*P<0.05，**P<0.01；与复方石韦片组比ΔΡ<0.05。结果表明本发明胶囊剂组和复方石韦片组对小鼠胸腺指数无影响，可使小鼠脾脏指数明显增加。本发明胶囊剂大剂量组与对照组相比有极显著性差异(P<0.01)；本发明胶囊剂中剂量组和复方石韦片组与对照组相比有显著性差异(P<0.05)；本发明胶囊剂大剂量组与复方石韦片组相比较有显著性差异(P<0.05)。本发明胶囊剂组比复方石韦片组对小鼠的免疫功能作用强。表5对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响&土s)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>与对照组相比*P<0.05，**P<0.01；与复方石韦片组比ΔΡ<0.05。结果表明本发明胶囊剂组和复方石韦片组对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能有明显的促进作用。本发明胶囊剂大、中剂量组和复方石韦片组与对照组相比有极显著性差异(P<0.01)；小剂量组与对照组相比有显著性差异(P<0.05)；大剂量组与复方石韦片组相比较有显著性差异(P<0.05)。本发明胶囊剂组比复方石韦片组对增强小鼠腹腔巨噬细胞活力，机体的免疫力作用强。(五)对阳离子化小牛血清白蛋白(C-BSA)肾小球肾炎大鼠模型的作用实验材料1、动物SD雄性大鼠，体重150200g。2、药物复方石韦片2.96g生药/片；本发明胶囊剂大、中、小三个剂量组4.5g生药/粒；生理盐水；小牛血清白蛋白(BSA)；无水乙二胺(EDA)；碳化二亚胺(EDC)；弗氏不完全佐剂。药物在实验前用蒸馏水配置，灌胃给药。实验方法阳离子化小牛血清白蛋白(C-BSA)的制备用67mLEDA加500ml双蒸馏水，然后缓慢加入6mol/L盐酸350ml，调pH至4.75，保持溶液在25°C；将5gBSA溶解于25ml双蒸馏水，再将此溶液缓慢加入EDA溶液，不断搅拌，使液温恒定25°C，加入1.8gEDC,2h后用pH为4.75的醋酸缓冲液30ml终止反应，即得等电点提高的C-BSA溶液。用4°C双蒸馏水透析72h(每3至5h换水)C-BSA溶液，冷冻干燥，得等电点为8.4上的C-BSA粉剂，保存于_20°C备用。SD雄性大鼠60只，体重150200g，随机分成5组，每组10只。除对照组外，其余各组大鼠均分别取C-BSA1.Omg与弗氏不完全佐剂0.Iml混均，大鼠皮下多点注射预免疫。每只大鼠预免疫1周后，每只注射C-BSA，先腹腔注射1周，第Id至第7d的剂量依次为1.0mg、1.0mg、1.0mg、1.5mg、1.5mg、2mg、2mg。第2周起，每次在灭菌条件下尾静脉注射2.5mgC-BSA,同时灌胃给药，正常组与模型组给予等体积20ml/kg的生理盐水；本发明胶囊剂组分别灌胃给药1.5,3.0,6.Og生药/kg；复方石韦片组灌胃给药6.Og生药/kg。每天1次，分别在给药第14d和第32d收集各大鼠24h尿液，进行尿蛋白含量测定。药后32d，从眼眶静脉取血，检测血清总蛋白、白蛋白、球蛋白、胆固醇、血清肌酐和尿素氮含量。实验结果见表6、7、8表6对C-BSA肾炎模型大鼠尿蛋白的影响&±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>与模型组相比*P<0.05，**P<0.01；与复方石韦片组比ΔΡ<0.05。结果表明本发明胶囊剂组和复方石韦片组能明显降低大鼠尿蛋白的含量。本发明胶囊剂大、中剂量组和复方石韦片与模型组相比有极显著性差异(P<0.01)；本发明胶囊剂小剂量组与模型组相比有显著性差异(P<0.05)；药后32d的尿蛋白量，本发明胶囊剂大剂量组与复方石韦片组相比较有显著性差异(P<0.05)。本发明胶囊剂组比复方石韦片组消除尿蛋白的作用强。表7对C-BSA肾炎模型大鼠血清蛋白的影响&±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>与模型组相比*P<0.05，**P<0.01；与复方石韦片组比ΔΡ<0.05。结果表明本发明胶囊剂组和复方石韦片组明显的升高了C-BSA肾炎模型大鼠血清中的总蛋白和白蛋白，但对球蛋白影响不显著。本发明胶囊剂大、中剂量组和复方石韦片对总蛋白的升高，与模型组相比有显著性差异(P<0.05)；本发明胶囊剂大剂量组对白蛋白的升高，与模型组相比有极显著性差异(P<0.01)；本发明胶囊剂中剂量组和复方石韦片组对白蛋白的升高，与模型组相比有显著性差异(P<0.05)；对白蛋白的升高，本发明胶囊剂大剂量组与复方石韦片组相比较有显著性差异(P<0.05)。本发明胶囊剂组比复方石韦片组对C-BSA肾炎模型大鼠血清蛋白的作用强。表8对C-BSA肾炎模型大鼠血清生化指标的影响动物数分组剂量(g/kg)胆固醇(腿ol/L)肌酐(腿ol/L)尿素氮(丽ol/L)对照组10—1.44±0.113.12.93±3.1285.24±2.821模型组10—1.77±0.27835.17±8.71418.37土5.587复方石韦片组106.01.39±0.236**25.76±8.255*11.86±6.115*本发明胶囊剂组(小)101.5'1.49±0.244*28.84土8.38712.94土5.342*本发明胶囊剂组(中)103.01.26±0·247**25.69±8.635*11.51±6.274*本发明胶囊剤组(大)106.01.16土0.218**Δ24.83±8.862*9.96土6.128**与模型组相比*P<0.05，**P<0.01；与复方石韦片组比ΔΡ<0.05。结果表明本发明胶囊剂组和复方石韦片组明显的降低了C-BSA肾炎模型大鼠血清中胆固醇、肌酐、尿素氮的含量。本发明胶囊剂大、中剂量组和复方石韦片对肌酐含量的降低，与模型组相比有显著性差异(P<0.05)；本发明胶囊剂大剂量组对尿素氮含量的降低，与模型组相比有极显著性差异(P<0.01)；本发明胶囊剂中、小剂量组和复方石韦片组对尿素氮含量的降低，与模型组相比有显著性差异(P<0.05)；本发明胶囊剂大、中剂量组和复方石韦片对胆固醇含量的降低，与模型组相比有极显著性差异(P<0.01)；对胆固醇含量的降低，本发明胶囊剂大剂量组与复方石韦片组相比较有显著性差异(P<0.05)。本发明胶囊剂组比复方石韦片组降低胆固醇、肌酐、尿素氮含量的作用强。急性毒性实验结果表明将本发明胶囊剂最大浓度、最大容积灌胃给药，在24h内连续给药3次，每次间隔4h，累积药物总量达81g生药/kg，相当于临床拟用量的109.5倍。给药后7d内，小鼠活动、进食、排泄均正常，生长良好，毛色光亮，其平均体重均随试验时间的延长而增加。第8d处死后解剖每只小鼠肉眼观察心、肝、脾、肺、肾、脑、胸腺、肾上腺、子宫、胃、肠等均未发现颜色及形态异常。表明本胶囊无急性毒性反应。长期毒性实验结果表明本发明胶囊剂组分为低、中、高剂量分别为14、28、56g生药/kg/d，相当于临床剂量的18.9,37.8,75.7倍，灌胃给药12周后，本发明胶囊剂对动物的一般状况、血液学指标、血液生化指标均无明显的影响，系统解剖、脏器系数及组织病理学检查也未发现异常病理改变。停药2周也未见明显改变。本发明胶囊剂在长期毒性试验中，未发现明显毒性反应和延迟毒性反应。可见，本发明胶囊剂无毒性反应，长期用药安全可靠。结论本发明胶囊剂组和复方石韦片组能明显抑制角叉菜胶所致小鼠足肿胀和棉球引起的肉芽肿；具有显著的利尿作用；促进小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能和明显增加小鼠脾脏指数；明显的抑制了C-BSA肾炎模型大鼠血清中的总蛋白和白蛋白的降低和胆固醇、肌酐、尿素氮的升高，能使大鼠尿蛋白的含量明显降低。结果表明，本发明胶囊剂比复方石韦片的抗炎、利尿、提高机体免疫力、治疗肾小球肾炎等作用强，本发明胶囊剂药理作用优于复方石韦片。临床试验本发明临床观察病人293例，其中门诊病人234例，住院病人59例。其中治疗急慢性肾小球肾炎患者64例；肾盂肾炎、膀胱炎、尿道炎患者共229例。本发明对急、慢性肾小球肾炎的治疗有较好疗效，可明显降低尿蛋白或转阴，减轻患者水肿。肾盂肾炎、膀胱炎、尿道炎患者的小便次数正常，尿痛减轻或消失，经检查，炎症消失。临床观察结果表明本发明总有效率为97.5%；说明本品的清热燥湿，利尿通淋之功效确切，在临床观察过程中，未发现患者有不良反应和过敏反应，说明本品安全性高。本发明具体实施例方式处方石韦925g黄芪925g苦参925g车前子860g川木通860g1、本发明胶囊剂的制备方法以上五味，取苦参、石韦893.75g、黄芪862.5g、车前子860g及川木通830g，加水煎煮二次，第一次加10倍量水，煎煮2小时，第二次加8倍量水煎煮1小时，滤过，滤液减压(-0.08Mpa,70°C)浓缩至相对密度为1.30-1.35(60°C)的稠膏，备用；另取石韦31.25g、黄芪62.5g、川木通30g粉碎成细粉，与上述稠膏，混勻，烘干，粉碎，制粒，装胶囊，制成1000粒，即得本发明胶囊剂。2、本发明颗粒剂的制备方法以上五味，取苦参、石韦893.75g、黄芪862.5g、车前子860g及川木通830g，加水煎煮二次，第一次加10倍量水，煎煮2小时，第二次加8倍量水煎煮1小时，滤过，滤液减压(-0.08Mpa,70°C)浓缩至相对密度为1.30-1.35(60°C)的稠膏，备用；另取石韦31.25g、黄芪62.5g、川木通30g粉碎成细粉，与上述稠膏，混勻，烘干，粉碎，加入适量糊精，制粒，干燥，整粒，制成颗粒lOOOg，装袋，即得本发明颗粒剂。权利要求一种用于泌尿系疾病的中药组合物，其特征在于按照重量组分计算它由石韦600-1200g、黄芪600-1200g、苦参600-1200g、车前子600-1000g、川木通600-1000g制备而成。2.根据权利要求1所述中药组合物，其特征在于它由石韦925g、黄芪925g、苦参925g、车前子860g、川木通860g。3.根据权利要求1或2述的中药组合物，其特征在于所述的最佳制剂为胶囊剂和颗粒剂。4.根据权利要求3所述中药组合物胶囊剂的制备方法，其特征在于以上五味，取苦参、石韦893.75g、黄芪862.5g、车前子860g及川木通830g，加水煎煮二次，第一次加10倍量水，煎煮2小时，第二次加8倍量水煎煮1小时，滤过，滤液减压(-0.08Mpa,70°C)浓缩至相对密度为1.30-1.35(60°C)的稠膏，备用；另取石韦31.25g、黄芪62.5g、川木通30g粉碎成细粉，与上述稠膏，混勻，烘干，粉碎，制粒，装胶囊，制成1000粒，即得本发明胶囊剂。5.根据权利要求3所述中药组合物颗粒剂的制备方法，其特征在于以上五味，取苦参、石韦893.75g、黄芪862.5g、车前子860g及川木通830g，加水煎煮二次，第一次加10倍量水，煎煮2小时，第二次加8倍量水煎煮1小时，滤过，滤液减压(-0.08Mpa,70°C)浓缩至相对密度为1.30-1.35(60°C)的稠膏，备用；另取石韦31.25g、黄芪62.5g、川木通30g粉碎成细粉，与上述稠膏，混勻，烘干，粉碎，加入适量糊精，制粒，干燥，整粒，制成颗粒lOOOg，装袋，即得本发明颗粒剂。全文摘要本发明涉及一种用于泌尿系疾病的中药组合物及其制备方法，该中药组合物是由石韦、黄芪、苦参、车前子、川木通共五味中药制备而成；该药具有清热燥湿，利尿通淋的功效，主要用于泌尿系感染所引起的小便不利，尿频，尿急，尿痛，下肢浮肿及急慢性肾小球肾炎，肾盂肾炎，膀胱炎，尿道炎等症。与现有技术相比，该药的组方合理，临床药效学实验效果与原药物组合物相比显著提高。文档编号A61K9/48GK101810688SQ20091000936公开日2010年8月25日申请日期2009年2月20日优先权日2009年2月20日发明者罗川申请人:陕西东泰制药有限公司