一种治疗尿路结石的仙黄中药制剂及制备和质量检测方法

专利名称：一种治疗尿路结石的仙黄中药制剂及制备和质量检测方法
技术领域：
本发明涉及复方药物制剂及其分析领域，特别涉及一种治疗尿路结石 的仙黄中药制剂及制备和质量检测方法。
背景技术：
中国专利ZL01143042.7中公开了一种治疗胆肾结石的中药制剂的制 备工艺。该制剂具有理气行滞、软坚散结、抗菌消炎、利胆止痛、利尿通 淋、溶石、排石功用，能够治疗胆结石和尿路结石，无明显的毒副作用， 是一种理想的抗结石症的中药制剂，具有良好的市场前景；所以，需要专 门的制备方法以及质量检测方法以保证其质量。

发明内容
本发明的目的是提供一种治疗尿路结石的仙黄中药制剂及制备和质
量检测方法；该制剂原料中含有威灵仙、麻黄，其重量份数比为5: 1;制 备方法为将威灵仙、麻黄粉碎粗粉并混匀，再进行提取、浓縮、干燥处 理，与适量的淀粉混合后装入胶囊即得成品。每0.4克所述的治疗尿路结
石的仙黄中药制剂中，含麻黄以盐酸麻黄碱(d。H,sN0，HCl)计，其含量限 度有了较大的提高，不少于l. 15mg。质量检测方法所检测项目为威灵仙 提取物鉴别对照检测，检测的方法为薄层色谱法；麻黄碱含量对照检测， 检测的方法为薄层扫描法。
本发明的目的是通过以下的技术方案实现的
一种治疗尿路结石的仙黄中药制剂，该制剂的原料中包括威灵仙、麻 黄，其重量份数比为5: 1，其特征在于每0.4克所述的中药成分中， 含有麻黄以盐酸麻黄碱(C1()H15N0，HC1)计，不少于l. 15mg。
所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂的用量用法为饭后口服， 一次
0.8克， 一日2次，疗程为一个月。
7所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂功能主治行气活血；用于尿路 结石气滞血瘀症，结石的横径小于等于0.8cm，纵径小于等于1.0cm，且结
石远端输尿管无畸形、狭窄、梗塞及手术疤痕粘连等明显并发症，肾功能 良好，结石在某一部位滞留时间不超过一年者。
本发明的另一目的是通过以下技术方案实现的
一种治疗尿路结石的仙黄中药制剂，该制剂的原料中包括威灵仙、麻 黄，其重量份数比为5: 1;每0.4克所述的中药成分中，含有麻黄以盐 酸麻黄碱(UH,HC1)计，不少于l. 15mg;制备方法如下
A. 取以上配比的威灵仙、麻黄，分别粉碎成粗粉，再混匀，得到混 合粗粉； 、
B. 将所述的混合粗粉中加入乙醇溶液，进行回流提取处理三次，合并 每次得到的提取液，得到总提取液；所述的三次提取处理中，每次提取处 理所述的混合粗粉和所述的乙醇的重量比为1: 8;第一次提取处理的时间 为2小时，第二、三次提取处理的时间均为1小时；
C. 将所述的总提取液进行减压蒸馏处理，去除其中的乙醇；再进行减 压浓縮处理，得到稠膏；再将所述的稠膏于80。C减压干燥处理，得到干膏；
D. 将所述的干膏进行粉碎处理，再加入淀粉混匀，装入胶囊，即得成
卩n o
本发明的另一目的是通过以下的技术方案实现的
一种治疗尿路结石的仙黄中药制剂，该制剂的原料中包括威灵仙、麻 黄，其重量份数比为5: 1，其特征在于每0.4克所述的中药成分中，
含有麻黄以盐酸麻黄碱(d。HJO'HCl)计，不少于1.15mg;所述的治疗尿
路结石的仙黄中药制剂的质量检测方法所检测项目为威灵仙提取物鉴别 对照检测，检测的方法为薄层色谱法；麻黄碱含量对照检测，检测的方法 为薄层扫描法；
所述的各项检测的过程为
I.威灵仙提取物鉴别对照检测-
A.治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液制备
a.取所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂，加水研磨，再进行过滤处 理，得到滤液；所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂与水的重量比为 0.5-15: 10-40;b.在所述的滤液中加入三氯甲垸，进行提取处理，分取三氯甲烷层， 得到提取液；所述的滤液与三氯甲烷的体积比为4: 1;
C.将所述的提取液水浴蒸干，得到残渣，向所述的残渣中加入甲醇， 得到残渣溶液，作为供试品溶液；所述的甲醇与所述的治疗尿路结石的仙 黄中药制剂的重量比为1: 0.8;
B. 威灵仙提取物对照品溶液制备
a. 取威灵仙对照药材加入乙醇溶液，加热回流处理1小时，再进行过 滤处理，得到威灵仙滤液；所述的威灵仙对照药材与乙醇溶液的重量体积 比(w/1)为3-15: 40-150，
b. 将所述的威灵仙滤液水浴蒸干，得到残渣，向所述的残渣中加入水， 得到威灵仙残渣溶液；所述的威灵仙滤液与所述的水的体积比为9: 2;
c. 将所述的威灵仙残渣溶液中中加入三氯甲烷，进行提取处理，分取 三氯甲垸层，得到威灵仙提取液；所述的威灵仙残渣溶液与三氯甲烷的体 积比为0.4: 1;
d. 将所述的威灵仙残渣水浴蒸干，得到威灵仙第二级残渣，向所述的
威灵仙第二级残渣中加入甲醇，得到威灵仙第二级残渣溶液，作为威灵仙
提取物对照品溶液；所述的的甲醇与所述的威灵仙的重量比为1: 7;
C. 薄层色谱法检测
吸取所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液、威灵仙提取物 对照品溶液，分别点样于同一硅胶G薄层板上，进行展开处理，再取出， 晾干，置紫外灯(365nm)下检视；所述的展开剂为苯-乙醚混合溶液，该 混合溶液中，苯、乙醚的体积比为4-15: 1-6;
检视的结果为所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液色谱 中，在与威灵仙提取物对照品溶液色谱相应的位置上，显相同的荧光斑点； II .盐酸麻黄碱含量对照检测
A.治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液制备
a.取所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂，加入1%盐酸溶液溶解， 得到治疗尿路结石的仙黄中药制剂的盐酸溶液；所述的治疗尿路结石的仙 黄中药制剂与1%盐酸溶液的重量体积比(w/1)为0.5-2: 10-40;
将所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂的盐酸溶液进行过滤处理，得
到滤液；
9b.将所述的滤液中加入乙醚，进行第一次提取处理，得到第一次提取 液，调节所述的第一次提取液的pH值为12;所述的滤液和乙醚的体积比 为4: 3;
C.将所述的第一次提取液用乙醚进行四次提取处理，合并四次提取处 理的乙醚层，得到总提取液；所述的第一次提取液与所述的四次提取处理 中每次提取处理乙醚的体积比为3: 4: 3: 2: 2;
d.将所述的总提取液中加入盐酸乙醇溶液，摇匀，蒸干，得到残渣； 将所述的残渣中加入乙醇，得到残渣溶液，作为治疗尿路结石的仙黄中药 制剂供试品溶液；所述的总提取液与所述的盐酸乙醇溶液的体积比为140:
B. 盐酸麻黄碱对照品溶液配制
精密称取经105'C干燥至恒重的盐酸麻黄碱(d。HisNOHCl)对照品， 加入甲醇制成每lml含有0.58mg盐酸麻黄碱的溶液，作为盐酸麻黄碱对 照品溶液；
C. 薄层色谱法检测
a. 吸取所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液、盐酸麻黄碱 对照品溶液，分别交叉点样于同一含P/。氢氧化钠的硅胶G薄层板上，进 行展开处理，取出，晾干；将该硅胶G薄层板置105'C烘20分钟以上， 取出，放冷，喷以显色剂，再置105°。烘15分钟，至斑点清晰，取出，所 述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液、2份盐酸麻黄碱对照品溶 液的体积比为3: 2: 4;所述的硅胶G薄层版的粘合剂为羧甲基纤维素钠；
所述的展开剂为三氯甲垸-甲醇-氨水混合溶液，该混合溶液中，三氯甲烷、
甲醇、氨水的体积比为15-60: 3-12: 0.3-1;所述的显色剂为1%茚三酮乙 醇溶液；
b. 将上述硅胶G薄层版进行扫描，分别测量治疗尿路结石的仙黄中药
制剂供试品溶液与盐酸麻黄碱对照品溶液的峰面积，计算，即得。
本发明的有益效果为
1. 本发明采用薄层色谱的方法进行威灵仙提取物、盐酸麻黄碱的定性
检测；薄层色谱的方法具有分离能力强、灵敏度高、分离速度快、显色方 便等优点；且操作简便、仪器简单。
2. 本发明采用薄层色谱扫描的方法进行盐酸麻黄碱含量对照检测。薄
10层色谱扫描的方法具有分离效能高、快速、简便等优点。
4. 本发明采用定性和定量结合的方法检测治疗尿路结石的仙黄中药 制剂，确保其质量，检测方法严谨、数据可靠。
5. 本发明中所述的制备方法和提高的质量标准中，主要重新确定了 关键工艺参数和盐酸麻黄碱含量限度，从而能保证药品的安全性、有效性 及质量均一性，体现了制法和质量标准的科学性、合理性及可行性。
具体实施例方式
实施例1:
一种治疗尿路结石的仙黄中药制剂，该制剂的原料中包括威灵仙、麻 黄，其重量份数比为5: 1，其特征在于每0.4克所述的中药成分中， 含有麻黄以盐酸麻黄碱(C。H15N0'HC1)计，不少于l. 15mg。
所述的治疗尿路结石的仙黄中药的性状为硬胶囊，内容物为棕色至 棕褐色的粉末；气特异，味苦。
所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂的用量用法为饭后口服， 一次
0.8克， 一日2次，疗程为一个月。
所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂功能主治行气活血；用于尿路 结石气滞血瘀证，结石的横径小于等于0.8cm，纵径小于等于1.0cm，且结 石远端输尿管无畸形、狭窄、梗塞及手术疤痕粘连等明显并发症，肾功能 良好，结石在某一部位滞留时间不超过一年者。
所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂的临床试验如下
1. 所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂(商品名为"仙黄胶囊")，于 2000年5月由国家食品药品监督管局批准临床研究，并于2001年3月至 2004年6月进行了仙黄胶囊用于肾结石、输尿管结石、胆结石(中医辨证
为气滞血瘀证)的临床有效性与用药安全性观察的n、 in期临床试验。II
期临床试验设计采用多中心、随机、双模拟双肓、阳性药对照试验方法， III期临床试验设计采用多中心、随机、单肓、阳性药对照试验方法，肾结 石、输尿管结石的对照药为肾石通冲剂，胆结石的对照药为利胆排石冲剂。
2. n期临床试验总病例数为357例，其中，用于观察肾结石、输尿管 结石适应症的总病例数为235例，仙黄胶囊组121例，肾石通冲剂组114 例；m期临床试验病例总数为439例，其中，用于观察肾结石、输尿管结石适应症的总病例数为278例，仙黄胶囊组211例，肾石通冲剂组67例。 II、 III期临床试验的纳入病例标准为，肾结石、输尿管结石符合肾 结石、输尿管结石西医诊断标准，符合气滞血瘀证的中医辨证标准，结石 的横径》0. 5cm，《1.0 cm;纵径》0.6cm，《1. 5 cm (II期临床试验个别 患者横径0. 3-0. 4 cm，纵径在0.4-0. 5cm)，肾、输尿管结石经体外碎石 术后，粉碎之微小结石在输尿管内结集凝滞成团块状或条索状，不能自排 者；肾、输尿管连接部，或结石远端输尿管无畸形、狭窄、梗塞及手术疤 痕粘连等；肾功能良好，尤其患侧肾功能良好，若患者有肾积水，则肾积 水程度需在中度以下；结石在某一部位滞留时间不超过一年，排除了膀胱 结石及尿道结石，肾和输尿管结石横径〉1.0cm，患侧合并重度肾积水， 或严重感染，或肾功能不全，膀胱以上尿路结石合并严重前列腺增生症或 尿道狭窄。
3.用药方法用于观察肾结石、输尿管结石适应症者治疗组为仙黄胶 囊，口服， 一次2粒， 一日2次。肾石通冲剂对照组为肾石通冲剂，温开 水冲服， 一次1袋， 一日2次。II期临床试验两组分别加安慰剂服用。临 床试验期间可以合并使用解痉止痛的药物。
4.疗效评价标准以结石的变化为主，显效和有效的标准包括了相关的 症状体征，但因包含因素多，疗效评价的准确性较差，因此，不再评价其 有效者，仅仅以痊愈患者为评价标准。
其痊愈标准为，肾结石、输尿管结石结石排出，并收集到结石标本， 复査腹部平片，结石阴影消失；或虽未收集到结石标本，却在某次排尿过 程有明显的结石排出感，复查平片结石阴影消失；或虽无明显结石排出感， 但长期无自觉症状，多次复查平片，结石阴影消失，造影检査结果阴性， 肾图、B超及IVP检査，均显示梗阻解除、积水减轻或消失。
对于仙黄胶囊治疗组和肾石通冲剂对照组临床符合痊愈患者结石部 位、结石大小(面积、横径、纵径)、不同部位的大小作了比较，具有可 比性，临床痊愈的患者肾结石、输尿管结石的横径均值多在0. 5-0. 6 cm,纵 径多在0. 7-0. 8 cm，总体看横径在O. 8cm以下，纵径多在1. 0 cm以下。
5.疗效方面，II期临床试验肾结石、输尿管结石的疗效仙黄胶囊 治疗组痊愈31例，痊愈率26.27% ，肾石通冲剂对照组31例，痊愈率 27. 19% ，两者痊愈率相近。m期临床试验肾结石、输尿管结石的疗效仙黄胶囊治疗组痊愈62例，痊愈率29.81% ，肾石通冲剂对照组痊愈IO 例，痊愈率15. 15% ，仙黄胶囊治疗组明显高于肾石通冲剂对照组。
6. 安全性方面仙黄胶囊组经治疗前后的约535例血、尿常规，大便 常规、肝功能(ALT)、肾功能(BUN、 Cr)以及心电图治疗前后的检査， 仙黄胶囊治疗组1例血WBC治疗前7000，治疗后升为10700，认为可能与 药物有关。仙黄胶囊治疗组有l例疗前尿常规蛋白士，疗后出现红细胞、 白细胞，停药后复査尿红细胞明显减少，但白细胞仍++，认为可能与药物 有关。仙黄胶囊治疗组1例大便常规疗前正常，疗后出现WBC+，认为可能 与药物有关。仙黄胶囊治疗组肝功能(ALT)有1例治疗前12IU/L,治疗 后升为59IU/L， 1例治疗前31IU/L，治疗后升为42IU/L，认为无特殊临 床意义，可能与药物有关。仙黄胶囊治疗组1例B丽治疗前4. 8匿ol/L， 治疗后升高为7. 6mmol/L，认为可能与药物有关。仙黄胶囊治疗组4例心 电图治疗前正常，l例治疗后偶发房性早博，认为与用药有关，3例治疗 后异常(1例疗后T波改变，1例ST-T改变，1例ST改变，房性早博)， 不确定与用药有否关系。仙黄胶囊治疗组有1例患者用药3天后出现轻度 腹泻、皮疹，持续15天，程度轻，未采取处理措施，未停用治疗药物， 认为可能与药物有关；仙黄胶囊治疗组有13例患者用药2-5天后出现轻 到中度恶心、呕吐、腹痛、腹泻等不良事件，持续l-5天不等，改为了饭 后服用，7例认为可能与药物有关，3例认为可疑与服药有关，3例因果关 系未作判断。
7. 药理毒理非临床药效学试验结果显示本品能降低大鼠乙二醇性
肾结石的结石形成率和肾结石的程度；能减轻大鼠异物性膀胱结石的重 量；能增加水负荷大鼠的排尿量；能增加大鼠胆汁的分泌量；能减少腹腔 注射醋酸引起小鼠扭体的次数；能降低巴豆油致小鼠耳廓肿胀的肿胀度； 能舒张大鼠在体奥狄氏括约肌；能抑制细菌内毒素致兔发热模型的体温升
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实施例2:
本实施例为实施例1中所述的中药制剂的检测方法。 所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂的质量检测方法所检测项目为 威灵仙提取物鉴别对照检测，检测的方法为薄层色谱法；麻黄碱含量对照检测，检测的方法为薄层色谱扫描法； 所述的各项检测的过程为 I.威灵仙提取物鉴别对照检测
A. 治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液制备
a. 取所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂，加水研磨，再进行过滤处 理，得到滤液；所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂与水的重量比为 0.5-1.5: 10-40;
b. 在所述的滤液中加入三氯甲垸，进行提取处理，分取三氯甲垸层，
得到提取液；所述的滤液与三氯甲烷的体积比为4: 1;所述的提取处理采 用分液漏斗；
c. 将所述的提取液水浴蒸干，得到残渣，向所述的残渣中加入甲醇， 得到残渣溶液，作为供试品溶液；所述的甲醇与所述的治疗尿路结石的仙 黄中药制剂的重量比为h 0.8;
B. 威灵仙提取物对照品溶液制备
a. 取威灵仙对照药材加入乙醇溶液，加热回流处理1小时，再进行过 滤处理，得到威灵仙滤液；所述的乙醇溶液的体积百分浓度为70%，所述 的威灵仙对照药材与乙醇溶液的重量体积比(w/1)为3-15: 40-150，所述 的威灵仙对照药材为细粉；
b. 将所述的威灵仙滤液水浴蒸干，得到残渣，向所述的残渣中加入水， 得到威灵仙残渣溶液；所述的威灵仙滤液与所述的水的体积比为9: 2;
c. 将所述的威灵仙残渣溶液中中加入三氯甲烷，进行提取处理，分取 三氯甲烷层，得到威灵仙提取液；所述的威灵仙残渣溶液与三氯甲烷的体 积比为0.4: 1;所述的提取处理采用分液漏斗；
d. 将所述的威灵仙残渣水浴蒸干，得到威灵仙第二级残渣，向所述的 威灵仙第二级残渣中加入甲醇，得到威灵仙第二级残渣溶液，作为威灵仙 提取物对照品溶液；所述的的甲醇与所述的威灵仙的重量比为1: 7;
C. 薄层色谱法检测
所述的薄层色谱检测法记载于中国药典2005年第一版附录VI B;吸
取所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液、威灵仙提取物对照品
溶液，分别点样于同一硅胶G薄层板上，进行展开处理，再取出，晾干， 置紫外灯(365nm)下检视；所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液、威灵仙提取物对照品溶液的体积比为1: 1;所述的硅胶G薄层版 的粘合剂为羧甲基纤维素钠；所述的展开剂为苯-乙醚混合溶液，该混合溶 液中，苯、乙醚的体积比为4-15: 1-6;
检视的结果为所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液色谱 中，在与威灵仙提取物对照品溶液色谱相应的位置上，显相同的荧光斑点； II .盐酸麻黄碱含量对照检测
A. 治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液制备
a. 取所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂，加入1%盐酸溶液溶解， 得到治疗尿路结石的仙黄中药制剂的盐酸溶液；所述的治疗尿路结石的仙 黄中药制剂与1%盐酸溶液的重量体积比(W/1)为0.5-2: 10-40;
所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂需精密称定，置于乳钵，用所述 的1%盐酸溶液分次研磨使麻黄碱充分溶解；
将所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂的盐酸溶液进行过滤处理，得 到滤液；
b. 将所述的滤液中加入乙醚，进行第一次提取处理，得到第一次提取 液，调节所述的第一次提取液的pH值为12;所述的滤液和乙醚的体积比 为4: 3;采用饱和的氢氧化钠溶液调节所述的第一次提取液的pH值；
C.将所述的第一次提取液用乙醚进行四次提取处理，合并四次提取处 理的乙醚层，得到总提取液；所述的第一次提取液与所述的四次提取处理 中每次提取处理乙醚的体积比为3: 4: 3: 2: 2;
d.将所述的总提取液中加入盐酸乙醇溶液，摇匀，蒸干，得到残渣； 将所述的残渣中加入乙醇，得到残渣溶液，作为治疗尿路结石的仙黄中药 制剂供试品溶液；所述的总提取液与所述的盐酸乙醇溶液的体积比为140: 3;所述的盐酸乙醇溶液中，盐酸与乙醇的体积比为1-5: 20，优选为3: 20;所述的盐酸、乙醇的纯度均为分析纯，均未经过稀释；
B. 盐酸麻黄碱对照品溶液配制
精密称取经105。C干燥至恒重的盐酸麻黄碱(d。H,5N0'HCl)对照品， 加入甲醇制成每lml含有0.58mg盐酸麻黄碱的溶液，作为盐酸麻黄碱对 照品溶液；
C. 薄层色谱法检测
a.所述的薄层色谱检测法记载于中国药典2005年第一版附录VI B;吸
15取所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液、盐酸麻黄碱对照品溶 液，分别交叉点样于同一含"/。氢氧化钠的硅胶G薄层板上，进行展开处
理，取出，晾干；将该硅胶G薄层板置105。C烘20分钟以上，取出，放 冷，喷以显色剂，再置105t:烘15分钟，至斑点清晰，取出，所述的治疗 尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液、2份盐酸麻黄碱对照品溶液的体积
比为3: 2: 4;所述的硅胶G薄层版的粘合剂为羧甲基纤维素钠；所述的
展开剂为三氯甲垸-甲醇-氨水混合溶液，该混合溶液中，三氯甲烷、甲醇、
氨水的体积比为15-60: 3-12: 0.3-1;所述的显色剂为1%茚三酮乙醇溶液；
b.将上述硅胶G薄层版进行扫描，分别测量治疗尿路结石的仙黄中药
制剂供试品溶液与盐酸麻黄碱对照品溶液的峰面积，计算，即得。
该扫描方法参见中国药典2005年第一版附录VI B记载的薄层扫描 法；扫描之前将上述硅胶G薄层上覆盖同样大小的玻璃板，并用胶布带固 定；所述的扫描的波长为入s=528nm，入R=640nm;
在本实施例中，在配制所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶 液，用于各项检测时，其试剂的用量可以在给出的配比范围内灵活组合， 在此不一一枚举；
在利用薄层色谱法进行各项检测时，所述的各个展开剂中的各个组分 的体积可以在给出的配比范围内灵活组合，在此不一一枚举。
本实施例中配制所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液和 各个对照品溶液的过程中，使用的重量单位是克(g)，体积单位是毫升(ml);
本实施例中进行所述的各个组分的薄层色谱法、薄层扫描法检测的过程 中，点样及进样用量的体积单位是微升(lil)。
本实施例中所述的各种对照药材和化学试剂均可以在市场及相关机 构购买得到。
本实施例中所述的提取处理、洗涤处理、蒸干、过滤中所用的设备均 为常规设备，均可以在市场上购买得到。
本实施例中采用薄层色谱(Thin Layer Chromatography, TLC)法进行 威灵仙提取物鉴别对照检测。薄层色谱法是具有操作简便、仪器简单、分 离速度快、分离能力强、灵敏度高、显色方便等优点，适用于微量样品的 分离鉴定。 一方面，薄层色谱法适用于小量样品(少到10吗-100吗，甚至 0.01)Ig)的分离；另一方面，若在制作薄层板时，把吸附层加厚，将样品点成一条线，则可分离多达500mg的样品，因此又可用来精制样品。故此 法特别适用于挥发性较小或在较高温度易发生变化而不能用气相色谱分 析的物质。
本实施例中采用薄层扫描法进行盐酸麻黄碱含量对照检测。薄层扫描 法(TLC - Scanning method)亦称薄层光密度法(TLC-Densitometry)，是 薄层色谱技术与光密度计和微型电子计算机结合起来的一种新型仪器分 析方法，是用一定波长的光照射在薄层板上，对薄层色谱有紫外光和可见 光吸收的斑点，或经激发后能发射出荧光的斑点进行扫描，将扫描得到的 图谱及积分数据用于药品的鉴别、检査和含量测定的方法；薄层扫描法具 有分离效能高、快速、简便等特点，因而适用于中药的分析；薄层扫描法 虽然精密度不如HPLC法高，但可作为补充，用于无紫外吸收，或不能用 HPLC法分析的组分如人参皂甙、贝母生物碱等。
本实施例的检测结果如下
1. 所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂成品批号040801、 040802、 040803:
自检盐酸麻黄碱含量分别为3.70mg/粒、3.56mg/粒、3.63mg/粒； 区局现场抽样经区所复核，盐酸麻黄碱含量分别为2.32mg/粒、 2.75mg/粒、2.80mg/粒；
2. 所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂成品批号970915、 970916、 970918、 970919、 970920:
药学研究方(区所)检测，盐酸麻黄碱含量分别为0.83mg/粒、 2.19mg/粒、1.86mg/粒、0.81mg/粒、2.07mg/粒、1.94mg/粒；
3. 所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂成品批号050705、 050708、 050709:
自制送区所检，盐酸麻黄碱含量分别1.36mg/粒、1.90mg/粒、 1.78mg/粒；
实施例3:
本实施例是在实施例2基础上的优选方案。本实施例中，用于所述的 各项检测的治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液制备过程中，所述的 治疗尿路结石的仙黄中药制剂的用量进一步优化；
17在配制所述的威灵仙取物对照品溶液用于检测时，威灵仙对照药材的 取样量进一步优化；
所述的各项检测中，所述的各种展开剂的组分配比进一步优化； 本实施例的操作方法与实施例2相同 I.威灵仙提取物鉴别对照检测
所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液制备中 所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂与水的重量比为1: 20; 所述的威灵仙提取物对照品溶液制备中
所述的威灵仙对照药材与乙醇溶液的重量体积比(W/1)为9: 100， 所述的薄层色谱法检测中
所述的展开剂为苯-乙醚混合溶液，该混合溶液中，苯、乙醚的体积比 为8: 3;
II .盐酸麻黄碱含量对照检测 所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液制备中 所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂与1%盐酸溶液的重量体积比 (W/1)为1: 25;
所述的薄层色谱法检测中
所述的展开剂为三氯甲烷-甲醇-氨水混合溶液，该混合溶液中，三氯 甲垸、甲醇、氨水的体积比为30: 7: 0.8; 本实施例的检测结果如下
1. 所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂成品批号040801、 040802、 040803:
自检盐酸麻黄碱含量分别为3.70mg/粒、3.56mg/粒、3.63mg/粒； 区局现场抽样经区所复核，盐酸麻黄碱含量分别为2.32mg/粒、 2.75mg/粒、2.80mg/粒；
2. 所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂成品批号970915、 970916、 970918、 970919、 970920:
药学研究方(区所)检测，盐酸麻黄碱含量分别为0.83mg/粒、 2.19mg/粒、1.86mg/粒、0.81mg/粒、2.07mg/粒、1.94mg/粒；
3. 所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂成品批号050705、 050708、 050709:自制送区所检，盐酸麻黄碱含量分别1.36mg/粒、1.90mg/粒、 1.78mg/粒；
实施例4:
本实施例是在实施例2基础上的优选方案。本实施例中，用于所述的 各项检测的治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液制备过程中，所述的
治疗尿路结石的仙黄中药制剂的用量进一步优化；
在配制所述的威灵仙取物对照品溶液用于检测时，威灵仙对照药材的 取样量进一步优化；
所述的各项检测中，所述的各种展开剂的组分配比进一步优化；
本实施例的操作方法与实施例2相同 I .威灵仙提取物鉴别对照检测
所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液制备中 所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂与水的重量比为1.5: 10; 所述的威灵仙提取物对照品溶液制备中
所述的威灵仙对照药材与乙醇溶液的重量体积比(W/1)为13: 40， 所述的薄层色谱法检测中
所述的展开剂为苯-乙醚混合溶液，该混合溶液中，苯、乙醚的体积比 为15: 1;
II .盐酸麻黄碱含量对照检测 所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液制备中 所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂与1%盐酸溶液的重量体积比 (W/1)为1.5: 10;
所述的薄层色谱法检测中
所述的展开剂为三氯甲垸-甲醇-氨水混合溶液，该混合溶液中，三氯 甲烷、甲醇、氨水的体积比为13: 4: 0.3;
实施例5:
本实施例是在实施例2基础上的优选方案。本实施例中，用于所述的 各项检测的治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液制备过程中，所述的 治疗尿路结石的仙黄中药制剂的用量进一步优化；在配制所述的威灵仙取物对照品溶液用于检测时，威灵仙对照药材的 取样量进一步优化；
所述的各项检测中，所述的各种展开剂的组分配比进一步优化； 本实施例的操作方法与实施例2相同 I .威灵仙提取物鉴别对照检测
所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液制备中 所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂与水的重量比为0.8: 40; 所述的威灵仙提取物对照品溶液制备中
所述的威灵仙对照药材与乙醇溶液的重量体积比(W/1)为4.5: 100 所述的薄层色谱法检测中-
所述的展开剂为苯-乙醚混合溶液，该混合溶液中，苯、乙醚的体积比 为13: 5;
II.盐酸麻黄碱含量对照检测 所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液制备中 所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂与1%盐酸溶液的重量体积比 (W/1)为1: 40;
所述的薄层色谱法检测中
所述的展开剂为三氯甲烷-甲醇-氨水混合溶液，该混合溶液中，三氯 甲烷、甲醇、氨水的体积比为60: 11: 1;
实施例6:
本实施例是在实施例2基础上的优选方案。本实施例中，用于所述的 各项检测的治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液制备过程中，所述的 治疗尿路结石的仙黄中药制剂的用量进一步优化；
在配制所述的威灵仙取物对照品溶液用于检测时，威灵仙对照药材的 取样量进一步优化；
所述的各项检测中，所述的各种展开剂的组分配比进一步优化；
本实施例的操作方法与实施例2相同
I .威灵仙提取物鉴别对照检测
所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液制备中 所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂与水的重量比为0.8: 20;
20所述的威灵仙提取物对照品溶液制备中
所述的威灵仙对照药材与乙醇溶液的重量体积比(W/1)为7: 90， 所述的薄层色谱法检测中
所述的展开剂为苯-乙醚混合溶液，该混合溶液中，苯、乙醚的体积比 为7: 3;
II .盐酸麻黄碱含量对照检测 所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液制备中 所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂与1%盐酸溶液的重量体积比 (W/1)为2: 40;
所述的薄层色谱法检测中
所述的展开剂为三氯甲烷-甲醇-氨水混合溶液，该混合溶液中，三氯 甲垸、甲醇、氨水的体积比为30: 6: 0.5;所述的显色剂为1%茚三酮乙醇 溶液。
实施例7:
本实施例为实施例l-X中的仙黄制剂的制备方法。
一种治疗尿路结石的仙黄中药制剂，该制剂的原料中包括威灵仙、麻
黄，其重量份数比为5: 1;每0.4克所述的治疗尿路结石的仙黄中药制 剂的成分中，含有麻黄以盐酸麻黄碱(C1()H15N0*HC1)计，不少于l. 15mg; 制备方法如下
A. 取以上配比的威灵仙、麻黄，分别粉碎成粗粉，再混匀，得到混 合粗粉；
B. 将所述的混合粗粉中加入乙醇溶液，进行回流提取处理三次，合并 每次得到的提取液，得到总提取液；所述的三次提取处理中，每次提取处 理所述的混合粗粉和所述的乙醇的重量比为1: 8;第一次提取处理的时间 为2小时，第二、三次提取处理的时间均为l小时；所述的提取处理的方
法为加热回流提取；所述的乙醇溶液的体积百分浓度为70%;
C. 将所述的总提取液进行减压蒸馏处理，去除其中的乙醇；再进行减 压浓縮处理，得到稠膏；再将所述的稠膏于8(TC减压干燥处理，得到干膏；
D. 将所述的干膏进行粉碎处理，得到干膏粉末；再向所述的干膏粉末
中加入淀粉，混匀，得到胶囊内容物，即为所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂；将所述的胶囊内容物装入胶囊，即得成品；所述的干膏粉末与所 述的淀粉的重量比为19:1;
本实施例中的重量单位可以是克，也可以是千克；
本实施例中所述的各种原料药和化学试剂均为常规产品，均可在市场
购买得到；
本实施例中使用的设备均为常规设备，均可在市场购买得到。
权利要求
1. 一种治疗尿路结石的仙黄中药制剂，该制剂的原料中包括威灵仙、麻黄，其重量份数比为5∶1，其特征在于每0.4克所述的中药成分中，含有麻黄以盐酸麻黄碱(C10H15NO·HCl)计，不少于1.15mg。
2. 根据权利要求1所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂，其特征在于-所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂的用量用法为饭后口服， 一次0.8克， 一日2次，疗程为一个月。
3. 根据权利要求l所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂，其特征在于 所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂功能主治行气活血；用于尿路结石气 滞血瘀症，结石的横径小于等于0.8cm，纵径小于等于1.0cm，且结石远端输 尿管无畸形、狭窄、梗塞及手术疤痕粘连等明显并发症，肾功能良好，结石 在某一部位滞留时间不超过一年者。
4. 一种治疗尿路结石的仙黄中药制剂的质量检测方法，其特征在于该 制剂的原料中包括威灵仙、麻黄，其重量份数比为5: 1，每0.4克所述的治 疗尿路结石的仙黄中药制剂中，含有麻黄以盐酸麻黄碱(C1()H15N(>HC1)计， 不少于1.15mg;所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂的质量检测方法所检测项目为威灵仙提取物鉴别对照检测，麻黄碱含量对照检测。
5. 根据权利要求4所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂的质量检测方法，其特征在于威灵仙提取物鉴别对照检测，检测的方法为薄层色谱法； 麻黄碱含量对照检测，检测的方法为薄层扫描法。
6. 根据权利要求5所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂的质量检测方法，其特征在于，所述的各项检测的过程为 I.威灵仙提取物鉴别对照检测A.治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液制备a.取所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂，加水研磨，再进行过滤处理， 得到滤液；所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂与水的重量比为0.5-15:10-40;b.在所述的滤液中加入三氯甲垸，进行提取处理，分取三氯甲烷层，得到提取液；所述的滤液与三氯甲烷的体积比为4: 1;C.将所述的提取液水浴蒸干，得到残渣，向所述的残渣中加入甲醇，得 到残渣溶液，作为供试品溶液；所述的甲醇与所述的治疗尿路结石的仙黄中 药制剂的重量比为1: 0.8;B. 威灵仙提取物对照品溶液制备a. 取威灵仙对照药材加入乙醇溶液，加热回流处理1小时，再进行过滤 处理，得到威灵仙滤液；所述的威灵仙对照药材与乙醇溶液的重量体积比(w/1)为3-15: 40-150，b. 将所述的威灵仙滤液水浴蒸干，得到残渣，向所述的残渣中加入水， 得到威灵仙残渣溶液；所述的威灵仙滤液与所述的水的体积比为9: 2;c. 将所述的威灵仙残渣溶液中中加入三氯甲垸，进行提取处理，分取三氯 甲烷层，得到威灵仙提取液；所述的威灵仙残渣溶液与三氯甲烷的体积比为0.4: 1;d. 将所述的威灵仙残渣水浴蒸干，得到威灵仙第二级残渣，向所述的威 灵仙第二级残渣中加入甲醇，得到威灵仙第二级残渣溶液，作为威灵仙提取物对照品溶液；所述的的甲醇与所述的威灵仙的重量比为1: 7;C. 薄层色谱法检测吸取所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液、威灵仙提取物对 照品溶液，分别点样于同一硅胶G薄层板上，进行展开处理，再取出，晾干，置紫外灯(365nm)下检视；所述的展开剂为苯-乙醚混合溶液，该混合溶液中，苯、乙醚的体积比为4-15: 1-6;检视的结果为所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液色谱中， 在与威灵仙提取物对照品溶液色谱相应的位置上，显相同的荧光斑点； ' II .盐酸麻黄碱含量对照检测A.治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液制备a.取所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂，加入1%盐酸溶液溶解，得到治疗尿路结石的仙黄中药制剂的盐酸溶液；所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂与1%盐酸溶液的重量体积比(w/D为0.5-2: 10-40;将所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂的盐酸溶液进行过滤处理，得到滤液；b.将所述的滤液中加入乙醚，进行第一次提取处理，得到第一次提取液，调节所述的第一次提取液的pH值为12;所述的滤液和乙醚的体积比为4: 3;C.将所述的第一次提取液用乙醚进行四次提取处理，合并四次提取处理的 乙醚层，得到总提取液；所述的第一次提取液与所述的四次提取处理中每次 提取处理乙醚的体积比为3: 4: 3: 2: 2;d.将所述的总提取液中加入盐酸乙醇溶液，摇匀，蒸干，得到残渣；将 所述的残渣中加入乙醇，得到残渣溶液，作为治疗尿路结石的仙黄中药制剂 供试品溶液；所述的总提取液与所述的盐酸乙醇溶液的体积比为140: 3;B. 盐酸麻黄碱对照品溶液配制精密称取经105。C干燥至恒重的盐酸麻黄碱(C1QH15NOHCl)对照品， 加入甲醇制成每iml含有o.58mg盐酸麻黄碱的溶液，作为盐酸麻黄碱对照品 溶液；C. 薄层色谱法检测a. 吸取所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液.盐酸麻黄碱对照 品溶液，分别交叉点样于同一含1%氢氧化钠的硅胶G薄层板上，进行展开 处理，取出，晾干；将该硅胶G薄层板置105。C烘20分钟以上，取出，放冷， 喷以显色剂，再置105"C烘15分钟，至斑点清晰，取出；所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液、2份盐酸麻黄碱对照品溶液的体积比为3: 2: 4;所述的硅胶G薄层版的粘合剂为羧甲基纤维素钠；所述的展开剂为三氯甲垸-甲醇-氨水混合溶液，该混合溶液中，三氯甲烷、甲醇、氨水的体积比为15-60: 3-12: 0.3-1;所述的显色剂为1%茚三酮乙醇溶液；b. 将上述硅胶G薄层版进行扫描，分别测量治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液与盐酸麻黄碱对照品溶液的峰面积，计算，即得。
7.根据权利要求6所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂的质量检测方法，其特征在于，所述的各项检测的过程为 I.威灵仙提取物鉴别对照检测所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液制备中 所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂与水的重量比为1: 20; 所述的威灵仙提取物对照品溶液制备中所述的威灵仙对照药材与乙醇溶液的重量体积比(W/1)为9: 100;所述的薄层色谱法检测中所述的展开剂为苯-乙醚混合溶液，该混合溶液中，苯、乙醚的体积比为 8: 3;II .盐酸麻黄碱含量对照检测 所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液制备中 所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂与1%盐酸溶液的重量体积比(W/1) 为1: 25;所述的薄层色谱法检测中所述的展开剂为三氯甲烷-甲醇-氨水混合溶液，该混合溶液中，三氯甲烷、 甲醇、氨水的体积比为30: 7: 0.8。
8. 根据权利要求6所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂的质量检测方 法，其特征在于，所述的各项检测的过程为I.威灵仙提取物鉴别对照检测所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液制备中 所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂与水的重量比为1.5: 10; 所述的威灵仙提取物对照品溶液制备中所述的威灵仙对照药材与乙醇溶液的重量体积比(W/1)为13: 40; 所述的薄层色谱法检测中所述的展开剂为苯-乙醚混合溶液，该混合溶液中，苯、乙醚的体积比为 15: 1;II.盐酸麻黄碱含量对照检测 所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液制备中 所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂与1%盐酸溶液的重量体积比(W/1) 为1.5: 10;所述的薄层色谱法检测中所述的展开剂为三氯甲垸-甲醇-氨水混合溶液，该混合溶液中，三氯甲垸、 甲醇、氨水的体积比为13: 4: 0.3。
9. 根据权利要求6所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂的质量检测方 法，其特征在于，所述的各项检测的过程为I.威灵仙提取物鉴别对照检测所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液制备中 所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂与水的重量比为0.8: 40; 所述的中威灵仙提取物对照品溶液制备所述的威灵仙对照药材与乙醇溶液的重量体积比(W/1)为4.5: 100; 所述的薄层色谱法检测中所述的展开剂为苯-乙醚混合溶液，该混合溶液中，苯、乙醚的体积比为 13: 5;II .盐酸麻黄碱含量对照检测 所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂供试品溶液制备中 所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂与1%盐酸溶液的重量体积比(W/1) 为1: 40;所述的薄层色谱法检测中所述的展开剂为三氯甲烷-甲醇-氨水混合溶液，该混合溶液中，三氯甲烷、 甲醇、氨水的体积比为60: 11: 1。
10. —种治疗尿路结石的仙黄中药制剂的制备方法，其特征在于该制 剂的原料中包括威灵仙、麻黄，其重量份数比为5: 1;制备步骤如下A. 取以上配比的威灵仙、麻黄，分别粉碎成粗粉，再混匀，得到混合粗粉；B. 将所述的混合粗粉中加入乙醇溶液，进行回流提取处理三次，合并每 次得到的提取液，得到总提取液；所述的三次提取处理中，每次提取处理所 述的混合粗粉和所述的乙醇的重量比为1: 8;第一次提取处理的时间为2小 时，第二、三次提取处理的时间均为1小时；所述的乙醇溶液的体积百分浓 度为70%;C. 将所述的总提取液进行减压蒸馏处理，去除其中的乙醇；再进行减压 浓縮处理，得到稠膏；再将所述的稠膏于8(TC减压干燥处理，得到干膏；D. 将所述的干膏进行粉碎处理，再加入淀粉混匀，装入胶囊，即得成品。
全文摘要
本发明的目的是提供一种治疗尿路结石的仙黄中药制剂及制备和质量检测方法；该制剂原料中含有威灵仙、麻黄，其重量份数比为5∶1；制备方法为将威灵仙、麻黄粉碎粗粉并混匀，再进行提取、浓缩、干燥处理，与适量的淀粉混合后装入胶囊即得成品。每0.4克所述的治疗尿路结石的仙黄中药制剂中，含麻黄以盐酸麻黄碱(C₁₀H₁₅NO·HCl)计，其含量限度有了较大的提高，不少于1.15mg。质量检测方法所检测项目为威灵仙提取物鉴别对照检测，检测的方法为薄层色谱法；麻黄碱含量对照检测，检测的方法为薄层扫描法。本发明采用定性和定量结合的方法检测治疗尿路结石的仙黄中药制剂，确保其质量，检测方法严谨、数据可靠。
文档编号A61P13/00GK101530486SQ200910082999
公开日2009年9月16日 申请日期2009年4月28日 优先权日2009年4月28日
发明者锋 阙 申请人:锋 阙